Circ_0103552靶向miR-1200调控肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭

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作者 周方 王猛 +3 位作者 程世钊 王峥 张思培 卢喜科 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期2099-2104,共6页

目的探讨circ_0103552对人肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其可能作用机制。方法qRT-PCR法检测circ_0103552、miR-1200在肺癌组织、癌旁组织表达;A549细胞分为si-NC、si-circ_0103552、miR-NC、miR-1200、si-circ_0103552+anti-mi... 目的探讨circ_0103552对人肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其可能作用机制。方法qRT-PCR法检测circ_0103552、miR-1200在肺癌组织、癌旁组织表达;A549细胞分为si-NC、si-circ_0103552、miR-NC、miR-1200、si-circ_0103552+anti-miR-NC、si-circ_0103552+anti-miR-1200组;检测细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭;采用双荧光素酶报告实验验证circ_0103552与miR-1200的靶向调控关系。Western blot检测E-cadherin、N-cadherin蛋白表达量。结果与癌旁组织比较,肺癌组织中circ_0103552的表达量升高(P<0.05),miR-1200的表达量降低(P<0.05);Circ_0103552下调或者过表达miR-1200削弱细胞活力、N-cadherin、克隆、侵袭和促进E-cadherin蛋白(P<0.05);circ_0103552可靶向miR-1200;下调miR-1200可逆转circ_0103552敲低对A549细胞增殖,迁移,侵袭的抑制作用以及对细胞凋亡的促进作用(P<0.05)。结论Circ_0103552通过靶向miR-1200促进肺癌细胞的进展。 展开更多

关键词 肺癌 circ_0103552 miR-1200 增殖 迁移 侵袭

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circ_0044516与miR-338-3p在肝癌组织中的表达及其与肝癌细胞转移的关系

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作者 翟渊鹏 王谦 《郑州大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第1期56-61,共6页

目的:探讨circ_0044516与miR-338-3p在肝癌组织中的表达及其与肝癌细胞转移的关系。方法:取58例肝癌患者术中切除肝癌组织及癌旁正常肝组织,qRT-PCR法检测circ_0044516、miR-338-3p的相对表达量;分析circ_0044516表达与肝癌患者临床病... 目的:探讨circ_0044516与miR-338-3p在肝癌组织中的表达及其与肝癌细胞转移的关系。方法:取58例肝癌患者术中切除肝癌组织及癌旁正常肝组织,qRT-PCR法检测circ_0044516、miR-338-3p的相对表达量;分析circ_0044516表达与肝癌患者临床病理参数的关系;采用Kaplan-Meier法分析circ_0044516表达与肝癌患者预后的关系。双荧光素酶报告实验检测circ_0044516与miR-338-3p的靶向调控作用。体外培养人肝癌细胞Huh-7,分为小干扰circ_0044516(si-circ_0044516)组及其阴性对照(si-NC)组2组,si-circ_0044516+miR-338-3p抑制剂组、si-circ_0044516+抑制剂阴性对照(I-NC)组2组;分别采用CCK-8法、Transwell实验检测细胞增殖率、迁移细胞数及侵袭细胞数。结果:与癌旁正常肝组织比较,肝癌组织中circ_0044516的相对表达量升高,miR-338-3p的相对表达量降低(P<0.05)。circ_0044516高表达肝癌患者门静脉侵犯占比高、Edmondson分级增加、TNM分期升高(P<0.05)。circ_0044516低表达患者预后较好(P=0.021)。circ_0044516可靶向调控miR-338-3p的表达。干扰circ_0044516表达可降低细胞增殖率,减少迁移及侵袭细胞数;与si-circ_0044516+I-NC组比较,si-circ_0044516+miR-338-3p抑制剂组细胞增殖率升高,迁移及侵袭细胞数增多(P<0.05)。结论:干扰circ_0044516表达可通过促进miR-338-3p表达而抑制肝癌细胞增殖、迁移及侵袭。 展开更多

关键词 肝癌 circ_0044516 miR-338-3p 细胞增殖 迁移 侵袭

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缺氧诱导的circ_0007766表达在前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭中的作用

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作者 赵梓岐 张敏 +4 位作者 杨涛 杨丽 廖国玲 张玮 楚元奎 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第5期460-468,共9页

目的:探讨环化自erb-b2受体酪氨酸激酶2(ERBB2)基因的circ_0007766分子在前列腺癌(PCa)细胞中的作用及缺氧对其表达调控的影响。方法:qRT-PCR检测circ_0007766分子在PCa细胞及组织中的表达;分别转染circ0007766的siRNA至PCa细胞DU145和... 目的:探讨环化自erb-b2受体酪氨酸激酶2(ERBB2)基因的circ_0007766分子在前列腺癌(PCa)细胞中的作用及缺氧对其表达调控的影响。方法:qRT-PCR检测circ_0007766分子在PCa细胞及组织中的表达;分别转染circ0007766的siRNA至PCa细胞DU145和PC3中,平板克隆实验、CCK-8实验和Transwell实验检测circ_0007766敲低对PCa细胞克隆形成、增殖、迁移和侵袭能力的影响;厌氧袋法建立DU145和PC3细胞的缺氧细胞模型,WB法检测缺氧通路关键分子HIF-1α的蛋白表达,qRT-PCR检测缺氧模型细胞中circ_0007766分子的表达,WB检测RNA结合蛋白真核翻译起始因子4A3(EIF4A3)的蛋白水平表达,RNA免疫沉淀(RIP)法检测缺氧条件下EIF4A3与circ_0007766的结合,qRT-PCR进一步检测缺氧条件下敲低EIF4A3对circ_0007766表达的影响。结果:circ_0007766在PCa细胞(P<0.01)及PCa组织(P<0.05)中呈高表达;敲低circ_0007766(P<0.05或P<0.01)能显著抑制PCa细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.01)。缺氧条件下HIF-1α蛋白表达增加,表明缺氧细胞模型建立成功。qRT-PCR检测结果显示,相较于常氧组,缺氧组circ_0007766的表达显著升高(P<0.01),WB法检测结果显示缺氧组细胞中EIF4A3的蛋白表达增强。RIP实验结果显示,circ_0007766在EIF4A3富集组高度富集(P<0.01)。qRT-PCR检测结果显示,缺氧可显著促进circ_0007766的表达,同时,敲低EIF4A3分子可显著降低缺氧诱导的circ_0007766的表达(P<0.05或P<0.01)。结论:circ_0007766在PCa细胞中扮演着促癌分子的角色,其表达形成与缺氧条件下EIF4A3分子的调控有关。 展开更多

关键词 前列腺癌 circ_0007766 缺氧 EIF4A3 增殖 迁移 侵袭

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Circ_0085315通过miR-149-5p/IRGQ通路对Treg介导的结肠癌免疫逃逸的机制探讨

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作者 廖汉琪 唐羿 +1 位作者 胡凯 姜耕 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第4期915-924,共10页

目的:探讨Circ_0085315通过miR-149-5p/免疫相关GTP酶Q(IRGQ)通路对Treg介导的结肠癌(CC)免疫逃逸的机制。方法:收集50例CC患者癌组织及正常组织,体外培养CC细胞系(SW480、HCT116、HT29、SW620、Lovo)和人正常结肠上皮细胞HCoEpiC,qRT-... 目的:探讨Circ_0085315通过miR-149-5p/免疫相关GTP酶Q(IRGQ)通路对Treg介导的结肠癌(CC)免疫逃逸的机制。方法:收集50例CC患者癌组织及正常组织,体外培养CC细胞系(SW480、HCT116、HT29、SW620、Lovo)和人正常结肠上皮细胞HCoEpiC,qRT-PCR检测组织和细胞中Circ_0085315表达水平。以CC细胞系SW480细胞为研究对象,通过生物信息学分析、双荧光素酶报告基因实验、RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验验证Circ_0085315、miR-149-5p、IRGQ三者间的关系,qRT-PCR检测细胞中Circ_0085315、miR-149-5p和IRGQ mRNA表达水平,CCK-8检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测细胞中IRGQ、Ki-67、PCNA、Bcl-2、Bax、Cleaved caspase-3蛋白表达,ELISA检测CC细胞与Treg共培养体系中免疫相关细胞因子水平,流式细胞术检测CC细胞与Treg共培养体系中FOXP3^(+)CD25^(+)、FOXP3^(+)CD4^(+)、FOXP3^(+)CD8^(+)比例。通过小鼠成瘤实验验证Circ_0085315对CC肿瘤生长、miR-149-5p/IRGQ通路以及免疫相关细胞因子的影响。结果:Circ_0085315在CC组织和细胞系中过表达。经生物信息学分析、双荧光素酶报告基因实验、RIP实验验证,miR-149-5p可能是Circ_0085315的下游靶点,IRGQ可能是miR-149-5p的一个靶基因。沉默Circ_0085315可降低CC细胞中IRGQ mRNA和蛋白表达水平、提高miR-149-5p表达水平(P<0.05);降低CC细胞存活率并提高细胞凋亡率,同时降低Ki-67、PCNA、Bcl-2蛋白表达水平,提高Bax、Cleaved caspase-3蛋白表达水平(P<0.05);还可降低CC细胞与Treg共培养体系中IL-10、TGF-β含量及FOXP3^(+)CD25^(+)、FOXP3^(+)CD4^(+)比例,提高IL-2、IFN-γ含量及FOXP3^(+)CD8^(+)比例(P<0.05)。进一步研究结果显示,抑制miR-149-5p表达可提高IRGQ mRNA表达水平,并减弱沉默Circ_0085315对CC细胞增殖、凋亡以及免疫逃逸的影响。体内小鼠成瘤实验显示,沉默Circ_0085315后肿瘤中IRGQ mRNA表达水平以及肿瘤体积、重量降低,而miR-149-5p表达水平升高(P<0.05);此外,外周血血清中IL-10、TGF-β含量降低,IL-2、IFN-γ含量升高(P<0.05)。结论:沉默Circ_0085315通过调控miR-149-5p/IRGQ通路不仅可抑制CC细胞增殖并诱导细胞凋亡,还可抑制Treg介导的CC免疫逃逸。 展开更多

关键词 Circ_0085315 miR-149-5p 免疫相关GTP酶Q TREG 结肠癌 免疫逃逸

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circ_0044556靶向调控miR-338-3p/BRD4轴对三阴性乳腺癌细胞恶性生物学行为的调节作用及其分子机制

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作者 董兴娟 张亚丽 +3 位作者 兴伟 朱莹莹 程永里 于萍 《解放军医学杂志》 北大核心 2025年第9期1146-1153,共8页

目的 探讨circ_0044556靶向调控miR-338-3p/溴结构域蛋白4(BRD4)轴对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞恶性生物行为的调节作用及其分子机制。方法 采用TargetScan在线网站预测circ_0044556与miR-338-3p、miR-338-3p与BRD4的结合位点。双荧光素酶... 目的 探讨circ_0044556靶向调控miR-338-3p/溴结构域蛋白4(BRD4)轴对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞恶性生物行为的调节作用及其分子机制。方法 采用TargetScan在线网站预测circ_0044556与miR-338-3p、miR-338-3p与BRD4的结合位点。双荧光素酶报告基因实验测定MDA-MB-231细胞中circ_0044556、miR-338-3p、BRD4的关系。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blotting检测人TNBC细胞系MDA-MB-231、人正常乳腺上皮细胞MCF-10A中circ_0044556、miR-338-3p、BRD4蛋白的表达情况。将MDA-MB-231细胞分为NC组、si-NC组(转染si-NC)、si-circ_0044556组(转染si-circ-004455)、si-circ_0044556+inhibitor NC组(转染si-circ_0044556和inhibitor NC)及si-circ_0044556+miR-338-3p inhibitor组(转染sicirc_0044556和miR-338-3p inhibitor),采用qRT-PCR检测circ_0044556、miR-338-3p的表达,Western blotting检测BRD4、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白的表达,CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Transwell实验检测细胞侵袭、迁移能力。将30只裸鼠随机分为NC组(尾静脉注射生理盐水)、si-NC组(尾静脉注射LV-NC)、si-circ_0044556组(尾静脉注射LV-circ_0044556)、si-circ_0044556+inhibitor NC组(尾静脉注射LV-circ_0044556和antiagomir NC)及si-circ_0044556+miR-338-3p inhibitor组(尾静脉注射LV-circ_0044556和antiagomir miR-338-3p),每组6只。裸鼠皮下注射MDA-MB-231细胞构建异种移植瘤模型,测定肿瘤体积和质量。结果 TargetScan预测结果显示,circ_0044556的下游miRNA为miR-338-3p,miR-338-3p下游的靶基因可能是BRD4。与转染mimic NC比较,转染miR-338-3p mimic后MDA-MB-231细胞中WT-circ_0044556荧光素酶活性(0.34±0.03 vs. 1.00±0.15,P<0.05)、WT-BRD4荧光素酶活性(0.41±0.05 vs. 1.05±0.13,P<0.05)明显降低。与MCF-10A细胞比较,MDA-MB-231细胞中circ_0044556、BRD4蛋白表达水平明显增高,miR-338-3p表达水平明显降低(P<0.05)。与NC组、si-NC组比较,si-circ_0044556组、si-circ_0044556+inhibitor NC组MDA-MB-231细胞中circ_0044556表达水平,BRD4、N-cadherin、波形蛋白表达水平,以及OD_(450)值明显降低(P<0.05),迁移、侵袭细胞数明显减少(P<0.05),miR-338-3p表达水平、E-cadherin蛋白表达水平升高,细胞凋亡率明显增高(P<0.05);而miR-338-3p下调挽救了circ_0044556敲低对MDA-MB-231细胞侵袭、迁移和增殖的阻滞作用。与NC组、si-NC组比较,si-circ_0044556组、si-circ_0044556+inhibitor NC组小鼠肿瘤体积明显减小,肿瘤质量明显降低(P<0.05);与si-circ_0044556组、si-circ_0044556+inhibitor NC组比较,si-circ_0044556+miR-338-3p inhibitor组肿瘤体积明显增大,肿瘤质量明显增高(P<0.05)。结论 circ_0044556可能通过miR-338-3p/BRD4轴促进TNBC细胞恶性生物学行为的发生。 展开更多

关键词 circ_0044556 miR-338-3p 溴结构域蛋白4 三阴性乳腺癌 增殖 迁移 侵袭

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外泌体介导的circ_0000615通过靶向miR-337-3p调控IL-1β诱导的骨关节炎软骨细胞损伤

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作者 刘雷 张明焕 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第2期281-286,共6页

目的:探讨外泌体介导的circ_0000615对IL-1β诱导的人软骨细胞CHON-001损伤的影响及分子机制。方法:IL-1β处理CHON-001细胞,构建骨关节炎(OA)体外模型;Western blot测凋亡相关蛋白的表达;RT-qPCR检测circ_0000615和miR-337-3p表达水平... 目的:探讨外泌体介导的circ_0000615对IL-1β诱导的人软骨细胞CHON-001损伤的影响及分子机制。方法:IL-1β处理CHON-001细胞,构建骨关节炎(OA)体外模型;Western blot测凋亡相关蛋白的表达;RT-qPCR检测circ_0000615和miR-337-3p表达水平;流式细胞术测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因实验分析miR-337-3p与circ_0000615的相互作用;ELISA检测细胞炎症因子的表达;功能恢复实验观察circ_0000615/miR-337-3p轴对CHON-001细胞损伤的影响。结果:circ_0000615和miR-337-3p在OA软骨组织和细胞模型中分别表达升高和降低(P<0.05)。与Control组比较,IL-1β诱导的CHON-001细胞凋亡率、Bax蛋白及IL-6、TNF-α水平升高,Bcl-2及IL-10水平下降(P<0.05);外泌体介导的沉默circ_0000615可降低CHON-001细胞凋亡率、Bax蛋白水平以及IL-6、TNF-α水平,升高Bcl-2蛋白水平以及IL-10水平(P<0.05);circ_0000615靶向调控miR-337-3p表达(P<0.05),且下调miR-337-3p逆转了沉默circ_0000615对CHON-001细胞损伤的影响(P<0.05)。结论:外泌体介导的沉默circ_0000615可通过靶向上调miR-337-3p缓解IL-1β诱导的CHON-001细胞损伤。 展开更多

关键词 骨关节炎 外泌体 circ_0000615 软骨细胞损伤

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circ_0101145通过miR-548c-3p/PD-L1轴促进胃癌细胞的免疫逃逸

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作者 王灿 杨先模 刘海 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第1期85-92,共8页

目的:探究circ_0101145通过miR-548c-3p/程序性死亡受体配体1(PD-L1)轴对胃癌(GC)细胞免疫逃逸的影响。方法:RT-qPCR、Western blot检测GC组织和细胞系中circ_0101145、miR-548c-3p、PD-L1 mRNA和蛋白水平,并分析circ_0101145水平与患... 目的:探究circ_0101145通过miR-548c-3p/程序性死亡受体配体1(PD-L1)轴对胃癌(GC)细胞免疫逃逸的影响。方法:RT-qPCR、Western blot检测GC组织和细胞系中circ_0101145、miR-548c-3p、PD-L1 mRNA和蛋白水平,并分析circ_0101145水平与患者临床病理参数的关系;双荧光素酶实验验证circ_0101145对miR-548c-3p以及miR-548c-3p对PD-L1的调控关系;采用脂质体转染法构建BGC-823转染细胞株,分为circ-NC组、circ_0101145组、si-circ-NC组、si-circ_0101145组、circ_0101145+NC组、circ_0101145+miR-548c-3p组、miR-548c-3p+NC组、miR-548c-3p+PD-L1组。从人外周血中分离CD8+T细胞,将其与BGC-823细胞共培养;流式细胞术检测CD8+T细胞凋亡率;ELISA检测共培养上清液中TNF-α、IFN-γ水平;CCK-8、EdU染色、Transwell实验检测细胞增殖、侵袭能力。裸鼠皮下注射敲低circ_0101145的BGC-823细胞悬液,30 d后检测移植瘤生长情况。结果:与癌旁组织或正常细胞相比,GC组织和细胞系中miR-548c-3p水平降低,circ_0101145、PD-L1 mRNA和蛋白水平升高,且circ_0101145水平越高,患者TNM分期越高,肿瘤分化程度越低,微血管越容易浸润,淋巴结越容易转移(P<0.05)。circ_0101145靶向调控miR-548c-3p,miR-548c-3p靶向调控PD-L1。在共培养体系中,过表达circ_0101145能够提高CD8+T细胞凋亡率,降低共培养上清液中TNF-α、IFN-γ水平,提高细胞培养1 d、2 d、3 d后的A值、EdU阳性率和细胞侵袭数(P<0.05);敲低circ_0101145能够降低CD8+T细胞凋亡率,提高共培养上清液中TNF-α、IFN-γ水平,降低细胞培养1 d、2 d、3 d后的A值、EdU阳性率和细胞侵袭数(P<0.05);过表达miR-548c-3p能部分逆转过表达circ_0101145对上述指标的影响(P<0.05);过表达PD-1能部分逆转过表达miR-548c-3p对上述指标的影响(P<0.05)。敲低circ_0101145能够抑制小鼠移植瘤生长(P<0.05)。结论:circ_0101145通过miR-548c-3p/PD-1轴促进GC细胞的免疫逃逸。 展开更多

关键词 circ_0101145 miR-548c-3p 程序性死亡受体配体1 胃癌 免疫逃逸

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circ_0071653靶向miR-197-3p调控食管鳞状细胞癌的增殖和转移

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作者 郑璇 戈艳蕾 +5 位作者 甘俊清 金叶 崔逸爽 吴亚男 刘子情 孙国贵 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第5期888-898,共11页

目的探讨circ_0071653靶向miR-197-3p对食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)细胞增殖和转移的影响。方法Sanger测序和核糖核酸外切酶耐受实验证实circ_0071653的环状结构。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和组织荧光... 目的探讨circ_0071653靶向miR-197-3p对食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)细胞增殖和转移的影响。方法Sanger测序和核糖核酸外切酶耐受实验证实circ_0071653的环状结构。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和组织荧光原位杂交实验检测circ_0071653的表达并分析其临床相关性。细胞荧光原位杂交和核质分离实验验证circ_0071653和miR-197-3p的亚细胞定位。生物信息学分析、双荧光素酶报告基因和RT-qPCR实验验证circ_0071653和miR-197-3p的相互作用。此外,CCK-8、集落形成、划痕、Transwell侵袭以及裸鼠皮下成瘤实验评估circ_0071653和miR-197-3p对细胞活性、增殖、迁移、侵袭以及体内成瘤能力的影响。结果circ_0071653为环状RNA,在ESCC细胞和癌组织中高表达,与ESCC患者的淋巴结转移和临床分期相关。circ_0071653和miR-197-3p均主要定位在细胞质,数据库预测显示circ_0071653与miR-197-3p存在互补结合位点,双荧光素酶和RT-qPCR实验证实二者结合。此外,敲低circ_0071653可抑制ESCC细胞的活性、增殖、迁移、侵袭以及裸鼠皮下成瘤能力,而下调miR-197-3p的表达可逆转该作用。结论circ_0071653通过靶向miR-197-3p促进ESCC恶性进展。 展开更多

关键词 食管鳞状细胞癌 circ_0071653 miR-197-3p 增殖 迁移 侵袭

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circ_1764的鉴定及其在鸡脂肪细胞分化中的功能预测 被引量：2

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作者 庄重 娄姬英 +8 位作者 杨婷 王来娣 江勇 王志秀 陈世豪 毕瑜林 陈国宏 常国斌 白皓 《中国家禽》 北大核心 2024年第8期14-21,共8页

为探究环状RNA circ_1764在鸡脂肪细胞分化中的重要作用,试验通过PCR扩增和RNase酶消化鉴定鸡circ_1764的存在特性,采用qRT-PCR技术检测circ_1764在鸡组织中的表达情况,利用Miranda、miRDB和Target Scan Human等网站预测鸡circ_1764的... 为探究环状RNA circ_1764在鸡脂肪细胞分化中的重要作用,试验通过PCR扩增和RNase酶消化鉴定鸡circ_1764的存在特性,采用qRT-PCR技术检测circ_1764在鸡组织中的表达情况,利用Miranda、miRDB和Target Scan Human等网站预测鸡circ_1764的调控网络,使用DAVID软件可视化预测靶基因的GO和KEGG富集通路,最后通过转染过表达circ_1764载体,验证生物信息学筛选出的调控网络的准确性。结果显示:鸡体内存在circ_1764,并主要在细胞质中表达,在鸡心脏、肝脏、胸腺和脂肪组织中高表达;circ_1764的预测靶miRNA主要为miR-7441-3p、miR-1656、miR-6578-3p、miR-7452-5p、miR-6645-5p、miR-6563-3p、miR-6607-5p和miR-6581-5p,并且circ_1764在DF-1细胞中过表达可以显著降低上述miRNA的表达;circ_1764靶基因主要集中在代谢、泛素介导的蛋白水解以及MAPK通路中。本研究验证了鸡circ_1764的存在,通过生物信息学预测了鸡circ_1764的调控网络,初步探究circ_1764通过吸附miR-1656、miR-6645-5p等miRNA调控靶基因进而影响鸡脂肪细胞分化的分子机制,为进一步阐明circ_1764调控鸡脂肪细胞分化的机理奠定了基础。 展开更多

关键词 鸡 脂肪细胞 circ_1764 鉴定 功能预测

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circ_100284通过miR-217/MAPK1调控食管鳞状细胞癌侵袭及其对5-FU化疗敏感性的影响 被引量：1

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作者 史艳伟 米彩锋 +1 位作者 牛丽林 杨洋 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1184-1195,共12页

目的 探究环状RNA(circ_100284)作为竞争性内源RNA(ceRNA)通过调控miR-217/丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)影响食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞侵袭及其对5-氟尿嘧啶(5-FU)化疗的敏感性。方法 生物信息学分析ESCC中差异表达的circRNAs。qRT-PCR检... 目的 探究环状RNA(circ_100284)作为竞争性内源RNA(ceRNA)通过调控miR-217/丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)影响食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞侵袭及其对5-氟尿嘧啶(5-FU)化疗的敏感性。方法 生物信息学分析ESCC中差异表达的circRNAs。qRT-PCR检测ESCC组织和细胞中circ_100284的表达。使用浓度逐渐增加的5-FU处理ESCC细胞KYSE450以建立5-FU耐药KYSE450细胞系(KYSE450-R),MTT实验检测KYSE450和KYSE450-R细胞的IC_(50)。qRT-PCR检测KYSE450和KYSE450-R细胞中circ_100284、miR-217和MAPK1 mRNA的表达,Western blotting检测MAPK1蛋白的表达。取KYSE450-R细胞,设置:(1)空白对照组(不做处理)、si-NC组(转染si-NC)、si-circ_100284组(转染si-circ_100284)、pc-Control组(转染pc-Control)、pc-circ_100284组(转染pc-circ_100284)、pc-circ_100284+mimic NC组(转染pc-circ_100284和mimicNC)与pc-circ_100284+miR-217mimic组(转染pc-circ_100284和miR-217mimic),采用MTT实验检测细胞活力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况。(2)空白对照组(不做处理)、si-NC组(转染si-MAPK1的阴性对照)、si-MAPK1组(转染si-MAPK1)、si-MAPK1+inhibitor NC组(转染si-MAPK1和inhibitor NC)与si-MAPK1+miR-217inhibitor组(转染si-MAPK1和miR-217 inhibitor),采用qRT-PCR和Western blotting检测MAPK1 mRNA和蛋白的表达,MTT实验检测细胞活力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况。将circ_100284-WT或circ_100284-MUT报告质粒、MAPK1-WT或MAPK1-MUT报告质粒分别与miR-NC或miR-217 mimic共转染KYSE450-R细胞48 h,采用双荧光素酶报告实验测定荧光素酶相对活性。结果 生物信息学分析显示circ_100284在ESCC中呈高表达。与癌旁正常组织比较,ESCC组织中circ_100284表达明显增加(P<0.05);与健康人食管上皮细胞HEEC比较,ESCC细胞系TE-11、ECA09和KYSE450中circ_100284表达明显增加(P<0.05)。与KYSE450细胞比较,KYSE450-R细胞的IC_(50)增加,circ_100284、MAPK1表达增加但miR-217表达被抑制(P<0.05)。与si-NC组比较,si-circ_100284组细胞活力被抑制,细胞侵袭数减少,细胞凋亡率增高(P<0.05)。与pc-Control组比较,pc-circ_100284组细胞活力和细胞侵袭数增加,细胞凋亡率降低(P<0.05),而pc-circ_100284对ESCC细胞恶性生物学行为的影响被miR-217过表达逆转(P<0.05)。与si-NC组比较,si-MAPK1组细胞活力被抑制,细胞侵袭数减少,细胞凋亡率增高(P<0.05),而si-MAPK1对ESCC细胞生物学行为的影响被miR-217 inhibitor逆转(P<0.05)。circ_100284与miR-217、miR-217与MAPK1具有靶向关系。结论 circ_100284通过调控miR-217/MAPK1进而增强ESCC细胞的侵袭能力,抑制ESCC细胞对5-FU化疗的敏感性,在ESCC中发挥促癌因子的作用。 展开更多

关键词 circ_100284 miR-217 丝裂原活化蛋白激酶1 食管癌 化疗敏感性

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环状RNA circ_0120051通过miR-144-3p/IDH2轴抑制心肌成纤维细胞的纤维化表型研究

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作者 梁俣 胡志琴 +5 位作者 温艺红 伍华燕 王娅 刘宇鹏 单志新 方咸宏 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期196-205,共10页

【目的】研究环形RNA circ_0120051对心肌成纤维细胞的纤维化表型的调控作用和机制。【方法】通过实时萤光定量PCR(RT-qPCR)检测健康器官捐献者(n=24)与心力衰竭(HF)病人(n=21)心肌标本中circ_0120051及其宿主基因溶质载体家族8成员A1(S... 【目的】研究环形RNA circ_0120051对心肌成纤维细胞的纤维化表型的调控作用和机制。【方法】通过实时萤光定量PCR(RT-qPCR)检测健康器官捐献者(n=24)与心力衰竭(HF)病人(n=21)心肌标本中circ_0120051及其宿主基因溶质载体家族8成员A1(SLC8A1)的表达水平。核糖核酸外切酶(RNase R)消化实验鉴定circ_0120051的RNA稳定性。RT-qPCR检测circ_0120051在人心肌细胞AC16中的核质分布情况。利用腺病毒在C57BL/6乳小鼠心肌成纤维细胞(mCFs)中过表达circ_0120051,通过RT-qPCR和Western blot检测过表达circ_0120051对mCFs中纤维化相关基因表达的影响,利用细胞划痕实验检测对mCFs迁移能力的影响。通过RNA免疫共沉淀技术(RIP)验证circ_0120051与miR-144-3p间的结合作用,利用双萤光素酶报告基因实验鉴定miR-144-3p与靶基因异柠檬酸脱氢酶2(Idh2)3’-UTR的结合位点。【结果】Circ_0120051在心衰病人心肌中表达显著增加,而其宿主基因SLC8A1表达无显著差异。Circ_0120051主要定位于人心肌细胞的胞质中。RNase R消化实验证实circ_0120051相对于线性SLC8A1 mRNA具有典型的环状RNA稳定性。过表达circ_0120051可抑制mCFs中纤维化相关基因表达和mCFs的迁移能力。RIP实验证实circ_0120051与miR-144-3p之间具有明显结合作用。在mCFs中转染miR-144-3p可促进纤维化相关基因的表达,并有效逆转circ_0120051对mCFs纤维化表型的抑制作用。双萤光素酶报告基因实验证实miR-144-3p与Idh2的3’-UTR存在结合作用。miR-144-3p可在转录水平抑制mCFs中Idh2表达,而过表达circ_0120051可增加mCFs中IDH2表达。在mCFs中转染miR-144-3p和Idh2的小干扰RNA(siRNA),可一致性地逆转circ_0120051对纤维化相关基因表达和mCFs迁移的抑制作用。【结论】Circ_0120051通过特异结合miR-144-3p并增加其靶基因IDH2表达来发挥抑制mCFs纤维化表型的作用。 展开更多

关键词 心肌纤维化 环状RNA 微RNA Circ_0120051 心肌成纤维细胞

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circ_0073585在急性髓系白血病中的表达及功能研究

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作者 周永勍 苏肖宇 +1 位作者 赵倩 邓兆群 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1018-1025,共8页

目的:研究环状RNA(circular RNA,circRNA)circ_0073585在急性髓系白血病(AML)患者骨髓中的表达水平、临床意义及其在白血病细胞中的功能。方法:采用实时定量PCR(RQ-PCR)检测106例初诊AML患者及38例对照者骨髓标本中circ_0073585的表达水... 目的:研究环状RNA(circular RNA,circRNA)circ_0073585在急性髓系白血病(AML)患者骨髓中的表达水平、临床意义及其在白血病细胞中的功能。方法:采用实时定量PCR(RQ-PCR)检测106例初诊AML患者及38例对照者骨髓标本中circ_0073585的表达水平,比较两组的表达差异并分析其临床意义。根据受试者工作特征(ROC)曲线来评估circ_0073585的表达对AML的诊断价值。将过表达circ_0073585载体及空载体的慢病毒感染的THP-1细胞分为circ_0073585-THP-1和NC-THP-1两组,通过CCK-8法、流式细胞术分析circ_0073585对THP-1细胞增殖、生存、凋亡及药物敏感性的影响。结果:与对照组相比,circ_0073585在AML患者骨髓中的表达水平显著降低(P<0.001)。circ_0073585高、低表达组在白细胞计数(P<0.05)、血小板计数(P<0.01)及染色体危险程度(P<0.05)方面差异有统计意义。与NC-THP-1细胞相比,circ_0073585-THP-1细胞增殖及生存能力减弱(P<0.01)、凋亡率增加(P<0.01),对高三尖杉酯碱(P<0.05)及柔红霉素(P<0.001)的敏感性增加。结论:circ_0073585在AML患者中表达水平下降,过表达circ_0073585可抑制白血病细胞的增殖能力、生存能力,促进凋亡,并提高白血病细胞对化疗药物的敏感性。 展开更多

关键词 环状RNA circ_0073585 急性髓系白血病

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环状RNA Circ_0000291/miR-326/PTBP1轴影响肝细胞癌进展 被引量：1

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作者 庞敏 邓芳 李珊珊 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1210-1216,共7页

目的:探讨Circ_0000291作为miR-326的分子海绵调控多聚嘧啶区结合蛋白1(PTBP1)对肝细胞癌(HCC)细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响。方法:qRT-PCR检测Circ_0000291、miR-326、PTBP1在组织标本和细胞中的表达。双荧光素酶报告实验检测Circ_0... 目的:探讨Circ_0000291作为miR-326的分子海绵调控多聚嘧啶区结合蛋白1(PTBP1)对肝细胞癌(HCC)细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响。方法:qRT-PCR检测Circ_0000291、miR-326、PTBP1在组织标本和细胞中的表达。双荧光素酶报告实验检测Circ_0000291和miR-326以及miR-326和PTBP1的靶向调控关系。CCK-8、Transwell、流式细胞术和ELISA分别检测细胞的增殖、侵袭、凋亡以及免疫调控相关因子TNF-α、IFN-γ的表达。结果:相对于正常组织和肝细胞,Circ_0000291和PTBP1在HCC组织标本和细胞中表达升高,而miR-326表达水平显著降低(均P<0.05)。下调Circ_0000291可以抑制细胞的增殖、侵袭和免疫逃逸,诱导细胞凋亡(均P<0.05),转染miR-326后观察到与下调Circ_0000291类似的结果,但是上调Circ_0000291可以部分拮抗miR-326对细胞的作用(均P<0.05)。在HCC中,Circ_0000291作为分子海绵调控miR-326表达,促进PTBP1表达。结论:Circ_0000291可以吸附miR-326从而上调PTBP1,促进HCC细胞的增殖、侵袭和免疫逃逸,抑制凋亡,从而促进HCC的发展。 展开更多

关键词 Circ_0000291 miR-326 PTBP1 肝细胞癌 增殖 凋亡 免疫逃逸

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Circ_0038467通过靶向miR-940调控缺氧缺糖诱导神经细胞损伤的机制

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作者 孔炫栋 周黎琴 +2 位作者 王宁 吴天涯 赵明 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期887-893,共7页

目的探讨circ_0038467对缺氧缺糖(hypoxia-glucose deprivation,OGD)诱导的神经细胞损伤的影响及其可能作用机制。方法分离培养原代大鼠皮质神经细胞,采用OGD诱导大鼠皮质神经细胞建立细胞损伤模型;si-NC、si-circ_0038467、miR-NC、miR... 目的探讨circ_0038467对缺氧缺糖(hypoxia-glucose deprivation,OGD)诱导的神经细胞损伤的影响及其可能作用机制。方法分离培养原代大鼠皮质神经细胞,采用OGD诱导大鼠皮质神经细胞建立细胞损伤模型;si-NC、si-circ_0038467、miR-NC、miR-940 mimics分别转染至大鼠皮质神经细胞后OGD处理6 h,si-circ_0038467和anti-miR-NC或anti-miR-940分别共转染至大鼠皮质神经细胞后OGD处理6 h;qRT-PCR法检测circ_0038467、miR-940的表达量;CCK-8法、流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡;LDH法检测细胞损伤情况;双荧光素酶报告实验用于靶向关系检测;Western blot检测cleaved caspase-3、cleaved caspase-9蛋白表达。结果OGD诱导的神经细胞中circ_0038467上调且miR-940下调(P<0.01);转染si-circ_0038467或miR-940 mimics后,细胞存活率升高(P<0.01),而LDH释放率、凋亡率和cleaved caspase-3、cleaved caspase-9水平下降(P<0.01);circ_0038467可靶向结合miR-940;相对于OGD+si-circ_0038467+anti-miR-NC组,细胞存活率在OGD+si-circ_0038467+anti-miR-940中降低(P<0.01),而LDH释放率、凋亡率和cleaved caspase-3、cleaved caspase-9水平增加(P<0.01)。结论干扰circ_0038467可上调miR-940表达保护神经细胞免受OGD诱导的氧化应激以及凋亡。 展开更多

关键词 大鼠皮质神经细胞 circ_0038467 miR-940 细胞增殖 凋亡 氧糖剥夺

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沉默circ_0000502对多发性骨髓瘤细胞生物学行为的影响

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作者 王丹丹 饶琦 郭彩玲 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2024年第9期934-938,共5页

目的探讨沉默circ_0000502对多发性骨髓瘤细胞生物学行为的影响及其可能作用机制。方法qRT-PCR法检测多发性骨髓瘤患者和健康体检者(对照组)血清中circ_0000502、miR-338-3p的表达量;体外培养人多发性骨髓瘤细胞RPMI-8226,将si-NC、si-c... 目的探讨沉默circ_0000502对多发性骨髓瘤细胞生物学行为的影响及其可能作用机制。方法qRT-PCR法检测多发性骨髓瘤患者和健康体检者(对照组)血清中circ_0000502、miR-338-3p的表达量;体外培养人多发性骨髓瘤细胞RPMI-8226,将si-NC、si-circ_0000502、miR-NC、miR-338-3p mimic、si-circ_0000502与miR-338-3p inhibitor(共转染)分别转染至RPMI-8226细胞,分别记为si-NC组、si-circ_0000502组、miR-NC组、miR-338-3p mimic组、si-circ_0000502+miR-338-3p inhibitor组,以正常培养的细胞作为正常培养组;CCK-8实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡率;划痕实验检测细胞迁移能力;验证circ_0000502与miR-338-3p的靶向关系;Western blot法检测Cleaved-caspase3蛋白表达量。结果与对照组circ_0000502(1.01±0.15)和miR-338-3p(1.03±0.12)表达量比较,多发性骨髓瘤患者中circ_0000502的表达量(5.39±0.26)升高,miR-338-3p的表达量(0.25±0.05)降低(P<0.05)。沉默circ_0000502或过表达miR-338-3p可使细胞活力和划痕愈合率降低,凋亡率和Cleaved-caspase3蛋白水平升高(P<0.05);circ_0000502能够靶向结合miR-338-3p,并可负向调控miR-338-3p的表达;下调miR-338-3p可减弱沉默circ_0000502对RPMI-8226细胞活力、划痕愈合率、凋亡率及Cleaved-caspase3蛋白水平的影响(P<0.05)。结论沉默circ_0000502可通过靶向调控miR-338-3p而抑制多发性骨髓瘤细胞增殖、迁移,并诱导细胞凋亡。 展开更多

关键词 多发性骨髓瘤 circ_0000502 miR-338-3p 细胞增殖 凋亡

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环状RNA分子circ＿0007766通过上调细胞周期相关蛋白Cyclin D1/CyclinE1/CDK4的表达促进肺腺癌细胞增殖 被引量：19

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作者 张帅 夏文佳 +3 位作者 董高超 徐维章 李明 许林 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期271-279,共9页

背景与目的环状RNA(circular RNA, circRNA)是有别于传统线性RNA的一类新型非编码RNA(noncoding RNA,ncRNA),越来越多的研究提示circRNA可作为诸多恶性肿瘤的生物学标志物,并成为治疗的潜在靶标。因此从circRNA角度挖掘肺腺癌新型分子靶... 背景与目的环状RNA(circular RNA, circRNA)是有别于传统线性RNA的一类新型非编码RNA(noncoding RNA,ncRNA),越来越多的研究提示circRNA可作为诸多恶性肿瘤的生物学标志物,并成为治疗的潜在靶标。因此从circRNA角度挖掘肺腺癌新型分子靶标,将有助于揭示肺腺癌发生发展新机制,并为临床诊疗提供新思路。本研究针对前期筛选出的一个肺腺癌组织高表达circRNA即circ_0007766进行体外生物学功能验证和分析,从而对circ_0007766促进肺腺癌增殖的相关机制进行初步探索。方法首先通过qPCR检测考察肺腺癌细胞中circ_0007766的表达水平,然后采用siRNA干扰circ_0007766的表达,通过CCK8法、划痕修复、PI单染和AnnexinV/PI双染方法检测circ_0007766沉默表达对肺腺癌细胞的增殖、周期和凋亡作用的影响。此外,我们还采用qPCR和western blots方法初步研究了circ_0007766在肺腺癌细胞中的生物学作用机制。结果 qPCR检测表明肺腺癌细胞株中表达有circ_0007766,在SPCA-1细胞中干扰circ_0007766表达,发现细胞增殖和迁移能力受到了抑制,细胞周期发生了G_0/G_1期阻滞,而细胞凋亡则不受影响。circ_0007766的缺失并不影响其亲本基因ERBB2的mRNA表达,而对eIF4A3调控的细胞周期相关基因Cyclin D1/Cyclin E1/CDK4的mRNA和蛋白水平均有影响。结论本研究通过体外功能学研究,发现circ_0007766可能对肺腺癌细胞增殖、迁移具有促进的作用,进一步的分子机制研究发现circ_0007766可上调细胞周期关键蛋白Cyclin D1/Cyclin E1/CDK4的表达,进而促进肺腺癌恶性增殖。本研究以circRNA为视角,将对肺腺癌发生发展机理及预后判断提供新线索,为临床治疗应用提供新靶标。 展开更多

关键词 肺腺癌 环状RNA/circRNA circ_0007766

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circ_0001955靶向miR-1243调控肝癌BEL-7402细胞增殖、凋亡及EMT的机制研究 被引量：7

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作者 曹颖 曹伟 +1 位作者 贾延伟 王冰莹 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期795-800,共6页

目的:探讨circ_0001955调控miR-1243对肝癌BEL-7402细胞增殖、凋亡及上皮间质转化(EMT)的机制研究。方法:肝癌BEL-7402细胞分为si-NC组、si-circ_0001955组、miR-NC组、miR-1243组、si-circ_0001955+anti-miR-NC组、si-circ_0001955+ant... 目的:探讨circ_0001955调控miR-1243对肝癌BEL-7402细胞增殖、凋亡及上皮间质转化(EMT)的机制研究。方法:肝癌BEL-7402细胞分为si-NC组、si-circ_0001955组、miR-NC组、miR-1243组、si-circ_0001955+anti-miR-NC组、si-circ_0001955+anti-miR-1243组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测circ_0001955和miR-1243的表达水平;MTT检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot法检测蛋白表达;双荧光素酶报告实验检测circ_0001955和miR-1243的靶向关系。结果:与癌旁组织比较,肝癌组织中circ_0001955表达水平升高,miR-1243表达水平降低(P<0.05)。抑制circ_0001955表达后,肝癌细胞BEL-7402活性降低,凋亡率升高,E-cadherin蛋白表达水平升高,Vimentin蛋白表达水平降低(P<0.05)。circ_0001955靶向调控miR-1243;miR-1243过表达后,细胞活性降低,细胞凋亡率升高,Vimentin表达水平降低,E-cadherin表达水平升高(P<0.05)。干扰miR-1243表达逆转了抑制circ_0001955表达对肝癌BEL-7402细胞增殖、凋亡和EMT的作用。结论:抑制circ_0001955表达可能通过调控miR-1243抑制肝癌BEL-7402细胞增殖及EMT,促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 circ_0001955 miR-1243 肝癌 增殖 凋亡 EMT

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circ_0026344靶向miR-938调控肺癌A549细胞迁移、侵袭及凋亡的分子机制研究 被引量：6

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作者 肖磊 杨志雄 +1 位作者 赖微微 刘升明 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期354-358,共5页

目的:探讨circ_0026344对肺癌细胞A549迁移、侵袭及凋亡的影响及分子机制。方法:选取2017年1月至2019年12月于广州医科大学附属第二医院就诊的39例肺癌患者癌组织及对应癌旁组织;将肺癌细胞A549分为pcDNA组、pcDNA-circ_0026344组、si-N... 目的:探讨circ_0026344对肺癌细胞A549迁移、侵袭及凋亡的影响及分子机制。方法:选取2017年1月至2019年12月于广州医科大学附属第二医院就诊的39例肺癌患者癌组织及对应癌旁组织;将肺癌细胞A549分为pcDNA组、pcDNA-circ_0026344组、si-NC组、si-circ_0026344组、anti-miR-NC组、anti-miR-938组、pcDNA-circ_0026344+miR-NC组、pcDNA-circ_0026344+miR-938组,RT-qPCR检测circ_0026344和miR-938表达;Transwell检测细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告实验检测circ_0026344和miR-938的靶向关系。结果:与癌旁组织比较,肺癌组织circ_0026344表达降低,miR-938表达升高(P<0.05)。过表达circ_0026344或抑制miR-938表达,肺癌A549细胞迁移、侵袭数减少,细胞凋亡率升高(P<0.05)。circ_0026344靶向调控miR-938表达;miR-938过表达逆转circ_0026344过表达对肺癌细胞A549迁移、侵袭及凋亡的作用。结论:过表达circ_0026344可能通过下调miR-938表达抑制肺癌细胞A549迁移、侵袭,并促进其凋亡。 展开更多

关键词 circ_0026344 miR-938 肺癌 迁移 侵袭 凋亡

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沉默circ0000745通过靶向miR-296-5p对结直肠癌细胞增殖及转移的影响 被引量：4

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作者 覃先蓬 赵高平 +3 位作者 杨春 朱学强 刘浩 杨洲 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期31-37,共7页

目的探讨circ;000745对结直肠癌细胞增殖及转移的影响及其可能的作用机制。方法收集2013年3月~2016年7月在四川省人民医院确诊的结直肠癌及癌旁组织65例,采用实时定量PCR(qRT-PCR)法检测结直肠癌组织、癌旁组织中circ;000745与miR-296-5... 目的探讨circ;000745对结直肠癌细胞增殖及转移的影响及其可能的作用机制。方法收集2013年3月~2016年7月在四川省人民医院确诊的结直肠癌及癌旁组织65例,采用实时定量PCR(qRT-PCR)法检测结直肠癌组织、癌旁组织中circ;000745与miR-296-5p表达,分析circ;000745与miR-296-5p表达与结直肠癌患者预后的关系。将人结直肠癌细胞HCT-116分为si-NC组、si-circ;000745组、miR-NC组、miR-296-5p过表达组、si-circ;000745+anti-miR-NC组、si-circ;000745+anti-miR-296-5p组;采用CCK-8法、平板克隆形成实验、Transwell实验分别检测各组细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭;采用双荧光素酶报告实验检测circ;000745与miR-296-5p的靶向关系;采用Western blot法检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达量。结果与癌旁组织比较,结直肠癌组织中circ;000745的表达升高(P<0.05),miR-296-5p的表达降低(P<0.05);随访5年,65例患者中死亡9例,存活56例,与存活患者相比,死亡患者的circ;000745明显增高(P<0.05),miR-296-5p明显降低(P<0.05)。与HT-29细胞相比,HCT-116细胞的circ;000745 mRNA表达升高(P<0.05),miR-296-5p的表达降低(P<0.05),选择HCT-116细胞进行下一步研究。与si-NC组比较,si-circ;000745组细胞存活率、MMP-2、MMP-9蛋白、细胞克隆形成数、迁移及侵袭细胞数减少(均P<0.05);circ;000745可靶向调控miR-296-5p的表达;与miR-NC组比较,miR-296-5p过表达组细胞存活率、MMP-2、MMP-9蛋白、细胞克隆形成数、迁移及侵袭细胞数减少(均P<0.05);与si-circ;000745+anti-miR-NC组比较,si-circ;000745+anti-miR-296-5p组细胞存活率、MMP-2、MMP-9蛋白水平、细胞克隆形成数、迁移及侵袭细胞数增多(均P<0.05)。结论结直肠癌组织中circ;000745呈高表达,miR-296-5p呈低表达,高表达circ;000745及低表达miR-296-5p可用于评估结直肠癌患者预后,circ;000745通过靶向miR-296-5p促进结直肠癌细胞增殖及转移,沉默circ;000745可为结直肠癌治疗提供新思路。 展开更多

关键词 结直肠癌 circ_0000745 miR-296-5p 细胞增殖 迁移 侵袭

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玄参提取物调控circ_0038467/miR-495对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞损伤的影响 被引量：5

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作者 余莉萍 余淑菁 +2 位作者 李旭成 崔金涛 陆佳鑫 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期257-260,266,共5页

目的:探讨玄参提取物对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞损伤的影响及作用机制。方法:采用肺炎链球菌诱导肺泡上皮细胞建立细胞损伤模型并给予不同剂量玄参提取物处理。si-NC、si-circ_0038467分别转染肺泡上皮细胞,1×108 CFU/ml肺炎... 目的:探讨玄参提取物对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞损伤的影响及作用机制。方法:采用肺炎链球菌诱导肺泡上皮细胞建立细胞损伤模型并给予不同剂量玄参提取物处理。si-NC、si-circ_0038467分别转染肺泡上皮细胞,1×108 CFU/ml肺炎链球菌处理,pcDNA-circ_0038467转染肺泡上皮细胞,40µg/ml玄参提取物与1×108 CFU/ml肺炎链球菌处理;MTT、流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡;ELISA检测IL-6、IL-10水平;qRT-PCR检测circ_0038467、miR-495表达;双荧光素酶报告实验检测circ_0038467与miR-495的靶向关系;Western blot检测Cleaved-caspase3蛋白表达。结果:玄参提取物可浓度依赖性地增强肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞活力(P<0.05),并提高miR-495表达和IL-10水平(P<0.05),而降低circ_0038467表达、IL-6水平、细胞凋亡率和Cleaved-caspase3蛋白表达(P<0.05);转染si-circ_0038467可促进miR-495表达(P<0.05),提高细胞活力和IL-10水平(P<0.05),降低IL-6水平、细胞凋亡率和Cleaved-caspase3蛋白水平(P<0.05);circ_0038467可靶向调控miR-495表达及活性;转染pcDNA-circ_0038467可减弱玄参提取物对细胞增殖、凋亡及炎症的作用。结论:玄参提取物可通过调控circ_0038467/miR-495表达促进细胞增殖,抑制细胞凋亡及炎症反应,从而减轻肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞损伤。 展开更多

关键词 玄参提取物 circ_0038467 miR-495 肺炎链球菌 肺泡上皮细胞 细胞增殖 凋亡

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