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鸭甲型肝炎活疫苗胚胎免疫试验
1
作者 刘青涛 卢凤英 +8 位作者 朱晓玮 周永银 闵兰 郝东敏 钟洪义 汪建华 杨婧 吴凤瑶 张小飞 《中国家禽》 北大核心 2025年第7期153-158,共6页
为评估鸭甲型肝炎活疫苗胚胎免疫保护效果,试验对不同品种的25胚龄鸭胚进行胚内注射免疫鸭甲型肝炎活疫苗,分别在出壳后1日龄、3日龄、5日龄采用鸭甲型肝炎病毒进行攻毒。结果显示:1型鸭甲型肝炎活疫苗胚内免疫的雏鸭对1型强毒的攻毒保... 为评估鸭甲型肝炎活疫苗胚胎免疫保护效果,试验对不同品种的25胚龄鸭胚进行胚内注射免疫鸭甲型肝炎活疫苗,分别在出壳后1日龄、3日龄、5日龄采用鸭甲型肝炎病毒进行攻毒。结果显示:1型鸭甲型肝炎活疫苗胚内免疫的雏鸭对1型强毒的攻毒保护率均在90%以上,3型鸭甲型肝炎活疫苗胚内免疫的雏鸭对3型强毒的攻毒保护率均在80%以上,1型和3型鸭甲型肝炎活疫苗胚内联合免疫的雏鸭对1型和3型强毒的攻毒保护率均在80%以上。此外,胚内免疫对出雏率无不良影响,雏鸭的采食、饮水、精神状态正常,14日龄剖检肝脏无异常。研究表明,1型和3型鸭甲型肝炎活疫苗胚胎免疫具有良好的免疫保护效果,为鸭甲型肝炎防控提供了一种新的免疫途径。 展开更多
关键词 鸭甲型肝炎活疫苗 鸭胚 胚胎免疫 保护率
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鸭病毒性肝炎鸭胚灭活疫苗的研究 被引量：8
2
作者 范文明 张菊英 +2 位作者 罗函禄 石爱华 刘建萍 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第4期354-358,共5页
以鸭病毒性肝炎病毒Ⅰ型ATCC毒株接种健康鸭胚,收集致死的全胚组织作制苗材料,用福尔马林灭活,以麸氨酸钠终止其作用。先后试制疫苗11批,在试验室免疫雏鸭71只,经强毒攻击后,总的保护率为90.4％。本疫苗免疫雏鸭3天后可产生较坚强的免疫... 以鸭病毒性肝炎病毒Ⅰ型ATCC毒株接种健康鸭胚,收集致死的全胚组织作制苗材料,用福尔马林灭活,以麸氨酸钠终止其作用。先后试制疫苗11批,在试验室免疫雏鸭71只,经强毒攻击后,总的保护率为90.4％。本疫苗免疫雏鸭3天后可产生较坚强的免疫力,在室温至少可保存11天,在4℃可保存254天。经在江苏、安徽、广东等省推广应用200000头剂,均安全有效,颇受用户欢迎,对控制鸭病毒性肝炎的流行起了重要作用。 展开更多
关键词 鸭胚 灭活 疫苗 鸭病 病毒性肝炎
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鸭胚骨骼肌成肌细胞中MyoD1和Myf5基因的表达与分析 被引量：10
3
作者 陶志云 朱春红 +3 位作者 姬改革 徐文娟 单艳菊 李慧芳 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2014年第3期299-303,共5页
以高邮鸭和金定鸭为研究对象,采用实时荧光定量PCR方法测定生肌调节因子MyoD1和Myf5基因在不同发育阶段鸭胚(13、15、17、19、21和23胚龄)骨骼肌成肌细胞中的表达水平,分析MyoD1和Myf5基因在鸭胚胎期骨骼肌成肌细胞中的表达模式和差异.... 以高邮鸭和金定鸭为研究对象,采用实时荧光定量PCR方法测定生肌调节因子MyoD1和Myf5基因在不同发育阶段鸭胚(13、15、17、19、21和23胚龄)骨骼肌成肌细胞中的表达水平,分析MyoD1和Myf5基因在鸭胚胎期骨骼肌成肌细胞中的表达模式和差异.结果表明,Myf5和MyoD1基因在胸腿肌成肌细胞中呈现不同的表达规律:胸肌成肌细胞中,Myf5基因的表达呈"低→高→低→较高"的趋势,类似反"∽"形;MyoD1基因的表达呈"低→高→低"的趋势,在金定鸭17胚龄时达到高峰后迅速下降(P<0.01),并维持在低水平,类似"∧"形,而在高邮鸭17胚龄时达到高峰后维持高水平至19胚龄(P>0.05),再下降并维持在低水平(P<0.05),类似"∩"形.腿肌成肌细胞中,Myf5基因的表达呈"低→高→低"的趋势,类似"∧"形;MyoD1基因的表达呈"较高→低→高→低"的趋势,类似"∽"形.结果提示:Myf5和MyoD1基因在骨骼肌成肌细胞中的表达具有时间和品种依赖性;两基因在两品种鸭胸腿肌中均在17胚龄时达到高峰,表明17胚龄可能是成肌细胞分化和增殖的一个重要时期. 展开更多
关键词 鸭 胚胎 骨骼肌 成肌细胞 MyoD1基因 Myf5基因
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鸭病毒性肠炎病毒CH强毒株在鸭胚成纤维细胞中形态发生学的研究 被引量：6
4
作者 郭宇飞 程安春 +2 位作者 汪铭书 周毅 袁桂萍 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期274-280,共7页
采用超薄切片和透射电子显微镜技术对鸭病毒性肠炎病毒CH强毒株(DEV-CHv)在鸭胚成纤维细胞(DEF)中的形态发生学进行了研究。结果表明,DEV-CHv吸附到DEF细胞上以后通过囊膜和细胞膜间发生融合的方式侵入宿主细胞;病毒在细胞核内完成病毒... 采用超薄切片和透射电子显微镜技术对鸭病毒性肠炎病毒CH强毒株(DEV-CHv)在鸭胚成纤维细胞(DEF)中的形态发生学进行了研究。结果表明,DEV-CHv吸附到DEF细胞上以后通过囊膜和细胞膜间发生融合的方式侵入宿主细胞;病毒在细胞核内完成病毒核酸的生成、核酸与衣壳的装配;病毒核衣壳通过核膜-内质网膜系统从细胞核转运到内质网池中并在内质网池中得到皮层结构;获得了皮层的DEV-CHv核衣壳通过出芽方式释放到细胞空泡内得到囊膜结构后成为成熟病毒;细胞空泡内的成熟DEV-CHv可通过细胞的胞吐作用被释放到细胞外,或在空泡破裂时被释放到细胞外。 展开更多
关键词 鸭病毒性肠炎病毒 鸭胚成纤维细胞 形态发生学
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半番鸭胚中鹅细小病毒的分离鉴定及其基因组分子特征分析 被引量：5
5
作者 傅秋玲 程龙飞 +8 位作者 万春和 傅光华 施少华 陈红梅 刘荣昌 陈翠腾 陈珍 朱春华 黄瑜 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期2148-2156,共9页
通过胶体金试验、电镜观察及PCR扩增等方法,自半番鸭胚及孵化的雏半番鸭中分离获得了鹅细小病毒(GPV)毒株(命名为MDE株),并进行了病毒全基因组分子特征分析。结果表明,该病毒粒子为直径20~24nm的球形、无囊膜粒子。胶体金试验结果呈GPV... 通过胶体金试验、电镜观察及PCR扩增等方法,自半番鸭胚及孵化的雏半番鸭中分离获得了鹅细小病毒(GPV)毒株(命名为MDE株),并进行了病毒全基因组分子特征分析。结果表明,该病毒粒子为直径20~24nm的球形、无囊膜粒子。胶体金试验结果呈GPV阳性。该毒株基因组全长为5 106bp,与GenBank登录的15株GPV基因组序列相似性为93.2%~98.1%,其中与SH株及疫苗株SYG61v株等的相似性较高,而与半番鸭源的GPV重组病毒M15株相似性最低。基于病毒VP1和NS1基因的遗传进化分析表明,分离毒株MDE与GPV疫苗毒株的亲缘关系最近,处于同一个独立的分支上,与番鸭细小病毒的亲缘关系较远。与疫苗毒株SYG61v株比较,MDE株VP1区的糖基化位点增加了703NRTS糖基化位点。以上结果表明,本研究揭示了GPV可通过半番鸭胚垂直传播给雏鸭,丰富了GPV的生态学内容。 展开更多
关键词 半番鸭胚 鹅细小病毒 全基因 分子特征
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不同品种鸭胚胎期骨骼肌成肌细胞GHR和IGF-1 mRNA表达差异分析 被引量：4
6
作者 姬改革 陶志云 +5 位作者 朱春红 束婧婷 刘宏祥 徐文娟 胡艳 李慧芳 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第3期406-411,共6页
为探讨生长激素受体(growth hormone receptor,GHR)和胰岛素样生长因子-1(Insulin-like growth factor-1,IGF-1)在不同品种鸭胚胎期骨骼肌成肌细胞中的表达差异。选择生长速度不同的金定鸭和高邮鸭为试验动物,采用实时荧光定量PCR方法... 为探讨生长激素受体(growth hormone receptor,GHR)和胰岛素样生长因子-1(Insulin-like growth factor-1,IGF-1)在不同品种鸭胚胎期骨骼肌成肌细胞中的表达差异。选择生长速度不同的金定鸭和高邮鸭为试验动物,采用实时荧光定量PCR方法检测鸭13,15,17,19,21和23胚龄时胸肌和腿肌成肌细胞GHR,IGF-1mRNA的表达情况,并进行了品种间比较。结果发现:13胚龄时,高邮鸭胸肌和腿肌成肌细胞IGF-1的表达均显著高于金定鸭(P<0.05);17胚龄是两个品种鸭GHR和IGF-1共同的表达高峰期;17胚龄之后,鸭胸肌和腿肌成肌细胞GHR和IGF-1表达均显著降低。在19,21胚龄时,高邮鸭胸肌成肌细胞2个基因的表达均显著高于金定鸭(P<0.05),而腿肌成肌细胞GHR和IGF-1表达在品种间无显著差异(P>0.05)。鸭胚胸肌和腿肌成肌细胞GHR和IGF-1表达呈现极显著的正线性相关(P<0.01)。提示:GHR和IGF-1的表达谱及各自在品种间的变化规律基本一致;鸭胚骨骼肌成肌细胞GHR和IGF-1 mRNA表达有组织特异性,二者之间可能存在正调控的作用机制。 展开更多
关键词 鸭 胚胎 成肌细胞 GHR IGF-1
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鸭胚成纤维细胞培养、传代及保存方法的研究 被引量：8
7
作者 许静 李进军 +3 位作者 熊胜 陈黎 杨倩 卢立志 《中国家禽》 北大核心 2012年第13期9-13,共5页
本研究旨在建立鸭胚成纤维细胞离体培养、传代以及冷冻保存体系,为鸭胚胎或生殖干细胞的离体培养奠定基础。利用胰酶-EDTA消化鸭胚胎组织,10% FBS+DEME营养液培养,获得原代和传代成纤维细胞。分别用DMSO、甘油以及乙二醇作为冷冻保护剂... 本研究旨在建立鸭胚成纤维细胞离体培养、传代以及冷冻保存体系,为鸭胚胎或生殖干细胞的离体培养奠定基础。利用胰酶-EDTA消化鸭胚胎组织,10% FBS+DEME营养液培养,获得原代和传代成纤维细胞。分别用DMSO、甘油以及乙二醇作为冷冻保护剂对F1代鸭胚成纤维细胞进行冷冻保存,检测复苏后细胞的生长情况。利用此方法可以获得高活性的鸭胚成纤维细胞,并可成功传至第三代。其中F1代与F2代细胞活力最好,达到90%以上。3种冷冻剂保存的细胞复苏后均与F1代细胞的活力存在明显差异,均小于80%,其中用DMSO冷冻保存的细胞复苏后活力最强,生长密度保持较好。 展开更多
关键词 鸭胚成纤维细胞 体外培养 冷冻保存 细胞活力
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鸭胚骨骼肌生肌调节因子MyoD1和Myf5发育性变化研究 被引量：9
8
作者 陶志云 邹剑敏 +5 位作者 宋迟 宋卫涛 胡艳 束婧婷 章双杰 李慧芳 《中国家禽》 北大核心 2012年第17期16-19,共4页
本研究采用Real-timePCR分析生肌调节因子MyoD1和Myf5在不同鸭品种(高邮鸭和金定鸭)胚胎期及初生早期(13、17、21、25、27日胚龄和出雏后7日龄)骨骼肌发育中的表达模式以及表达差异。结果表明,MyoD1mRNA和Myf5mRNA在两个品种鸭胸肌早期... 本研究采用Real-timePCR分析生肌调节因子MyoD1和Myf5在不同鸭品种(高邮鸭和金定鸭)胚胎期及初生早期(13、17、21、25、27日胚龄和出雏后7日龄)骨骼肌发育中的表达模式以及表达差异。结果表明,MyoD1mRNA和Myf5mRNA在两个品种鸭胸肌早期发育中表现出一致的表达规律,均呈"波浪"型;在腿肌早期发育中均呈近似"反√"型的表达趋势,在27日胚龄时表达量最低,出生后7日龄表达量又上升,但MyoD1mRNA的表达量仅有小幅增加,与27日胚龄的表达量差异不显著(P>0.05),而Myf5mRNA的表达量有大幅增加,与27日胚龄的表达量差异极显著(P<0.01),胸肌和腿肌中两基因的mRNA表达量在同一胚龄不同品种间差异均不显著。结果提示:骨骼肌中MyoD1和Myf5基因表达具有显著的时空性,但不存在品种差异,为进一步深入研究MyoD1和Myf5基因在胚胎期骨骼肌发生过程及其调控机理中的功能提供一定的理论依据。 展开更多
关键词 鸭 胚胎期 MyoD1基因 Myf5基因 骨骼肌
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应用鸭胚组织培养液酶活性进行蛋鸭早期选种的研究 被引量：5
9
作者 檀俊秩 曾安庆 陈晖 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第2期97-100,共4页
根据亲代产蛋性能,将10个家系320个13日龄的鸭胚分成Ⅰ和Ⅱ两组,进行活组织培养,测定培养液中的碱性磷酸酶(AKP)和谷草转氨酶(GOT)的活性。结果:AKP活性与其亲代产蛋指数、半同胞姐妹鸭的开产日龄和500日龄产蛋数有密切相关,其相关系数... 根据亲代产蛋性能,将10个家系320个13日龄的鸭胚分成Ⅰ和Ⅱ两组,进行活组织培养,测定培养液中的碱性磷酸酶(AKP)和谷草转氨酶(GOT)的活性。结果:AKP活性与其亲代产蛋指数、半同胞姐妹鸭的开产日龄和500日龄产蛋数有密切相关,其相关系数分别为0.8736、-0.6616和0.7954;GOT活性与上述性能的相关系数分别为-0.7737、0.4331和-0.9024。AKP活性高、GOT活性低的Ⅰ组比AKP活性低、GOT活性高的Ⅱ组,其半同胞姐妹鸭开产日龄提早18.8天(P<0.01);500日龄产蛋数多21.8个(P<0.05)。AKP和GOT活性的遗传力分别为0.7993和0.3410,它们间的关系为负相关,相关系数为-0.8641。根据鸭胚组织培养液中的AKP和GOT的活性,对蛋鸭进行早期选种,比常规选种法可提早半年。 展开更多
关键词 蛋鸭 选种 鸭胚培养 碱性磷酸酶 鸭
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3种消毒剂对鸭肝炎病毒的杀灭效果试验 被引量：4
10
作者 张济培 卢玉葵 +2 位作者 陈建红 司兴奎 李海松 《动物医学进展》 CSCD 2004年第6期120-121,共2页
以 1 0日龄鸭胚为试验载体 ,检验 3种消毒剂对鸭肝炎病毒 (DHV Ⅰ )野毒株的杀灭效果。将一定剂量的DHV Ⅰ感染鸭胚尿囊液分别与四烷铵络合碘、二氯异氰脲酸钠、百毒杀(双链季铵盐类消毒剂 ) 3种消毒剂的不同浓度混合作用后 ,接种鸭胚... 以 1 0日龄鸭胚为试验载体 ,检验 3种消毒剂对鸭肝炎病毒 (DHV Ⅰ )野毒株的杀灭效果。将一定剂量的DHV Ⅰ感染鸭胚尿囊液分别与四烷铵络合碘、二氯异氰脲酸钠、百毒杀(双链季铵盐类消毒剂 ) 3种消毒剂的不同浓度混合作用后 ,接种鸭胚继续孵化 ;计算鸭胚死亡比例 ,测定各种消毒剂对DHV Ⅰ的杀灭效力。结果显示 :0 .0 4%的二氯异氰脲酸钠能有效灭活DHV Ⅰ ,显著降低试验鸭胚的死亡率 ;显示了较好的消毒效果 。 展开更多
关键词 消毒剂 鸭 肝炎病毒 杀灭效果 试验
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实时荧光定量PCR技术在鸭胚鸭瘟病毒检测中的应用 被引量：3
11
作者 汤承 岳华 +3 位作者 索化夷 杨发龙 于学辉 高元刚 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期284-287,共4页
用real-time PCR技术定量检测了鸭瘟标准强毒（DPV F37）和鸡胚化弱毒（C-KEC）疫苗毒在鸭胚中的动态分布．结果表明，F37在接种后3～45h内胚体和绒毛尿囊膜中的病毒荷载量为7．43×10～5．01×10^3拷贝·μL^-1，57-69h达... 用real-time PCR技术定量检测了鸭瘟标准强毒（DPV F37）和鸡胚化弱毒（C-KEC）疫苗毒在鸭胚中的动态分布．结果表明，F37在接种后3～45h内胚体和绒毛尿囊膜中的病毒荷载量为7．43×10～5．01×10^3拷贝·μL^-1，57-69h达到平台期，为1．7×10^4～4．04×10^4拷贝·μL^-1，接种后9～81h尿囊液中的DPV荷载量始终在2．13～5．11×10^2拷贝·μL^-1，胚体和绒毛尿囊膜中病毒荷载量高于尿囊液，病毒收获时间以接种后69～81h为宜；C-KEC接种鸭胚后3h尿囊液中病毒荷载量为7．6×10^3拷贝·μL^-1，9h下降至1．94×10^2拷贝·μL^-1，21h呈阴性．以后快速上升到平台期达9．16×10^3拷贝·μL^-1；而绒毛尿囊膜在21h前、胚体在45h前的检测均为阴性，之后快速上升，均在69h达到平台期，为6．40×10^4·μL^-1及4．14×10^4拷贝·μL^-1，C-KEC在鸭胚绒毛尿囊膜及胚体中的含量同样高于尿囊液，收毒时间以接种后69～81h为佳；对real-time PCR与空斑法两种定量检测结果进行相关性分析，结果显示，两者存在显著的直线相关，说明Real-time PCR技术完全可以替代空斑法定量检测DPV，并可将检测时间由144h缩短至3h． 展开更多
关键词 鸭瘟病毒 REAL-TIME PCR 鸭胚 空斑试验
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鸭胚胎及其组织器官生长发育规律的研究 被引量：3
12
作者 朱文奇 宋卫涛 +3 位作者 章玲玲 宋迟 胡艳 李慧芳 《中国家禽》 北大核心 2012年第19期29-32,共4页
为了研究高邮鸭胚胎及其重要组织器官的生长发育情况,测定了高邮鸭胚胎的胚重、胚长、肝脏重、胸肌重及腿肌重,并对其进行分析。结果表明:随着胚龄的增加,鸭胚胎的胚重、肝脏、胸肌和腿肌性状的测定值由慢到快逐渐增大,而胚长的累积生... 为了研究高邮鸭胚胎及其重要组织器官的生长发育情况,测定了高邮鸭胚胎的胚重、胚长、肝脏重、胸肌重及腿肌重,并对其进行分析。结果表明:随着胚龄的增加,鸭胚胎的胚重、肝脏、胸肌和腿肌性状的测定值由慢到快逐渐增大,而胚长的累积生长趋势较为平缓。鸭胚胎的胚重、肝脏的绝对生长速度随着胚龄的增加而增加,胚长的生长速度较为平缓,17胚龄达到高峰(0.59cm/d),然后缓慢下降;胸肌的生长速度较为缓慢,17胚龄最高(0.06mg/d),然后逐渐下降;腿肌的绝对生长速度随着胚龄的增加而缓慢增加,但在27胚龄后有所下降。鸭胚胎的所有性状的相对生长都表现为前期强后期弱的趋势。不同孵化阶段鸭胚胎的各组织器官与整体的生长速度不一致,13～27胚龄期间,肝脏、腿肌为晚熟部位,胸肌为早熟部位。本研究结果为鸭胚胎的相关研究提供了基础理论依据。 展开更多
关键词 鸭 胚胎 组织器官 生长发育
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鸭胚胎及其头与四肢生长发育的研究 被引量：2
13
作者 景栋林 张绮琼 +2 位作者 潘杏荷 谢蝶娟 岑丽莎 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2007年第2期106-108,共3页
对仙湖肉鸭胚胎及其头与四肢部分性状的重量和长度进行了测定与分析。结果表明,不同性状有着各自不同的生长发育规律,并表现出明显的不平衡性。生长强度表现为前期强后期弱的趋势。胚重的生长速度随着胚龄的增加而增加。头重、前肢和后... 对仙湖肉鸭胚胎及其头与四肢部分性状的重量和长度进行了测定与分析。结果表明,不同性状有着各自不同的生长发育规律,并表现出明显的不平衡性。生长强度表现为前期强后期弱的趋势。胚重的生长速度随着胚龄的增加而增加。头重、前肢和后肢重以及胚长、前肢、后肢、胫和第三趾长的生长速度表现为正态分布的变化趋势。头长、眼泡直径和喙长在分化出现后,立即进入快速生长阶段,在第8～12胚龄之后生长速度减缓。在第8～26胚龄期间,头为早熟部位,前肢和后肢为晚熟部位,前肢的重量生长先于后肢。 展开更多
关键词 鸭 胚胎 头 四肢 生长发育
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山西亚群H5N1亚型HPAIV对鸭及鸭胚的继代感染研究 被引量：2
14
作者 张翼 段振华 +5 位作者 刘丽玲 施建忠 田国彬 曾显营 陈化兰 李雁冰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期365-369,共5页
2006年从山西省分离获得的H5N1亚型禽流感病毒(AIV)曾引起免疫鸡群的大量死亡,与我国之前分离的病毒抗原差异性较大,称为"山西鸡型"抗原变异株。本研究应用该亚群代表毒株CK/SX/2/06(H5N1),研究该病毒对SPF鸭和鸭胚的致病性,... 2006年从山西省分离获得的H5N1亚型禽流感病毒(AIV)曾引起免疫鸡群的大量死亡,与我国之前分离的病毒抗原差异性较大,称为"山西鸡型"抗原变异株。本研究应用该亚群代表毒株CK/SX/2/06(H5N1),研究该病毒对SPF鸭和鸭胚的致病性,并通过病毒在鸭和鸭胚内的连续传代,探讨该亚群病毒在鸭和鸭胚中的进化规律。结果表明,病毒对3周龄鸭呈低致病性,在各脏器中的复制能力较弱;鸭感染病毒后无明显临床症状,排毒水平较低并且不能感染同居鸭。病毒在3周龄鸭和10日龄鸭胚中分别继代感染3代和5代后,对3周龄鸭仍呈低致病性且HA基因未发生氨基酸位点变化。病毒不能致死3周龄鸭和1日龄雏鸭,但能致死10日龄～23日龄鸭胚,而且对鸭胚的致病性随着鸭胚日龄的增长逐渐减弱,致死鸭胚时间从对10日龄鸭胚24h致死到对23日龄鸭胚72h致死直至对25日龄鸭胚只感染但不致死。病毒对鸭呈低致病性且在鸭群传播中保持着基因水平和致病性上的相对稳定,对不同日龄鸭胚、1日龄和3周龄鸭致病性的不同表现,与目前存在于我国的其他亚群H5N1HPAIV对鸭致病性和进化特点上呈现出明显的差异,并对家禽养殖业存在威胁。 展开更多
关键词 禽流感病毒 山西亚群 鸭 鸭胚 继代感染
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鸭源新城疫病毒和减蛋综合征病毒在同一鸭胚中增殖的观察 被引量：3
15
作者 姜平 陈溥言 +1 位作者 何琴娟 朱琴亚 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第2期79-83,共5页
用鸭源新城疫病毒（ＮＤ）Ｄ１０株和减蛋综合征（ＥＤＳ—７６）病毒ＧＣ２株同时在同一鸭胚中复制增殖．结果表明：（１）两种病毒同时感染同一鸭胚后，鸭胚平均死亡时间（ＭＤＴ）７３．６ｈ，死亡率８８．２％（１５／１７）．胚体... 用鸭源新城疫病毒（ＮＤ）Ｄ１０株和减蛋综合征（ＥＤＳ—７６）病毒ＧＣ２株同时在同一鸭胚中复制增殖．结果表明：（１）两种病毒同时感染同一鸭胚后，鸭胚平均死亡时间（ＭＤＴ）７３．６ｈ，死亡率８８．２％（１５／１７）．胚体皮肤出血、淤血，绒毛尿囊膜水肿、增厚，尿囊液能凝集人和鸡红细胞．（２）尿囊液感染鸡胚成纤维（ＣＥＦ）细胞，致细胞病变（ＣＰＥ），证实尿囊液中存在ＮＤＶ．用间接法Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ检测ＥＤＳ—７６病毒抗原，结果为阳性．（３）电镜观察经提纯浓缩后的尿囊液，可见到两种病毒粒子：ＮＤＶ形态不一，多数直径约１２０～１３０ｎｍ或更大．有囊膜；ＥＤＳ—７６病毒呈圆形，直径约７０ｎｍ，有囊膜．（４）用血凝试验（ＨＡ）测定两种病毒．其生长规律与单独接种时一致．（５）接种灭活的含毒尿囊液的雏鸡，在血清中出现抗两种病毒的ＨＩ抗体及抗ＥＤＳ－７６病毒的中和抗体，对ＮＤＶ强毒攻击有坚强的免疫力。 展开更多
关键词 新城疫 病毒 减蛋综合征 鸭胚 接种
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鸭胚成纤维细胞上坦布苏病毒受体蛋白的鉴定 被引量：2
16
作者 赵冬敏 韩凯凯 +7 位作者 刘青涛 黄欣梅 杨婧 刘宇卓 章丽娇 田宇杰 王梦瑶 李银 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期173-178,共6页
【目的】拓展对坦布苏病毒受体的认知,为研究其在鸭体内的感染机制打下基础。【方法】取9日龄SPF鸭胚制备鸭胚成纤维细胞(DEF),待细胞长成单层后提取DEF膜蛋白,利用免疫共沉淀试验筛选出DEF膜蛋白中可与坦布苏病毒结合的蛋白,经病毒辅... 【目的】拓展对坦布苏病毒受体的认知,为研究其在鸭体内的感染机制打下基础。【方法】取9日龄SPF鸭胚制备鸭胚成纤维细胞(DEF),待细胞长成单层后提取DEF膜蛋白,利用免疫共沉淀试验筛选出DEF膜蛋白中可与坦布苏病毒结合的蛋白,经病毒辅覆蛋白结合分析(VOPBA)验证后通过LC-MSMS质谱分析进行鉴定;同时人工合成鸭热休克蛋白70基因(HSP70)序列的开放阅读框(1905 bp),构建重组质粒pET32a-HSP70并转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,以重组蛋白免疫小鼠制备抗鸭HSP70血清,与DEF细胞共孵育后接种坦布苏病毒,并采用实时荧光定量PCR检测抗血清对病毒感染的抑制作用。【结果】DEF膜蛋白中分子量约70 kD的蛋白可与坦布苏病毒结合,经LC-MSMS质谱分析和序列比对可确定该蛋白即为鸭热休克蛋白70(HSP70)。含重组质粒pET32aHSP70的BL21(DE3)感受态细胞经IPTG诱导4 h后,SDS-PAGE检测发现在分子量约85 kD处出现目的蛋白条带,获得的重组鸭HSP70蛋白主要以包涵体形式进行表达,且能与His标签抗体发生特异性反应。以重组鸭HSP70蛋白免疫小鼠获得的抗鸭HSP70血清可封闭DEF细胞上的HSP70,而竞争性抑制坦布苏病毒感染。【结论】HSP70是坦布苏病毒感染DEF细胞的受体,可作为新的靶点用于抗坦布苏病毒药物设计。 展开更多
关键词 坦布苏病毒 鸭胚成纤维细胞 热休克蛋白70 受体 免疫共沉淀 病毒辅覆蛋白结合分析(VOPBA)
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鸭胚胸肌成肌细胞IGF-Ⅰ和MSTN基因的表达分析 被引量：1
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作者 姬改革 朱春红 +3 位作者 陶志云 刘宏祥 宋迟 李慧芳 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期139-144,共6页
[目的]本文旨在探讨IGF-Ⅰ和MSTN基因在鸭胚胸肌成肌细胞的表达规律。[方法]以生长速度不同的高邮鸭和金定鸭为试验对象,采用实时荧光定量PCR方法检测鸭13、15、17、19、21和23胚龄时胸肌成肌细胞IGF-Ⅰ、MSTN mRNA的表达情况,并进行品... [目的]本文旨在探讨IGF-Ⅰ和MSTN基因在鸭胚胸肌成肌细胞的表达规律。[方法]以生长速度不同的高邮鸭和金定鸭为试验对象,采用实时荧光定量PCR方法检测鸭13、15、17、19、21和23胚龄时胸肌成肌细胞IGF-Ⅰ、MSTN mRNA的表达情况,并进行品种间比较。[结果]IGF-Ⅰ与MSTN mRNA表达都呈先升后降的趋势,都存在17胚龄的表达高峰,19胚龄之后,表达显著下调并持续至23胚龄;高邮鸭IGF-ⅠmRNA的表达比金定鸭多了13胚龄的表达高峰,且在13胚龄时,2个基因的表达量都是高邮鸭极显著高于金定鸭(P<0.01)。与之相反,IGF-Ⅰ/MSTN mRNA表达量的比值都是呈先降后升的趋势,在19胚龄之前比值小于1,21胚龄至23胚龄时,表达量比值显著升高;品种间是高邮鸭的显著高于金定鸭(P<0.05)。IGF-Ⅰ与MSTN mRNA表达均无显著品种效应,而IGF-Ⅰ/MSTN mRNA表达量比值品种效应显著。2个品种的IGF-Ⅰ与MSTN mRNA表达均呈极显著正相关。[结论]IGF-Ⅰ与MSTN协同调节成肌细胞的增殖与分化,二者表达量比值在品种上的差异可能是造成鸭胚胸肌发育品种差异的重要因素。 展开更多
关键词 鸭 胚胎 成肌细胞 IGF-Ⅰ MSTN
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鸭胚多肽对小鼠抗疲劳、耐缺氧能力的影响 被引量：2
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作者 王旭清 张培正 +2 位作者 李坤 段欣 刘辉 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2010年第3期502-505,共4页
实验研究鸭胚多肽对小鼠机体抗疲劳、耐缺氧能力的影响。实验设对照组和实验组(鸭胚多肽低剂量、中剂量和高剂量组),连续灌胃小鼠30 d后,测定小鼠负重游泳力竭至死时间,并测定小鼠游泳后血清中乳酸(LD)含量、尿素氮(BUN)含量、葡萄糖(LG... 实验研究鸭胚多肽对小鼠机体抗疲劳、耐缺氧能力的影响。实验设对照组和实验组(鸭胚多肽低剂量、中剂量和高剂量组),连续灌胃小鼠30 d后,测定小鼠负重游泳力竭至死时间,并测定小鼠游泳后血清中乳酸(LD)含量、尿素氮(BUN)含量、葡萄糖(LG)含量、乳酸脱氢酶(LDH)活性,小鼠常压耐缺氧存活时间、亚硝酸钠中毒存活时间、急性脑缺血性存活时间。结果表明:鸭胚多肽能显著增加小鼠负重游泳时间、血清中LDH活性、小鼠亚硝酸钠中毒存活时间及急性脑缺血性存活时间,并能显著降低LD、BUN含量。说明鸭胚多肽能有效提高小鼠的抗疲劳、耐缺氧能力。 展开更多
关键词 鸭胚肽 抗疲劳 耐缺氧
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新型鸭呼肠孤病毒分离株的致病性研究 被引量：35
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作者 陈仕龙 陈少莺 +6 位作者 程晓霞 林锋强 江斌 王劭 朱小丽 张世忠 李兆龙 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2010年第4期14-18,共5页
【目的】研究新型鸭呼肠孤病毒（NDRV）的致病性。【方法】以NDRV分离株NP01、NP03、NPM为供试病毒，分析其对禽胚（番鸭胚、鸡胚）、部分禽类（雏番鸭、雏半番鸭、雏鸡、雏鹅）及细胞的致病性。【结果】NDRV分离株经尿囊腔接种能100％... 【目的】研究新型鸭呼肠孤病毒（NDRV）的致病性。【方法】以NDRV分离株NP01、NP03、NPM为供试病毒，分析其对禽胚（番鸭胚、鸡胚）、部分禽类（雏番鸭、雏半番鸭、雏鸡、雏鹅）及细胞的致病性。【结果】NDRV分离株经尿囊腔接种能100％致死12日龄番鸭胚和9日龄鸡胚。2Et龄雏番鸭、雏半番鸭经腿肌、口鼻、爪垫等途径人工感染NDRV分离株后，出现了与自然病例相同的病症，NDRV分离株对雏番鸭和雏半番鸭的致死率分别为20％～53％和13％～33％，同时能从病死鸭肝脾中回收到该病毒，耐过鸭大多成为僵鸭；15日龄雏鸡和2日龄雏鹅人工感染NDRV分离株后观察20d，均未表现出NDRV致病的临床症状。NDRV分离株具有较广的细胞亲嗜性，能在MDEF、CEF、AD293、Marc145、Vero、ST、MDCK等细胞中增殖并产生细胞病变，病变细胞呈现巨融合状；但NDRV分离株在PK细胞中盲传3代均未出现病变。【结论】NDRV在致病特性方面明显不同于禽呼肠孤病毒和番鸭呼肠孤病毒。 展开更多
关键词 新型鸭呼肠孤病毒 致病性 禽胚 禽类 细胞病变
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蛋内注射T3对鸭胚骨骼肌发育和MSTN mRNA表达的影响 被引量：1
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作者 姬改革 胡艳 +3 位作者 陶志云 刘宏祥 朱春红 李慧芳 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第1期164-169,共6页
为探讨生长因子三碘甲状腺原氨酸(Triiodothyronine,T3)对鸭胚骨骼肌生长发育和肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)mRNA表达的影响,在入孵前的鸭种蛋蛋清内分别注射100μl的生理盐水溶液(对照组)和含0.25μg T3的生理盐水溶液(注射组),检... 为探讨生长因子三碘甲状腺原氨酸(Triiodothyronine,T3)对鸭胚骨骼肌生长发育和肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)mRNA表达的影响,在入孵前的鸭种蛋蛋清内分别注射100μl的生理盐水溶液(对照组)和含0.25μg T3的生理盐水溶液(注射组),检测13、17、21、25、27胚龄鸭胸肌和腿肌发育及骨骼肌MSTN mRNA的表达情况。结果显示,T3处理极显著提高27胚龄鸭胚的胸肌质量,但对腿肌质量影响不显著;21胚龄注射组胸肌MSTN mRNA表达显著高于对照组,27胚龄则显著低于对照组;注射组腿肌MSTN mRNA表达仅在25胚龄显著增加。相关性分析结果显示,两组骨骼肌质量与MSTN mRNA表达呈不同程度的线性相关。表明蛋内注射T3能增加鸭胚胸肌质量,并改变MSTN mRNA表达量,MSTN mRNA的差异表达可能在鸭胚胸肌发育过程中具有重要的作用。 展开更多
关键词 蛋内注射 T3 鸭胚 骨骼肌 MSTN
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