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包埋-交联磷脂酶A_1聚集体的制备及酶学性质 被引量:3
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作者 王妍 王雪 +2 位作者 李越 李志平 于殿宇 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第5期118-123,共6页
为得到可重复使用且活力较高的固定化磷脂酶A1,采用包埋-交联酶聚集体的方法对磷脂酶A1进行固定,对固定化条件和部分酶学特性进行优化和研究,确定最佳条件为:酶液质量浓度0.06g/mL、沉淀剂饱和度80%、沉淀pH6、沉淀时间35min、戊二醛体... 为得到可重复使用且活力较高的固定化磷脂酶A1,采用包埋-交联酶聚集体的方法对磷脂酶A1进行固定,对固定化条件和部分酶学特性进行优化和研究,确定最佳条件为:酶液质量浓度0.06g/mL、沉淀剂饱和度80%、沉淀pH6、沉淀时间35min、戊二醛体积分数0.4%、交联时间6.5h、海藻酸钠质量分数2%、Ca2+浓度0.25mol/L。得到包埋-交联磷脂酶聚集体A1的酶活回收率为80.2%。固定化酶热稳定性增强,重复使用7次相对酶活力保留在6 5%以上。 展开更多
关键词 磷脂酶A1 沉淀剂 戊二醛 交联酶聚集体 固定化 包埋 扫描电镜(SEM)
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交联海藻糖合酶聚集体的制备及其性质 被引量:2
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作者 陈颖 肖辰鹏 +4 位作者 陈晓云 杨丽维 唐柳 李明春 张峻 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第9期108-113,共6页
采用交联酶聚集体(CLEAs)技术制备交联海藻糖合酶聚集体,研究不同沉淀剂、酶与交联剂浓度比例、交联强度及硼氢化钠还原处理对海藻糖合酶CLEAs活性的影响及其结构特征与反应性能。结果表明:采用质量浓度为10mg/mL的酶以质量浓度为30mg/m... 采用交联酶聚集体(CLEAs)技术制备交联海藻糖合酶聚集体,研究不同沉淀剂、酶与交联剂浓度比例、交联强度及硼氢化钠还原处理对海藻糖合酶CLEAs活性的影响及其结构特征与反应性能。结果表明:采用质量浓度为10mg/mL的酶以质量浓度为30mg/mL的聚乙二醇(PEG)为沉淀剂,以体积分数为0.5%的戊二醛室温交联2h,再以硼氢化钠还原处理后,制备得到的海藻糖合酶CLEAs最适催化温度为70℃,比游离酶提高20℃,最适pH值为7.0,与游离酶相比,CLEAs的温度及pH值稳定性均得到提高,对Zn2+、Cu2+、Fe2+、Al3+金属离子的抗性明显增强。微观形貌分析表明单个海藻糖合酶聚集体粒径在0.2~0.5μm,众多聚集体以"脚手架"结构形成大小不一的集簇。 展开更多
关键词 海藻糖合酶 交联酶聚集体(cleas) 无载体固定化 集簇
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交联酶聚体制备的研究进展 被引量:3
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作者 张思 张亚楠 崔建东 《中国酿造》 CAS 北大核心 2010年第8期8-12,共5页
交联酶聚体是一种无需载体、无需酶的纯化、制备简单、成本低和高稳定性的新型固定化酶方法,具有广阔的应用前景。对交联酶聚体制备过程中影响酶活性的相关因素等最新研究进展进行了总结与分析。并对其应用及发展进行了展望,旨在为进一... 交联酶聚体是一种无需载体、无需酶的纯化、制备简单、成本低和高稳定性的新型固定化酶方法,具有广阔的应用前景。对交联酶聚体制备过程中影响酶活性的相关因素等最新研究进展进行了总结与分析。并对其应用及发展进行了展望,旨在为进一步的研究提供基础。 展开更多
关键词 交联酶聚体 制备 固定化酶
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青霉素酰化酶交联酶聚体的制备及热失活动力学 被引量:4
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作者 慕洋洋 甄倩楠 +3 位作者 王梦凡 齐崴 苏荣欣 何志敏 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1212-1218,共7页
以0.53 g/mL硫酸铵为沉淀剂,0.35%(体积分数)戊二醛为交联剂制得青霉素酰化酶交联酶聚体(CLEAs),酶活收率30.1%,其最适温度(57℃)比游离酶提高10℃,最适pH(10.0)向碱性偏移1.7个单位.对比游离酶及其CLEAs的热稳定性和热失活动力学模型发... 以0.53 g/mL硫酸铵为沉淀剂,0.35%(体积分数)戊二醛为交联剂制得青霉素酰化酶交联酶聚体(CLEAs),酶活收率30.1%,其最适温度(57℃)比游离酶提高10℃,最适pH(10.0)向碱性偏移1.7个单位.对比游离酶及其CLEAs的热稳定性和热失活动力学模型发现,游离青霉素酰化酶制成CLEAs后,其热失活动力学模型由一步失活转变为连串失活,失活反应活化能由248.8 kJ/mol增加至549.2 kJ/mol,对CLEAs热稳定性大幅提高的原因进行了解释.CLEAs重复利用7次后,酶活保留56%以上,具有良好的重复利用性. 展开更多
关键词 交联酶聚体 青霉素酰化酶 固定化 稳定性 热失活动力学
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复合交联酶聚集体的制备及催化羰基不对称还原合成手性醇 被引量:5
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作者 杨猛 江惠娟 +2 位作者 宁晨曦 魏东芝 苏二正 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2018年第1期54-63,共10页
尝试建立一种复合交联酶聚集体辅酶再生方法.以Corynebacterium sp.酮还原酶KRED 30和Bacillus subtilis D-葡萄糖脱氢酶GDH 1为模式酶,通过对沉淀剂类型、戊二醛浓度、交联温度和时间的优化,制备了高活力复合交联酶聚集体.酶学性质研... 尝试建立一种复合交联酶聚集体辅酶再生方法.以Corynebacterium sp.酮还原酶KRED 30和Bacillus subtilis D-葡萄糖脱氢酶GDH 1为模式酶,通过对沉淀剂类型、戊二醛浓度、交联温度和时间的优化,制备了高活力复合交联酶聚集体.酶学性质研究结果表明,与自由酶混合物相比,复合交联酶聚集体的稳定性和底物耐受性得到明显提升.催化性能研究结果表明,仅添加少量辅酶启动反应,在水相体系中复合交联酶聚集体可有效催化4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)和间氯苯乙酮(CPO)还原合成手性醇,连续催化10次,残余活性仍保留70%以上;在双相体系中,复合交联酶聚集体的催化性能更加优越,催化COBE的总转化数(TTN)达到6595,催化CPO的TTN达到7500.结果表明,复合交联酶聚集体是一种可行的辅酶再生方法. 展开更多
关键词 酮还原酶 D-葡萄糖脱氢酶 辅酶再生 复合交联酶聚集体 手性醇
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磁性松香基高分子固定化交联脂肪酶聚集体的制备及性质研究 被引量:2
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作者 卢建芳 黎克纯 +1 位作者 雷福厚 周菊英 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期128-134,共7页
制备了磁性松香基高分子固定化交联脂肪酶聚集体(固定化CLEAs-L)。研究制备条件对固定化CLEAs-L活性的影响,并研究了固定化CLEAs-L的结构与性质。结果表明,固定化CLEAs-L的最佳制备条件为:沉淀剂无水乙醇用量30%,脂肪酶质量浓度4 g/L,... 制备了磁性松香基高分子固定化交联脂肪酶聚集体(固定化CLEAs-L)。研究制备条件对固定化CLEAs-L活性的影响,并研究了固定化CLEAs-L的结构与性质。结果表明,固定化CLEAs-L的最佳制备条件为:沉淀剂无水乙醇用量30%,脂肪酶质量浓度4 g/L,一次交联反应中添加0. 3%的戊二醛,交联反应2 h,二次交联反应中添加1%的戊二醛,交联脂肪酶聚集体与载体的质量比2. 5∶1。在最佳条件下,固定化CLEAs-L的酶活回收率为86. 52%,固定化CLEAs-L的最适温度和pH分别为45℃和7. 0。与游离脂肪酶、CLEAs-L相比,固定化CLEAs-L热稳定性和储存稳定性明显提高;重复操作6次后,固定化CLEAs-L的酶活回收率仍保持在60. 00%以上。 展开更多
关键词 磁性松香基高分子 交联脂肪酶聚集体 脂肪酶 交联 固定化cleas-L
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