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变形链球菌表面蛋白真核表达载体pcDNA3-PAc的构建——Ⅰ.质粒DNA pPC41和pcDNA3的提取与纯化 被引量:7
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作者 刘建国 刘天佳 +3 位作者 周学东 刘莉 贾文祥 詹玲 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期361-363,I016,共4页
目的:从大肠杆菌克隆子中提取和纯化质粒DNApPC41和pcDNA3。方法:采用碱裂解法将质粒DNA从菌体细胞中分离出来,进一步用聚乙二醇沉淀法、透析袋电洗脱法、低溶点胶回收法、玻璃纤维柱层析法纯化质粒DNA。用分光光度法测其A260、A280值,... 目的:从大肠杆菌克隆子中提取和纯化质粒DNApPC41和pcDNA3。方法:采用碱裂解法将质粒DNA从菌体细胞中分离出来,进一步用聚乙二醇沉淀法、透析袋电洗脱法、低溶点胶回收法、玻璃纤维柱层析法纯化质粒DNA。用分光光度法测其A260、A280值,确定其浓度和纯度。通过酶切分析确定其质粒大小。结果:4种方法获得的质粒DNA浓度为0.12~0.24g/L,聚乙二醇沉淀法、透析袋电洗脱法、低溶点胶回收法和玻璃纤维柱层析法的A260/A280比值依次为1.9、2.2、2.2、2.6。酶切鉴定质粒pPC41大小为10.6kb,pcDNA3大小为5.4kb。结论:4种方法均能有效地从大肠杆菌克隆子中提取和纯化得到质粒DNA。其中玻璃纤维柱层析法获得的质粒DNA纯度最高,是获取高纯度质粒DNA的有效方法之一。 展开更多
关键词 变形链球菌 表面蛋白抗原 质粒 载体构建 龋齿
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质粒DNA的阴离子交换色谱法纯化及内毒素去除 被引量:11
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作者 皮文辉 孙从建 +5 位作者 宋志强 马连营 刘淑萍 白丁平 蔡宜东 刘守仁 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期809-813,共5页
采用Fractogel(EMD TMAE(M)强阴离子交换介质分离纯化质粒脱氧核糖核酸(DNA),该介质对质粒DNA的动态载样量达0.62mg/mL。用Triton X-114或Triton X-100预先处理质粒DNA的裂解澄清液后,经阴离子交换色谱分离纯化获得的质粒DNA中内毒素含... 采用Fractogel(EMD TMAE(M)强阴离子交换介质分离纯化质粒脱氧核糖核酸(DNA),该介质对质粒DNA的动态载样量达0.62mg/mL。用Triton X-114或Triton X-100预先处理质粒DNA的裂解澄清液后,经阴离子交换色谱分离纯化获得的质粒DNA中内毒素含量分别为6.42EU/mg和9.50EU/mg,显著低于未经Triton处理的裂解澄清液(67.82EU/mg)。该法实现了阴离子交换色谱一步纯化质粒DNA的目的,具有简便、省时、成本低等特点。 展开更多
关键词 阴离子交换色谱 纯化 质粒dna TRITON X-114 TRITON X-100 内毒素 去除
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基于色谱法的超螺旋质粒DNA纯化与分析进展 被引量:4
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作者 李亮 柳方方 +1 位作者 宛煜嵩 金芜军 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1089-1094,共6页
质粒DNA含有独立复制的遗传结构,是基因工程的常用工具,广泛应用于分子生物学基础研究、农业转基因检测、医疗诊断与基因治疗等领域。质粒DNA的构型一般分为超螺旋、开口环状及线性3种。初步纯化的质粒DNA溶液中常混有3种构型,并且掺杂... 质粒DNA含有独立复制的遗传结构,是基因工程的常用工具,广泛应用于分子生物学基础研究、农业转基因检测、医疗诊断与基因治疗等领域。质粒DNA的构型一般分为超螺旋、开口环状及线性3种。初步纯化的质粒DNA溶液中常混有3种构型,并且掺杂一定量的蛋白质、RNA、内毒素以及宿主基因组DNA,这些杂质会影响后续的应用,因此质粒DNA需要进一步精细纯化。该文对质粒DNA的新应用领域、基于色谱的精细纯化技术及产物质量分析体系进行了综述,并展望了高纯度质粒DNA精细纯化及产物分析的发展方向。 展开更多
关键词 超螺旋质粒dna 精细纯化 色谱技术 数字PCR 综述
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青刺尖总黄酮提取、分离纯化工艺优化
4
作者 夏海梅 张娅 +4 位作者 王莉 饶晓尧 陆中云 宋娜丽 蒲亚萍 《山西农业科学》 2025年第1期173-180,共8页
青刺尖是滇西北特色生物资源,其含有黄酮类成分,但提取率、纯度均较低。为高效提取、纯化青刺尖总黄酮,以青刺尖总黄酮提取率为考察指标,利用正交设计优化超声波辅助提取法提取青刺尖总黄酮的工艺参数,筛选纯化青刺尖总黄酮的理想树脂... 青刺尖是滇西北特色生物资源,其含有黄酮类成分,但提取率、纯度均较低。为高效提取、纯化青刺尖总黄酮,以青刺尖总黄酮提取率为考察指标,利用正交设计优化超声波辅助提取法提取青刺尖总黄酮的工艺参数,筛选纯化青刺尖总黄酮的理想树脂及纯化条件;然后采用大孔树脂联合聚酰胺柱色谱法进一步纯化,并计算青刺尖总黄酮纯度。结果表明,超声波辅助提取法提取青刺尖总黄酮的最佳工艺为:乙醇为60%、料液比1∶60 g/mL、提取时间70 min,该条件下青刺尖总黄酮提取率为7.97%。其中,各因素对青刺尖总黄酮提取率的影响由大到小依次为乙醇体积分数>料液比>提取时间。分离纯化青刺尖总黄酮的理想树脂为HPD-500树脂,通过绘制静态吸附/解吸曲线获得静态吸附饱和时间为240 min,静态解吸平衡时间为120 min。最佳纯化工艺参数为:上样液pH值为4,上样液质量浓度为1.30 mg/mL,洗脱剂用量为4 BV,洗脱液为60%的乙醇;该条件下纯化青刺尖总黄酮,纯度为33.19%。大孔树脂联合聚酰胺纯化获得的青刺尖总黄酮纯度为62.48%,较大孔树脂纯化后纯度增加29.29%,较纯化前纯度增加54.51%。 展开更多
关键词 青刺尖 总黄酮 超声波辅助提取法 大孔树脂联合聚酰胺柱色谱法 分离纯化
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荔枝低分子量多糖的分离纯化及抗氧化吸湿保湿性能分析 被引量:18
5
作者 景永帅 张丹参 +3 位作者 吴兰芳 戎欣玉 杜红霞 许伟涛 《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第9期277-283,共7页
为进一步开发和利用荔枝中的多糖成分,该文对荔枝低分子量多糖组分进行分离纯化,并对其理化性质、抗氧化和吸湿保湿性进行研究。采用超声波辅助提取、分级醇沉、DEAE-cellulose 52和Sephadex G-100柱分离纯化荔枝多糖;紫外-可见光谱扫... 为进一步开发和利用荔枝中的多糖成分,该文对荔枝低分子量多糖组分进行分离纯化,并对其理化性质、抗氧化和吸湿保湿性进行研究。采用超声波辅助提取、分级醇沉、DEAE-cellulose 52和Sephadex G-100柱分离纯化荔枝多糖;紫外-可见光谱扫描法、比旋光度法、渗透凝胶色谱法3种方法验证纯度;高效凝胶渗透色谱法测定相对分子量,高效阴离子交换色谱测定单糖组成;清除DPPH自由基和羟基自由基评价体外抗氧化活性;体外法测定吸湿保湿性。结果表明:荔枝多糖经分离纯化后获得组分荔枝多糖PLC-1,经3种方法验证PLC-1为精多糖,相对分子量为2.35×104 Da,是由半乳糖、鼠李糖、葡萄糖组成,摩尔比为:1.00∶3.52∶5.89。抗氧化活性研究结果表明PLC-1对DPPH和羟基自由基呈良好的量效关系,半数清除浓度IC50分别为0.41和0.31 mg/m L。吸湿保湿性的结果表明,PLC-1具有良好的吸湿和保湿性,在32 h时的吸湿率为58.3%,32 h时的失水率为45.3%,荔枝多糖PLC-1为具抗氧化和吸湿保湿活性的多糖,研究结果可为荔枝的深加工和进一步研究开发提供一定的理论基础。 展开更多
关键词 提取 纯化 柱层析 荔枝 多糖 抗氧化活性 吸湿保湿活性
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液-液萃取-气相色谱法测定水中9种有机氯农药 被引量:23
6
作者 王娜 王海娇 +1 位作者 汪寅夫 李丽君 《岩矿测试》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期497-502,共6页
采用正己烷液-液萃取法提取,气相色谱法-电子捕获检测器测定水中9种有机氯农药。优化了实验条件:添加两种替代物作为分析过程的质量监控;使用浓硫酸磺化法净化去除杂质;采用Rtx-5MS和Rtx-1701柱双柱定性,保证数据准确可靠。9种有机氯农... 采用正己烷液-液萃取法提取,气相色谱法-电子捕获检测器测定水中9种有机氯农药。优化了实验条件:添加两种替代物作为分析过程的质量监控;使用浓硫酸磺化法净化去除杂质;采用Rtx-5MS和Rtx-1701柱双柱定性,保证数据准确可靠。9种有机氯农药的方法检出限为0.0017~0.0079μg/L,回收率为74.7%~105.1%,相对标准偏差(RSD,n=7)为4.2%~9.3%,9种农药在0.5~100μg/L内与峰面积呈良好的线性关系。方法检出限低,准确度和精密度高,简便,适用于批量样品的分析。 展开更多
关键词 液-液萃取 气相色谱法 双柱定性 净化 有机氯农药
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微囊藻毒素MCLR的分离与纯化 被引量:5
7
作者 王金丽 梁文艳 陈莉 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期184-188,共5页
通过萃取和常压柱层析色谱技术的合理组合,建立了从实验室培养的铜绿微囊藻中提纯微囊藻毒素MCLR的有效方法。MCLR粗提液先经过正己烷萃取脱脂、固相萃取净化,再用Sephadex LH-20凝胶过滤层析色谱分离去除杂质和色度,流出液分管收集,通... 通过萃取和常压柱层析色谱技术的合理组合,建立了从实验室培养的铜绿微囊藻中提纯微囊藻毒素MCLR的有效方法。MCLR粗提液先经过正己烷萃取脱脂、固相萃取净化,再用Sephadex LH-20凝胶过滤层析色谱分离去除杂质和色度,流出液分管收集,通过测定流出组分在238nm处的吸光度值,并对峰值组分进行鉴定,证明第2个洗脱峰为MCLR,其纯度为40.5%。最后利用DEAE Sepharose CL-6B阴离子交换层析进一步纯化,以水为初始缓冲液,以3mmol/L NaCl水溶液洗脱MCLR,得到MCLR在238nm的特征吸收峰,MCLR的纯度达90%以上,最终得率为66.2%。 展开更多
关键词 MCLR 纯化 萃取 柱层析色谱
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高效液相色谱-串联质谱法同时测定饲料中11种霉菌毒素 被引量:15
8
作者 魏云计 冯民 +5 位作者 朱臻怡 何健 沈金荣 何正和 秦娴 周利英 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期891-896,共6页
建立了高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)同时检测饲料中11种霉菌毒素的分析方法。样品经乙腈提取,MycoSep 228多功能净化柱填料和PRIME HLB固相萃取柱净化;采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(150 mm×2.1 mm,3.5μm)分离,以甲醇和5... 建立了高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)同时检测饲料中11种霉菌毒素的分析方法。样品经乙腈提取,MycoSep 228多功能净化柱填料和PRIME HLB固相萃取柱净化;采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(150 mm×2.1 mm,3.5μm)分离,以甲醇和5 mmol/L乙酸铵水溶液(含0.1%(v/v)甲酸)为流动相梯度洗脱;采用ESI源正、负离子同时扫描,多反应监测(MRM)模式测定,内标法定量。结果表明,11种目标物在各自的线性范围内线性关系良好,相关系数均大于0.99,定量限为2.0~50.0μg/kg。11种霉菌毒素在3个加标水平(1、2、5倍定量限)下的平均回收率为79.3%~101.6%,相对标准偏差(RSD)为5.9%~13.2%(n=5)。该法简单快速,净化效果好,灵敏度高,适用于饲料中11种霉菌毒素的分析。 展开更多
关键词 高效液相色谱-串联质谱 固相萃取 多功能净化柱填料 霉菌毒素 饲料
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加压柱层析法纯化苦瓜总皂甙的工艺研究 被引量:3
9
作者 朱益波 金烨琛 +1 位作者 林霄 齐斌 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第8期359-362,共4页
采用乙醇提取苦瓜总皂甙,并利用加压柱层析法对其进行纯化,以提取温度、浸提时间、乙醇浓度、固液比为考察因素,通过单因素试验及正交试验确定了最佳提取条件:乙醇浓度80%(V/V)、温度80℃、浸提时间2h、固液比1:20;影响提取因素的主次... 采用乙醇提取苦瓜总皂甙,并利用加压柱层析法对其进行纯化,以提取温度、浸提时间、乙醇浓度、固液比为考察因素,通过单因素试验及正交试验确定了最佳提取条件:乙醇浓度80%(V/V)、温度80℃、浸提时间2h、固液比1:20;影响提取因素的主次顺序为:乙醇浓度>固液比>提取时间>温度;利用AB-8大孔吸附树脂加压层析柱法吸附纯化苦瓜总皂甙,吸附工艺条件为:吸附时间20h、流速2ml/min;洗脱条件为:洗脱时间60min、洗脱液乙醇浓度80%、洗脱液流速2ml/min。所得苦瓜总皂甙纯度为48%。 展开更多
关键词 苦瓜总皂甙 提取 纯化 AB-8大孔树脂 加压柱层析
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刺葡萄皮中花色苷的分离纯化与结构鉴定 被引量:13
10
作者 王维茜 邓洁红 +1 位作者 石星波 刘永红 《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第4期296-301,共6页
为研究刺葡萄花色苷的结构及其纯化分离的柱层析法,将刺葡萄色素粗提液依次经大孔树脂HP-20、聚酰胺树脂、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20吸附纯化,利用超高效液相色谱三重四级杆飞行时间质谱联用技术对分离所得花色苷进行结构鉴定,并运用荧... 为研究刺葡萄花色苷的结构及其纯化分离的柱层析法,将刺葡萄色素粗提液依次经大孔树脂HP-20、聚酰胺树脂、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20吸附纯化,利用超高效液相色谱三重四级杆飞行时间质谱联用技术对分离所得花色苷进行结构鉴定,并运用荧光光度法探索荧光图谱与花色苷结构的关系。研究发现,聚酰胺树脂对部分花色苷产生了吸附作用,而Sephadex LH-20凝胶能起到较好的分离作用,最终得到3种色素,经鉴定,确定色素I为锦葵素-3,5-O-双葡萄糖苷,通过质谱信息初步确定色素III可能为锦葵素-3,5-O-双葡萄糖苷-香豆酰,色素IV可能为飞燕草素-3-O-芸香糖苷和锦葵素-3-O-芸香糖苷的混合物,经高效液相色谱以归一法计算峰面积,色素I和色素III的纯度分别达到了98.64%、98.33%,得率分别为0.114%和0.076%。研究结果为花色苷的分离及鉴定提供参考。 展开更多
关键词 提取 纯化 柱层析 刺葡萄 花色苷 分离 鉴定 荧光分光光度法
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迷迭香叶中鼠尾草酸的分离纯化 被引量:4
11
作者 夏田娟 毕良武 +2 位作者 赵振东 程贤 邢雅丽 《林产化学与工业》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第5期105-110,共6页
以迷迭香叶为原料,采用超声波辅助乙醇提取、超声波辅助正己烷提取及p H值调节、硅胶柱层析3步骤复合提取纯化方法制备鼠尾草酸,结果表明:迷迭香叶经超声波辅助乙醇提取得到迷迭香叶提取物,其鼠尾草酸纯度为21.06%;迷迭香叶提取物经超... 以迷迭香叶为原料,采用超声波辅助乙醇提取、超声波辅助正己烷提取及p H值调节、硅胶柱层析3步骤复合提取纯化方法制备鼠尾草酸,结果表明:迷迭香叶经超声波辅助乙醇提取得到迷迭香叶提取物,其鼠尾草酸纯度为21.06%;迷迭香叶提取物经超声波辅助正己烷提取和p H调节得鼠尾草酸粗品,其鼠尾草酸纯度为79.62%,超声波辅助正己烷提取的优化条件为:液固比20∶1(m L∶g)、超声波频率28 k Hz、超声波时间40 min、超声波功率140 W,鼠尾草酸的得率为2.0%;硅胶柱层析的优化条件为:硅胶粒径48~75μm、洗脱剂为乙酸乙酯/石油醚(体积比4∶7)、洗脱剂流速6 m L/min、上样量为0.3 g,鼠尾草酸回收率为54.12%。通过此种方法得到的鼠尾草酸纯度为95.18%。 展开更多
关键词 鼠尾草酸 超声波辅助提取 纯化 柱层析
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结核病核酸疫苗纯化过程的初步研究 被引量:1
12
作者 毛记军 徐殿胜 +1 位作者 夏杰 陆兵 《华东理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1285-1288,共4页
对结核病核酸疫苗的质粒DNA的制备性纯化过程进行了初步研究。此工艺主要包括以简化的碱裂解法处理大肠杆菌、超滤与离心法除大部分杂质并浓缩样品、Q-Sepharose阴离子交换层析、DNA B ioSepharTMFF亲和层析等步骤,以去除细胞RNA和蛋白... 对结核病核酸疫苗的质粒DNA的制备性纯化过程进行了初步研究。此工艺主要包括以简化的碱裂解法处理大肠杆菌、超滤与离心法除大部分杂质并浓缩样品、Q-Sepharose阴离子交换层析、DNA B ioSepharTMFF亲和层析等步骤,以去除细胞RNA和蛋白等杂质,并对不同分子结构的质粒DNA作分离。结果表明:以碱裂液中质粒DNA为计算基准的得率为56.61%、超螺旋质粒DNA的电泳纯度100%。 展开更多
关键词 结核病 核酸疫苗 质粒 纯化 层析
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雅津蛋白桑多糖的分离纯化及生物活性研究 被引量:8
13
作者 王羚佳 舒晓梦 +3 位作者 辛文 张驰松 陈祥贵 杨潇 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2018年第3期175-179,210,共6页
采用纤维素酶法提取桑叶多糖,通过单因素试验和正交试验,确定最优提取工艺参数;并采用Sephadex G-100型葡聚糖凝胶进行初级纯化,比较纯化前后多糖的抗氧化能力和α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果表明,纤维素酶法提取的最优工艺为提取液pH 6.... 采用纤维素酶法提取桑叶多糖,通过单因素试验和正交试验,确定最优提取工艺参数;并采用Sephadex G-100型葡聚糖凝胶进行初级纯化,比较纯化前后多糖的抗氧化能力和α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果表明,纤维素酶法提取的最优工艺为提取液pH 6.0、酶解温度50℃、酶浓度1.0%、酶反应时间50min;纯化后的桑叶多糖具有更高的总抗氧化能力、DPPH·和·OH清除能力;但纯化后的桑叶多糖对α-葡萄糖苷酶抑制效果低于纯化前的。优选得到的纤维素酶法提取桑叶多糖工艺具有较好的提取效果,且纯化后的桑叶多糖具有更强的抗氧化活性。 展开更多
关键词 雅津蛋白桑 多糖 酶法 柱层析 生物活性
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HCGβ抗肿瘤核酸疫苗的纯化工艺
14
作者 李岩 夏杰 +1 位作者 陆兵 徐殿胜 《华东理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第5期665-669,共5页
对HCGβ抗肿瘤核酸疫苗的预处理和层析纯化工艺进行了研究。用碱裂解法对湿菌体进行预处理,当菌体湿重(g)∶悬浮液体积(mL)∶裂解液体积(mL)∶中和液体积(mL)为1∶2∶2∶2,碱裂解时间为8-12 min时,质粒的产量最高,可达32.94 mg/... 对HCGβ抗肿瘤核酸疫苗的预处理和层析纯化工艺进行了研究。用碱裂解法对湿菌体进行预处理,当菌体湿重(g)∶悬浮液体积(mL)∶裂解液体积(mL)∶中和液体积(mL)为1∶2∶2∶2,碱裂解时间为8-12 min时,质粒的产量最高,可达32.94 mg/g。用Sepharose 6 FF凝胶过滤层析去除RNA和蛋白质,再用Plasmidselect亲和层析捕获超螺旋质粒DNA,质粒DNA的得率为48.3%。用L-Histidine-agarose亲和层析可从澄清的碱裂解液中一步分离纯化超螺旋质粒DNA,质粒DNA得率为51.62%。经琼脂糖核酸电泳检测,HCGβ抗肿瘤核酸疫苗超螺旋质粒DNA的纯度为100%电泳纯。 展开更多
关键词 HCGΒ 核酸疫苗 质粒dna 层析 纯化
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抑制素质粒的提取与纯化研究
15
作者 杨维 石国庆 +1 位作者 夏洁 张红琳 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第23期10895-10896,共2页
[目的]为抑制素质粒的大量提取与纯化寻找一种成本低的方法。[方法]采用碱裂解法与DEAE-纤维柱层析法提取与纯化抑制素质粒DNA,用分光光度法测定其浓度和纯度。[结果]抑制素质粒DNA的等电点为2.0~2.5,低于大部分蛋白质。pH值为8.0时,... [目的]为抑制素质粒的大量提取与纯化寻找一种成本低的方法。[方法]采用碱裂解法与DEAE-纤维柱层析法提取与纯化抑制素质粒DNA,用分光光度法测定其浓度和纯度。[结果]抑制素质粒DNA的等电点为2.0~2.5,低于大部分蛋白质。pH值为8.0时,抑制素质粒DNA带负电荷,且电荷数量与RNA和蛋白质不同。用紫外分光光度计测定的柱层析后洗脱峰1、2、3在260和280 nm波长处的吸光度值分别为3.01和2.9、0.95和0.51、0.84和0.76,其OD260 nm/OD280 nm分别为1.04、1.86和1.10。3 mol/LNaCl的洗脱峰1大部分是蛋白质,0.6 mol/LNaCl的洗脱峰2是浓度为93.0 ng/ml的抑制素质粒DNA,3 mol/LNaCl的洗脱峰3是杂质。[结论]利用碱裂解法能从大肠杆菌细胞中分离出抑制素质粒DNA,DEAE-纤维柱层析法纯化的抑制素质粒DNA达到了要求的纯度。 展开更多
关键词 质粒 提取 纯化 碱裂解法 DEAE-纤维柱层析
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牛蒡苷元的提取及纯化 被引量:2
16
作者 叶胜强 陈洁 +5 位作者 金尔光 郭一 钱运国 童伟文 万平民 鲍伯胜 《中国兽药杂志》 2011年第2期32-34,共3页
探索了一种从牛蒡子中提取、纯化牛蒡苷元的方法。将脱脂牛蒡子粗粉用含5%盐酸的50%乙醇溶液回流5 h,过滤后,药渣用50%乙醇溶液重复提取1 h,合并滤液后用5 mol/LNaOH溶液调节至中性,氯仿萃取2次,减压旋转蒸干后得牛蒡苷元粗品。粗品用... 探索了一种从牛蒡子中提取、纯化牛蒡苷元的方法。将脱脂牛蒡子粗粉用含5%盐酸的50%乙醇溶液回流5 h,过滤后,药渣用50%乙醇溶液重复提取1 h,合并滤液后用5 mol/LNaOH溶液调节至中性,氯仿萃取2次,减压旋转蒸干后得牛蒡苷元粗品。粗品用硅胶柱层析纯化2次,获得类白色粉末,HPLC法进行分析。结果表明,牛蒡苷元样品保留时间与对照品保留时间一致,约为12.1 min,其相对百分含量为99.3%。牛蒡苷元总提取率为1.1%。该方法是一种有效的、简便的、能满足常规实验室设备要求的牛蒡苷元制备方法。 展开更多
关键词 牛蒡子 牛蒡苷元 提取 纯化 硅胶柱层析
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红叶石楠提取类胡萝卜素的工艺条件研究 被引量:1
17
作者 蒋耀瑛 霍湘芸 +3 位作者 董子钰 范晓越 黄志伟 王岁楼 《农产品加工》 2020年第1期29-31,36,共4页
在单因素试验基础上,采用正交试验优化红叶石楠绿叶中类胡萝卜素的提取工艺条件,并用柱层析分离纯化粗提液中的类胡萝卜素。结果表明,在40℃下以丙酮∶乙醇=1∶1为提取剂,料液比1∶10,浸提时间1.5 h,类胡萝卜素含量可达51.26μg/g。该... 在单因素试验基础上,采用正交试验优化红叶石楠绿叶中类胡萝卜素的提取工艺条件,并用柱层析分离纯化粗提液中的类胡萝卜素。结果表明,在40℃下以丙酮∶乙醇=1∶1为提取剂,料液比1∶10,浸提时间1.5 h,类胡萝卜素含量可达51.26μg/g。该类胡萝卜素粗提液经过柱层析法初步分离纯化,纯化倍数可达1.41。 展开更多
关键词 红叶石楠 类胡萝卜素 提取 纯化 柱层析
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去磷脂PPR固相萃取柱净化-高效液相色谱-串联质谱法测定多种动物源性食品中5种咪唑啉酮类农药的残留量
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作者 吴舒悦 李菊 +2 位作者 陈姿竹 王岚 陈泳 《理化检验(化学分册)》 2025年第7期788-794,共7页
为实现动物源性食品中多种咪唑啉酮类农药的同时测定,提出了题示方法。取鸡蛋、鸡肉、鸡肝、肠衣、罗非鱼、牛肉或牛奶样品5.00 g,加入10 mL含1%(体积分数,下同)乙酸的乙腈溶液(鸡肉、牛肉和罗非鱼等肉类样品需要均质20~30 s,用10 mL含1... 为实现动物源性食品中多种咪唑啉酮类农药的同时测定,提出了题示方法。取鸡蛋、鸡肉、鸡肝、肠衣、罗非鱼、牛肉或牛奶样品5.00 g,加入10 mL含1%(体积分数,下同)乙酸的乙腈溶液(鸡肉、牛肉和罗非鱼等肉类样品需要均质20~30 s,用10 mL含1%乙酸的乙腈溶液清洗残渣并将洗涤液与样品溶液合并),涡旋20 s,加入含4.0 g无水硫酸镁、1.0 g氯化钠、1.0 g二水合柠檬酸钠、0.5 g倍半水合柠檬酸二钠的QuEChERS萃取盐包,迅速混匀后振荡10 min,离心5 min。鸡肉、牛肉和罗非鱼样品需于−18℃冷冻2 h,其余样品无需冷冻直接分取2 mL上层酸性乙腈相过去磷脂PPR固相萃取柱,收集流出液,混匀后过0.22μm有机滤膜,滤液采用高效液相色谱-串联质谱法测定。5种咪唑啉酮类农药(甲氧咪草烟、甲咪唑烟酸、咪唑烟酸、咪唑喹啉酸、咪唑乙烟酸)在Accucore aQ色谱柱上以不同体积比的甲醇和含0.1%(体积分数)甲酸的5 mmol·L^(−1)甲酸铵溶液的混合溶液为流动相进行梯度洗脱分离,以加热电喷雾离子源正离子模式电离,多反应监测模式检测,标准曲线法(鸡蛋和肠衣基质)联合基质匹配工作曲线法(鸡肉、鸡肝、罗非鱼、牛肉和牛奶基质)定量。结果显示,5种咪唑啉酮类农药的质量浓度均在1~100μg·L^(−1)和对应的峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)为0.045~0.332μg·kg^(−1)。按照标准加入法对上述7种空白基质进行回收试验,回收率为67.8%~120%,测定值的相对标准偏差(n=6)为1.0%~10%。方法用于分析多批进口牛肉、鱼肉,5种咪唑啉酮类农药均未检出。 展开更多
关键词 高效液相色谱-串联质谱法 去磷脂PPR固相萃取柱 净化 动物源性食品 咪唑啉酮类农药
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