期刊文献+
共找到8篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
体外生产红细胞:进展与挑战 被引量:1
1
作者 王辉 张进进 +1 位作者 陈立力 邢颜超 《协和医学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第1期166-171,共6页
目前临床用血供不应求,尽管自体输血等血液保护技术可部分缓解此类情况,但红细胞作为主要的血液成分需求量巨大,而体外生产安全的红细胞则可解决这一难题。目前研究显示,可从胚胎干细胞、人诱导多能干细胞、脐带血、外周血和永生化红系... 目前临床用血供不应求,尽管自体输血等血液保护技术可部分缓解此类情况,但红细胞作为主要的血液成分需求量巨大,而体外生产安全的红细胞则可解决这一难题。目前研究显示,可从胚胎干细胞、人诱导多能干细胞、脐带血、外周血和永生化红系祖细胞系几种来源分化出成熟红细胞。本文就体外生产红细胞的来源及应用进行综述,并分析目前所面临的挑战,以期为输血治疗提供新思路。 展开更多
关键词 体外生产红细胞 胚胎干细胞 永生化红系祖细胞系 输血
在线阅读 下载PDF
猪胚胎干细胞建系研究进展 被引量:5
2
作者 王磊 陶勇 +1 位作者 章孝荣 宋锐 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第11期86-91,共6页
胚胎干细胞(ESCs)是遗传工程、发育生物学和疾病模型研究与应用的重要材料。猪ESCs建系研究虽已历经十多年,且已有建立猪类ES细胞系的报道,但由于其培养和鉴定方法基本都是借鉴小鼠和人的ESCs建系,从而使其培养体系存在着极大的不可靠性... 胚胎干细胞(ESCs)是遗传工程、发育生物学和疾病模型研究与应用的重要材料。猪ESCs建系研究虽已历经十多年,且已有建立猪类ES细胞系的报道,但由于其培养和鉴定方法基本都是借鉴小鼠和人的ESCs建系,从而使其培养体系存在着极大的不可靠性,至今未有种系嵌合的猪ESCs建系成功的报道。论文对猪ESCs建系的影响因素和存在的问题、传统的培养和鉴定方法在猪ESCs建系中的应用、ESCs多能性分子以及ESCs研究中出现的新理论进行了综述。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 细胞系 鉴定方法 多能性分子
在线阅读 下载PDF
哺乳类动物胚胎干细胞多能性和全能性研究进展 被引量:6
3
作者 安立龙 杨奇 +1 位作者 雷安民 窦忠英 《西北农业学报》 CAS CSCD 1999年第2期113-116,共4页
将ES细胞分离与克隆技术和分子生物学技术相结合就可将新的遗传物质导入家畜的生殖腺细胞。通过囊胚注入胚胎干细胞产生嵌合体小鼠表明对胚胎干细胞进行遗传操作是对动物生殖细胞进行遗传改造的有效方法之一。用于遗传操作的胚胎干细... 将ES细胞分离与克隆技术和分子生物学技术相结合就可将新的遗传物质导入家畜的生殖腺细胞。通过囊胚注入胚胎干细胞产生嵌合体小鼠表明对胚胎干细胞进行遗传操作是对动物生殖细胞进行遗传改造的有效方法之一。用于遗传操作的胚胎干细胞的多能性或全能性的检测技术,是改良家畜的有效方法。胚胎干细胞在动物克隆、基因工程及发育生物学等领域的应用前景广阔。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 全能性 嵌合 核移植 生殖细胞
在线阅读 下载PDF
小鼠胚胎干细胞培养体系的建立 被引量:2
4
作者 汪河海 刘红林 +2 位作者 范必勤 钟卉 丁家桐 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 1997年第2期57-60,共4页
通过探讨影响小鼠胎儿成纤维细胞饲养层制备及胚胎干细胞体外培养的若干因素,建立了小鼠胚胎干细胞体外培养体系。
关键词 小鼠 胚胎干细胞 培养体系
在线阅读 下载PDF
胚胎干细胞系向造血干细胞定向分化的研究 被引量:1
5
作者 谢祁阳 焦解歌 +2 位作者 黄元华 姚红霞 涂蓉 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期15-19,共5页
目的建立并稳定和优化诱导胚胎干细胞(ES)向造血干细胞定向分化的方法。方法应用体外胚胎干细胞分化系统,观察了多种因素对原始细胞成集落细胞(BLast Colony-Forming Cell,BL-CFC)形成集落的影响。结果植入不同数量的3.5d胚体... 目的建立并稳定和优化诱导胚胎干细胞(ES)向造血干细胞定向分化的方法。方法应用体外胚胎干细胞分化系统,观察了多种因素对原始细胞成集落细胞(BLast Colony-Forming Cell,BL-CFC)形成集落的影响。结果植入不同数量的3.5d胚体衍生的细胞与BL-CFC集落生成数量之间呈高度相关,大约每植入100个3.5d胚体衍生的细胞,能生成1.08~1.2个BL-CFC集落;20%与30%浓度的D4T条件培养液促BL-CFC集落生成作用的效率最高;单用D4T条件培养液、EPO或KL对BL-CFC集落的生长无明显促进作用(P>0.05);但单用VEGF对BL-CFC集落的生成有极显著的促进作用(P<0.001)。但当这四种因素两两组合使用时,均比单用VEGF具有明显的促BL-CFC集落生成作用。在VEGF+KL+D4T合用的基础上加用EPO,则促BL-CFC集落生成作用大大增强,与其它各组相比较,BL-CFC集落数极显著地增多(P<0.001)。大约每植入100个3.5d胚体衍生的细胞,能生成1.5~1.6个BL-CFC集落。结论影响BL-CFC生长的主要因素可能为VEGF;D4T条件培养液具有强大的协同作用;EPO和KL为诱导BL-CFC向造血细胞系分化的主要因素;3.5d胚体衍生的细胞比3.25d胚体衍生的细胞对各种刺激因子反应更敏感。 展开更多
关键词 胚胎干细胞系 原始细胞成集落细胞 造细胞 内皮细胞 共同前体细胞 造血干细胞 定向分化
在线阅读 下载PDF
无动物源性成分培养体系快速诱导人胚胎干细胞向视网膜色素上皮细胞的分化 被引量:1
6
作者 刘秋慧 王菁 +4 位作者 田蓉 王肖 曹迪 卢晶 罗燕 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期484-488,共5页
背景 随着视网膜色素上皮(RPE)细胞视网膜下腔移植治疗年龄相关性黄斑变性(AMD)研究的开展,需要优化无动物源性成分(xeno-free)培养体系快速定向诱导人胚胎干细胞(hESCs)向RPE细胞分化以满足日渐增长的科研及临床需要. 目的 建... 背景 随着视网膜色素上皮(RPE)细胞视网膜下腔移植治疗年龄相关性黄斑变性(AMD)研究的开展,需要优化无动物源性成分(xeno-free)培养体系快速定向诱导人胚胎干细胞(hESCs)向RPE细胞分化以满足日渐增长的科研及临床需要. 目的 建立xeno-free培养体系,优化快速诱导hESCs向RPE细胞分化的方法. 方法 将hESCs克隆团接种至Vitronectin XFTM,在培养液中加入50 ng/ml noggin、10 ng/ml DKK-1以及10 ng/ml胰岛素样生长因子-1(IGF-1)培养2d,第2~4天将培养液中noggin质量浓度减至10 ng/ml,并加入5 ng/ml碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),第4~6天移除培养液中的noggin和bFGF,第8~14天培养液中加入1 μmol/L CHIR99021.倒置显微镜下观察ESCs在分化为RPE细胞过程中的形态变化,免疫荧光染色检测细胞内特异性抗原的表达以对分化细胞进行鉴定,实时荧光定量PCR (qRT-PCR)法检测细胞分化过程中RPE细胞特异性蛋白mRNA的相对表达变化量.结果 分化培养第14天,部分细胞呈多角形并呈现铺路石样排列,且细胞内可见色素颗粒;培养第35天,诱导分化的细胞内表达RPE细胞特异性抗原Mitf及RPE65;培养至第60天,细胞内富含黑色素颗粒且呈规则六边形.与诱导分化前比较,诱导分化第7天和第14天hES-RPE细胞中Mitf mRNA的表达量分别增加了(3.43±2.77)倍和(8.91±2.83)倍,而RPE65 mRNA的表达量分别增加了(14.60±3.94)倍和(87.16±9.32)倍,分化第7天和第14天细胞中的Mitf mRNA和RPE65mRNA的相对表达量均明显高于分化前,差异均有统计学意义(均P<0.05). 结论 hESCs可在含尼克酰胺、DKK-1、noggin、IGF-1和CHIR99021的xeno-free优化培养体系中快速分化为RPE细胞. 展开更多
关键词 胚胎干细胞/药物作用 细胞培养技术/方法 细胞分化 视网膜色素上皮 培养液/药物作用 细胞株 无动物源性
在线阅读 下载PDF
α-HNP-1转基因细胞系的建立
7
作者 高其双 黄海军 +5 位作者 欧阳静萍 吴建英 陶弼菲 杨悦 张德玲 蒋思文 《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第6期113-116,共4页
目的构建稳定表达人α-HNP-1的转基因细胞系,为稳定生产α-HNP-1并将其应用于医药开发提供生产细胞源。方法真核表达载体pcDNA3.1(-)/HNP-1经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染昆明白小鼠胚胎干细胞来源的上皮细胞,通过不同浓度的G41... 目的构建稳定表达人α-HNP-1的转基因细胞系,为稳定生产α-HNP-1并将其应用于医药开发提供生产细胞源。方法真核表达载体pcDNA3.1(-)/HNP-1经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染昆明白小鼠胚胎干细胞来源的上皮细胞,通过不同浓度的G418加压筛选,建立稳定转染的胚胎干细胞来源的上皮细胞系,用RT-PCR及抑菌试验检测α-HNP-1的表达。结果建立了稳定转染的ES来源的上皮细胞系,成功地表达目的基因,其培养上清液及细胞冻融液具有抑菌作用,结论真核表达载体稳定转染胚胎干细胞来源的上皮细胞系,为进一步研究α-HNP-1的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 人α-防御素-1 真核表达载体 ES细胞 上皮细胞系 稳定转染 基因表达
在线阅读 下载PDF
稳定表达E-cadherin的TW2R细胞增强人胚胎干细胞生长
8
作者 宋琼 滕夏虹 +3 位作者 王丽惠 许倩倩 孙晓婷 邹春林 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第11期1-8,共8页
目的构建一种可高效支持人胚胎干细胞生长的人源饲养层细胞系。方法首先通过在TW2R细胞系稳定表达人E-钙黏素(E-cadherin)基因构建永生化人源饲养层细胞系TWE3R,并比较人胚胎干细胞在TWE3R及其亲本细胞上的克隆形成数。将H9人胚胎干细胞... 目的构建一种可高效支持人胚胎干细胞生长的人源饲养层细胞系。方法首先通过在TW2R细胞系稳定表达人E-钙黏素(E-cadherin)基因构建永生化人源饲养层细胞系TWE3R,并比较人胚胎干细胞在TWE3R及其亲本细胞上的克隆形成数。将H9人胚胎干细胞在TWE3R细胞上经过10代连续传代培养后,进行人胚胎干细胞特异性标志物分析、拟胚体形成分析和畸胎瘤形成检测等实验。结果本研究成功构建了永生化的人源饲养层细胞系TWE3R,TWE3R细胞可比其亲本细胞更高效地支持人胚胎干细胞生长,并且TWE3R饲养层细胞还具有支持低密度接种条件下(每平方厘米5个)人胚胎干细胞生长的特性。此外,H9人胚胎干细胞在TWE3R细胞上长期传代培养后,仍可保持所有人胚胎干细胞的未分化特性、正常细胞核型以及在体内外均可分化形成所有3个胚层衍生物的潜能。结论本研究所建立的永生化人源饲养层细胞系TWE3R具有高效支持胚胎干细胞生长的特性。 展开更多
关键词 人胚胎干细胞 人源饲养层细胞 E-钙黏素
在线阅读 下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部