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CKAP2L在卵巢癌中的表达及临床意义
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作者 柴莹 倪妍 +2 位作者 赵媛 王晓 杨晓洁 《循证医学》 2024年第3期150-154,177,共6页
目的本研究主要分析细胞骨架相关蛋白2样蛋白(cytoskeleton associated protein 2 like protein,CKAP2L)在卵巢癌中的表达及临床意义。方法选取2018年2月至2020年5月在太原市中心医院行卵巢癌根治术的卵巢癌患者87例,收集其卵巢癌组织... 目的本研究主要分析细胞骨架相关蛋白2样蛋白(cytoskeleton associated protein 2 like protein,CKAP2L)在卵巢癌中的表达及临床意义。方法选取2018年2月至2020年5月在太原市中心医院行卵巢癌根治术的卵巢癌患者87例,收集其卵巢癌组织及距癌灶边缘>2 cm的癌旁组织。实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)法测定卵巢癌组织及癌旁组织中CKAP2L的mRNA表达,免疫组化法分析卵巢癌组织及癌旁组织中CKAP2L的蛋白表达。Kaplan-Meier法分析卵巢癌组织中CKAP2L表达与患者预后的关系。结果CKAP2L在卵巢癌组织中mRNA表达显著高于癌旁组织(P<0.05)。卵巢癌组织中CKAP2L的蛋白阳性表达率显著高于癌旁组织(P<0.05)。卵巢癌组织中CKAP2L mRNA表达与患者肿瘤分化程度、淋巴结转移、FIGO分期、浸润深度有关(P<0.05)。Kaplan-Meier分析结果表明,卵巢癌患者3年总生存率为80.46%;CKAP2L低表达患者3年总生存率为显著高于CKAP2L高表达患者(Log-rankχ^(2)=8.316,P=0.004)。患者3年无复发生存率为77.01%;CKAP2L低表达患者3年无复发生存率显著高于CKAP2L高表达患者(Log-rankχ^(2)=8.921,P=0.003)。结论CKAP2L在卵巢癌组织中高表达,与FIGO分期、淋巴结转移等有关,是卵巢癌患者死亡的影响因素。 展开更多
关键词 细胞骨架相关蛋白2样蛋白 卵巢癌 临床意义
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8-甲氧沙林对黑素细胞内游离钙浓度及细胞骨架蛋白形成的影响 被引量:2
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作者 张宪旗 郑敏 +1 位作者 牟宽厚 冯捷 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期348-351,共4页
目的:观察8-甲氧沙林对体外培养黑素细胞内游离钙浓度、细胞骨架蛋白形成的影响。方法:正常人黑素细胞取自包皮环切术切取的包皮,用激光共聚焦扫描显微镜检测细胞内游离钙浓度,用罗丹明结合毒伞素对细胞骨架蛋白进行特异性染色。结果:8... 目的:观察8-甲氧沙林对体外培养黑素细胞内游离钙浓度、细胞骨架蛋白形成的影响。方法:正常人黑素细胞取自包皮环切术切取的包皮,用激光共聚焦扫描显微镜检测细胞内游离钙浓度,用罗丹明结合毒伞素对细胞骨架蛋白进行特异性染色。结果:8-甲氧沙林可使细胞内游离钙离子浓度升高,促进黑素细胞骨架蛋白合成。结论:8-甲氧沙林可能通过诱导黑素细胞内钙离子浓度升高和细胞骨架actin蛋白生成,从而影响黑素细胞的迁移。 展开更多
关键词 黑素细胞/药物作用 甲氧西林/药理学 钙/代谢 细胞骨架 细胞支架蛋白质类/代谢 细胞 培养的
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p38丝裂原活化蛋白激酶通路在非对称性二甲基精氨酸诱导内皮细胞通透性增高中的作用 被引量:2
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作者 张东亮 王丽妍 +1 位作者 张育 刘文虎 《生物医学工程与临床》 CAS 2011年第5期479-482,F0003,共5页
目的探讨非对称性二甲基精氨酸(ADMA)对单层内皮细胞通透性的影响,以及氧化应激、p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路在此过程中的作用。方法利用Transwell小室建立单层内皮细胞屏障结构,设立实验组和对照组,实验组经浓度25、50、100、200... 目的探讨非对称性二甲基精氨酸(ADMA)对单层内皮细胞通透性的影响,以及氧化应激、p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路在此过程中的作用。方法利用Transwell小室建立单层内皮细胞屏障结构,设立实验组和对照组,实验组经浓度25、50、100、200μmol/L ADMA作用24 h和100μmol/L ADMA分别刺激细胞4、8、16、24 h,或分别经烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶抑制剂、p38 MAPK抑制剂预处理细胞后再加入ADMA刺激。随后用异硫氰酸荧光素(FITC)标记的右旋糖酐漏出法测定单层内皮细胞的通透系数Pa值,并用免疫荧光染色显示细胞骨架及细胞间连接的形态学改变。结果 ADMA呈剂量及时间依赖性的增加单层内皮细胞的通透性,同时促进内皮细胞中应力纤维的形成并破坏细胞间连接。NADPH氧化酶抑制剂和p38 MAPK抑制剂均可对抗ADMA的上述作用。结论 ADMA通过引起氧化应激,激活p38 MAPK通路,改变细胞骨架及细胞间连接的结构,使单层内皮细胞通透性增高。 展开更多
关键词 非对称性二甲基精氨酸 P38丝裂原活化蛋白激酶 氧化应激 细胞骨架
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骨形态发生蛋白7在高糖环境下对成骨细胞分化的影响 被引量:2
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作者 孙龙 侯玉东 +1 位作者 薛鹏飞 侯小青 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期973-977,共5页
目的:研究对于重组人骨形态发生蛋白7(bone morphogenetic protein7,BMP7)在持续稳定高糖环境下对成骨细胞生物学性能及成骨活性的影响。方法:细胞取小鼠颅顶前成骨细胞亚克隆14(MC3T3-E1Subclone 14,MC3T3),分为4组:正常生理糖浓度组(... 目的:研究对于重组人骨形态发生蛋白7(bone morphogenetic protein7,BMP7)在持续稳定高糖环境下对成骨细胞生物学性能及成骨活性的影响。方法:细胞取小鼠颅顶前成骨细胞亚克隆14(MC3T3-E1Subclone 14,MC3T3),分为4组:正常生理糖浓度组(葡萄糖浓度为5.5mmol/L)为对照组,生理糖浓度+BMP7组高糖组(葡萄糖浓度为5.5mmol/L,BMP7浓度为100μg/L)(葡萄糖浓度为25 mmol/L),高糖+BMP7组(葡萄糖浓度为25mmol/L,BMP7浓度为100μg/L)。甲基噻唑基四唑(MTT)法检测不同条件培养后1d、3d、5d、7d后的细胞增殖情况,成骨诱导检测细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性。罗丹明-鬼笔环肽染色后以激光共聚焦显微镜观察MC3T3细胞骨架于BMP7作用24h后的形态变化,荧光实时定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)检测BMP7作用48h后成骨基因特异性转录因子2(Runx2),骨钙素(osteocalcin,OCN)、碱性磷酸酶(ALP)的mRNA表达。结果:MTT实验显示25mmol/L葡萄糖可抑制MC3T3增殖(P<0.05),加入BMP7后可提高细胞增值率(P<0.05)。并可上调高糖导致的ALP活性下降。细胞骨架观察结果显示,对照组细胞骨架成束状铺开,交织成网,较为均匀。高糖组细胞微丝解聚成团状,模糊不清。RT-qPCR结果显示BMP7可促进MC3T3细胞的ALP、OCN及Runx2(P<0.05)的表达。结论:持续稳定高糖环境能够抑制成骨细胞的增殖及ALP活性,影响细胞骨架结构,抑制成骨基因表达,添加BMP7可以在不同程度上反转该趋势,但仍较正常水平低。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白7 成骨细胞高糖细胞骨架
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重组人细胞角蛋白9 cDNA的原核表达及纯化
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作者 王博 周艳 +5 位作者 侯卫坤 蔡永松 张英 王林玉 韩燕 孟列素 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期502-506,共5页
目的克隆人细胞角蛋白CK9的cDNA,通过原核表达系统表达融合蛋白并进行纯化和鉴定。方法从人角质形成细胞系(HaCaT)中提取RNA,以RT-PCR反转录cDNA,使用特异性引物PCR扩增出人CK9编码区全长并克隆到pET-28a载体上,再用IPTG诱导融合蛋白his... 目的克隆人细胞角蛋白CK9的cDNA,通过原核表达系统表达融合蛋白并进行纯化和鉴定。方法从人角质形成细胞系(HaCaT)中提取RNA,以RT-PCR反转录cDNA,使用特异性引物PCR扩增出人CK9编码区全长并克隆到pET-28a载体上,再用IPTG诱导融合蛋白his-CK9的表达。表达的融合蛋白通过Ni 2+亲和层析纯化后,进行SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果测序鉴定构建表达载体中CK9的cDNA序列正确;融合蛋白his-CK9可在大肠杆菌中诱导表达;纯化的融合蛋白his-CK9纯度较高;纯化的融合蛋白his-CK9可与商品化CK9抗体特异性结合。结论成功构建原核表达载体pET-28a-CK9,并成功诱导及纯化融合蛋白his-CK9。 展开更多
关键词 原核表达系统 细胞角蛋白9 融合蛋白 细胞骨架
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骨架蛋白降解对冰鲜草鱼质构的影响 被引量:5
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作者 贾胜男 杨方 +4 位作者 臧金红 夏文水 姜启兴 许艳顺 于沛沛 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第13期1-7,共7页
利用免疫组化技术检测草鱼背肌白肉中骨架蛋白在冰藏条件下的变化,同时通过超微结构、剪切力、滴水损失率分析草鱼背肌组织精微结构和质构特性的变化,以期阐明草鱼骨架蛋白降解与鱼肉质构劣化之间的关系,从而为调控冰鲜淡水鱼品质提供... 利用免疫组化技术检测草鱼背肌白肉中骨架蛋白在冰藏条件下的变化,同时通过超微结构、剪切力、滴水损失率分析草鱼背肌组织精微结构和质构特性的变化,以期阐明草鱼骨架蛋白降解与鱼肉质构劣化之间的关系,从而为调控冰鲜淡水鱼品质提供理论依据。结果显示:冰藏21 d内伴肌球蛋白、伴肌动蛋白、抗肌营养不良蛋白分别降解了76.10%、78.21%、71.14%;冰藏14 d后草鱼肌纤维明暗带模糊,Z带、M带被破坏,肌纤维结构出现严重断裂松散现象。冰藏10 d内剪切力由81 N快速下降至32 N,滴水损失率由1.6%增加至7.8%;将骨架蛋白的灰度与剪切力及滴水损失率进行相关性分析发现,剪切力与伴肌球蛋白、抗肌营养不良蛋白的灰度呈极显著正相关(P<0.01);滴水损失率与伴肌球蛋白、抗肌营养不良蛋白的灰度值呈极显著负相关(P<0.01)。综上所述,骨架蛋白降解可能是草鱼在冰藏期间肌纤维结构破坏以及质构劣化的重要原因。 展开更多
关键词 草鱼 骨架蛋白 免疫组化技术 肌纤维结构 质构
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骨架蛋白对肉持水性的影响及机制研究进展 被引量:2
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作者 孙良格 张新笑 +4 位作者 卞欢 邹烨 徐为民 王道营 李鹏鹏 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2021年第18期413-420,共8页
持水性是肉的重要品质指标,直接影响肉的颜色、多汁性和嫩度。汁液流失常被用来衡量肉的持水性,宰后过多的汁液流失会给肉类行业造成一定程度的经济损失,因此,研究肉的持水性是食品行业的一项重要内容。骨架蛋白作为肌肉细胞的主要成分... 持水性是肉的重要品质指标,直接影响肉的颜色、多汁性和嫩度。汁液流失常被用来衡量肉的持水性,宰后过多的汁液流失会给肉类行业造成一定程度的经济损失,因此,研究肉的持水性是食品行业的一项重要内容。骨架蛋白作为肌肉细胞的主要成分,对维持细胞结构和功能起着重要作用,其在宰后肌肉成熟过程中发生的变化对肉的持水性有一定影响。本文综述了主要骨架蛋白的生理生化性质以及骨架蛋白对肉品持水性的影响,探讨了影响骨架蛋白降解的重要因素和作用机制,以期为肉品持水性控制提供理论参考。 展开更多
关键词 骨架蛋白 持水性 蛋白降解 作用机理
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滩羊肉宰后成熟期间ATPase活力变化对微观结构及保水性的影响 被引量:6
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作者 姬琛 罗辉 +1 位作者 刘吉娟 罗瑞明 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第21期16-22,共7页
为研究宰后成熟期间ATPase活力变化对滩羊肉微观结构以及保水性的影响,以6月龄滩羊背最长肌(Longissimus dorsi)为研究对象,分析其4℃成熟0、1、2、4、8 d时Na^(+)-K^(+)-ATPase、Ca^(2+)-ATPase、Caspase-3活力以及肌肉微观结构、pH值... 为研究宰后成熟期间ATPase活力变化对滩羊肉微观结构以及保水性的影响,以6月龄滩羊背最长肌(Longissimus dorsi)为研究对象,分析其4℃成熟0、1、2、4、8 d时Na^(+)-K^(+)-ATPase、Ca^(2+)-ATPase、Caspase-3活力以及肌肉微观结构、pH值与滴水损失率的变化情况。结果表明:随成熟时间延长,Na^(+)-K^(+)-ATPase与Ca^(2+)-ATPase活力先升高后降低,成熟1 d时达到最大值;Caspase-3活力先升高后降低,成熟2 d时达到最大值;滴水损失率先升高后降低,pH值先降低后有所回升;总蛋白、低盐溶性蛋白及高盐溶性蛋白质量浓度均逐渐减少,水溶性蛋白质量浓度成熟2 d后显著降低(P<0.05);成熟至8 d时,肌原纤维断裂,肌纤维之间、肌束之间、肌纤维及肌膜之间形成间隙,Z线断裂,H带消失;相关性分析结果表明Na^(+)-K^(+)-ATPase活力与各指标均呈极显著相关性(P<0.01),Ca^(2+)-ATPase活力与pH值、Na^(+)-K^(+)-ATPase及Caspase-3活力均呈极显著相关性(P<0.01)。结论:滩羊肉宰后成熟过程中Na^(+)-K^(+)-ATPase与Ca^(2+)-ATPase活力变化可能促使下游Caspase-3激活,Caspase-3水解结构蛋白可能导致肌肉组织在不同部位形成间隙,在重力作用下肌肉中的水分流入间隙中,引起滩羊肉滴水损失升高,保水性变差。 展开更多
关键词 滩羊 宰后成熟 细胞骨架蛋白降解 微观结构 羊肉品质
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血清细胞骨架相关蛋白4与慢性肾脏病患者血管钙化的关系 被引量:2
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作者 卢浩 章磊 +3 位作者 张小燕 徐永伟 周飞雪 刘小菊 《中国医药导报》 CAS 2022年第12期75-78,共4页
目的探讨血清细胞骨架相关蛋白4(CKAP4)与慢性肾脏病(CKD)患者血管钙化的关系。方法选取浙江省丽水市中医院2019年1月至2021年4月收治的153例CKD患者,根据是否存在血管钙化将其分为钙化组(52例)和无钙化组(101例)。比较两组临床资料及... 目的探讨血清细胞骨架相关蛋白4(CKAP4)与慢性肾脏病(CKD)患者血管钙化的关系。方法选取浙江省丽水市中医院2019年1月至2021年4月收治的153例CKD患者,根据是否存在血管钙化将其分为钙化组(52例)和无钙化组(101例)。比较两组临床资料及血钙、血磷、甲状旁腺激素(PTH)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及血清CKAP4水平。采用logistic回归模型分析血清CKAP4水平与CKD患者血管钙化发生的关系。采用受试者操作特征(ROC)曲线分析血清CKAP4水平对CKD患者血管钙化的预测价值。结果钙化组病程长于无钙化组,CKD分期高于无钙化组,血清CKAP4水平低于无钙化组,血钙、血磷、PTH、MMP-2水平高于无钙化组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素结果显示,CDK分期、血钙、血磷、PTH、MMP-2、CKAP4均为CKD患者血管钙化发生的独立影响因素(P<0.05)。血清CKAP4水平预测CKD患者血管钙化发生的ROC曲线下面积为0.823(P<0.05),灵敏度为84.62%,特异度为72.28%,约登指数为0.569,截断值为173.50 pg/ml。结论CKD患者血清CKAP4水平降低,为血管钙化发生独立影响因素,可作为CKD血管钙化预测指标。 展开更多
关键词 慢性肾脏病 血管钙化 细胞骨架相关蛋白4
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A549细胞来源外泌体对肺上皮BEAS-2B细胞紧密连接蛋白及骨架重塑的影响 被引量:2
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作者 邓仕华 吴东明 +4 位作者 韩蓉 刘腾 张婷 谢洪祥 许颖 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2017年第10期1035-1040,共6页
目的外泌体与肿瘤细胞的发生发展密切相关,但具体机制不详。文中旨在探讨非小细胞肺癌A549细胞来源外泌体对正常肺上皮BEAS-2B细胞紧密连接蛋白及骨架重塑的影响。方法超速离心法提取A549细胞exosome,透射电镜进行形态学观察,Western b... 目的外泌体与肿瘤细胞的发生发展密切相关,但具体机制不详。文中旨在探讨非小细胞肺癌A549细胞来源外泌体对正常肺上皮BEAS-2B细胞紧密连接蛋白及骨架重塑的影响。方法超速离心法提取A549细胞exosome,透射电镜进行形态学观察,Western blot鉴定表面标志物CD9、CD63。实验分实验组和对照组,实验组为BEAS-2B细胞中加入终浓度为50μg/m L的exosome,对照组为BEAS-2B细胞中加入等量的PBS液,通过免疫荧光实验、Western blot实验、q PCR实验检测exosome对BEAS-2B细胞紧密连接蛋白ZO-1和Occludin蛋白及mRNA表达的影响,phalloidin-FITC荧光染色实验检测exosome对BEAS-2B细胞骨架重塑的影响,Transwell侵袭实验检测exosome处理BEAS-2B后对A549细胞侵袭BEAS-2B细胞能力的影响。结果免疫荧光实验表明,与对照组相比,实验组的ZO-1及Occuldin的表达明显减少;Western blot实验也表明exosome处理BEAS-2B后可显著减少ZO-1和Occuldin蛋白的表达(P<0.05)。q PCR实验表明,与对照组相比,外泌体处理BEAS-2B后可明显下调紧密连接蛋白ZO-1(1.00±0.00 vs 0.45±0.04)和Occuldin mRNA(1.00±0.00 vs 0.52±0.08)水平,差异有统计学意义(P<0.01)。phalloidin-FITC检测结果表明,与对照组相比exosome直接处理后BEAS-2B细胞后F-actin重聚明显增多。Exosome处理BEAS-2B后A549穿过微孔膜的细胞数量[(22.0±4.0)个]明显高于对照组[(10.6±4.5)个],差异有统计学意义(P<0.05)。结论 A549细胞来源exosome可通过下调BEAS-2B细胞紧密连接蛋白ZO-1、Occludin的表达,促进BEAS-2B细胞骨架重塑,最终破坏BEAS-2B细胞对肿瘤细胞A549的屏障作用。 展开更多
关键词 A549 紧密连接蛋白 骨架重塑 侵袭
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LIM激酶及其在神经系统中的作用研究进展 被引量:1
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作者 张如意 丁悦敏 张立煌 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期119-124,F0003,共7页
LIM激酶(LIMKs)是一类具有丝氨酸/苏氨酸和酪氨酸双重活性的激酶。该家族的两大成员为LIMK1和LIMK2。虽然它们结构十分相似,但具有不同的表达、细胞亚定位和功能特点。活化的LIMKs主要作用于Rho激酶家族下游通路,通过调节cofilin蛋白活... LIM激酶(LIMKs)是一类具有丝氨酸/苏氨酸和酪氨酸双重活性的激酶。该家族的两大成员为LIMK1和LIMK2。虽然它们结构十分相似,但具有不同的表达、细胞亚定位和功能特点。活化的LIMKs主要作用于Rho激酶家族下游通路,通过调节cofilin蛋白活性影响细胞骨架结构。近期发现LIMKs对神经系统功能有重要影响,如LIMK1与中枢神经系统的发育有关,Limk1基因的缺失参与了神经发育障碍的发病。因此,研究LIMKs在神经系统中的功能具有十分重要的生理学意义。本文综述了LIMKs的蛋白质结构、磷酸化调控机制及其在神经系统中的作用,旨在为临床相关疾病的治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 Lim激酶类 蛋白质类 基因 细胞骨架 磷酰化 中枢神经系统 综述
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CKAP2对高糖培养的人视网膜血管内皮细胞的作用研究 被引量:2
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作者 陈湘婷 谢洁 孟倩丽 《循证医学》 2020年第2期96-102,共7页
目的探讨细胞骨架蛋白2(CKAP2)对高糖培养的人视网膜血管内皮细胞的作用。方法体外培养人视网膜微血管内皮细胞(HRMECs)株,分为正常对照组(CON组)、高渗培养组(30 mmol/L甘露醇,HO组)、高糖培养组(30 mmol/L D-葡萄糖,HG组)。RT-PCR和We... 目的探讨细胞骨架蛋白2(CKAP2)对高糖培养的人视网膜血管内皮细胞的作用。方法体外培养人视网膜微血管内皮细胞(HRMECs)株,分为正常对照组(CON组)、高渗培养组(30 mmol/L甘露醇,HO组)、高糖培养组(30 mmol/L D-葡萄糖,HG组)。RT-PCR和Western blot法分别检测CKAP2 mRNA及蛋白表达情况。分别用siCKAP2转染HRMECs阻断CKAP2,或加入雷珠单抗(106μg/mL)阻断血管内皮生长因子后,细胞增殖、划痕和小管形成实验检测细胞的增殖率、迁移能力和成管能力。结果①与正常对照组、高渗组相比,高糖组CKAP2的mRNA和蛋白表达上调;②阻断CKAP2后,细胞的增殖能力、迁移能力和血管形成能力明显减弱;③阻断CKAP2与阻断血管内皮生长因子对降低细胞的增殖、迁移和成管能力的作用相似。结论 CKAP2可影响视网膜微血管内皮细胞的增殖、迁移和成管能力,其作用效果可能与血管内皮生长因子相似。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 细胞骨架蛋白2 视网膜微血管内皮细胞 血管内皮生长因子
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金思维对拟散发性AD小鼠海马PSD95和Shank1表达及学习记忆的影响 被引量:1
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作者 黄帅阳 吴艺琼 +5 位作者 巩卓彦 王亚晗 玛娜璐璐 刘珍洪 秦高凤 王蓬文 《环球中医药》 CAS 2020年第5期772-777,共6页
目的通过研究中药复方金思维(简称金思维)对拟散发性阿尔茨海默病(sporadic Alzheimer’s disease,SAD)模型小鼠海马神经元突触相关蛋白突触后致密蛋白95(postsynaptic density95,PSD95)和骨架蛋白(Shank1)的表达,探究金思维对拟SAD小... 目的通过研究中药复方金思维(简称金思维)对拟散发性阿尔茨海默病(sporadic Alzheimer’s disease,SAD)模型小鼠海马神经元突触相关蛋白突触后致密蛋白95(postsynaptic density95,PSD95)和骨架蛋白(Shank1)的表达,探究金思维对拟SAD小鼠学习记忆的改善作用。方法链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)对C57/BL6J小鼠双侧侧脑室隔日注射,制备拟SAD模型;将部分小鼠双侧侧脑室注射人工脑脊液作为对照组(0.5%CMC)。随机将拟SAD模型小鼠分为模型组(0.5%CMC)、多奈哌齐组(0.92 mg·kg-1·d-1)、金思维大、中、小剂量组(20、10、5 mg·kg-1·d-1),每组12只,连续灌胃3个月。在最后一次灌胃结束后进行行为学跳台检测并取材。运用蛋白质印迹法和免疫组织化学染色技术对小鼠海马CA1区PSD95和Shank1蛋白进行检测。结果蛋白印迹法和免疫组化结果趋势一致,模型组小鼠海马CA1区PSD95表达(P<0.01)和Shank1表达(P<0.05)较于对照组均降低,且金思维各干预组较模型组不同程度增加了PSD95和Shank1蛋白的表达(P<0.01或P<0.05)。结论金思维可能通过调节突触相关蛋白PSD95和Shank1来改善突触的结构和功能,进而提高拟SAD小鼠记忆获得和保持能力。 展开更多
关键词 散发性阿尔茨海默病 金思维 突触 突触后致密蛋白95 骨架蛋白Shank1
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非小细胞肺癌组织中Ezrin、nm23-h1蛋白的表达变化及意义
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作者 张银文 杜亚明 王中彬 《山东医药》 CAS 北大核心 2009年第50期1-3,共3页
目的观察非小细胞肺癌(NSCLC)组织中Ezrin及nm23-h1蛋白的表达变化,探讨其意义。方法采用免疫组化SP法检测112例手术切除的NSCLC组织及20例癌旁肺组织中的Ezrin和nm23-h1蛋白。结果观察组Ezrin阳性率为69.6%(78/112),nm23-h1阳性率为24.... 目的观察非小细胞肺癌(NSCLC)组织中Ezrin及nm23-h1蛋白的表达变化,探讨其意义。方法采用免疫组化SP法检测112例手术切除的NSCLC组织及20例癌旁肺组织中的Ezrin和nm23-h1蛋白。结果观察组Ezrin阳性率为69.6%(78/112),nm23-h1阳性率为24.1%(27/112);对照分别为25.0%(5/20)、85.0%(17/20);两组比较,P均<0.05。Ezrin和nm23-h1的表达均与NSCLC的分化程度、临床分期和淋巴转移有关(P<0.05)。Ezrin与nm23-h1表达无明显相关(P>0.05)。Ezrin高表达、nm23-h1低表达者平均生存时间为39.3个月,Ezrin低表达、nm23-h1高表达者为48.2个月,P<0.05。结论NSCLC组织中Ezrin高表达、nm23-h1蛋白低表达可促进NSCLC发生发展,联合检测Ezrin和nm23-h1有助于判定NSCLC患者的预后。 展开更多
关键词 肺肿瘤 非小细胞肺癌 膜细胞骨架连接蛋白 EZRIN蛋白 NM23-H1蛋白
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人CAP1蛋白真核表达及细胞定位与功能
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作者 刘旭 张莹 +7 位作者 王彬 刘晓丹 王豫 曾妍 潘秀颉 周平坤 朱茂祥 顾永清 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期195-198,203,共5页
目的构建CAP1蛋白真核表达质粒并使之在细胞内得以表达,确定CAP1蛋白在细胞中的定位及其对细胞迁移的影响。方法以HeLa细胞cDNA为模板,经PCR获取CAP1编码区cDNA,将该编码区cDNA序列插入pCMV-Myc质粒中,构建带Myc标签的真核表达重组质粒... 目的构建CAP1蛋白真核表达质粒并使之在细胞内得以表达,确定CAP1蛋白在细胞中的定位及其对细胞迁移的影响。方法以HeLa细胞cDNA为模板,经PCR获取CAP1编码区cDNA,将该编码区cDNA序列插入pCMV-Myc质粒中,构建带Myc标签的真核表达重组质粒。重组质粒转染至293细胞中,Western blot方法检测其在真核细胞内的表达;重组质粒转染HeLa细胞,免疫荧光法检测其细胞内的定位,划痕实验观察其对细胞迁移的影响。结果成功构建了CAP1真核表达重组质粒,并在真核细胞内成功表达,确定CAP1定位于细胞质中,划痕实验证明CAP1过表达的细胞迁移能力明显下降。结论在真核细胞中成功表达了CAP1重组质粒且CAP1定位于细胞质,其过表达对细胞迁移有抑制作用,为研究CAP1的生理功能奠定实验基础。 展开更多
关键词 细胞骨架 肌动蛋白 CAP1 亚细胞定位 细胞迁移 重组质粒
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ERM蛋白在哺乳动物卵母细胞成熟和受精中的研究进展
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作者 邵静 张颖 +1 位作者 唐毓 许保增 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期4477-4487,共11页
受精是有性生殖的基本特征,也是个体发育的起点。卵母细胞的成熟状态是保障受精成功和胚胎发育的先决条件。卵母细胞在成熟和受精的过程里受到一系列分子机制细致精密的调控,在近年来发现的许多能调节哺乳动物卵母细胞成熟和受精的信号... 受精是有性生殖的基本特征,也是个体发育的起点。卵母细胞的成熟状态是保障受精成功和胚胎发育的先决条件。卵母细胞在成熟和受精的过程里受到一系列分子机制细致精密的调控,在近年来发现的许多能调节哺乳动物卵母细胞成熟和受精的信号通路中,埃兹蛋白-根蛋白-膜突蛋白(ezrin-radixin-moesin,ERM)作为连接卵母细胞膜与细胞骨架的桥梁分子都直接或间接地介导了其中的多条通路,因此,ERM蛋白也成为研究这类生物学事件的焦点。本文综述了国内外关于ERM蛋白家族通过调节微绒毛的形成、极体的排出、卵母细胞-颗粒细胞间的信息交流以及精卵融合等细胞过程来参与卵母细胞成熟和受精过程的研究进展,以期为保障哺乳动物卵母细胞体外成熟和体外受精的成功率,提高雌性哺乳动物繁殖效率提供理论参考。 展开更多
关键词 ERM蛋白 细胞膜-细胞骨架连接 减数分裂 受精
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细胞骨架相关蛋白2(CKAP2)在db/db小鼠视网膜组织中的表达及其与HIF-1α/VEGF信号通路的关系 被引量:1
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作者 贺梦霞 崔颖 +2 位作者 谢洁 吕正 孟倩丽 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2022年第2期104-107,共4页
目的观察细胞骨架相关蛋白2(CKAP2)在db/db小鼠视网膜组织中的表达及分布特点,分析其与缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路的关系。方法选取雄性db/db糖尿病小鼠(db/db组)及同窝正常野生型wt/wt小鼠(wt/wt组)各1... 目的观察细胞骨架相关蛋白2(CKAP2)在db/db小鼠视网膜组织中的表达及分布特点,分析其与缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路的关系。方法选取雄性db/db糖尿病小鼠(db/db组)及同窝正常野生型wt/wt小鼠(wt/wt组)各15只。采用HE染色观察两组小鼠视网膜结构变化,免疫荧光染色检测CKAP2、HIF-1α和VEGF在视网膜组织中的表达与定位,实时荧光定量PCR及Western blot检测三者mRNA和蛋白的表达情况。结果与wt/wt组相比,db/db组小鼠视网膜神经纤维层断裂,各层细胞排列紊乱,内核层及外核层变薄、细胞密度减少。与wt/wt组相比,db/db组小鼠视网膜组织CKAP2、HIF-1α和VEGF表达的荧光强度较高,且三者主要分布在内层视网膜。db/db组小鼠视网膜组织CKAP2与HIF-1α、CKAP2与VEGF、HIF-1α与VEGF存在一定程度的共表达。db/db组小鼠视网膜组织中CKAP2 mRNA相对表达量为2.27±0.74,HIF-1α为2.68±0.21,VEGF为2.12±0.61,均显著高于wt/wt组(均为P<0.05)。db/db组小鼠视网膜组织中CKAP2、HIF-1α和VEGF的蛋白表达量均显著高于wt/wt组(均为P<0.05)。结论CKAP2、HIF-1α和VEGF的mRNA及蛋白在db/db小鼠视网膜组织中表达升高,三者存在一定的共表达。CKAP2可能通过HIF-1α/VEGF通路参与糖尿病视网膜病变的发生与发展。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 细胞骨架相关蛋白2 缺氧诱导因子1Α 血管内皮生长因子 DB/DB小鼠
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运动训练对急性脑梗死后学习记忆能力及细胞骨架蛋白的影响 被引量:3
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作者 张维文 王晓莉 +2 位作者 张方圆 方玲 魏琰 《解剖学杂志》 CAS 2020年第4期300-304,共5页
目的:观察早期运动训练对急性脑梗死大鼠学习记忆能力及海马区神经细胞骨架相关蛋白表达的影响。方法:健康成年雄性Wistar大鼠60只,按随机数字表法分为假手术组、模型组、训练组,每组20只。采用线拴法建立大脑中动脉闭塞(MCAO)大鼠模型... 目的:观察早期运动训练对急性脑梗死大鼠学习记忆能力及海马区神经细胞骨架相关蛋白表达的影响。方法:健康成年雄性Wistar大鼠60只,按随机数字表法分为假手术组、模型组、训练组,每组20只。采用线拴法建立大脑中动脉闭塞(MCAO)大鼠模型,术后24 h对大鼠进行强度渐增的跑台运动训练。于造模后14、28 d采用Morris水迷宫实验评估大鼠的空间学习记忆能力;干湿重法测定脑组织含水量;TTC染色检测大鼠脑梗死体积;免疫组织化学显色法检测海马CA1区微管蛋白β-tubulin的分布情况;免疫印迹检测海马组织中β-tubulin和微管相关蛋白-2(MAP-2)的表达变化;结果:与假手术组相比,模型组逃避潜伏期延长,穿越平台次数及平台象限停留时间均减少;脑含水量升高;海马组织β-tubulin与MAP-2蛋白表达量下调。与模型组比较,运动训练大鼠空间学习记忆能力显著提高,脑梗死体积和脑含水量明显降低,海马区β-tubulin与MAP-2蛋白水平显著升高。结论:大鼠脑梗死后早期进行运动训练可以减轻脑损伤程度,促进空间学习记忆能力的恢复,其机制可能与上调海马组织细胞骨架相关蛋白表达,增加神经可塑性相关。 展开更多
关键词 脑梗死 运动训练 学习记忆 细胞骨架 β微管蛋白 微管相关蛋白-2
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