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基于episomal CRISPR/Cas9载体的基因敲入方法
1
作者 邹征伟 赖兴强 李伟强 《中山大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期660-668,共9页
【目的】研究一种在哺乳动物细胞中高效的基因敲入方法,比较带有oriP-EBNA1序列的episomal CRISPR/Cas9载体与普通CRISPR/Cas9载体的基因敲入效率是否有差别。【方法】首先利用慢病毒载体构建稳定表达红色荧光蛋白DsRedE2的人胚肾细胞系... 【目的】研究一种在哺乳动物细胞中高效的基因敲入方法,比较带有oriP-EBNA1序列的episomal CRISPR/Cas9载体与普通CRISPR/Cas9载体的基因敲入效率是否有差别。【方法】首先利用慢病毒载体构建稳定表达红色荧光蛋白DsRedE2的人胚肾细胞系(293FT)与人诱导多能干细胞系(hiPS);利用CRISPR/Cas9序列设计网站,设计和合成靶向DsRedE2的向导RNA(sgRNA),分别克隆至带有oriP-EBNA1的episomal CRISPR/Cas9敲除载体与普通CRISPR/Cas9敲除载体中,测序筛选插入正确片段的克隆;然后设计靶向DsRedE2的同源臂,把同源臂连接在绿色荧光蛋白(GFP)的两端,构建GFP敲入片段的载体。把两种敲除载体分别导入到DsRedE2-293FT与DsRedE2-hiPS细胞系中,在不同时间点通过荧光显微镜观察以及流式细胞分析比较细胞的敲除效率,同时利用PCR检测靶基因的敲除情况;在筛选获得有效的sgRNA片段后,把两种敲除载体和同源臂同时导入到DsRedE2-293FT与DsRedE2-hiPS细胞系中,在不同时间通过荧光显微镜观察以及流式细胞分析比较细胞的敲入效率,同时利用PCR检测DsRedE2序列中GFP的敲入情况。【结果】成功构建表达DsRedE2的293FT与hiPS细胞系;获得靶向DsRedE2的episomal CRISPR/Cas9敲除载体、普通CRISPR/Cas9敲除载体及带有GFP的同源臂载体;荧光显微镜观察与流式细胞分析结果显示,转染两种CRISPR/Cas9质粒均可以使DsRedE2阳性细胞明显减少,而且episomal CRISPR/Cas9质粒组的DsRedE2阳性细胞数量显著低于转染普通CRISPR/Cas9质粒组。同时,敲入实验证实episomal CRISPR/Cas9组的GFP阳性细胞数量比普通CRISPR/Cas9组更多;TA克隆测序证实打靶位点有敲除与敲入片段。【结论】episomal CRISPR/Cas9载体与普通CRISPR/Cas9载体在细胞上都能实现基因的敲除与敲入;带有oriP-EBNA1序列的episomal CRISPR/Cas9载体敲除和敲入的效率均比普通CRISPR/Cas9载体高。以上结果为利用episomal CRISPR/Cas9载体进行人多能干细胞的基因敲入研究和谱系追踪动物模型的建立提供了重要的实验基础。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 episomal载体 敲除 敲入
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多时间尺度下载体金属铜及其伴生金属市场溢出效应研究 被引量：1
2
作者 吴巧生 王昱力 毕致玮 《中南大学学报(社会科学版)》 北大核心 2025年第1期107-122,共16页
关键金属是战略性新兴产业的关键原材料,其重要性日益凸显。多数关键金属矿产常以伴生状态存在,产量受载体金属约束,研究载体金属与伴生金属的价格影响关系,对于化解价格波动带来的风险尤为重要。采用多元小波与DY溢出指数研究载体金属... 关键金属是战略性新兴产业的关键原材料,其重要性日益凸显。多数关键金属矿产常以伴生状态存在,产量受载体金属约束,研究载体金属与伴生金属的价格影响关系,对于化解价格波动带来的风险尤为重要。采用多元小波与DY溢出指数研究载体金属铜及其伴生金属镍、锡、黄金之间的市场关联与溢出效应,结果显示,短期时间尺度下铜-镍相关性更强,长期时间尺度下铜-锡相关性更强。在不同时间尺度下,铜-镍、铜-锡金属对之间存在较强的共同运动。DY溢出结果显示,在各时间尺度下,铜与伴生金属市场存在双向溢出效应;铜是伴生金属市场风险的最大贡献者,且最容易受到伴生金属市场的冲击;在中长期的时间尺度下,铜与伴生金属的溢出幅度变化更大,分散组合投资效益差。 展开更多
关键词 载体金属 伴生金属 小波分析方法 溢出效应
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载体沉淀分离富集-二甲酚橙光度法测定氧化锌中微量铅
3
作者 王惠英 周娟 +4 位作者 张涛 朱祎文 江明月 陈丁龙 次立杰 《无机盐工业》 北大核心 2025年第6期108-113,共6页
针对目前直接法生产的氧化锌中铅的测定需要复杂的仪器、操作人员要求高等问题,提出了一种简单的载体沉淀分离富集-二甲酚橙分光光度法测定微量铅的方法。利用在硫酸介质中,氯化锶为载体沉淀分离铅,再用碳酸钾将硫酸铅转化为碳酸铅,然... 针对目前直接法生产的氧化锌中铅的测定需要复杂的仪器、操作人员要求高等问题,提出了一种简单的载体沉淀分离富集-二甲酚橙分光光度法测定微量铅的方法。利用在硫酸介质中,氯化锶为载体沉淀分离铅,再用碳酸钾将硫酸铅转化为碳酸铅,然后用硝酸将碳酸铅溶解为铅离子,最后铅离子与二甲酚橙生成紫红色的配合物,建立了一种测定微量铅的分光光度法。研究了溶液pH、显色剂浓度和干扰离子等因素对该方法的影响。结果表明:生成配合物的吸光度值与铅离子浓度呈线性关系,线性浓度为1.45~14.49µmol/L,线性方程ΔA=0.05924c-0.01715,相关系数R2为0.9903。该方法对直接法氧化锌中铅的测定值与原子吸收光谱法测定值进行了比较,相对偏差为-1.7%~-1.2%。相较于现行GB/T 4372.2—2014《直接法氧化锌化学分析方法第2部分:氧化铅量的测定》中规定的原子吸收光谱法,该方法具有仪器简单、操作简便等优点,可用于工业推广。 展开更多
关键词 氧化锌 载体沉淀 铅 二甲酚橙 分光光度法
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多模态信息载体对突发事件协同研判情境意识的影响
4
作者 袁晓芳 刘新星 刘旸 《中国安全生产科学技术》 北大核心 2025年第8期21-28,共8页
为探究突发事件应急决策中,多模态信息载体与协同研判情境意识的关系,模拟跨部门协同研判工作情境,采用主观测量、问卷测量、绩效测量等方法,收集不同信息载体下被试的情境意识得分、主观认知负荷以及协同研判反应时间进行显著性分析。... 为探究突发事件应急决策中,多模态信息载体与协同研判情境意识的关系,模拟跨部门协同研判工作情境,采用主观测量、问卷测量、绩效测量等方法,收集不同信息载体下被试的情境意识得分、主观认知负荷以及协同研判反应时间进行显著性分析。研究结果表明:主观认知负荷与协同研判反应时间之间存在显著的正相关关系;在单一信息载体下,视频组与文本组被试的情境意识水平较好,但视频组与音频组被试的主观认知负荷与协同研判反应时间较高;在组合模态信息载体下,文本-视频的被试情境意识水平优于文本-音频,但2种组合模态下被试的主观认知负荷与协同研判反应时间差异较小。研究结果可为协同研判实务工作中信息载体的应用提供参考。 展开更多
关键词 信息载体 协同研判 情境意识 主观认知负荷
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乳源细胞外囊泡作为生物活性物质体内递送载体的研究进展
5
作者 王芳 焦阳 +7 位作者 中拉毛草 翟欢 梁泽毅 杨晨 刘婧 陈安乐 丁学智 安彩霞 《食品科学》 北大核心 2025年第18期405-415,共11页
细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)是由细胞分泌的纳米至微米级磷脂双层微囊泡,携带蛋白质、核酸、脂质等多种活性分子。EVs作为一种信号传递分子,可将含有生物信息的内容物传送到靶细胞使其发挥特定作用。乳中含有多种有益的生... 细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)是由细胞分泌的纳米至微米级磷脂双层微囊泡,携带蛋白质、核酸、脂质等多种活性分子。EVs作为一种信号传递分子,可将含有生物信息的内容物传送到靶细胞使其发挥特定作用。乳中含有多种有益的生物活性分子,其中乳源细胞外囊泡(milk-derived EVs,M-EVs)因生物利用度高、免疫原性低、消化耐受性和商业生产性能优良而被视为EVs的理想来源。此外,M-EVs可以在胃中的强酸性条件和肠道中的降解条件下存活,且可以穿过生物屏障到达靶组织,这使其成为具有定向递送促进健康或治疗性生物活性物质的合适载体。然而,由于牛奶成分的复杂性,需要进一步的研究阐明M-EVs特定成分和功能之间的关系,规范其提取过程,以推进M-EVs未来的应用。本文综述了M-EVs的形成途径、组成特征、提取和递送方法,探讨了M-EVs作为活性物质天然纳米载体的优势和挑战,以及M-EV研究的未来前景,旨在为基于M-EVs口服给药系统的新型功能性食品开发提供新的思路。 展开更多
关键词 乳 细胞外囊泡 生物活性物质 递送载体
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漆黄素纳米结构脂质载体制备及其体内药动学评价
6
作者 房伟 王奎鹏 韩德恩 《中成药》 北大核心 2025年第6期1796-1804,共9页
目的制备漆黄素纳米结构脂质载体,并考察其体内药动学。方法乙醇注入法制备纳米结构脂质载体。以单硬脂酸甘油酯与磷脂比例、单硬脂酸甘油酯与三乙酸甘油酯比例、聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯(TPGS)质量浓度为影响因素,包封率为评价指标... 目的制备漆黄素纳米结构脂质载体,并考察其体内药动学。方法乙醇注入法制备纳米结构脂质载体。以单硬脂酸甘油酯与磷脂比例、单硬脂酸甘油酯与三乙酸甘油酯比例、聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯(TPGS)质量浓度为影响因素,包封率为评价指标,Box-Behnken响应面法优化处方。X射线粉末衍射法分析晶型,透射电镜观察形态,进行红外光谱分析,透析袋法考察释药,测定稳定性。18只大鼠随机分为3组,分别灌胃给予漆黄素及其磷脂复合物、纳米结构脂质载体的0.5%CMC-Na混悬液(150 mg/kg),于0.25、0.5、1、1.5、2、3、4、6、8、12 h采血,UPLC-MS/MS法测定漆黄素血药浓度,计算主要药动学参数。结果最佳处方为单硬脂酸甘油酯与磷脂比例1.56∶1,单硬脂酸甘油酯与三乙酸甘油酯比例3.05∶1,TPGS质量浓度0.2 mg/mL。纳米结构脂质载体近似圆形,平均包封率、载药量、粒径、Zeta电位分别为(86.14±1.28)%、(8.96±0.26)%、(212.35±9.04)nm、-(31.13±1.16)mV。原料药以无定形状态存在于纳米结构脂质载体中,制备过程未影响原料药与磷脂之间的氢键结合。纳米结构脂质载体在模拟胃液中3 h内累积释放度为46.12%,而在模拟肠液中18 h内约为50%,其冻干粉放置6个月后稳定性良好。与原料药、磷脂复合物比较,纳米结构脂质载体tmax、t1/2延长(P<0.01),Cmax、AUC_(0~t)、AUC0~∞升高(P<0.01),相对生物利用度增加至7.07倍。结论纳米结构脂质载体可改善漆黄素口服生物利用度。 展开更多
关键词 漆黄素 纳米结构脂质载体 制备 体内药动学 乙醇注入法 UPLC-MS/MS
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人文地理学教学载体的课程思政表征及实践
7
作者 刘小鹏 郑芳 +1 位作者 王鹏 杨美玲 《地理教学》 北大核心 2025年第1期15-18,共4页
数字时代背景下的人才培养更具挑战性。本文提出包括人才培养方案、教学大纲、教材、教案、教学设计、教学课件和互联网“七位一体”的教学载体,构建地理科学类专业核心课程人文地理学的课程思政育人结构体系,并系统设计“七位一体”的... 数字时代背景下的人才培养更具挑战性。本文提出包括人才培养方案、教学大纲、教材、教案、教学设计、教学课件和互联网“七位一体”的教学载体,构建地理科学类专业核心课程人文地理学的课程思政育人结构体系,并系统设计“七位一体”的教学载体的课程思政教学内容、教学方式等,以期通过人文地理学课程思政教学培养学生家国情怀、科学精神和创新能力等,发挥人文地理学思政育人价值。 展开更多
关键词 人文地理学 教学载体 课程思政 育人结构体系 教学实践
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作为传播载体的苏区俱乐部:布局、架构与机制
8
作者 陈信凌 戴笑慧 《现代传播(中国传媒大学学报)》 北大核心 2025年第7期59-69,共11页
俱乐部是一种群众性文化教育组织,在中央苏区实现了覆盖性的布局,并且在发展演变过程中形成了相对稳定的框架结构。俱乐部建构了别开生面的文化传播范式,其传播机制主要体现于三点。第一,环境熏染,空间环境被设计成一种“有意味的形式”... 俱乐部是一种群众性文化教育组织,在中央苏区实现了覆盖性的布局,并且在发展演变过程中形成了相对稳定的框架结构。俱乐部建构了别开生面的文化传播范式,其传播机制主要体现于三点。第一,环境熏染,空间环境被设计成一种“有意味的形式”,参与者的认知结构可以在不知不觉间获得提升;第二,氛围涵化,着意营造快乐平和的氛围,使每个成员以全角色投入活动,在潜移默化中形塑自我及他人;第三,情境喻示,组织富有生气的活动,通过各类含蕴丰盈的活动情境喻示并劝服参与者。在注重发挥新闻舆论成风化人功能的当下,俱乐部的经验具有显著的启示价值。 展开更多
关键词 中央苏区 俱乐部 传播载体 传播机制
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同源重组法衣原体RNA聚合酶表达载体的构建和应用
9
作者 石禹 包小峰 《医学研究与战创伤救治》 北大核心 2025年第2期113-119,共7页
目的利用同源重组法构建衣原体RNA聚合酶(cRNAP)各亚基质粒,转化入大肠埃希菌中表达蛋白并探讨其在衣原体转录调控中的应用。方法根据Gen Bank中的基因序列设计特异性引物,聚合酶链式反应(PCR)扩增cRNAP各亚基的目的基因片段,对PCR产物... 目的利用同源重组法构建衣原体RNA聚合酶(cRNAP)各亚基质粒,转化入大肠埃希菌中表达蛋白并探讨其在衣原体转录调控中的应用。方法根据Gen Bank中的基因序列设计特异性引物,聚合酶链式反应(PCR)扩增cRNAP各亚基的目的基因片段,对PCR产物进行纯化,质粒载体进行质粒抽提、质粒酶切、胶回收等处理。采用同源重组法将基因片段插入到目的载体进行片段融合构建cRNAP各亚基表达质粒,融合产物转化后用特异性引物进行PCR验证和测序。构建好的融合产物转化入大肠埃希菌化学感受态细胞表达蛋白。结果成功构建cRNAP各亚基质粒并成功表达cRNAP各亚基蛋白,研究了衣原体转录调节因子GrgA与cRNAP的直接相互作用是GrgA与cRNAP的α、β′亚基有结合,与β亚基无结合。两者可以作为衣原体感染治疗和预防的药物作用新靶点。结论同源重组法可用于构建cRNAP各亚基质粒并成功表达相应蛋白,并用于研究转录调节因子GrgA与cRNAP各亚基蛋白的结合位点,为衣原体感染治疗和预防药物作用新靶点的研究提供参考信息。 展开更多
关键词 同源重组法 衣原体 cRNAP 亚基 质粒载体 融合蛋白
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高铝碱性废液资源化利用制备活性氧化铝载体
10
作者 李骞 韩雨琪 +3 位作者 张雁 杨永斌 董海刚 杜安睿 《矿业科学学报》 北大核心 2025年第3期563-572,共10页
从废铝基催化剂中回收贵金属时,会产生大量的高铝碱性废液,废液的直接排放不仅会造成铝资源的严重浪费,还可能因其强碱性对环境造成负面影响。目前,关于高铝碱性废液的资源化利用的研究较少,本文对某废铝基催化剂回收过程中产生的高铝... 从废铝基催化剂中回收贵金属时,会产生大量的高铝碱性废液,废液的直接排放不仅会造成铝资源的严重浪费,还可能因其强碱性对环境造成负面影响。目前,关于高铝碱性废液的资源化利用的研究较少,本文对某废铝基催化剂回收过程中产生的高铝碱性废液(Al质量浓度6.594 g/L)进行资源化利用研究。首先,采用碳化法将废液中Al元素转化为拟薄水铝石;然后,将拟薄水铝石样品焙烧制成氧化铝载体。结果表明:通过调整废液中磷的质量分数为2%~3%、溶液苛性比(氧化钠与氧化铝摩尔比)为1.5后,拟薄水铝石的比表面积和胶溶指数显著提高。此外,预成型的拟薄水铝石在温度为450℃、恒温3.5 h、升温速率为100℃/h条件下焙烧,可获得符合指标的活性氧化铝载体。该工艺可实现高铝碱浸液的资源化利用,且环境友好、无三废产生,具有较好的工业应用前景。 展开更多
关键词 废铝基催化剂 高铝碱性废液 拟薄水铝石 活性氧化铝载体
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金龟子绿僵菌Ma54颗粒剂载体与促活剂的筛选及评价
11
作者 李良德 李慧玲 王定锋 《茶叶学报》 2025年第2期44-49,共6页
【目的】金龟子绿僵菌Ma54对茶园害虫灰茶尺蠖具有较好的防治效果,但该菌株目前缺乏成熟的剂型,导致在田间使用过程中效果不稳定。载体与促活剂是组成颗粒剂的重要成分,从不同类别材料中筛选菌株Ma54颗粒剂研制的合适载体与促活剂,为后... 【目的】金龟子绿僵菌Ma54对茶园害虫灰茶尺蠖具有较好的防治效果,但该菌株目前缺乏成熟的剂型,导致在田间使用过程中效果不稳定。载体与促活剂是组成颗粒剂的重要成分,从不同类别材料中筛选菌株Ma54颗粒剂研制的合适载体与促活剂,为后续剂型的开发提供理论基础。【方法】将高岭土、硅藻土、菜籽粕、珍珠岩、活性白土5种供试载体与菌株Ma54孢子粉制成孢悬液,通过PDA培养板上的菌落,镜检载体对孢子萌发率的影响,并考察密封存放不同时长(7、14、21、28 d)对孢子贮存活性的影响;通过含有6个梯度浓度(0.01%、0.10%、0.20%、0.30%、0.40%、0.50%)海藻糖、酪氨酸的PDA培养板,检测2种促活剂对Ma54孢子萌发率与萌发促进率的影响;将筛选出的载体与孢子粉、促活剂按比例搭配,进行挤压造粒,检测造粒过程孢子的损伤率。【结果】5种载体对孢子萌发率的影响并不大,仅珍珠岩和高岭土可有效延长孢子的贮存期;2种载体储存孢子28 d后,孢子萌发率为61.47%和62.87%,显著高于纯孢子贮存方式的21.07%。海藻糖或酪氨酸2种促活剂均能显著提升孢子的萌发率,孢子萌发促进率均大于20.84%,且不随促活剂浓度的增加而增加。珍珠岩和高岭土在造粒过程中对孢子活性的影响较大,高岭土对孢子的损伤率达70.18%,而珍珠岩为21.37%。【结论】珍珠岩在5种试验载体中表现最好,酪氨酸可进一步促进孢子的萌发。 展开更多
关键词 金龟子绿僵菌 颗粒剂 载体 促活剂
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Ru/M_(x)O_(y)催化甲醇水蒸气重整反应的载体效应
12
作者 张磊 刘明新 +4 位作者 郑亦凇 安国超 韩蛟 张财顺 高志贤 《燃料化学学报(中英文)》 北大核心 2025年第8期1233-1242,共10页
以CeO_(2)、ZrO_(2)、γ-Al_(2)O_(3)、AlO(OH)为载体,RuCl_(3)为钌源,采用沉积-沉淀法制备Ru/M_(x)O_(y)催化剂。通过XRD、BET、H_2-TPR、XPS等表征手段,结合高通量甲醇水蒸气重整制氢反应评价,探究了不同载体对Ru/M_(x)O_(y)催化剂催... 以CeO_(2)、ZrO_(2)、γ-Al_(2)O_(3)、AlO(OH)为载体,RuCl_(3)为钌源,采用沉积-沉淀法制备Ru/M_(x)O_(y)催化剂。通过XRD、BET、H_2-TPR、XPS等表征手段,结合高通量甲醇水蒸气重整制氢反应评价,探究了不同载体对Ru/M_(x)O_(y)催化剂催化性能的影响。实验结果表明,RuO_(x)和载体之间相互作用的差异,以及是否存在氧空位,呈现出明显的载体效应。以CeO_(2)为载体制备的Ru/CeO_(2)催化剂,RuO_(x)分散性较好,RuO_(x)和载体之间的相互作用较强,存在氧空位,催化活性较好。在反应温度为420℃,水醇物质的量比为1.2,甲醇水质量空速为6 h^(-1)的条件下,甲醇转化率为88.64%,在高通量下表现出较好的催化活性。 展开更多
关键词 Ru基催化剂 甲醇水蒸气重整 载体 CeO_(2)
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纳米载体递送系统介导的豌豆蚜四个基因RNA干涉条件筛选 被引量：1
13
作者 张琨 郭士刚 +3 位作者 常美玲 余明玉 阚云超 李丹丹 《昆虫学报》 北大核心 2025年第6期728-735,共8页
【目的】评估纳米载体递送系统介导豌豆蚜Acyrthosiphon pisum基因的RNA干涉条件。【方法】选择豌豆蚜表皮发育相关基因几丁质合成酶2(chitin synthase 2,CHS2)基因,代谢相关酶液泡型H^(+)-ATP酶AC39(vacuolar H^(+)ATPase AC39,VhaAC39... 【目的】评估纳米载体递送系统介导豌豆蚜Acyrthosiphon pisum基因的RNA干涉条件。【方法】选择豌豆蚜表皮发育相关基因几丁质合成酶2(chitin synthase 2,CHS2)基因,代谢相关酶液泡型H^(+)-ATP酶AC39(vacuolar H^(+)ATPase AC39,VhaAC39)基因、水通道蛋白(water-specific aquaporin,Wsa)基因和N6-甲基腺苷(N6 methyladenosine,m6A)修饰关键酶甲基转移酶样蛋白14(methyltransferase-like protein 14,METTL14)基因作为研究对象,通过纳米载体递送系统在豌豆蚜4龄若蚜中分别注射上述4个基因不同浓度(10~5000 ng/μL,5~250 ng/头)的dsRNA,注射后48 h时利用qRT-PCR检测这上述4个基因的表达量,筛选dsRNA最适浓度;将这4个基因的dsRNA以最适浓度通过纳米载体递送系统注射豌豆蚜4龄若蚜后12,24,36,48,60和72 h时qRT-PCR检测这4个基因的表达量,筛选纳米载体递送系统介导RNA干涉的最佳时间。【结果】与注射dsEGFP的对照组相比,豌豆蚜4龄若蚜注射50 ng/μL(25 ng/头)dsCHS2后48 h时,CHS2表达量显著下降47.5%;豌豆蚜4龄若蚜注射50~200 ng/μL(25~100 ng/头)dsMETTL14后48 h时METTL14的表达量显著下降,呈剂量依赖效应;豌豆蚜4龄若蚜注射50 ng/μL(25 ng/头)dsVhaAC39后48 h时VhaAC39表达量显著下降53.4%,而注射dsWsa后48 h时Wsa的表达量没有显著变化。与注射dsEGFP的对照组相比,CHS2,METTL14和VhaAC39表达量均在注射靶基因dsRNA后48 h时下降最显著,Wsa在注射dsWsa后60 h时下降最显著。【结论】对豌豆蚜使用纳米载体介导的RNA干涉的dsRNA的最佳浓度约为50 ng/μL(25 ng/头),干涉效果较好的时间段为处理后48-60 h时,该研究为使用纳米递送系统实现蚜虫RNA干涉提供了参考。 展开更多
关键词 豌豆蚜 DSRNA RNA干涉 纳米载体递送系统 RNA农药
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芳纶1313织物阳离子染料载体染色及载体的循环再利用 被引量：1
14
作者 杨旭礼 高晓红 +3 位作者 刘其霞 樊姚姚 张雪婷 王梁宇 《印染》 北大核心 2025年第2期31-35,共5页
采用自制环保载体GY对芳纶1313织物进行阳离子染料载体染色。分析了载体质量浓度、染色温度、保温时间、pH及氯化钠质量浓度对染色性能的影响,测试了染色织物的耐皂洗、耐摩擦和耐日晒色牢度,评估了环保载体GY的循环利用性能。优化的载... 采用自制环保载体GY对芳纶1313织物进行阳离子染料载体染色。分析了载体质量浓度、染色温度、保温时间、pH及氯化钠质量浓度对染色性能的影响,测试了染色织物的耐皂洗、耐摩擦和耐日晒色牢度,评估了环保载体GY的循环利用性能。优化的载体染色工艺为:染料质量分数2%(omf)、浴比1∶25、载体质量浓度25 g/L、染色温度130℃、保温时间60 min、pH 5、氯化钠质量浓度60 g/L。三种阳离子染料染色芳纶1313织物的耐皂洗、耐摩擦色牢度均在4级以上,耐日晒色牢度在2~3级以上。自制环保载体GY经过5次循环染色使用后,染色织物颜色特征值变化很小,色差ΔE的波动范围小于1。 展开更多
关键词 芳纶1313织物 阳离子染料 载体染色 循环再利用
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Ni/USY催化剂金属-载体相互作用对CO_(2)甲烷化性能的影响 被引量：1
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作者 李江涛 刘相洋 +4 位作者 黄奕晨 邱丽 秦波 李瑞丰 闫晓亮 《低碳化学与化工》 北大核心 2025年第1期27-34,共8页
调控金属-载体相互作用是提升负载型Ni基催化剂CO_(2)甲烷化性能的重要途径之一。采用浸渍法通过调变溶液p H值制备了系列Ni/USY-X(X=1、3或5)催化剂,考察了各催化剂的CO_(2)甲烷化性能。其中Ni/USY-3催化剂在450℃、20 h反应条件下的... 调控金属-载体相互作用是提升负载型Ni基催化剂CO_(2)甲烷化性能的重要途径之一。采用浸渍法通过调变溶液p H值制备了系列Ni/USY-X(X=1、3或5)催化剂,考察了各催化剂的CO_(2)甲烷化性能。其中Ni/USY-3催化剂在450℃、20 h反应条件下的稳定性测试中表现出相对最优的CO_(2)甲烷化性能,CO_(2)转化率和CH_(4)选择性分别达到84.5%和95.7%。采用XRD、H_(2)-TPR、SEM和TEM等对催化剂的物相结构、还原性能和形貌进行了表征,从微观层面系统考察了浸渍溶液p H值对催化剂结构和CO_(2)甲烷化性能的影响。结果表明,在适宜p H值调控下,金属-载体相互作用增强,活性金属Ni晶粒的粒径减小,分散度提高。进一步借助原位FT-IR对催化剂的反应路径进行了分析,发现Ni/USY-3催化剂遵循甲酸盐路径。高分散性、较小粒径的活性金属Ni晶粒为碳酸氢盐及时氢化为关键中间体单齿甲酸盐提供了丰富的活性位点,从而实现了CO_(2)的高效转化。 展开更多
关键词 CO_(2)甲烷化 金属-载体相互作用 酸性
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纳米载体SPc提升橘小实蝇中的RNA干扰效率 被引量：1
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作者 谢超 曾彪 +3 位作者 闫硕 杜相革 沈杰 张俊争 《昆虫学报》 北大核心 2025年第6期736-743,共8页
【目的】提供一种用于提高橘小实蝇Bactrocera dorsalis中的RNA干扰(RNA interference,RNAi)效率和双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)稳定性的纳米复合物及其制备方法与应用手段。【方法】采用琼脂糖凝胶阻滞实验(agarose gel shiftin... 【目的】提供一种用于提高橘小实蝇Bactrocera dorsalis中的RNA干扰(RNA interference,RNAi)效率和双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)稳定性的纳米复合物及其制备方法与应用手段。【方法】采用琼脂糖凝胶阻滞实验(agarose gel shifting test)检测橘小实蝇成虫血淋巴对dseGFP的降解能力,星形阳离子聚合物(star polycation,SPc)与dseGFP结合的最佳质量比,以及SPc对dseGFP的保护作用。通过向橘小实蝇成虫腹部注射常用于dsRNA递送体系的表面活性剂烷基糖苷(alkyl polyglucoside,APG),计算死亡率,评估其毒性。在体外合成的dshsp68与纳米载体SPc混合后,用显微注射的方法将纳米复合物注射入橘小实蝇成虫的腹部,运用RT-qPCR检测RNAi效率。【结果】琼脂糖凝胶电泳结果显示橘小实蝇血淋巴能迅速降解dseGFP,当SPc与dseGFP的质量比大于或等于1∶1时能自发形成SPc/dseGFP纳米复合物,减缓橘小实蝇血淋巴对dseGFP的降解。表面活性剂APG对橘小实蝇成虫毒性较强,注射APG后48 h时橘小实蝇的平均死亡率为78.33%,不适宜作为注射法的助剂。单独注射dshsp68后48 h时的RNAi效率为49.53%,在72 h时失去RNAi效果,而注射SPc/dshsp68纳米复合物的RNAi效率更高,48 h时达到了85.99%,且在72 h时的RNAi效率为40.87%,具有更长的RNAi持效时间。【结论】SPc可以结合dsRNA形成复合物,减缓dsRNA被橘小实蝇血淋巴RNase的降解,从而实现持续高效的RNAi敲降效果。本研究建立了一种通过纳米载体SPc实现高效RNAi的方法,可以用于橘小实蝇基因功能研究。 展开更多
关键词 橘小实蝇 纳米载体 星形阳离子聚合物 hsp68 RNAI
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节旋藻同源重组载体的构建及自然转化研究
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作者 王康 崔红利 +1 位作者 李文军 秦松 《生物学杂志》 北大核心 2025年第2期52-58,共7页
节旋藻(Arthrospira)是一类具有较高经济价值的多细胞丝状蓝藻。然而,节旋藻的遗传改造极为困难,特别是缺乏易于操作的遗传转化技术。为了进一步开发节旋藻基因工程应用潜力,从12株不同的节旋藻中筛选具备自然转化能力藻株并评估同源侧... 节旋藻(Arthrospira)是一类具有较高经济价值的多细胞丝状蓝藻。然而,节旋藻的遗传改造极为困难,特别是缺乏易于操作的遗传转化技术。为了进一步开发节旋藻基因工程应用潜力,从12株不同的节旋藻中筛选具备自然转化能力藻株并评估同源侧翼序列和插入片段长度对自然转化效率的影响。结果显示,在12株节旋藻中仅S17和S39可通过自然转化实现遗传操作。同源侧翼序列与插入DNA片段长度均影响转化效率,当同源侧翼序列为1500 bp以上时可显著提升阳性率;相反,插入片段长度则与阳性率呈负相关,因此,当插入DNA较长时需要考虑增加同源侧翼序列长度以提高转化效率。此外,研究还表明节旋藻的同质化与持续筛选时间有关,在筛选120 d后同质化藻株可占阳性藻株的50%以上;同质化藻株可在至少6个月内保持遗传稳定。研究结果可为节旋藻作为高价值化合物生产的生物反应器的应用开发提供技术支持。 展开更多
关键词 节旋藻 自然转化 同源重组 基因工程 载体
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脑心肌炎病毒VP22A基因真核表达载体的构建 被引量：1
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作者 邵帅 纪晓岚 +1 位作者 刘明启 李琼毅 《中国动物保健》 2025年第1期240-241,共2页
为构建脑心肌炎病毒VP2 2A基因真核表达载体。参考EMCV毒株基因组序列,设计VP2 2A基因特异性引物,PCR扩增VP22A基因目的片段,双酶切目的基因和pc DNA3.1-Flag质粒产生相同的黏性末端,使用T4 DNA连接酶连接相同的黏性末端,连接产物转化至... 为构建脑心肌炎病毒VP2 2A基因真核表达载体。参考EMCV毒株基因组序列,设计VP2 2A基因特异性引物,PCR扩增VP22A基因目的片段,双酶切目的基因和pc DNA3.1-Flag质粒产生相同的黏性末端,使用T4 DNA连接酶连接相同的黏性末端,连接产物转化至DH5α感受态细胞,菌液PCR鉴定阳性单克隆菌落,对阳性单克隆提取重组质粒并双酶切进行验证,对阳性重组质粒进行测序。重组质粒双酶切和测序结果表明,pc DNA3.1-Flag-VP2和pc DNA3.1-Flag-2A真核表达载体构建成功。 展开更多
关键词 脑心肌炎病毒 VP2基因 2A基因 真核表达载体
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模块化高效CRISPR载体组装与苹果基因编辑效率评价体系构建
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作者 侯飞帆 黄传秘 +12 位作者 郝鹏博 丛柳 白团辉 史江莉 王苗苗 刘昱 赵玉洁 万然 申亚文 张恒涛 张坤玺 郑先波 焦健 《果树学报》 北大核心 2025年第8期1871-1882,共12页
【目的】CRISPR/Cas基因编辑技术在苹果等果树遗传改良中展现了广阔的应用前景,然而现有的基因编辑系统在载体组装效率和模块化设计等方面仍存在局限性。旨在构建一个模块化高效的CRISPR载体系统,并建立与之配套的苹果基因编辑效率评价... 【目的】CRISPR/Cas基因编辑技术在苹果等果树遗传改良中展现了广阔的应用前景,然而现有的基因编辑系统在载体组装效率和模块化设计等方面仍存在局限性。旨在构建一个模块化高效的CRISPR载体系统,并建立与之配套的苹果基因编辑效率评价体系。【方法】利用常规载体进行改造,通过Golden Gate克隆技术构建了模块化CRISPR载体组装平台,实现了Cas蛋白、启动子及sgRNA表达盒等核心元件的灵活替换和快速构建。同时,整合RUBY报告元件,建立了精准的质粒转染可视化检测系统。【结果】该系统成功实现CRISPR/Cas元件与报告基因元件的协同组装;利用苹果瞬时转化体系,对苹果PDS基因的gRNA的编辑效率进行初步评估,发现不同的gRNA的基因编辑效率存在差异,有必要在稳定遗传转化开展之前对gRNA的编辑效率进行初步评价。【结论】研究结果为后续苹果基因编辑系统的优化提供了主要的载体骨架,并为其他果树基因编辑工具的进一步优化奠定了基础。 展开更多
关键词 苹果 CRISPR/Cas系统 模块化载体 基因编辑效率 瞬时转化
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氢在有机液态储氢载体中的溶解度研究进展
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作者 石秦川 王施媛 +7 位作者 李培雅 路书涵 王波 王家慧 杨福胜 王斌 杨生春 方涛 《化工进展》 北大核心 2025年第7期3816-3827,共12页
氢能是实现“双碳”目标的重要支撑,而有机液态储氢载体(liquid organic hydrogen carriers,LOHCs)技术是发展氢能的重要研究内容,芳杂环储氢载体是目前研究的热点。迄今为止,国内外对加氢过程效率低的问题尚缺乏深入的研究,为了完成加... 氢能是实现“双碳”目标的重要支撑,而有机液态储氢载体(liquid organic hydrogen carriers,LOHCs)技术是发展氢能的重要研究内容,芳杂环储氢载体是目前研究的热点。迄今为止,国内外对加氢过程效率低的问题尚缺乏深入的研究,为了完成加氢过程的科学设计与优化,储氢体系相关的溶解行为与相平衡研究不可或缺。LOHCs加氢反应涉及气液固三相体系的物理溶解-化学反应串联过程,加氢所需氢气来自液体中溶解的氢,而由于氢气在液相中的溶解度与相平衡数据的缺失,现有的LOHCs加氢反应动力学计算并不准确,这需要氢气在不同LOHCs中的溶解度数据修正。本文对氢气在有机液体中溶解度的研究现状进行了阐述,涉及单一氢气的溶解度和混合气体在有机液体中的溶解度。本文详细描述了研究氢气溶解度时所采用的实验方法的种类及优缺点,依据实验方法的不同搭建了实验装置,对数据的关联模型及预测模型进行了讨论。 展开更多
关键词 溶解度 相平衡 有机液态储氢载体 氢气 加氢反应
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