应用缺口末端标记法(TUNEL)分析犬瘟热病毒(CDV)诱导的细胞凋亡 被引量：3

1

作者 郭爱珍 陆承平 《南京农业大学学报》 CSCD 北大核心 2000年第1期71-73,共3页

利用犬瘟热病毒 (caninedistempervirus,CDV)弱毒标准株OP CDV感染敏感细胞系非洲绿猴肾细胞 (Vero) ,应用缺口末端标记法 (TdT mediateddUTPnickendlabeling ,TUNEL)分析感染细胞的凋亡。结果在感染后 48h的Vero细胞中检出了凋亡阳性细... 利用犬瘟热病毒 (caninedistempervirus,CDV)弱毒标准株OP CDV感染敏感细胞系非洲绿猴肾细胞 (Vero) ,应用缺口末端标记法 (TdT mediateddUTPnickendlabeling ,TUNEL)分析感染细胞的凋亡。结果在感染后 48h的Vero细胞中检出了凋亡阳性细胞 ,而对照细胞内未检测到凋亡细胞。感染后 2 4h的细胞尚未出现细胞病变 ,这一时期的细胞内也未检测到凋亡细胞。表明CDV能诱导细胞调亡 ,且凋亡细胞的检出时间与细胞病变的出现时间呈正向相关。 展开更多

关键词 犬瘟热病毒 细胞凋亡 缺口末端标记法 细胞病变

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TUNEL法原位检测心肌细胞凋亡的改进 被引量：18

2

作者 董小莉 谭宁 +2 位作者 符永恒 邓宇珺 孙凯亮 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期1038-1040,共3页

目的:脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)是检测细胞凋亡的常用方法,但以往仍有TUNEL假阳性率高的报道。本实验目的在于探讨应用TUNEL检测心肌细胞凋亡时增强其特异性的方法。方法:缺血再灌注心肌组织的石蜡切片(2μm... 目的:脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)是检测细胞凋亡的常用方法,但以往仍有TUNEL假阳性率高的报道。本实验目的在于探讨应用TUNEL检测心肌细胞凋亡时增强其特异性的方法。方法:缺血再灌注心肌组织的石蜡切片(2μm)和冰冻切片(3μm)进行TUNEL染色。分为石蜡切片HE染色组,石蜡切片常规TUNEL组,冰冻切片改良TUNEL组。石蜡切片常规TUNEL组完全按照试剂盒说明书进行,光学显微镜下观察;冰冻切片改良TUNEL组使用荧光素(FITC)标记的dUTP及4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DA-PI)双重荧光染色,在共聚焦显微镜下观察。结果:TUNEL改良法凋亡背景清晰,阳性细胞主要分布在缺血再灌注损伤区域,其凋亡检出率与石蜡切片HE染色相比无显著差异(P>0.05);常规TUNEL组凋亡背景清晰度较差,非缺血再灌注损伤区域亦有大量阳性细胞出现,其凋亡率明显高于石蜡切片HE染色(P<0.01)。结论:冰冻切片改良TUNEL法可能是更适宜研究SD大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的方法。 展开更多

关键词 心肌细胞凋亡 冰冻切片 脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法

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脑膜瘤细胞凋亡的意义及其检测方法的比较 被引量：2

3

作者 赵旭 滕良珠 +3 位作者 张丙杰 辛涛 马春燕 刘盈 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期200-203,共4页

目的　探讨脑膜瘤细胞凋亡的意义,分析TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)、流式细胞术(FCM)和透射电镜3种检测方法的优缺点。方法　应用TUNEL、FCM检测47例脑膜瘤的凋亡指数(AI),同时用透射电镜观察其中15例凋亡细胞的超微结构改变... 目的　探讨脑膜瘤细胞凋亡的意义,分析TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)、流式细胞术(FCM)和透射电镜3种检测方法的优缺点。方法　应用TUNEL、FCM检测47例脑膜瘤的凋亡指数(AI),同时用透射电镜观察其中15例凋亡细胞的超微结构改变。结果　经TUNEL和FCM检测,不典型及恶性脑膜瘤的AI高于良性脑膜瘤,复发组AI高于非复发组。经FCM检测的凋亡指数高于TUNEL法检测结果,二者呈正相关。透射电镜也证实了凋亡细胞的超微结构改变。结论　细胞凋亡是脑膜瘤的一种重要生物学特征,它与肿瘤的不典型或恶性改变以及预后有关,检测AI有助于判断脑膜瘤的复发倾向。TUNEL和FCM用于凋亡的定量检测,FCM的敏感性高于TUNEL,而透射电镜是凋亡定性的可靠方法。 展开更多

关键词 脑膜瘤 细胞凋亡 复发 TdT介导的dutp缺口末端标记 流式细胞术 透射电镜

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促炎细胞因子对成人胰岛细胞的损伤作用

4

作者 黄云鸿 董维平 +2 位作者 王煜非 吴艺捷 彭永德 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期810-811,共2页

关键词 促炎细胞因子 胰岛细胞 损伤作用 成人 dutp缺口末端标记法 IL-1Β IFN-Γ TUNEL法

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冰冻和石蜡切片对TUNEL染色结果的影响 被引量：4

5

作者 陈志胜 计慧琴 王丙云 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期1801-1801,1810,共2页

目的与方法:为比较不同组织切片方法对细胞凋亡TUNEL反应结果的影响,用雏鸭胸腺分别制成冰冻(8μm)和石蜡(6μm)切片,然后进行TUNEL染色。结果:冰冻切片组细胞凋亡阳性率高,背景清晰,特异性好。石蜡切片组则阳性率相对较低,反差较小,容... 目的与方法:为比较不同组织切片方法对细胞凋亡TUNEL反应结果的影响,用雏鸭胸腺分别制成冰冻(8μm)和石蜡(6μm)切片,然后进行TUNEL染色。结果:冰冻切片组细胞凋亡阳性率高,背景清晰,特异性好。石蜡切片组则阳性率相对较低,反差较小,容易出现假阳性。结论:不同制片法对TUNEL结果有影响,即冰冻切片可能较石蜡切片具有更高的反应敏感性。 展开更多

关键词 冰冻切片 石蜡包埋 原位缺口末端标记法

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白介素12诱导T细胞凋亡的作用 被引量：1

6

作者 郭秀枝 范洪涛 +3 位作者 谭广销 周涛 陈鹏 刘元生 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 2001年第6期22-26,共5页

目的 :探讨白介素 12 (IL - 12 )对T细胞凋亡的作用。方法 :用dUTP缺口末端标记(TUNEL)和AnnexinV的方法测定IL - 12诱导后T细胞凋亡率。结果 :IL - 12诱导人的白血病T细胞株TIB - 15 2和人的淋巴瘤T细胞株HTB - 176的凋亡 ,以 5 0ng/m... 目的 :探讨白介素 12 (IL - 12 )对T细胞凋亡的作用。方法 :用dUTP缺口末端标记(TUNEL)和AnnexinV的方法测定IL - 12诱导后T细胞凋亡率。结果 :IL - 12诱导人的白血病T细胞株TIB - 15 2和人的淋巴瘤T细胞株HTB - 176的凋亡 ,以 5 0ng/mL的质量浓度作用效果最佳 ,作用时间在 3和 6d内达到最高峰。结论 :IL - 12能诱导T细胞的凋亡 ,其诱导作用从细胞早期质膜的改变开始 ,并与IL - 12的浓度和T细胞成熟状态及作用时间有关。 展开更多

关键词 白介素12 T细胞凋亡 dutp缺口末端标记 临床治疗 白血病 淋巴瘤

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骨髓间充质干细胞移植可促进移植胰岛周围新生血管形成 被引量：3

7

作者 李睿 董红丽 +1 位作者 刘汝斌 刘宝林 《器官移植》 CAS CSCD 2017年第2期149-153,160,共6页

目的探讨胰岛移植联合骨髓间充质干细胞(MSC)移植能否促进移植胰岛周围新生血管形成。方法以非肥胖糖尿病(NOD)小鼠作为受体,将NOD小鼠随机分为4组,联合移植组(6只)、单独胰岛移植组(6只)、单独MSC移植组(6只)、假性移植组(3只)。观察各... 目的探讨胰岛移植联合骨髓间充质干细胞(MSC)移植能否促进移植胰岛周围新生血管形成。方法以非肥胖糖尿病(NOD)小鼠作为受体,将NOD小鼠随机分为4组,联合移植组(6只)、单独胰岛移植组(6只)、单独MSC移植组(6只)、假性移植组(3只)。观察各组NOD小鼠移植后血糖和存活率的变化;采用5-乙炔基-2’脱氧尿苷(Ed U)及d UTP缺口末端标记(TUNEL)方法,在胰岛移植后1、2、4周检测单独胰岛移植组和联合移植组移植胰岛的增殖与凋亡情况;采用光学显微镜(光镜)直接观察、组织化学及免疫组织化学的方法观察并定量分析,移植术后2、4、8周单独胰岛移植组和联合移植组移植胰岛的周围新生血管密度。结果 MSC联合移植与胰岛单独移植均能明显改善移植后小鼠的血糖水平,提高NOD小鼠的存活率。MSC联合移植可促进胰岛细胞再生,减少细胞凋亡。联合移植组移植胰岛周围血管密度明显大于单独胰岛移植组。结论 MSC可以促进移植胰岛周围新生血管生成,增加移植胰岛的血供,保护移植胰岛的功能与活性。 展开更多

关键词 1型糖尿病 胰岛移植 骨髓间充质细胞 5-乙炔基-2’脱氧尿苷(EdU) dutp缺口末端标记(TUNEL) 非肥胖糖尿病(NOD)小鼠 增殖 凋亡

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^(125)I放射性粒子组织间植入治疗人胰腺癌裸鼠移植瘤的有效性研究 被引量：2

8

作者 宋琦 刘玉 +3 位作者 王忠敏 黄蔚 陆健 陈克敏 《介入放射学杂志》 CSCD 北大核心 2010年第10期795-799,共5页

目的探讨125I放射性粒子组织间植入治疗人胰腺癌裸鼠移植瘤的疗效及其作用机制。方法人胰腺癌SW1990细胞株接种于BABL/c裸鼠右下肢旁腹股沟区偏背侧皮下,成瘤后取瘤块接种,6周后成瘤8～10mm。共16只成瘤大小合适的裸鼠用于实验,分别植入... 目的探讨125I放射性粒子组织间植入治疗人胰腺癌裸鼠移植瘤的疗效及其作用机制。方法人胰腺癌SW1990细胞株接种于BABL/c裸鼠右下肢旁腹股沟区偏背侧皮下,成瘤后取瘤块接种,6周后成瘤8～10mm。共16只成瘤大小合适的裸鼠用于实验,分别植入125I粒子(8只)和空载粒子(8只)。粒子植入后,每4天测量肿瘤的长径和短径并称裸鼠体重,裸鼠处死后称量瘤体重。瘤体标本行组织病理学检查、末端脱氧核苷酸转移酶-生物素dUTP切口末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞及免疫组化染色检测增殖细胞核抗原。结果 125I粒子治疗组肿瘤体积增长缓慢,而对照组肿瘤体积增长迅速。实验组和对照组瘤体重分别约(2.68±0.70)g和(4.68±1.45)g,两者的差异有统计学意义(P=0.021);抑瘤率约42.66%。粒子植入前、后实验组和对照组间裸鼠体重对比差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组肿瘤细胞坏死明显,而对照组肿瘤细胞无明显或仅有少许坏死。TUENL法检查发现实验组和对照组的凋亡指数分别为(23.2±1.9)%和(8.1±1.5)%,两者的差异有统计学意义(P<0.01)。免疫组化染色发现:实验组及对照组增殖细胞核抗原(PCNA)阳性染色指数分别为(49.8±1.8)%和(82.2±2.4)%,两者的差异有统计学意义(P<0.01)。裸鼠心、肝、肺、肾及脾脏等组织无明显放射性炎症表现。结论 125I粒子组织间植入治疗人胰腺癌裸鼠移植瘤是有效的,其作用机制包括:直接杀伤肿瘤细胞、诱导肿瘤细胞凋亡及降低细胞增殖,并且125I粒子植入瘤体内对周围脏器是安全的。 展开更多

关键词 125I粒子 短距离放疗 胰腺癌 末端脱氧核糖核苷酸转移酶-生物素dutp切口末端标记法 免疫组织化学 磁共振

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一氧化氮诱导棘阿米巴凋亡的初探 被引量：1

9

作者 章平 朱溧 陈琳 《华东师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期82-87,共6页

本实验旨在通过形态学和生物化学方法探讨NO对棘阿米巴凋亡的影响。将棘阿米巴在不同浓度的SNP(NO供体)处理条件下孵育一定时间,选用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的d-UTP缺口末端标记法(TUNEL)、透射电镜观察可发现SNP(外源性NO供体)... 本实验旨在通过形态学和生物化学方法探讨NO对棘阿米巴凋亡的影响。将棘阿米巴在不同浓度的SNP(NO供体)处理条件下孵育一定时间,选用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的d-UTP缺口末端标记法(TUNEL)、透射电镜观察可发现SNP(外源性NO供体)可诱导棘阿米巴滋养体随SNP剂量和时间的增长,逐渐产生凋亡的趋势;透射电镜下可见实验组(终浓度3mmol/L的SNP与棘阿米巴孵育9h和12h)棘阿米巴滋养体有凋亡的超微结构特征。结果表明NO可对棘阿米巴凋亡产生影响并发挥其抗棘阿米巴感染的作用。 展开更多

关键词 一氧化氮 棘阿米巴 原虫凋亡 缺口末端标记法 寄生虫 超微结构

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病毒性心脏病小鼠心肌细胞凋亡的动态变化 被引量：6

10

作者 张召才 李双杰 +4 位作者 杨英珍 陈瑞珍 程蕾蕾 葛均波 陈灏珠 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期388-390,F002,共4页

目的探讨急、慢性病毒性心肌炎和感染性扩张型心肌病小鼠心肌细胞凋亡的动态变化。方法以柯萨奇病毒B3感染Balb/c小鼠建立急、慢性心肌炎和扩张型心肌病的系列动物模型,同期设正常对照;经组织病理学方法和超声心动图验证模型后,以缺口... 目的探讨急、慢性病毒性心肌炎和感染性扩张型心肌病小鼠心肌细胞凋亡的动态变化。方法以柯萨奇病毒B3感染Balb/c小鼠建立急、慢性心肌炎和扩张型心肌病的系列动物模型,同期设正常对照;经组织病理学方法和超声心动图验证模型后,以缺口末端标记法(TUNEL)检测各组小鼠心肌细胞凋亡。结果各期感染小鼠心肌细胞凋亡率较同期对照组明显增高,心肌细胞凋亡率依次分别为(8.2±1.4)%vs(1.3±0.5)%,(15.3±1.1)%vs(2.7±0.7)%,(13.9±2.1)%vs(3.1±0.6)%,(均P<0.01)。结论心肌细胞凋亡贯穿病毒性心脏病全程,可能对其病程和预后产生深远影响。 展开更多

关键词 心肌细胞凋亡 病毒性心脏病 动态变化 柯萨奇病毒B3感染 慢性病毒性心肌炎 Balb/c小鼠 扩张型心肌病 组织病理学方法 缺口末端标记法 细胞凋亡率 慢性心肌炎 超声心动图 动物模型 正常对照 小鼠心肌 感染性 对照组 同期

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大鼠肺移植供肺保存过程中细胞死亡类型的动态变化

11

作者 丁建勇 葛棣 +2 位作者 谭黎杰 郑如恒 王群 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期489-493,共5页

目的通过对供肺保存过程中细胞凋亡和细胞坏死的动态变化的研究,探讨建立一种可以准确评估供肺保存质量的实验模型。方法清洁级健康雄性Sprague-Dawley大鼠42只,体重250～300g,预先分为7组,每组6只。整体获取心肺,置于4℃的新鲜制备的... 目的通过对供肺保存过程中细胞凋亡和细胞坏死的动态变化的研究,探讨建立一种可以准确评估供肺保存质量的实验模型。方法清洁级健康雄性Sprague-Dawley大鼠42只,体重250～300g,预先分为7组,每组6只。整体获取心肺,置于4℃的新鲜制备的低钾右旋糖酐（LPD）溶液中保存。保存不同的时间（0、2、4、6、12、18、24h）后,通过主肺动脉向肺内灌注20mL的500mmol/L锥虫蓝、20mL生理盐水和10mL4%的多聚甲醛后固定,蜡块包埋后按4μm层厚切片。在光学显微镜下观察锥虫蓝染色情况;另一方面作TUNEL染色和Hoechst染色,在荧光显微镜下观察,严格按照盲法原则由两位研究者对死亡细胞进行分类计数。结果随着供肺低温保存时间的延长,细胞死亡数量上逐渐增加,而且细胞的死亡类型上发生动态变化。在低温保存的条件下,4h组才开始有少量的坏死细胞出现,随着保存时间的逐渐延长,细胞坏死也逐渐增加,在供肺保存18h以上组,坏死细胞显著增加;而细胞的凋亡开始于供肺保存2h组,在供肺保存12h组达到高峰,约占所有细胞的9%,在供肺保存18h组基本消失。结论通过对不同保存时间的供肺进行锥虫蓝、TUNEL、Hoechst三染色的方法,能很好的显示供肺保存后的细胞凋亡和坏死的情况。 展开更多

关键词 移植 供肺保存 凋亡 坏死 锥虫蓝 TdT介导的dutp缺口末端标记技术

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恶性黑素瘤FHIT基因蛋白的表达与肿瘤细胞增殖、凋亡关系的研究

12

作者 李慎秋 张春梅 熊芬 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期468-468,共1页

关键词 FHIT基因蛋白 细胞凋亡指数 肿瘤细胞增殖 恶性黑素瘤 脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法 增殖细胞核抗原 脆性组氨酸三联体 FHIT蛋白 免疫组化SP法

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