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Therapeutic effect of Styela plicata on duck hepatitis B virus in vivo
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作者 张淼 王瑞 +2 位作者 闫荟 曾凡林 万新祥 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 2006年第6期352-357,共6页
Objective:To evaluate the antiviral activity of the alcohol extract of Styela plicata on DHBV (duck hepatitis B virus) in vivo. Methods: Guangzhou-Sheldrake ducklings congenitally infected with DHBV were assigned to r... Objective:To evaluate the antiviral activity of the alcohol extract of Styela plicata on DHBV (duck hepatitis B virus) in vivo. Methods: Guangzhou-Sheldrake ducklings congenitally infected with DHBV were assigned to receive the alcohol extract of Styela plicata or lamivudine for 30 consecutive days. The DHBV DNA of sera was detected by RT-PCR. and the histological analysis of duckling liver was evaluated. Results:Thirty days after therapy,histological analysis of duckling liver showed that the ducklings receiving the alcohol extract of Styela plicata or lamivudine exhibited catabatic status in the degree of liver cell degeneration and inflammation compared with the ducklings receiving normal diet. DHBV DNA of sera from alcohol extract of Styela plicata-treated ducklings and lamivudine-treated ducklings all produced significantly lower levels compared with ducklings receiving normal diet (P<0. 01 ). Although these treatment groups all exhibited a rebound phenomenon 10 d after withdrawal of medication, they still exhibited a significant lower level of serum DHBV DNA compared with the control group responded to normal diet (P<0. 05, P<0. 01). Conclusion:Styela plicata may be an effective antiviral medicine in treating chronic hepatitis B. The data of this experiment will be valuable in studying the therapeutic role and the potential therapeutic mechanism of Styela plicata. 展开更多
关键词 Styela plicata duck hepatitis b virus chronic hepatitis b RT-PCR SYbR Green I dye
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1型鸭甲肝病毒VP3蛋白的抗血清中和活性分析及B细胞表位鉴定 被引量:2
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作者 沈友林 汪铭书 +8 位作者 程安春 贾仁勇 朱德康 陈舜 刘马峰 刘菲 杨乔 孙昆峰 陈孝跃 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期141-148,共8页
旨在探究1型鸭甲肝病毒(DHAV-1)VP3蛋白抗血清的中和活性并鉴定VP3的线性B细胞表位。利用pGEX-4T-1表达载体,在BL21(DE3)宿主菌中原核表达DHAV-1 VP3基因,以切胶纯化出的蛋白质为抗原免疫兔制备多克隆抗体,通过鸡胚中和试验对多抗的中... 旨在探究1型鸭甲肝病毒(DHAV-1)VP3蛋白抗血清的中和活性并鉴定VP3的线性B细胞表位。利用pGEX-4T-1表达载体,在BL21(DE3)宿主菌中原核表达DHAV-1 VP3基因,以切胶纯化出的蛋白质为抗原免疫兔制备多克隆抗体,通过鸡胚中和试验对多抗的中和效价进行检测;采用Karplus&Schulz、Emini、Jameson-Wolf和Parker方法分别对柔韧性、表面可及性、抗原性及亲水性进行分析,得到了4条候选线性B细胞表位,以制备的兔抗VP3多克隆抗体为一抗,通过间接ELISA方法对人工合成的B细胞表位进行鉴定,并进一步用临床鸭血清样品对鉴定的B细胞表位的抗体检测能力进行评估。结果显示,VP3在BL21(DE3)中以包涵体形式表达,大小约54ku,Western blot分析表明重组蛋白质具有较好的反应原性。制备的兔抗VP3多克隆抗体的琼扩效价达到1∶16,并能中和DHAV-1,中和效价为1∶39;利用间接ELISA鉴定出GKRKPCRRPIHKPKNPPQEP(1—20aa)、FNTGRYQMSWYPIADGEQSL(131—150aa)和VNSSAPSNID(200—209aa)为VP3的B细胞表位,抗体检测能力试验结果显示表位肽可检测临床DHAV-1鸭血清。本研究表明DHAV-1VP3的抗血清具备一定的中和活性,1—20aa、131—150aa和200—209aa为VP3的B细胞表位且具有临床应用前景。 展开更多
关键词 1型鸭甲肝病毒 VP3蛋白 多克隆抗体 中和活性 b细胞表位
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结合肽抑制鸭乙型肝炎病毒复制作用的研究 被引量:3
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作者 贾红宇 陈智 +4 位作者 周林福 陈峰 朱海红 刘继洪 许晓燕 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2005年第2期116-120,共5页
目的探讨与鸭乙型肝炎病毒多聚酶(DHBVP)特异结合的结合肽,对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)感染的原代鸭肝细胞中DHBV复制的抑制作用。方法应用噬菌体表面展示技术(PDT)筛选出与DHBVP特异结合的结合肽,经测序得知其核苷酸序列,推论出其氨基酸序... 目的探讨与鸭乙型肝炎病毒多聚酶(DHBVP)特异结合的结合肽,对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)感染的原代鸭肝细胞中DHBV复制的抑制作用。方法应用噬菌体表面展示技术(PDT)筛选出与DHBVP特异结合的结合肽,经测序得知其核苷酸序列,推论出其氨基酸序列,据此合成结合肽,将其作用于体外感染DHBV的鸭肝原代培养细胞,分时段检测细胞核、细胞浆及培养上清中的DHBV-DNA。结果应用噬菌体展示技术筛选3轮后共筛到7条结合肽,根据推论出的氨基酸序列合成结合肽,作用于体外感染DHBV的鸭肝原代培养细胞,其中3号肽、6号肽的培养上清及胞浆中的DHBV-DNA含量低于对照组(P<0.05)。结论与DHBVP特异结合的结合肽对DHBV的复制有抑制作用。 展开更多
关键词 肝炎病毒 乙型 噬菌体 病毒复制 多聚酶 结合肽 原代培养
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生物靶标光敏剂对鸭乙肝病毒的特异结合及杀灭作用研究 被引量:3
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作者 高飞 熊鸿燕 陈惠孙 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期75-77,共3页
目的 :利用生物靶标效应的原理 ,探索一种特异灭活病毒的光化学方法。方法 :将针对鸭乙肝病毒 (DHBV)设计并人工合成的两条三螺旋结构寡核苷酸 (TFO)分别标记 8-甲氧基补骨脂素 (8-MOP) ,并将这种复合物 (TFO -P)与长波紫外线 (UVA)共... 目的 :利用生物靶标效应的原理 ,探索一种特异灭活病毒的光化学方法。方法 :将针对鸭乙肝病毒 (DHBV)设计并人工合成的两条三螺旋结构寡核苷酸 (TFO)分别标记 8-甲氧基补骨脂素 (8-MOP) ,并将这种复合物 (TFO -P)与长波紫外线 (UVA)共同作用于血液中的DHBV ,通过原代细胞感染、酶联免疫测定、DNA斑点杂交等试验 ,观察在一定作用条件下 ,TFO -P对DHBV-DNA的特异结合及其所产生的特异光敏效应对DHBV的灭活程度。结果 :DHBV -DNA样品斑点印迹随TFO -P含量的增加明显增强 ,而同时处理的血液中的白细胞DNA样品斑点印迹无明显增强 ;在TFO -P的加入量为 0 1nmol/ml,UVA照射强度为180 0 μW /cm2 时 ,5~ 2 0min的UV照射可灭活DHBV 1 90~ 6 4个对数级 ,灭活病毒的效率显著高于UVA和 8-MOP的单独作用时的效果。结论 :TFO -P与血液中DHBV -DNA能特异结合 ,在适宜的处理条件下 ,所产生的光敏效应能有效灭活血液中的DHBV ,灭活滴度可达 展开更多
关键词 生物靶标 光敏剂 鸭乙肝病素 三螺旋结构寡核苷酸 8-甲氧基补骨脂素 灭活
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拉米夫定联合胸腺肽α1治疗鸭乙型肝炎的效果观察 被引量:5
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作者 陈祥明 柳子明 +2 位作者 杜心芳 羊正纲 陈晓明 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2005年第2期121-125,共5页
目的探讨联合应用胸腺肽α1(Tα1)和拉米夫定对樱桃谷鸭乙型肝炎病毒(DHBV)复制的抑制作用。方法以DHBV阳性血清感染1日龄樱桃谷鸭,制备鸭乙型肝炎模型。用拉米夫定治疗12w后,联用Tα1治疗8d,以拉米夫定治疗为对照组,半定量PCR法检测鸭... 目的探讨联合应用胸腺肽α1(Tα1)和拉米夫定对樱桃谷鸭乙型肝炎病毒(DHBV)复制的抑制作用。方法以DHBV阳性血清感染1日龄樱桃谷鸭,制备鸭乙型肝炎模型。用拉米夫定治疗12w后,联用Tα1治疗8d,以拉米夫定治疗为对照组,半定量PCR法检测鸭血清中DHBV,常规病理学方法观察鸭肝组织病理变化情况。结果和生理盐水对照组比较,拉米夫定治疗后鸭血清中DHBV水平显著降低(4483.2±5193.4vs9351.8±5059.6),联合Tα1治疗后抗DHBV效果更加明显(1692.2±589.2)。拉米夫定治疗可减轻肝细胞变性(3.2±0.8vs4.6±0.5)和炎症反应程度(6.2±3.3vs8.6±2.8),联合Tα1治疗后肝脏炎症反应有所加强(9.0±5.2)。结论拉米夫定可抑制DHBV复制,联用Tα1抗病毒效果更好,而且有加强肝脏内免疫功能的作用。 展开更多
关键词 肝炎病毒 乙型 鸭/药物疗法 拉米夫定/治疗应用 胸腺素/治疗应用 抗病毒药/治疗应用
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抗鸭乙肝病毒core蛋白单克隆抗体的制备与鉴定 被引量:1
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作者 王亚文 刘正稳 +5 位作者 张琳 冯艾 王威 王全颖 杨广笑 惠凌云 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期768-772,共5页
目的制备抗鸭乙肝病毒core蛋白的单克隆抗体并进行鉴定。方法 PCR扩增鸭乙肝病毒(DHBV)core基因片段,构建表达载体pET28a(+)/DHBV core。转化诱导表达融合蛋白,用Ni 2+亲和柱纯化目的蛋白。免疫Balb/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融... 目的制备抗鸭乙肝病毒core蛋白的单克隆抗体并进行鉴定。方法 PCR扩增鸭乙肝病毒(DHBV)core基因片段,构建表达载体pET28a(+)/DHBV core。转化诱导表达融合蛋白,用Ni 2+亲和柱纯化目的蛋白。免疫Balb/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,ELISA筛选,采用有限稀释法筛选单克隆杂交瘤细胞并进行细胞克隆。体内诱生法大量制备单克隆抗体,进行抗体的特异性、效价和亚型的鉴定。结果成功构建表达载体pET28a(+)/DHBV core,并表达DHBV core蛋白。获得2株稳定分泌抗DHBV core抗体的杂交瘤细胞株,分别为2D7和5G10,细胞培养液抗体效价为1∶400和1∶800。选择5G10细胞株制备单克隆抗体,小鼠腹水抗体效价可达1∶320 000。鸭肝组织免疫组化结果显示,DHBV病毒载量>1010copies/mg的肝组织中DHBV core蛋白的表达明显高于病毒载量<105copies/mg的肝组织,而未感染DHBV的鸭肝细胞内不表达DHBV core蛋白。亚型鉴定结果为IgG2aκ链。结论制备并获得了抗DHBV core蛋白的单克隆抗体,为DHBV core蛋白的功能研究、诊断试剂的研制与抗病毒治疗研究奠定了基础。 展开更多
关键词 鸭乙肝病毒 核心蛋白 单克隆抗体 细胞克隆
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芒果苷在鸭体内抑制鸭乙型肝炎病毒感染的实验研究 被引量:22
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作者 邓家刚 杨柯 +1 位作者 郑作文 周小雷 《广西中医学院学报》 2007年第1期1-3,共3页
[目的]观察芒果苷对鸭乙型肝炎病毒感染模型的抑制作用。[方法]采用1日龄北京鸭静脉注射强阳性鸭乙型肝炎病毒后,口服给予芒果苷50、100和200mg/kg 3个剂量,每日2次,连续给药10d,于给药前、给药后第5、10天以及停药后第3天采血,分离血清... [目的]观察芒果苷对鸭乙型肝炎病毒感染模型的抑制作用。[方法]采用1日龄北京鸭静脉注射强阳性鸭乙型肝炎病毒后,口服给予芒果苷50、100和200mg/kg 3个剂量,每日2次,连续给药10d,于给药前、给药后第5、10天以及停药后第3天采血,分离血清,采用斑点杂交方法及放射自显影方法,观察鸭血清乙肝病毒DNA(DHBV-DNA)的动态变化。[结果]芒果苷100mg/kg、200mg/kg在给药期间对DHBV-DNA有明显抑制作用;且在停药后未见明显反跳现象。[结论]提示芒果苷有良好的抑制DHBV感染作用,且停药后不易出现反跳现象。 展开更多
关键词 鸭乙肝病毒 芒果苷 鸭乙肝动物模型 体内实验
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3株鸭乙型肝炎病毒全基因组克隆与序列分析
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作者 王静 许鑫 +5 位作者 李宛玉 王雪雨 吴倩倩 姚伦广 阚云超 冀君 《动物医学进展》 北大核心 2019年第8期11-17,共7页
对河南南阳、安徽亳州、湖北潜江三地鸭血清样本用PCR进行鸭乙型肝炎病毒(DHBV)检测,并从三地经检测为DHBV阳性的样本中各挑选1份进行DHBV全基因的扩增、克隆、测序及序列分析。结果显示,河南南阳、安徽亳州、湖北潜江三地的鸭乙型肝炎... 对河南南阳、安徽亳州、湖北潜江三地鸭血清样本用PCR进行鸭乙型肝炎病毒(DHBV)检测,并从三地经检测为DHBV阳性的样本中各挑选1份进行DHBV全基因的扩增、克隆、测序及序列分析。结果显示,河南南阳、安徽亳州、湖北潜江三地的鸭乙型肝炎自然感染率分别为17.6%、13.6%、16.1%,差异不显著(P>0.05)。河南南阳、安徽亳州、湖北潜江3株DHBV基因组全长分别为3024、3027、3024bp,均含有编码P、S和C蛋白的3个开放阅读框。通过各开放阅读框氨基酸同源性比较,发现编码P蛋白的区域差异较大。全基因序列分析显示,3株DHBV核苷酸同源性为95.1%~97.4%,与选取的25株参考株同源性为90.3%~96.2%。遗传进化分析及P蛋白关键位点分析结果表明,3株均为类中国基因型,湖北潜江的DHBV毒株P蛋白3位-345位关键氨基酸残基位点与中国毒株基因型相同,在367位-771位关键氨基酸残基位点与西方毒株基因型相同,推测其产生了重组。结果表明,成功克隆了华中地区的3株鸭DHBV全基因序列,为DHBV的分子流行病学调查提供参考。 展开更多
关键词 鸭乙型肝炎病毒 全基因 序列分析 克隆 同源性
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京玉清肝胶囊抗鸭乙肝病毒效应及其机制探讨
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作者 张洪泉 刘云 《中国现代中药》 CAS 2006年第2期8-10,共3页
目的:研究京玉清肝胶囊抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的作用。方法:采用重庆麻鸭乙型肝炎动物模型口服灌胃,治疗28d,停药观察7d,检测用药前、后血清中DHBVDNA的改变情况及肝脏病理改变。结果:京玉清肝胶囊用药28d后鸭血清中的DHBVDNA降低有显... 目的:研究京玉清肝胶囊抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的作用。方法:采用重庆麻鸭乙型肝炎动物模型口服灌胃,治疗28d,停药观察7d,检测用药前、后血清中DHBVDNA的改变情况及肝脏病理改变。结果:京玉清肝胶囊用药28d后鸭血清中的DHBVDNA降低有显著意义(P<0.05),停药7d后未出现反跳。结论:京玉清肝胶囊在鸭体内有抑制鸭乙型肝炎病毒DNA的作用且停药后无反跳。 展开更多
关键词 京玉清肝胶囊 抗鸭乙肝病毒
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基于鸭胚原代肝细胞的抗乙肝病毒药物评价模型的建立 被引量:3
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作者 贾袁媛 沈钰明 +1 位作者 伍义行 俞晓平 《安徽农业科学》 CAS 2013年第14期6276-6279,共4页
[目的]建立基于鸭胚原代肝细胞的抗乙肝药物筛选及评价模型。[方法]采用PCR技术鉴定鸭乙肝病毒(DHBV)感染鸭胚,分离感染鸭胚肝细胞原代培养,运用建立的荧光定量PCR技术检测鸭胚肝细胞DHBV-DNA复制水平,从而建立基于鸭胚原代肝细胞的抗... [目的]建立基于鸭胚原代肝细胞的抗乙肝药物筛选及评价模型。[方法]采用PCR技术鉴定鸭乙肝病毒(DHBV)感染鸭胚,分离感染鸭胚肝细胞原代培养,运用建立的荧光定量PCR技术检测鸭胚肝细胞DHBV-DNA复制水平,从而建立基于鸭胚原代肝细胞的抗乙肝药物评价模型。[结果]选择18~22日龄鸭胚建立了优化的鸭胚肝细胞原代培养方法和鸭胚肝细胞中DHBV-DNA水平的荧光定量PCR检测技术。[结论]该研究建立了基于鸭胚肝细胞的抗乙肝药物评价模型,经实践证实该模型具有特异、灵敏、重复性好和操作简便的优点,适用于抗乙肝化合物的筛选与评价。 展开更多
关键词 乙肝模型 鸭乙肝病毒 鸭胚肝细胞 原代培养 荧光定量PCR检测
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疏肝健脾祛湿中药体内抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究 被引量:3
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作者 陈诗慧 莫运涛 《中国医药导报》 CAS 2008年第13期25-26,共2页
目的:观察由疏肝健脾袪湿中药组成的加味四逆散醇提物体内抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的作用。方法:采用先天感染鸭乙型肝炎病毒的广州麻鸭为动物模型,以斑点杂交法检测用药前后鸭血清DHBV-DNAOD值的变化,并以拉米夫定作阳性对照。结果:加... 目的:观察由疏肝健脾袪湿中药组成的加味四逆散醇提物体内抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的作用。方法:采用先天感染鸭乙型肝炎病毒的广州麻鸭为动物模型,以斑点杂交法检测用药前后鸭血清DHBV-DNAOD值的变化,并以拉米夫定作阳性对照。结果:加味四逆散大剂量组用药第5天和第10天,血清DHBV-DNAOD值明显下降,与病毒对照组比较,差异有显著性(P<0.05,P<0.01),与自身用药前比较,差异有显著性(P<0.05,P<0.01);加味四逆散中剂量组在用药第5和第10天,血清DHBV-DNAOD值明显下降,与病毒对照组比较差异有显著性(P<0.05,P<0.05);与自身用药前比较,用药第10天,血清DHBV-DNAOD值明显下降,差异有显著性(P<0.05)。结论:加味四逆散大、中剂量在鸭体内有抗乙型肝炎病毒作用。 展开更多
关键词 疏肝健脾袪湿法 加味四逆散 鸭乙型肝炎病毒 鸭肝炎模型
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