牛白血病病毒RAA荧光检测方法的建立与初步应用

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作者 侯欣怡 王建发 +2 位作者 连帅 耿子健 武瑞 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第8期46-52,共7页

为了建立一种基于牛白血病病毒(BLV)env结构基因的高效、便捷和特异的重组酶介导等温扩增(RAA)快速检测方法,本试验利用DNAMAN进行序列比对,构建重组质粒pESI-env,设计并筛选RAA引物和探针,建立反应体系,进一步优化反应程序和引物探针用... 为了建立一种基于牛白血病病毒(BLV)env结构基因的高效、便捷和特异的重组酶介导等温扩增(RAA)快速检测方法,本试验利用DNAMAN进行序列比对,构建重组质粒pESI-env,设计并筛选RAA引物和探针,建立反应体系,进一步优化反应程序和引物探针用量,建立检测方法,并评价所建立方法的特异性、灵敏性和重复性,将该方法对临床样本的检测结果与酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光定量PCR(qPCR)进行比对。结果显示,最佳引物探针组合为F4/R1/P;该方法在20 min即可完成反应;与牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)和牛轮状病毒(BRV)无交叉反应,最低检出限可达1.62×10^(1) copies/μL,且重复性良好;建立方法的临床样本阳性检出率略高于ELISA和qPCR两种标准检测方法。本试验成功建立了一种高效、便捷且特异性强的BLV RAA荧光检测方法,摆脱了传统方法对昂贵设备、专业人员和检测技术的依赖,为BLV的临床检测提供了技术支持。 展开更多

关键词 牛白血病病毒(BLV) 重组酶介导等温扩增(raa) 快速检测方法

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基于RT-RAA和CRISPR/Cas12a的一管式玉米矮花叶病毒快速检测方法

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作者 侯雨萌 赵振兴 +4 位作者 王思元 董铮 胡中泽 周涛 张永江 《江苏农业学报》 北大核心 2025年第2期268-275,共8页

玉米矮花叶病毒(Maize dwarf mosaic virus,MDMV)是一种重要的检疫性病毒,严重影响玉米的生产。为了有效防治玉米矮花叶病,本研究基于反转录重组酶介导等温核酸扩增(RT-RAA)技术和CRISPR/Cas12a系统构建了一种MDMV快速检测方法,将所有... 玉米矮花叶病毒(Maize dwarf mosaic virus,MDMV)是一种重要的检疫性病毒,严重影响玉米的生产。为了有效防治玉米矮花叶病,本研究基于反转录重组酶介导等温核酸扩增(RT-RAA)技术和CRISPR/Cas12a系统构建了一种MDMV快速检测方法,将所有试剂集中在一个试管中进行反应,并通过侧向流动试纸条(LFD)检测反应结果。本研究筛选得到的最佳反应条件为,引物添加量2.8μL、FB报告分子浓度100 nmol/L、RT-RAA系统反应时间20 min、CRISPR/Cas12a系统反应时间20 min。本研究构建的基于RT-RAA和CRISPR/Cas12a的一管式玉米矮花叶病毒快速检测方法特异性强、灵敏度高,且所用试验材料方便携带和运输,适用于现场检测。 展开更多

关键词 玉米矮花叶病毒 反转录重组酶介导等温核酸扩增(RT-raa)技术 CRISPR/Cas12a 侧向流动试纸条

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基于RAA-CRISPR/Cas12a-LFD的杜英疫病菌可视化检测技术的建立

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作者 黄灿 吴浩雨 +2 位作者 熊典广 黄华毅 田呈明 《北京林业大学学报》 北大核心 2025年第4期10-20,共11页

【目的】由杜英生假隐丛赤壳菌引起的杜英疫病是杜英属植物上新发现的一种危害严重的枝干病害。目前,该病的研究仍处于起步阶段,尚缺乏有效的防控措施。本文旨在建立一种快速、可视化的杜英疫病菌检测方法,为该病害的早期监测和预警提... 【目的】由杜英生假隐丛赤壳菌引起的杜英疫病是杜英属植物上新发现的一种危害严重的枝干病害。目前,该病的研究仍处于起步阶段,尚缺乏有效的防控措施。本文旨在建立一种快速、可视化的杜英疫病菌检测方法,为该病害的早期监测和预警提供重要技术支持。【方法】以杜英疫病菌PsGti1基因为靶标,采用重组酶辅助扩增(RAA)反应特异性扩增靶标基因,并利用CRISPR/Cas12a体系切割靶标和荧光探针,最后利用侧向流试纸条(LFD)实现杜英疫病菌的可视化检测。【结果】(1)筛选获得针对杜英疫病菌PsGti1基因RAA扩增反应的最优引物对。(2)当Cas12a与CrRNA浓度配比分别为1μmol/L和0.125μmol/L时CRISPR/Cas12a切割反应体系的效果最好。(3)建立了基于RAA-CRISPR/Cas12a-LFD的可视化检测体系,在37℃恒温反应条件下可快速检测杜英疫病菌,检测灵敏度为50 fg/μL(以gDNA为模板)和20 pg/μL(以PsGti1_T-vector为模板)。【结论】本研究建立的杜英疫病菌RAA-CRISPR/Cas12a-LFD检测体系具有反应温度易达到、高特异性、高灵敏度和易操作等优点,适合在野外或缺乏实验室检测设备的场景下进行杜英疫病菌的检测。 展开更多

关键词 杜英疫病菌 重组酶辅助扩增(raa) CRISPR/Cas12a 侧向流试纸条(LFD) 可视化检测

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基于RAA-LbCas12a技术的有毒(害)赤潮快速检测产品应用效果评估

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作者 吴隐生 潘非斐 +3 位作者 李聪 陈逍遥 陈建明 王路 《渔业研究》 2025年第3期294-305,共12页

【目的】在全球气候变化和人类活动对水生态环境影响日益加剧的背景下,赤潮的发生频率和规模逐年上升,已成为威胁海洋生态环境、社会经济可持续发展和公共卫生安全的重大生态灾害。福建作为中国的海洋大省,其海水养殖业的发展受到赤潮... 【目的】在全球气候变化和人类活动对水生态环境影响日益加剧的背景下,赤潮的发生频率和规模逐年上升,已成为威胁海洋生态环境、社会经济可持续发展和公共卫生安全的重大生态灾害。福建作为中国的海洋大省,其海水养殖业的发展受到赤潮的显著制约。为实现赤潮灾害的早期监测和预警,亟需一种准确、快速且特异的有毒(害)藻类检测技术。【方法】本研究以米氏凯伦藻(Karenia mikimotoi)、剧毒卡尔藻(Karlodinium veneficum)和短凯伦藻(K.brevis)为代表,通过现场赤潮样品和试点应用测试基于重组酶介导等温核酸扩增(RAA)和LbCas12a核酸酶的藻类快速检测方法。RAA-LbCas12a方法的主要原理是在目标藻种的内转录间隔区(ITS)的特异性区间设计扩增引物和crRNA,实现靶标核酸的快速扩增和特异性识别,并使用侧流层析试纸条实现检测结果的可视化。【结果】在现场赤潮样品测试中,即使藻细胞浓度低至10个/mL(仅占赤潮样品细胞总量的0.1%),该技术也能准确检测目标藻种。在为期65 d的试点应用中,本研究多次检测到环境样品中的目标藻种,其结果与基于胶体金免疫的赤潮快速检测试纸条及显微镜观察结果基本一致,且未出现明显的假阳性结果。【结论】现场应用数据表明,RAA-LbCas12a技术具有出色的灵敏度、特异性、可靠性和操作简便性,在赤潮藻种的现场检测中展现了广泛的适用性。该技术仅需一个便携式快速检测工具箱,即可供一线检测人员快速开展有毒(害)赤潮藻种的现场检测工作,为提升赤潮监测预警能力和海洋生态灾害防控水平提供了重要支撑。 展开更多

关键词 赤潮 重组酶介导等温核酸扩增(raa) LbCas12a核酸酶 快速检测

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基于CRISPR/Cas12a-RT-RAA的猪繁殖与呼吸综合征病毒快速检测方法的建立 被引量：4

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作者 于晶雪 韦珊珊 +9 位作者 覃绍敏 吴健敏 杨丽华 陈凤莲 许力士 秦树英 华俊 韦珏 方芳 刘金凤 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3237-3246,共10页

[目的]本研究将CRISPR/Cas12a系统与反转录重组酶介导等温核酸扩增技术(RT-RAA)结合,拟建立一种基于CRISPR/Cas12a-RT-RAA的猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)快速检测方法。[方法]... [目的]本研究将CRISPR/Cas12a系统与反转录重组酶介导等温核酸扩增技术(RT-RAA)结合,拟建立一种基于CRISPR/Cas12a-RT-RAA的猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)快速检测方法。[方法]分析不同基因型PRRSV全基因组序列,在3′-UTR端保守区设计重组酶介导等温核酸扩增技术(RAA)引物、crRNA及DNA报告底物分子,筛选RT-RAA最佳引物对。表达纯化AsCas12a蛋白,并以质粒为标准品,经RT-RAA扩增后,将产物加入CRISPR/Cas12a系统,建立PRRSV的CRISPR/Cas12a-RT-RAA检测方法,分别以PRRSV、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)核酸为模板验证建立方法的特异性,以不同浓度的pMD18T-PRRSV为模板验证建立方法的敏感性。以5.62×10^(6)、5.62×10^(3)、5.62拷贝数/μL的质粒为模板进行重复性试验,最后进行临床效果评价,将所建立的方法与实时荧光定量逆转录PCR方法进行比较。[结果]本研究成功表达并纯化获得具有良好剪切活性的AsCas12a蛋白,蛋白分子质量大小为196 ku;所建立的CRISPR/Cas12a-RT-RAA方法的检测下限可达5.62拷贝/μL;该方法具有良好的特异性,可特异性检测出PRRSV,不能检出其他猪病病毒PCV2、PEDV、CSFV和PRV,并具有良好的重复性。应用该方法对121份猪组织样品进行检测,与实时荧光定量逆转录PCR的阳性符合率为93.75%,阴性符合率为99.05%,总符合率为99.17%。[结论]本研究成功建立基于CRISPR/Cas12a-RT-RAA的PRRSV快速检测方法,该方法特异性强、灵敏性高、重复性好且不依赖复杂设备,可在现场和基层实验室使用。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 反转录重组酶介导等温核酸扩增技术(RT-raa) CRISPR/Cas12系统

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ERA实时荧光法快速检测乙肝病毒的建立与应用

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作者 翁兴墉 邹林涛 +3 位作者 周璇 唐红花 何军 邓仲良 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期112-117,共6页

基于酶促重组等温扩增(ERA)技术构建一种快速检测乙肝病毒的实时荧光检测方法。根据乙肝病毒聚合酶编码区(P区)保守序列设计引物和探针,对引物、温度、荧光探针浓度等反应条件进行优化,建立ERA实时荧光法最佳反应体系,再对其敏感性、特... 基于酶促重组等温扩增(ERA)技术构建一种快速检测乙肝病毒的实时荧光检测方法。根据乙肝病毒聚合酶编码区(P区)保守序列设计引物和探针,对引物、温度、荧光探针浓度等反应条件进行优化,建立ERA实时荧光法最佳反应体系,再对其敏感性、特异性、抗干扰能力、临床样本检出效果进行验证。结果显示:ERA实时荧光法在42℃、20 min内可完成对乙肝病毒的检测,最低检出限为102 copies/μL;除乙肝病毒外,其他4种病毒(甲肝病毒、丙肝病毒、EB病毒、巨细胞病毒)均未产生荧光扩增曲线,具有良好的特异性和抗干扰能力;以实时荧光PCR法检测结果为标准,ERA实时荧光法检测58份乙肝病毒临床样本的灵敏度为97.37%、特异度为100%、阴性预测值为95.24%、阳性预测值为100%、Kappa值为0.96。成功建立了一种简单、快速、灵敏、特异、低成本的乙肝病毒早期检测方法,满足乙肝病毒快速检测的需要。 展开更多

关键词 酶促重组等温扩增技术 快速检测 乙肝病毒 era实时荧光法 早期诊断

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鲤浮肿病毒RAA-LFD检测方法的建立 被引量：6

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作者 吕晓楠 徐立蒲 +4 位作者 张文 曹欢 王小亮 王姝 王静波 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期263-267,共5页

为建立一种简便、快捷的现地检测鲤浮肿病毒(CEV)的方法,本研究联合重组酶介导扩增(RAA)和侧向流试纸条(LFD)技术,在优选的RAA下游引物和探针的5’端分别进行Biotin和FAM标记,通过RAA反应时间和温度等条件的优化,建立了可用于CEV现地检... 为建立一种简便、快捷的现地检测鲤浮肿病毒(CEV)的方法,本研究联合重组酶介导扩增(RAA)和侧向流试纸条(LFD)技术,在优选的RAA下游引物和探针的5’端分别进行Biotin和FAM标记,通过RAA反应时间和温度等条件的优化,建立了可用于CEV现地检测的RAA-LFD方法。该检测方法在34℃~40℃恒温反应10 min即可实现对CEV目的基因片段的有效扩增;与其它常见水生动物疫病病原DNA无交叉反应;RAA扩增产物可以直接对LFD经肉眼观察结果,该方法对标准质粒pEASY-CEVP4a的最低检测限为6拷贝/μL,与荧光定量PCR灵敏度相当;组内和组间重复性试验表明该方法具有良好的重复性和稳定性;采用该方法和荧光定量PCR对60份临床样本同时进行检测,二者的阳性符合率为96.08%。本研究建立的RAA-LFD检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好、操作方便,可用于CEV的临床快速检测。 展开更多

关键词 鲤浮肿病毒(CEV) 重组酶介导扩增(raa) 侧向流试纸条(LFD) 快速检测

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基于ERA-CRISPR/Cas12a-LFD的犀牛特异性检测技术 被引量：1

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作者 王瑛 张冲 +4 位作者 蔡一村 王鑫杰 林颖峥 冯之航 潘良文 《野生动物学报》 北大核心 2023年第4期798-806,共9页

野生犀牛(Rhinocerotidae)种群的生存正面临极大威胁,包括栖息地减少、碎片化及偷猎等,在对打击犀牛角等非法贸易的努力中,物种的特异性检测至关重要,为了在现场就可以迅速完成犀牛源性成分鉴定,将酶促重组等温扩增(enzymatic recombina... 野生犀牛(Rhinocerotidae)种群的生存正面临极大威胁,包括栖息地减少、碎片化及偷猎等,在对打击犀牛角等非法贸易的努力中,物种的特异性检测至关重要,为了在现场就可以迅速完成犀牛源性成分鉴定,将酶促重组等温扩增(enzymatic recombinase amplification,ERA)、CRISPR/Cas12a和侧向流试纸条(lateral flow dipstick,LFD)技术相结合,研发了一种适于现场使用的犀牛特异性核酸检测方法。结果表明:该方法只能检测出5种现生犀牛特异性核酸,与其他哺乳动物核酸测试样本没有交叉反应,最低检测下限可达100拷贝/孔,具有较好的特异性和灵敏度。该方法可以在36.5~40.0℃条件下,27~30 min完成特异性识别,无需高规格的实验室环境和精密仪器,从而提供更快、更准确和更灵敏的检测方案。 展开更多

关键词 犀牛源性成分 CRISPR/Cas12a 酶促重组等温扩增 侧向流试纸条

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猪肺疫、猪丹毒病原RAA检测方法的建立 被引量：5

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作者 邵建宏 赵福振 +4 位作者 廖秀云 陈轩 黄海超 沙才华 罗宝正 《广东畜牧兽医科技》 2020年第1期43-47,共5页

重组酶介导的等温核酸扩增(RAA)技术是一种新的检测技术,本研究分别基于猪丹毒CPS基因序列和猪肺疫KMT基因序列,使用分子生物学软件Oligo 7.0分别设计两套特异性引物、探针,建立猪丹毒、猪肺疫的RAA检测方法,并分别对其特异性、灵敏度... 重组酶介导的等温核酸扩增(RAA)技术是一种新的检测技术,本研究分别基于猪丹毒CPS基因序列和猪肺疫KMT基因序列,使用分子生物学软件Oligo 7.0分别设计两套特异性引物、探针,建立猪丹毒、猪肺疫的RAA检测方法,并分别对其特异性、灵敏度和稳定进行测试。结果显示,所建立的两种方法将巴氏杆菌、丹毒杆菌显著区分于大肠杆菌O157、金黄色葡萄球菌、胸膜肺炎放线杆菌、单核细胞增生李斯特菌、支气管败血波氏杆菌、Ⅱ型猪链球菌等其他猪细菌性传染病病原,单个样品检测时间约20分钟,最低均可检测到100个拷贝数量级的重组质粒DNA。 展开更多

关键词 猪丹毒 猪肺疫 重组酶介导链替换核酸扩增技术 检测

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重组酶等温扩增技术在分析检测中的应用研究进展 被引量：26

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作者 孙晓红 后来旺 +4 位作者 李达容 赵勇 黄新新 何宇平 蓝蔚青 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2020年第24期265-270,共6页

重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)与重组酶介导扩增(recombinase aided amplification,RAA)是新型核酸等温扩增技术中极具代表性和前沿性的2项技术。RPA与RAA技术均可在常温下进行等温扩增,还可在简单设备... 重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)与重组酶介导扩增(recombinase aided amplification,RAA)是新型核酸等温扩增技术中极具代表性和前沿性的2项技术。RPA与RAA技术均可在常温下进行等温扩增,还可在简单设备甚至低资源环境下实现快速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、检测时间短等优点。该文在简述RPA与RAA技术扩增原理的基础上,重点阐述了主要针对重组酶等温扩增技术在分析检测中的应用研究进展,提出存在问题与解决办法,并对其未来发展前景予以展望,以期为拓展2项技术的应用领域提供理论参考。 展开更多

关键词 重组酶聚合酶扩增 重组酶介导扩增 分析检测 研究进展

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重组酶聚合酶扩增、重组酶介导等温扩增及酶促重组等温扩增技术在食源性致病菌快速检测中的研究进展 被引量：38

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作者 王帅 杨艳歌 +4 位作者 吴占文 李红娜 李涛 孙冬梅 袁飞 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第9期297-305,共9页

随着人民生活水平的提高,食品安全问题也越来越受到社会关注,其中生物(微生物)因子是影响食品安全的最主要因素。食品安全研究领域针对生物(微生物)因子的检测技术众多,其中等温扩增技术因不需依赖复杂的仪器设备,能够快速、准确地进行... 随着人民生活水平的提高,食品安全问题也越来越受到社会关注,其中生物(微生物)因子是影响食品安全的最主要因素。食品安全研究领域针对生物(微生物)因子的检测技术众多,其中等温扩增技术因不需依赖复杂的仪器设备,能够快速、准确地进行生物成分检测而被广泛应用,尤其是新发展起来的重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)、重组酶介导等温扩增(recombinase-aided amplification,RAA)和酶促重组等温扩增(enzymatic recombinase amplification,ERA)技术。这3种等温扩增技术相对于其他等温扩增技术具有反应条件更温和、引物设计更简单等优点,且检测原理相似,本文对这3种技术进行对比研究,从原理、概念以及近年来在食源性致病菌快速检测方面的研究应用情况进行综述,概括其在食品检测中的优势和面临的实际问题,并对未来的发展前景进行展望。 展开更多

关键词 重组酶聚合酶扩增 重组酶介导等温扩增 酶促重组等温扩增 食源性致病菌 快速检测

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重组酶扩增技术概述及应用研究进展 被引量：2

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作者 陈兴浩 李鑫 +10 位作者 沈海潇 张校培 徐丽娜 张鹤平 葛菲菲 杨显超 刘健 白艺兰 王建 杨德全 赵洪进 《中国动物检疫》 CAS 2023年第11期76-81,共6页

重组酶扩增技术是近几年快速发展起来的一类等温扩增技术,相对于传统的核酸检测方法,具有设备要求低、操作简单等优势,在现场快速检测方面有着广阔的应用前景。本文简要介绍了重组酶扩增技术的技术原理、优点和难点,重点阐述了其在病毒... 重组酶扩增技术是近几年快速发展起来的一类等温扩增技术,相对于传统的核酸检测方法,具有设备要求低、操作简单等优势,在现场快速检测方面有着广阔的应用前景。本文简要介绍了重组酶扩增技术的技术原理、优点和难点,重点阐述了其在病毒、细菌、寄生虫及其他微生物检测领域的应用研究进展,旨在为重组酶扩增技术的进一步发展与应用提供参考。 展开更多

关键词 重组酶聚合酶扩增技术 酶促重组等温扩增技术 重组酶介导等温扩增技术 多酶恒温核酸快速扩增技术

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重组酶介导等温扩增技术检测鰤鱼诺卡氏菌方法的建立 被引量：5

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作者 杨惠源 陈国权 +2 位作者 温依铭 夏洪丽 夏立群 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期104-111,共8页

为建立一种基于重组酶介导等温扩增技术(recombinase-aided amplification,RAA)的快速检测鰤鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae)的方法,针对鰤鱼诺卡氏菌的特异性基因组片段,设计重组酶介导扩增引物,通过检测7株鰤鱼诺卡氏菌近缘菌和9种水... 为建立一种基于重组酶介导等温扩增技术(recombinase-aided amplification,RAA)的快速检测鰤鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae)的方法,针对鰤鱼诺卡氏菌的特异性基因组片段,设计重组酶介导扩增引物,通过检测7株鰤鱼诺卡氏菌近缘菌和9种水产养殖过程中常见病原菌,筛选出特异性RAA检测引物,并通过将含有目的片段的重组质粒进行梯度稀释以分析该检测方法的灵敏度,最后采用RAA方法检测患病鱼、健康鱼及11种不同来源的鰤鱼诺卡氏菌菌株,以评价该检测方法的应用性和覆盖度。结果表明:本研究中设计的引物仅针对鰤鱼诺卡氏菌可以扩增出目的条带,检测灵敏度为100 pg/μL,人工感染鰤鱼诺卡氏菌的杂交鳢(Channa maculate♀×C.argus♂)肝脏、体肾和脾脏等组织基因组DNA能够扩增出阳性条带,不同来源的鰤鱼诺卡氏菌菌株可以扩增出阳性条带。研究表明,本研究中所建立的鰤鱼诺卡氏菌重组酶介导等温检测方法具有准确、简便的特点,可对鰤鱼诺卡氏菌进行快速检测。 展开更多

关键词 鰤鱼诺卡氏菌 重组酶介导等温扩增(raa) 快速检测

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酶促重组等温扩增实时荧光法快速检测肺炎支原体方法的建立及应用 被引量：7

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作者 胡海洋 应婉琴 +3 位作者 何军 吕芷贤 谢小平 邓仲良 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期264-270,共7页

利用酶促重组等温扩增(enzymatic recombinase amplification,ERA)技术建立快速检测肺炎支原体的实时荧光检测方法。针对肺炎支原体P1基因设计特异性引物和探针,优化反应条件,分析其敏感性和特异性,并对临床样本进行验证。ERA实时荧光法... 利用酶促重组等温扩增(enzymatic recombinase amplification,ERA)技术建立快速检测肺炎支原体的实时荧光检测方法。针对肺炎支原体P1基因设计特异性引物和探针,优化反应条件,分析其敏感性和特异性,并对临床样本进行验证。ERA实时荧光法在25-40℃均具有扩增能力,在35℃条件下对肺炎支原体的扩增效果最好,20 min内可完成扩增;该法对肺炎支原体的检出限为10^(3) copies/μL;并对其他6种呼吸道病原体进行检测,均无扩增曲线产生,有较好的特异性;以荧光定量PCR法检测结果为标准,ERA实时荧光法对34份临床样本的检测结果的诊断敏感度为96.15%、特异度为100%、阳性预测值为100%、阴性预测值为88.89%。本研究构建的ERA实时荧光法可以快速简单、灵敏和特异地检测出肺炎支原体,满足现场检测的需求。 展开更多

关键词 酶促重组等温扩增技术 实时荧光检测 肺炎支原体

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