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冻融后小鼠休眠胚胎超微结构的变化 被引量:5
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作者 顾美超 卢天罡 +5 位作者 刘云海 倪和民 张劭俣 翟椿东 邢书涵 郭勇 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2014年第3期53-56,61,I0009-I0010,共7页
目的从亚细胞超微结构的角度揭示其抗冻能力优于正常孵化胚胎的原因。方法利用透射电子显微镜观察小鼠休眠胚胎与正常孵化期胚胎在细胞连接和各细胞器形态与分布上的差异,以及冻融培养后的变化,并进行相关比较分析。结果通过亚细胞结构... 目的从亚细胞超微结构的角度揭示其抗冻能力优于正常孵化胚胎的原因。方法利用透射电子显微镜观察小鼠休眠胚胎与正常孵化期胚胎在细胞连接和各细胞器形态与分布上的差异,以及冻融培养后的变化,并进行相关比较分析。结果通过亚细胞结构对比分析发现:冷冻前小鼠休眠胚胎为紧缩状,处于能量代谢较低的"基态",通过冻融后培养,细胞器结构恢复与正常孵化胚胎冷冻前相似;而正常孵化胚胎经过冻融后,线粒体数量减少,细胞核松散,异染色质增多。结论小鼠休眠胚胎与正常孵化胚胎冻融后相比,其细胞状态更有利于物质储存及能量代谢,表明小鼠休眠胚胎从亚细胞超微结构的角度比其正常孵化胚胎更具抗冻性。 展开更多
关键词 小鼠 休眠胚胎 超微结构 冻融
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经程序化冷冻的小鼠休眠胚胎的基因表达谱差异分析 被引量:6
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作者 张劭俣 刘云海 +5 位作者 倪和民 王灏 顾美超 阎芃 杨菲 郭勇 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2012年第5期15-19,F0003,共6页
目的探讨小鼠休眠胚胎经程序化冷冻后基因表达谱的变化及相关信号通路的改变趋势。方法采用Affymetrix基因芯片检测小鼠正常休眠胚胎和经程序化冷冻后的休眠胚胎的差异表达基因;采用GO分析和Pathway分析等生物信息学方法进一步了解相关... 目的探讨小鼠休眠胚胎经程序化冷冻后基因表达谱的变化及相关信号通路的改变趋势。方法采用Affymetrix基因芯片检测小鼠正常休眠胚胎和经程序化冷冻后的休眠胚胎的差异表达基因;采用GO分析和Pathway分析等生物信息学方法进一步了解相关信号通路的改变。结果经程序化冷冻后的小鼠休眠胚胎与正常休眠胚胎相比,存在228个差异表达基因,其中50个基因表达上调,178个基因表达下调。Pathway分析显示黏着斑通路、细胞外基质受体相互作用通路、肌动蛋白细胞骨架调节通路、细胞凋亡通路、细胞通讯通路、泛素介导的蛋白质水解通路、甘油磷脂代谢通路、小细胞肺癌通路、TGF-β信号通路、MAPK信号通路等基因差异表达变化趋势明显。结论小鼠休眠胚胎经程序化冷冻后会导致一系列基因调控变化,并可能影响多条信号通路的协同变化。 展开更多
关键词 小鼠 休眠胚胎 程序化冷冻 基因表达谱差异分析
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程序化冷冻前后小鼠孵化囊胚和休眠胚胎的Hba-α蛋白分布和差异表达 被引量:3
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作者 刘迪 倪和民 +6 位作者 顾美超 李征 王力红 盛熙晖 齐晓龙 王相国 郭勇 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期579-584,共6页
目的利用程序化冷冻的方法,探究冷冻前、后小鼠孵化囊胚和休眠胚胎中Hba-α蛋白的分布和差异表达的变化,为今后开发和利用新型哺乳动物源抗冻蛋白提供理论依据。方法从妊娠d5小鼠体内获取孵化囊胚;从小鼠延迟着床模型获取休眠胚胎,利用C... 目的利用程序化冷冻的方法,探究冷冻前、后小鼠孵化囊胚和休眠胚胎中Hba-α蛋白的分布和差异表达的变化,为今后开发和利用新型哺乳动物源抗冻蛋白提供理论依据。方法从妊娠d5小鼠体内获取孵化囊胚;从小鼠延迟着床模型获取休眠胚胎,利用Confocal显微镜和Western Blot技术对程序化冷冻前、后的各组胚胎进行Hba-α蛋白的分布和表达检测。结果孵化囊胚和休眠胚胎在程序化冷冻前、后均有Hba-α蛋白的表达;孵化囊胚经程序化冷冻后Hba-α蛋白的表达与冷冻前相比差异无显著性(P>0.05);冷冻前休眠胚胎与程序化冷冻前后的孵化囊胚相比,Hba-α蛋白的表达量显著下调(P<0.05);冷冻后休眠胚胎Hba-α蛋白的表达量显著低于其他各组(P<0.05)。结论程序化冷冻处理对小鼠休眠胚胎Hba-α蛋白的表达影响明显大于孵化囊胚;Hba-α基因具有作为新型哺乳动物源抗冻蛋白的潜力。 展开更多
关键词 小鼠 孵化囊胚 休眠胚胎 程序化冷冻 Hba-α蛋白
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利用超数排卵方法高效获取小鼠休眠胚胎 被引量:3
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作者 芦天罡 倪和民 +4 位作者 曲杨燕 赵雁伟 张鸿波 邵丹华 刘云海 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2007年第3期212-214,I0005,共4页
目的为提高小鼠休眠胚胎的制备效率,尝试用超数排卵方法获取小鼠休眠胚胎。方法超排小鼠在注射孕马血清促性腺激素(PMSG)后,按照是否注射抗孕马血清(anti-PMSG serum或A-PMSG)以及注射的不同时间分为5组:在母鼠合笼前注射A-PMSG、在母... 目的为提高小鼠休眠胚胎的制备效率,尝试用超数排卵方法获取小鼠休眠胚胎。方法超排小鼠在注射孕马血清促性腺激素(PMSG)后,按照是否注射抗孕马血清(anti-PMSG serum或A-PMSG)以及注射的不同时间分为5组:在母鼠合笼前注射A-PMSG、在母鼠见栓后注射A-PMSG、在见栓第四天卵巢摘除手术后注射A-PMSG、不注射A-PMSG的超排组和不超排组。结果见栓后注射抗PMSG组的平均出胚数(9.4枚/只)最高,显著高于其他实验组。结论常规超排处理结合注射抗PMSG血清法能有效提高小鼠休眠胚胎的回收率。 展开更多
关键词 小鼠 休眠胚胎 超排卵
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程序化冷冻前后小鼠正常孵化囊胚和休眠胚胎中C3基因表达的研究 被引量:2
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作者 刘迪 倪和民 +5 位作者 顾美超 卢文瑾 盛熙晖 齐晓龙 王相国 郭勇 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第2期514-520,共7页
试验旨在研究程序化冷冻前后小鼠正常孵化囊胚和休眠胚胎中C3蛋白的分布及转录水平的差异表达情况,为阐明哺乳动物胚胎在抗冻过程中的相关调控机制提供理论依据。试验选用ICR系雌性小鼠,从妊娠第5天小鼠子宫回收正常孵化囊胚;构建延迟... 试验旨在研究程序化冷冻前后小鼠正常孵化囊胚和休眠胚胎中C3蛋白的分布及转录水平的差异表达情况,为阐明哺乳动物胚胎在抗冻过程中的相关调控机制提供理论依据。试验选用ICR系雌性小鼠,从妊娠第5天小鼠子宫回收正常孵化囊胚;构建延迟着床模型获取小鼠休眠胚胎,利用激光共聚焦和实时荧光定量PCR技术对各组胚胎进行细胞免疫荧光和C3mRNA相对表达量的检测。结果发现,程序化冷冻前后的正常孵化囊胚和休眠胚胎中C3在转录和翻译水平均有表达;正常孵化囊胚经冷冻处理后C3mRNA相对表达量显著上调(P<0.05);休眠胚胎冷冻后C3mRNA相对表达量与冷冻前相比显著下调(P<0.05);冷冻前休眠胚胎C3mRNA相对表达量显著高于冷冻前正常孵化囊胚(P<0.05);冷冻后休眠胚胎C3mRNA相对表达量显著低于冷冻后正常孵化囊胚(P<0.05)。结果表明,胚胎中C3基因在转录水平的下调表达对胚胎抗冻具有一定的积极作用,C3基因很可能参与了胚胎抗冻过程的相关调控。 展开更多
关键词 小鼠 囊胚 休眠胚胎 程序化冷冻 C3基因
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溶菌酶1在小鼠超数排卵前后孵化及休眠囊胚中差异表达的研究 被引量:1
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作者 卢文瑾 郭勇 +10 位作者 胡新宇 张寅屏 黄启震 刘迪 王力红 田凤 盛熙晖 齐晓龙 邢凯 倪和民 王相国 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期580-586,共7页
目的研究溶菌酶1(lysozyme 1,LYZ1)基因在超数排卵前后小鼠孵化囊胚和休眠胚胎中的分布以及表达,探究动物胚胎着床过程中新的调节机制。方法从妊娠5 d ICR小鼠体内获取的正常孵化囊胚和超排囊胚,利用小鼠延迟着床模型于妊娠第8天获取休... 目的研究溶菌酶1(lysozyme 1,LYZ1)基因在超数排卵前后小鼠孵化囊胚和休眠胚胎中的分布以及表达,探究动物胚胎着床过程中新的调节机制。方法从妊娠5 d ICR小鼠体内获取的正常孵化囊胚和超排囊胚,利用小鼠延迟着床模型于妊娠第8天获取休眠胚胎和超排休眠胚胎。利用免疫荧光和Western Blot方法检测LYZ1蛋白在四组胚胎中的分布和差异表达变化。结果 LYZ1在超数排卵前、后小鼠孵化囊胚和休眠胚胎中均有表达,且主要集中在内细胞团中,滋养层细胞和胞质中少见分布;与未进行超排的小鼠相比,LYZ1蛋白在超排后小鼠胚胎中表达量显著上调,与未营造休眠模型的小鼠相比,LYZ1蛋白在休眠模型小鼠胚胎中的表达量显著上调。结论 LYZ1蛋白在囊胚内细胞团中表达,可能参与调节胚胎内细胞团的发育;LYZ1蛋白在超排-休眠胚胎中的高表达,说明LYZ1蛋白在休眠和超数排卵的双重影响下,会因为抵御不利环境而上调。 展开更多
关键词 小鼠 溶菌酶1 孵化囊胚 休眠胚胎 超数排卵
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云南红豆杉新采收种子的形态与离体胚的萌发特性 被引量:7
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作者 卞方圆 苏建荣 +2 位作者 刘万德 李帅锋 郎学东 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第24期8211-8220,共10页
通过云南红豆杉新采收种子形态观察、透水性测定、种子大小以及所带胚乳多少对离体胚萌发率的影响等试验,探讨云南红豆杉种子的休眠与萌发机理。结果表明,云南红豆杉种子呈倒卵形和三棱形;胚酒瓶形,白色;胚乳淡黄色,油质。种子千粒重为7... 通过云南红豆杉新采收种子形态观察、透水性测定、种子大小以及所带胚乳多少对离体胚萌发率的影响等试验,探讨云南红豆杉种子的休眠与萌发机理。结果表明,云南红豆杉种子呈倒卵形和三棱形;胚酒瓶形,白色;胚乳淡黄色,油质。种子千粒重为72.934g;种皮、种仁和种胚分别占种子鲜重的50.56%、40.45%和8.99%;胚与种子的体积比(E∶S)为0.074。胚的体积为0.156—1.012mm^3,种子为51.658—109.649mm^3,两者呈显著正相关(P<0.05,r=0.810)。完整种子的吸水率明显低于破裂种皮、酸蚀40min和酸蚀20min的种子,但差异随着浸泡时间延长而缩小;种子含水量饱和时,完整种子、破皮种子与酸蚀种子的吸水率无显著差异(前者为23.7%,后两者约28.0%)。不同大小种子离体胚的萌发率差异显著(P<0.05),特大、大、中、小和特小种子的离体胚的萌发率为80%、77.8%、67.5%、62.0%和44.0%。胚乳抑制离体胚的萌发,不带胚乳离体胚的萌发率为41.3%,显著高于带胚乳的萌发率(P<0.05),带部分胚乳的胚为9.7%—13.3%,带全胚乳的胚为0。同时离体胚培养过程中所用种胚的新鲜程度也严重影响胚的萌发率。云南红豆杉种子休眠属于中度生理休眠类型,种子中的抑制物质含量随时间的动态变化和胚乳中抑制物质含量的多少对胚萌发率的影响是以后云南红豆杉休眠研究的重点。 展开更多
关键词 云南红豆杉 形态学 离体胚培养 种子萌发 休眠类型
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小鼠孵化囊胚及其休眠胚胎程序化冷冻-解冻前后Mgst1基因的差异表达
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作者 胡新宇 邢凯 +7 位作者 李征 赵志显 常雪蕊 齐晓龙 盛熙晖 王相国 倪和民 郭勇 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期175-179,共5页
目的通过对比小鼠孵化囊胚以及其休眠胚胎程序化冷冻并解冻处理前后Mgst1基因的相对表达情况,以及Mgst1蛋白的差异表达分布情况,分析Mgst1基因在小鼠胚胎程序化冷冻过程中发挥的作用,为胚胎抗冻机理研究提供新的理论基础。方法使用激光... 目的通过对比小鼠孵化囊胚以及其休眠胚胎程序化冷冻并解冻处理前后Mgst1基因的相对表达情况,以及Mgst1蛋白的差异表达分布情况,分析Mgst1基因在小鼠胚胎程序化冷冻过程中发挥的作用,为胚胎抗冻机理研究提供新的理论基础。方法使用激光共聚焦扫描显微镜采集Mgst1蛋白在胚胎中表达分布的免疫荧光图像;使用qRT-PCR技术鉴定Mgst1基因在胚胎中的相对表达量。结果通过免疫荧光图像发现,Mgst1蛋白在小鼠冷冻前后的孵化囊胚与休眠胚胎中均有表达;通过qRT-PCR发现,冷冻前的孵化囊胚与休眠胚胎的Mgst1基因相对表达无显著差异(P>0.05);冷冻后的孵化囊胚Mgst1基因相对表达量较冷冻之前显著上调(P<0.05);冷冻后的休眠胚胎Mgst1基因相对表达量较冷冻之前极显著上调(P<0.01);冷冻后的休眠胚胎Mgst1基因相对表达量较冷冻后的孵化囊胚显著上调(P<0.05)。结论Mgst1基因可能在小鼠胚胎抗冻机制中发挥着重要的正调控作用。 展开更多
关键词 孵化囊胚 休眠胚胎 程序化冷冻 Mgst1
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小鼠休眠胚胎与正常胚胎冻融后体内外发育潜力的比较
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作者 陈超磊 芦天罡 +6 位作者 倪和民 盛熙晖 王相国 齐晓龙 邢凯 刘云海 郭勇 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期167-172,共6页
目的检验小鼠休眠胚胎冻融后的质量及体内外发育潜力,为胚胎休眠技术的生产应用提供必要的参考。方法采用常规冷冻方法将正常孵化期胚胎和休眠胚胎进行冷冻,之后分别进行体外复苏培养实验和胚胎移植实验。随后利用双重荧光染色的方法分... 目的检验小鼠休眠胚胎冻融后的质量及体内外发育潜力,为胚胎休眠技术的生产应用提供必要的参考。方法采用常规冷冻方法将正常孵化期胚胎和休眠胚胎进行冷冻,之后分别进行体外复苏培养实验和胚胎移植实验。随后利用双重荧光染色的方法分别对冻融前后的小鼠休眠胚胎与正常孵化期胚胎进行细胞计数,观察两种胚胎冻融前后的质量变化。结果休眠胚胎的冷冻解冻回收率、发育率均极显著高于孵化期胚胎(72.1%vs 50.2%,P<0.01;94.2%vs 73.9%,P<0.01)。休眠胚胎的移植妊娠率显著高于孵化期胚胎(40.8%vs 30.1%,P<0.05)。休眠胚胎的内细胞团细胞数显著高于孵化期胚胎(27.83 vs 19.53,P<0.05),滋养层细胞数差异不显著。冻融培养后休眠胚胎的内细胞团数,滋养层细胞数均显著高于孵化期胚胎(25.18 vs 14.68,P<0.05;114.09 vs 73.88,P<0.05)。结论小鼠休眠胚胎冻融后胚胎质量及体内外发育潜力均优于小鼠正常孵化期胚胎。 展开更多
关键词 休眠胚胎 胚胎冷冻 胚胎移植 小鼠
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以卤虫为模式的干细胞静息研究
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作者 王潇漫 刘琨莹 李安琪 《生物学教学》 2025年第9期8-11,共4页
干细胞通过静息维持自我更新和多能性,在组织再生和肿瘤干细胞抵抗放化疗方面发挥重要作用。为了适应干旱和高盐的环境,卤虫以产下静息态休眠胚胎的方式确保种群的延续。干细胞静息与卤虫胚胎休眠均是生物在极端环境下的生存策略,本文... 干细胞通过静息维持自我更新和多能性,在组织再生和肿瘤干细胞抵抗放化疗方面发挥重要作用。为了适应干旱和高盐的环境,卤虫以产下静息态休眠胚胎的方式确保种群的延续。干细胞静息与卤虫胚胎休眠均是生物在极端环境下的生存策略,本文从干细胞静息研究的价值和以卤虫为模式生物开展的干细胞静息研究两个方面进行综述,为中学生物学细胞增殖相关内容的教学提供参考。 展开更多
关键词 卤虫 干细胞静息 胚胎休眠 分子机制
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