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不同铜源对鸡嗉囊Ctr1、Ctr2基因和蛋白表达的影响 被引量：2
1
作者 宋明明 高晨 +3 位作者 朱风华 黄凯 陈甫 朱连勤 《饲料研究》 CAS 2015年第17期51-57,共7页
试验选择105只1日龄的SPF蛋鸡,随机分为7组,每组15只鸡。对照组饲喂低铜半纯化日粮;试验组为在基础日粮中分别添加铜8 mg/kg的Cu SO4、微米Cu O和纳米Cu O组及在基础日粮中分别添加铜160 mg/kg的Cu SO4、微米Cu O和纳米Cu O组。研究不... 试验选择105只1日龄的SPF蛋鸡,随机分为7组,每组15只鸡。对照组饲喂低铜半纯化日粮;试验组为在基础日粮中分别添加铜8 mg/kg的Cu SO4、微米Cu O和纳米Cu O组及在基础日粮中分别添加铜160 mg/kg的Cu SO4、微米Cu O和纳米Cu O组。研究不同水平Cu SO4、微米Cu O和纳米Cu O对鸡嗉囊铜转运蛋白基因Ctr1、Ctr2 mRNA相对表达量及蛋白表达量的影响,探讨纳米Cu O在嗉囊的吸收和转运机制。结果表明:试验至15 d,日粮中添加铜160 mg/kg,Cu SO4组雏鸡嗉囊铜含量和Ctr1蛋白表达量显著高于对照组、微米Cu O和纳米Cu O组(P<0.05)。试验至30 d,日粮中添加铜8 mg/kg,Cu SO4和纳米Cu O组雏鸡嗉囊铜含量和平均日增质量显著高于对照组和微米Cu O组(P<0.05);Cu SO4组雏鸡嗉囊Ctr1 mRNA相对表达量显著高于对照组(P<0.05),Cu SO4组雏鸡嗉囊Ctr1蛋白表达量显著高于对照组和微米Cu O组(P<0.05),对照组和微米Cu O组显著高于纳米Cu O组(P<0.05);日粮中添加铜160 mg/kg,对照组雏鸡嗉囊Ctr1蛋白表达量显著高于Cu SO4组,Cu SO4组显著高于微米Cu O组,微米Cu O组显著高于纳米Cu O组(P<0.05)。日粮中添加铜8和160 mg/kg,各组雏鸡嗉囊Ctr2 mRNA相对表达量无显著差异(P>0.05),纳米Cu O组雏鸡嗉囊Ctr2蛋白表达量显著高于对照组、Cu SO4和微米Cu O组(P<0.05)。可以看出,日粮中添加Cu SO4和纳米Cu O显著提高雏鸡嗉囊铜含量和平均日增质量,微米Cu O没有明显变化。嗉囊Ctr1对Cu SO4的吸收转运发挥重要的作用,Ctr1与纳米Cu O的吸收转运关联不甚密切,纳米Cu O与Cu SO4的吸收转运方式有较大差异。日粮中添加纳米Cu O显著提高雏鸡嗉囊Ctr2蛋白表达,嗉囊Ctr2与Cu SO4吸收转运关系不明显。 展开更多
关键词 雏鸡 嗉囊 纳米Cu O ctr1 Ctr2
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铜对Ctr1基因mRNA表达的影响 被引量：4
2
作者 付世新 张利 +2 位作者 齐长学 王瑶 罗春海 《黑龙江八一农垦大学学报》 2009年第6期29-31,35,共4页
采用半定量RT-PCR法检测铜对猪传代肾细胞(PK15)中特异性铜转运蛋白Ctr1基因mRNA表达水平的影响,以β-actin为内参考,对各试验组cDNA同时进行PCR扩增。结果,猪肾PK15细胞/%1基因mRNA表达量在7.8～31.2μmoL.L-1 Cu范围内随铜添加浓度的... 采用半定量RT-PCR法检测铜对猪传代肾细胞(PK15)中特异性铜转运蛋白Ctr1基因mRNA表达水平的影响,以β-actin为内参考,对各试验组cDNA同时进行PCR扩增。结果,猪肾PK15细胞/%1基因mRNA表达量在7.8～31.2μmoL.L-1 Cu范围内随铜添加浓度的升高减少,当铜添加浓度达到62.5μmoL.L-1时,其表达量又有所回升,呈双相反应。 展开更多
关键词 铜 PK15细胞 ctr1基因 克隆 RT-PCR
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纳米ZnO对斑马鱼(Danio rerio)肝组织mdr1、nka、ctr1、hif基因mRNA的影响 被引量：1
3
作者 陈晓菲 赵群芬 +3 位作者 卢鹏 孔华庭 方剑 龚一富 《生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第5期29-32,36,共5页
随着纳米材料的广泛应用,越来越多的人开始关注并研究纳米材料的环境安全性,特别是生物毒性。基因mRNA受环境的影响往往早于毒性损伤,可作为组织损伤的前兆。以斑马鱼为受试生物,运用RT-PCR研究了ZnO纳米颗粒(5.6 mg/L)对肝组织mdr1(多... 随着纳米材料的广泛应用,越来越多的人开始关注并研究纳米材料的环境安全性,特别是生物毒性。基因mRNA受环境的影响往往早于毒性损伤,可作为组织损伤的前兆。以斑马鱼为受试生物,运用RT-PCR研究了ZnO纳米颗粒(5.6 mg/L)对肝组织mdr1(多药耐药性基因)、nka(Na+-K+-ATP酶基因)、ctr1(高亲和铜转运蛋白基因)、hif(低氧诱导因子基因)mRNA的影响,这些基因主要与斑马鱼肝组织自身免疫、细胞膜转运功能以及氧化应激有关。实验发现各基因与对照组相比有显著性差异(p<0.05),说明ZnO纳米颗粒对斑马鱼肝组织mdr1、nka、ctr1、hif基因有影响。 展开更多
关键词 ZnO纳米颗粒 斑马鱼 mdr1 NKA ctr1 HIF RT-PCR
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牡丹CTR1基因家族基因片段及其cDNA 3′-末端的克隆与序列分析 被引量：2
4
作者 高娟 董丽 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期100-105,共6页
以牡丹品种‘洛阳红’(Paeonia suffruticosa‘Luo Yang Hong’)花瓣为材料,用CTAB法提取总RNA,根据已报道的CTR1(Constitutive Triple Response 1)蛋白的保守氨基酸序列设计简并引物,通过RT-PCR扩增得到3条牡丹CTR1基因同源片段。利用... 以牡丹品种‘洛阳红’(Paeonia suffruticosa‘Luo Yang Hong’)花瓣为材料,用CTAB法提取总RNA,根据已报道的CTR1(Constitutive Triple Response 1)蛋白的保守氨基酸序列设计简并引物,通过RT-PCR扩增得到3条牡丹CTR1基因同源片段。利用其已知中间序列,通过3′快速扩增cDNA末端技术(3′RACE)及序列拼接,最终得到了这3个基因片段除5′末端外的全部cDNA序列,分别命名为PsCTR1、PsCTR2和PsCTR3。分析结果表明,由PsCTR1、PsCTR2和PsCTR3基因翻译的氨基酸片段与拟南芥和番茄的CTR1蛋白氨基酸序列的同源性均较高,分别为88%和85%;61%和61%以及70%和69%。 展开更多
关键词 牡丹 ctr1 RT-PCR RACE 序列分析
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Ctr1mRNA表达水平与细胞内CuZn-SOD活性的相关性 被引量：2
5
作者 付世新 夏成 +2 位作者 李鹏 沈冰蕾 王长远 《黑龙江八一农垦大学学报》 2010年第4期64-67,共4页
采用半定量RT-PCR法检测不同铜水平对猪传代肾细胞（PK15）中特异性铜转运蛋白Ctr1基因mRNA表达水平的影响,以β-actin为内参考,对各试验组cDNA同时进行PCR扩增;采用黄嘌呤氧化酶法对各实验组细胞内CuZn-SOD活性进行检测。猪肾PK15细胞C... 采用半定量RT-PCR法检测不同铜水平对猪传代肾细胞（PK15）中特异性铜转运蛋白Ctr1基因mRNA表达水平的影响,以β-actin为内参考,对各试验组cDNA同时进行PCR扩增;采用黄嘌呤氧化酶法对各实验组细胞内CuZn-SOD活性进行检测。猪肾PK15细胞Ctr1基因mRNA表达量在铜添加量在7.8～62.5μmoL·L-1范围时,其表达量呈双相反应;实验各组细胞内CuZn-SOD活性均高于对照组（P〈0.05）,以Ⅳ组与其它各组差异显著（P〈0.05）。细胞表面Ctr1基因mRNA的表达量与细胞内CuZn-SOD活性呈反向性关系。 展开更多
关键词 铜 PK15细胞 ctr1mRNA CuZn-SOD活性
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焦磷酸测序分析CTR1基因多态性方法的建立
6
作者 刘英姿 曾飞跃 +1 位作者 肖乐东 王果 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2016年第6期673-677,共5页
目的:建立CTR1 rs10981694单核苷酸多态性位点的焦磷酸测序方法。方法:全血g DNA为模板,生物素标记引物,对扩增多态位点目的片段,制备生物素标记单链模板,与测序引物退火结合后行焦磷酸测序。分析结果经毛细管电泳测序验证,并进行重复... 目的:建立CTR1 rs10981694单核苷酸多态性位点的焦磷酸测序方法。方法:全血g DNA为模板,生物素标记引物,对扩增多态位点目的片段,制备生物素标记单链模板,与测序引物退火结合后行焦磷酸测序。分析结果经毛细管电泳测序验证,并进行重复性检验。结果:本文建立了针对CTR1 rs10981694多态性位点的焦磷酸测序方法,经毛细管电泳测序验证和重复性验证,结果准确可靠。CTR1 rs10981694 C和A等位基因频率分别为21%和79%均符合Hardy-Weinberg平衡。结论:本文建立的焦磷酸测序方法可准确、高通量、快速检测CTR1 rs10981694单核苷酸多态性,并且特别适宜大样本量的临床及科研批量检测需要。 展开更多
关键词 药理学 焦磷酸测序 ctr1 单核苷酸多态性
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甜瓜乙烯信号转导途径关键因子基因CTR1的克隆及表达特性分析 被引量：3
7
作者 姚远 高峰 +1 位作者 郝金凤 哈斯阿古拉 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期83-87,共5页
在拟南芥中,CTR1在乙烯信号转导途径中发挥重要的负调控作用。目前的研究表明,在拟南芥中只存在一个CTR1基因。利用RT-PCR技术从甜瓜果实中克隆得到CTR1基因cDNA(Cm-CTR1)。Cm-CTR1 cDNA全长2 613 bp,编码870个氨基酸。氨基酸序列比对... 在拟南芥中,CTR1在乙烯信号转导途径中发挥重要的负调控作用。目前的研究表明,在拟南芥中只存在一个CTR1基因。利用RT-PCR技术从甜瓜果实中克隆得到CTR1基因cDNA(Cm-CTR1)。Cm-CTR1 cDNA全长2 613 bp,编码870个氨基酸。氨基酸序列比对和同源性分析表明,所克隆的甜瓜CTR1基因与拟南芥CTR1基因相似度为53.69%。Cm-CTR1的C-末端具有明显的类似于哺乳动物和果蝇中的Raf(retro-viral protein,V-raf)蛋白激酶家族的丝/苏氨酸蛋白激酶(Serine/threonine protein kinase)的特征。该结构具有所有已知蛋白激酶所共有的11个亚结构域,其中包括ATP结合位点和丝/苏氨酸蛋白激酶位点结构域,说明CmCTR1与其他植物CTR1相似。实时荧光定量PCR分析结果表明,从授粉后第15天到第20天,甜瓜果实Cm-CTR1基因表达量显著增加,第20天的表达量是第15天的2.5倍,之后表达水平趋于稳定,第40天到第45天表达量有所下降。 展开更多
关键词 甜瓜 ctr1 基因表达 果实成熟 实时荧光定量PCR
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外源乙烯及1-MCP对牡丹CTR基因表达的影响 被引量：8
8
作者 高娟 贾培义 +3 位作者 王彦杰 张超 王玮然 董丽 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期19-26,共8页
采用RT-PCR法研究外源乙烯和1-MCP对牡丹品种洛阳红(Paeonia suffruticosa Luoyanghong)1级切花CTR基因家族3个成员基因表达的影响,以揭示乙烯在牡丹采后开花和衰老进程中的调控机制.结果表明,在花朵开放和衰老进程中,PsCTR1和PsCTR2类... 采用RT-PCR法研究外源乙烯和1-MCP对牡丹品种洛阳红(Paeonia suffruticosa Luoyanghong)1级切花CTR基因家族3个成员基因表达的影响,以揭示乙烯在牡丹采后开花和衰老进程中的调控机制.结果表明,在花朵开放和衰老进程中,PsCTR1和PsCTR2类似组成型表达,PsCTR3随内源乙烯的增加表达增强.PsCTR2和PsCTR3表达受外源乙烯的促进,PsCTR1的表达仅在花朵开放后期受到外源乙烯的促进.1-MCP处理增加了PsCTR1和PsCTR2的表达,但对PsCTR3的表达起先促进后抑制的作用.复合处理的结果表明,1-MCP处理可以逆转乙烯处理对PsCTR1和PsCTR2的作用;在切花进入盛花期和衰老期后,乙烯处理可以逆转1-MCP处理对PsCTR1、PsCTR2和PsCTR3的作用. 展开更多
关键词 ctr1 乙烯 切花 牡丹
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顺铂降低铜离子转运蛋白1表达诱导人食管鳞癌细胞耐药 被引量：6
9
作者 余乐 陈明辉 +3 位作者 古春萍 李亦蕾 曹之宪 刘叔文 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期911-915,共5页
目的诱导对顺铂耐药的人食管鳞癌细胞株,并进一步研究细胞耐药性产生的机制。方法逐渐增加顺铂浓度处理人食管鳞癌细胞HKESC-1,诱导顺铂耐药细胞株HKESC-1/cis。MTT法观察顺铂的细胞毒作用以及细胞的生长曲线。电感耦合等离子体质谱检... 目的诱导对顺铂耐药的人食管鳞癌细胞株,并进一步研究细胞耐药性产生的机制。方法逐渐增加顺铂浓度处理人食管鳞癌细胞HKESC-1,诱导顺铂耐药细胞株HKESC-1/cis。MTT法观察顺铂的细胞毒作用以及细胞的生长曲线。电感耦合等离子体质谱检测细胞内顺铂的蓄积和Pt-DNA加合物的形成。Western blot检测铜离子转运蛋白(copper transporter 1,CTR1)的表达。结果顺铂耐药细胞株HKESC-1/cis较其亲代细胞HKESC-1对顺铂引起的细胞毒作用敏感性下降,耐药指数为2.9。顺铂耐药细胞株HKESC-1/cis与其亲代细胞HKESC-1的生长速度相似。然而,HKESC-1/cis细胞内顺铂蓄积和Pt-DNA加合物的形成较HKESC-1细胞减少,并且CTR1蛋白表达水平降低。结论顺铂通过降低细胞膜CTR1蛋白的表达,抑制顺铂进入细胞,导致细胞耐药性的产生。 展开更多
关键词 食管鳞癌 顺铂 耐药性 铜转运蛋白1 Pt-DNA加合物 细胞毒作用
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