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猪繁殖与呼吸综合征病毒1型和2型毒株ORF6双重qPCR检测方法的构建
1
作者
闫才杰
王聪
+12 位作者
刘纪玉
段连茂
朱光山
孙少辉
王紫荷
万进
马妮妮
戴银娣
胡娟
王天硕
韩峰
罗刚
张振东
《中国猪业》
2025年第3期80-88,共9页
为了实现同时快速检测与鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒1型和2型,本研究以PRRSV 1与PRRSV2常见参考毒株的ORF6基因序列为靶序列,分别设计1对特异性引物,以及1条TaqMan MGB探针。通过对各反应条件进行优化,并开展特异性、重复性以及敏感性试...
为了实现同时快速检测与鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒1型和2型,本研究以PRRSV 1与PRRSV2常见参考毒株的ORF6基因序列为靶序列,分别设计1对特异性引物,以及1条TaqMan MGB探针。通过对各反应条件进行优化,并开展特异性、重复性以及敏感性试验,建立了快速鉴别检测PRRSV 1和PRRSV 2的双重qPCR方法。结果显示,PRRSV 1阳性质粒标准品的最低检出限为10 copies/μL,PRRSV 2阳性质粒标准品的最低检出限为10~2 copies/μL,敏感性较高;该方法组内和组间重复性试验的变异系数(CV)均在1.4%以下,PRRSV 1和PRRSV 2的R2分别为0.936和0.985,重复性较好;该方法能够特异性扩增PRRSV 1和PRRSV 2临床阳性样本,与猪伪狂犬病毒(PRV)等8种常见猪传染性病原以及阴性对照无交叉反应,特异性显著。综上所述,本研究建立的PRRSV 1与PRRSV 2双重qPCR方法可同时对2种病原进行鉴别检测,为猪场PRRSV的快速检测及其分子流行病学调查提供了技术支撑。
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关键词
猪场
疾病
猪繁殖与呼吸综合征
PRRSV
双重
taqman
qpcr
混合感染
检测
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职称材料
猪圆环病毒2型和3型检测方法建立及初步应用
被引量：
4
2
作者
李桐
赵润泽
+5 位作者
李博天
李春琪
王妍
郭利伟
杨小林
刘国平
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2024年第2期151-159,共9页
为快速检测并鉴别猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)病毒。本文研究参考GenBank中PCV2和PCV3高度保守片段分别设计了探针引物,成功建立了一种双重TaqMan荧光定量检测方法。结果显示:该方法特异性好,可鉴别PCV2、PCV3与其他猪病...
为快速检测并鉴别猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)病毒。本文研究参考GenBank中PCV2和PCV3高度保守片段分别设计了探针引物,成功建立了一种双重TaqMan荧光定量检测方法。结果显示:该方法特异性好,可鉴别PCV2、PCV3与其他猪病病毒;PCV2最低检测下限为1.00×10^(1)copies/μL,PCV3最低检测下限为1.00×10^(0)copies/μL;重复性高,批内、批间的变异系数分别为0.01%~0.02%和0.02%~0.05%;本研究采用建立的方法与商品试剂盒同步检测猪只样品440份,PCV2样品符合率为97.47%,PCV3样品符合率为96.85%;测序结果显示,PCV2均为2d亚型,PCV3均为3c亚型。结果表明,建立的双重TaqMan荧光定量检测方法具有良好的特异性、敏感性且快速、准确,节约成本,可为PCV2和PCV3的监测与防控提供技术支撑。
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关键词
PCV2
PCV3
双重
taqman
qpcr
方法建立
混合感染
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职称材料
题名
猪繁殖与呼吸综合征病毒1型和2型毒株ORF6双重qPCR检测方法的构建
1
作者
闫才杰
王聪
刘纪玉
段连茂
朱光山
孙少辉
王紫荷
万进
马妮妮
戴银娣
胡娟
王天硕
韩峰
罗刚
张振东
机构
江苏科技大学生物技术学院
中牧实业股份有限公司
河北农业大学动物医学院
瑞东农牧(山东)有限责任公司
中牧南京动物药业有限公司
扬州大学兽医学院
出处
《中国猪业》
2025年第3期80-88,共9页
基金
江苏省自然科学基金青年基金项目(BK20201005)。
文摘
为了实现同时快速检测与鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒1型和2型,本研究以PRRSV 1与PRRSV2常见参考毒株的ORF6基因序列为靶序列,分别设计1对特异性引物,以及1条TaqMan MGB探针。通过对各反应条件进行优化,并开展特异性、重复性以及敏感性试验,建立了快速鉴别检测PRRSV 1和PRRSV 2的双重qPCR方法。结果显示,PRRSV 1阳性质粒标准品的最低检出限为10 copies/μL,PRRSV 2阳性质粒标准品的最低检出限为10~2 copies/μL,敏感性较高;该方法组内和组间重复性试验的变异系数(CV)均在1.4%以下,PRRSV 1和PRRSV 2的R2分别为0.936和0.985,重复性较好;该方法能够特异性扩增PRRSV 1和PRRSV 2临床阳性样本,与猪伪狂犬病毒(PRV)等8种常见猪传染性病原以及阴性对照无交叉反应,特异性显著。综上所述,本研究建立的PRRSV 1与PRRSV 2双重qPCR方法可同时对2种病原进行鉴别检测,为猪场PRRSV的快速检测及其分子流行病学调查提供了技术支撑。
关键词
猪场
疾病
猪繁殖与呼吸综合征
PRRSV
双重
taqman
qpcr
混合感染
检测
Keywords
pig farm
disease
PRRS
PRRSV
dual taqman qpcr
co-infection
test
分类号
S828 [农业科学—畜牧学]
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
猪圆环病毒2型和3型检测方法建立及初步应用
被引量：
4
2
作者
李桐
赵润泽
李博天
李春琪
王妍
郭利伟
杨小林
刘国平
机构
长江大学
出处
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2024年第2期151-159,共9页
基金
荆州市2022年度自然科学研究专项(202254-07CC)
石首市先行县“先进技术集成示范基地建设与定向攻关”揭榜项目(SS202311)
生猪健康养殖省部共建协同创新中心创新平台项目(2019H2209)。
文摘
为快速检测并鉴别猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)病毒。本文研究参考GenBank中PCV2和PCV3高度保守片段分别设计了探针引物,成功建立了一种双重TaqMan荧光定量检测方法。结果显示:该方法特异性好,可鉴别PCV2、PCV3与其他猪病病毒;PCV2最低检测下限为1.00×10^(1)copies/μL,PCV3最低检测下限为1.00×10^(0)copies/μL;重复性高,批内、批间的变异系数分别为0.01%~0.02%和0.02%~0.05%;本研究采用建立的方法与商品试剂盒同步检测猪只样品440份,PCV2样品符合率为97.47%,PCV3样品符合率为96.85%;测序结果显示,PCV2均为2d亚型,PCV3均为3c亚型。结果表明,建立的双重TaqMan荧光定量检测方法具有良好的特异性、敏感性且快速、准确,节约成本,可为PCV2和PCV3的监测与防控提供技术支撑。
关键词
PCV2
PCV3
双重
taqman
qpcr
方法建立
混合感染
Keywords
PCV2
PCV3
Establishment of
dual taqman qpcr
mixed infection
分类号
S852.651 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪繁殖与呼吸综合征病毒1型和2型毒株ORF6双重qPCR检测方法的构建
闫才杰
王聪
刘纪玉
段连茂
朱光山
孙少辉
王紫荷
万进
马妮妮
戴银娣
胡娟
王天硕
韩峰
罗刚
张振东
《中国猪业》
2025
0
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职称材料
2
猪圆环病毒2型和3型检测方法建立及初步应用
李桐
赵润泽
李博天
李春琪
王妍
郭利伟
杨小林
刘国平
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2024
4
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职称材料
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