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Influences of Plant Growth Regulators, Basal Media and Carbohydrate Levels on Cell Suspension Culture of Panax ginseng 被引量:1
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作者 Tang Wei Wu Jiongyuan, Zhang Limei(Northeast Agricultural University, Harbin 150030, P R C) 《Journal of Northeast Agricultural University(English Edition)》 CAS 1995年第1期62-65,共4页
A cell suspension culture of Panax ginseng which may be continuously subcultured has been established. Embryogenic callus derived from clutured young leaves was used to initiate the culture.Plant growth regulators, ba... A cell suspension culture of Panax ginseng which may be continuously subcultured has been established. Embryogenic callus derived from clutured young leaves was used to initiate the culture.Plant growth regulators, basal medium formula and carbohydrate levels were examined to determine their various effects on suspension culture cell growth and development. The best selection of plant growth regulator, hasal medium and carbohydrate level is 2 mg / L 2,4-D: 0.5 mg / L KT,MS and 3% sucrose respectively. 展开更多
关键词 Panax ginseng cell suspension culture plant growth regulators
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Insulin-like growth factor-binding protein-3 inhibits IGF-1-induced proliferation of human hepatocellular carcinoma cells
2
作者 Yang MA Chen-chen HAN +2 位作者 Yi-fan LI Yang WANG Wei WEI 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期966-966,共1页
OBJECTIVE Basic fibroblast growth factor(b FGF)and platelet-derived growth factor(PDGF)produced by hepatocellular carcinoma(HCC)cells are responsible for the cell growth.Accumulating evidence shows that insulin-like g... OBJECTIVE Basic fibroblast growth factor(b FGF)and platelet-derived growth factor(PDGF)produced by hepatocellular carcinoma(HCC)cells are responsible for the cell growth.Accumulating evidence shows that insulin-like growth factor-binding protein-3(IGFBP-3)suppresses HCC cell proliferation in both IGF-dependent and independent manners.The present study is to investigate whether treatment with exogenous IGFBP-3 inhibits bF GF and PDGF production and the cell proliferation of HCC cells.METHODS Cell Counting Kit 8 assay were designed to detect HCC cell proliferation,transcription factor early growth response-1(EGR1)involving in IGFBP-3 regulation of b FGF and PDGF were detected by RT-PCR and Western blot assays.Western blot assay was adopted to detect the IGFBP-3 regulating insulin-like growth factor 1 receptor(IGF-1R)signaling pathway.RESULTS The present study demonstrates that IGFBP-3 suppressed IGF-1-induced b FGF and PDGF expression while it does not affect their expression in the absence of IGF-1.To delineate the underlying mechanism,Western-blot and RT-PCR assays confirmed that the transcription factor early growth response protein 1(EGR1)is involved in IGFBP-3 regulation of b FGF and PDGF.IGFBP-3 inhibition of type 1 insulin-like growth factor receptor(IGF1R),ERK and AKT activation is IGF-1-dependent.Furthermore,transient transfection with constitutively activated AKT or MEK partially blocks the IGFBP-3 inhibition of EGR1,b FGF and PDGF expression.CONCLUSION In conclusion,these findings suggest that IGFBP-3suppresses transcription of EGR1 and its target genes b FGF and PDGF through inhibiting IGF-1-dependent ERK and AKT activation.It demonstrates the importance of IGFBP-3 in the regulation of HCC cell proliferation,suggesting that IGFBP-3 could be a target for the treatment of HCC. 展开更多
关键词 insulin-like growth factor-binding protein-3 early growth response-1 insulin-like growth factor 1 receptor cell proliferation
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GLP-1、Betacellulin、Activin A、bFGF和Nicotinamide联合诱导小鼠胚胎干细胞分化为胰岛素分泌细胞 被引量:5
3
作者 吴木潮 陈黎红 +1 位作者 徐明彤 程桦 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期426-430,共5页
【目的】探讨体外联合应用GLP-1、betacellulin、activinA、bFGF和nicotinamide5种生长因子能否将小鼠胚胎干细胞(ES细胞)诱导分化为胰岛素分泌细胞。【方法】以GLP-1、betacellulin、activinA、bFGF和nicoti-namide5种生长因子诱导E14.... 【目的】探讨体外联合应用GLP-1、betacellulin、activinA、bFGF和nicotinamide5种生长因子能否将小鼠胚胎干细胞(ES细胞)诱导分化为胰岛素分泌细胞。【方法】以GLP-1、betacellulin、activinA、bFGF和nicoti-namide5种生长因子诱导E14.1小鼠ES细胞30d后,应用RT-PCR、DTZ染色和免疫组化检测分化细胞胰岛素表达,以流式细胞仪检测胰岛素分泌细胞的分化率,用RIA法测定培养液中胰岛素水平。【结果】分化细胞可检测到胰岛素mRNA表达,DTZ染色和胰岛素免疫组化染色阳性,胰岛素分泌细胞的分化率平均为13.6%±3.7%,在5.6mmol/L和25mmol/L葡萄糖浓度作用下培养液中胰岛素水平分别为(0.04±0.01)ng/mL和(0.09±0.02)ng/mL。【结论】体外联合应用GLP-1、betacellulin、activinA、bFGF和nicotinamide5种生长因子能将小鼠ES细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞,但胰岛素分泌功能较差。 展开更多
关键词 胰岛素分泌细胞 GLP-1 FGF 生长因子 胰岛素水平 干细胞分化 联合诱导 分化细胞 小鼠胚胎 ES细胞
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Blockade of cholecystokinin-2 receptor and cyclooxygenase-2 synergistically induces cell apoptosis, and inhibits the proliferation of human gastric cancer cells in vitro 被引量:33
4
作者 Sun, W. H. 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1213-1213,共1页
Gastrin and cyclooxygenase-2(COX-2) playimportant roles in the carcinogenesis and progression ofgastric cancer.However,it remains unknown whether the combination of cholecystokinin-2(CCK-2) receptor antagonist plus CO... Gastrin and cyclooxygenase-2(COX-2) playimportant roles in the carcinogenesis and progression ofgastric cancer.However,it remains unknown whether the combination of cholecystokinin-2(CCK-2) receptor antagonist plus COX-2 inhibitor exerts synergistic anti-tumor effects on human gastric cancer.Here,we demonstrated that the combination of AG-041R(a CCK-2 receptor antagonist) plus NS-398(a selective COX-2 inhibitor) treatment had synergistic effects on proliferation inhibition,apoptosis induction,down-regulation of Bcl-2 and up-regulation of Bax expression in MKN-45 cells.These results indicate that simultaneous targeting of CCK-2 receptor and COX-2 may inhibit gastric cancer development more effectively than targeting either molecule alone.(C)2008 Elsevier Ireland Ltd.All rights reserved. 展开更多
关键词 缩胆囊肿 下垂症 胃癌 治疗方法 临床分析
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JWA is required for arsenic trioxide induced apoptosis in HeLa and MCF-7 cells via reactive oxygen species and mitochondria linked signal pathway 被引量:8
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作者 Zhou, J. H. Ye, J. Zhao, X. J. Li, A. P. Zhou, J. W. 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1648-1648,共1页
关键词 基因 三氧化二砷 诱导方法 细胞凋亡 活性氧 线粒体
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Signal transduction involved in CTGF-induced production of chemokines in mesangial cells
6
作者 Wu, S.H. Lu, C. Dong, L. Chen, Z. Q. 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1639-1639,共1页
关键词 信号转导 结缔组织 生长因子 诱导方法 膜细胞
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基于组学分析的补料策略提高地衣芽孢杆菌HW生长和产孢效率
7
作者 陈琛 王彦婷 +3 位作者 史玥玡 甘天香 黄亚男 王志 《食品科学》 北大核心 2025年第21期137-145,共9页
为研究地衣芽孢杆菌HW在30 L罐发酵后期细胞生长和芽孢形成的限制因素,分析了菌株HW对数生长中期(25 h)与后期(32 h)的转录组及代谢组差异。与对数生长中期组相比,对数生长后期糖酵解基因gapA、pfkA、pyK表达量下调65.1%~80.5%;三羧酸... 为研究地衣芽孢杆菌HW在30 L罐发酵后期细胞生长和芽孢形成的限制因素,分析了菌株HW对数生长中期(25 h)与后期(32 h)的转录组及代谢组差异。与对数生长中期组相比,对数生长后期糖酵解基因gapA、pfkA、pyK表达量下调65.1%~80.5%;三羧酸循环基因sucC、sdhB、fumC下调56.8%~80.2%,相应代谢产物柠檬酸、异柠檬酸、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸丰度降低了32.2%~96.3%。糖异生通路基因pckA、gapB上调1.21、1.29倍。另外,磷壁酸合成基因tagB、tagD、tagO下调54.6%~64.0%,相关代谢物N-乙酰胞壁酸、6-磷酸氨基葡萄糖、尿苷二磷酸-N-乙酰氨基葡萄糖的丰度显著下调35.4%~95.6%。氨基酸代谢相关基因gltA、gltB、gdhA、avtA、serC等下调71.3%~98.8%,而aspB表达上调1.849倍。pdxT、pdxK表达分别下调64.8%、51.4%。对应代谢物谷氨酸、谷氨酰胺、缬氨酸、天冬氨酸丰度降低20%~56%。另外,芽孢合成相关基因spo0A、spo0F、kinA、kinE等下调51%~81%。同时Spo0A~Spo0P的抑制基因abrB、rapH上调1.439~4.653倍,芽孢衣合成基因cotE、cotF、cotA、cotY、cotZ、yhcN下调83.1%~91.2%。同时,芽孢皮层四肽亚单位(如赖氨酰天冬氨酰谷氨酰亮氨酸等)和芽孢衣亚单位三肽(如亮氨酰脯氨酰异亮氨酸等)的丰度下调48.6%~77.1%。说明菌株HW发酵对数期存在能量、磷酸盐供应不足及氨基酸代谢效率不高的瓶颈。基于此在发酵20~26 h匀速补料葡萄糖(终添加量3%),发酵20~22 h匀速补料磷酸盐(终添加量0.1%)和VB_(6)(50 mg/L),使得生物量峰值(33 h)达到5.11×10^(10) CFU/mL,比补料前提高44.7%,芽孢数达4.89×10^(10) CFU/mL,较对照提高60.3%,显著提高了细胞生长及芽孢的生成效率,实验结果为地衣芽孢杆菌高芽孢率工业化生产提供了理论和技术支撑。 展开更多
关键词 地衣芽孢杆菌 细胞生长 补料优化 转录组分析 代谢组分析
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Effects of Methylseleninic Acid on the Proliferation and Cell Cycle in Human High Metastatic Large Cell Lung Cancer Cell Line L9981 and Its Molecular Mechanism
8
作者 Xiaorong ZHONG Yu FAN Li MA Jun CHEN Sen WEI Zhigang LI Hongyu LIU Haisu WAN Zhihao WU Qinghua ZHOU 《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第6期498-499,共2页
Background and Objective Lung cancer is the rst killer of human being in the whole world. Recently, although many treatment strategies have been developed, the anti-cancer effects
关键词 肺癌 临床 治疗 疗效
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高等农业院校细胞生物学实验课程建设研究与实践
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作者 孙虎男 韩英浩 +2 位作者 金美华 臧忠婧 金颖华 《安徽农学通报》 2025年第15期127-130,共4页
为培养高素质生命科学专业人才,本文基于成果导向教育(OBE)理念,对细胞生物学实验课教学内容、教学模式、实验资源、师资队伍等方面的现状进行分析,并进行该课程教学改革实践。目前,该课程与现代农业生产需求相匹配的新型实验不足,部分... 为培养高素质生命科学专业人才,本文基于成果导向教育(OBE)理念,对细胞生物学实验课教学内容、教学模式、实验资源、师资队伍等方面的现状进行分析,并进行该课程教学改革实践。目前,该课程与现代农业生产需求相匹配的新型实验不足,部分课堂教学以“教师主导—学生操作”模式为主,实验耗材供应不足,具有跨学科背景的教师相对较少。教学改革方面,对实验项目进行分阶段调整,采用基础实验、示范性实验、综合性实验、应用性实验的循序渐进式课程结构体系;应用“基于教学环节的提出问题—自主学习与讨论—汇报设计方案—实施实验操作”的教学模式,并引入问题导向学习(PBL)等模式;优化资源配置,有序更新实验设备;利用农场资源建立实践教学基地,并定期举办技能竞赛活动;构建多元化评价体系,进行过程性评价考核;提升师资教学能力,建立常态化的青年教师发展制度。实践表明,该教学改革对培养学生实践能力和创新思维具有明显效果,提高了学生的课堂参与度,全面培养其科研素质。本文为类似课程教学改革提供参考。 展开更多
关键词 OBE理念 细胞生物学 动物免疫力 细胞生长
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表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂联合化疗一线治疗表皮生长因子受体突变晚期非小细胞肺癌疗效及安全性的Meta分析 被引量:4
10
作者 史健 王亚静 +2 位作者 侯冉 黄娅婕 段晓阳 《中国全科医学》 北大核心 2025年第11期1383-1394,共12页
背景表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)的靶向治疗已成为表皮生长因子受体(EGFR突变晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的规范治疗方案,但临床发现了不可避免的原发性或继发性耐药最终导致了疾病进展。为此,寻找早期预测有效人群的标志... 背景表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)的靶向治疗已成为表皮生长因子受体(EGFR突变晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的规范治疗方案,但临床发现了不可避免的原发性或继发性耐药最终导致了疾病进展。为此,寻找早期预测有效人群的标志物和探索延长或逆转继发性耐药的优化治疗方案成为国内外研究重点。目的依据国内外文献数据系统评价EGFR-TKI联合化疗一线治疗EGFR突变晚期NSCLC的疗效及安全性。方法计算机检索PubMed、Embase、Cochrane Library数据库发布的有关EGFR-TKI联合化疗对比单药EGFR-TKI一线治疗EGFR突变晚期NSCLC患者疗效及安全性的随机对照试验,检索时间为建库至2023年11月。由2名研究者独立筛选文献、提取数据并评价纳入研究的偏倚风险,对无进展生存期(PFS)、总生存期(OS)、客观缓解率(ORR)、疾病控制率(DCR)以及≥3级不良反应等数据收集和分析。基于基线临床特征进行亚组分析,使用RevMan 5.4.1版本进行数据统计分析。结果纳入符合条件的10项研究,共2029例患者,其中EGFR-TKI联合化疗组1049例患者,单纯EGFR-TKI组980例患者。Meta分析结果显示,与单纯EGFR-TKI组相比,EGFR-TKI联合化疗组可延长EGFR突变晚期NSCLC患者的PFS(HR=0.54,95%CI=0.49~0.60,P<0.00001)和OS(HR=0.69,95%CI=0.59~0.79,P<0.00001)。与单纯EGFR-TKI组相比,EGFR-TKI联合化疗组可提高EGFR突变晚期NSCLC患者的ORR(OR=1.95,95%CI=1.57~2.42,P<0.00001)和DCR(OR=1.76,95%CI=1.13~2.74,P=0.01)。在伴随脑转移的患者中,与单纯EGFR-TKI治疗相比,EGFR-TKI联合化疗延长EGFR突变晚期NSCLC患者的PFS(HR=0.42,95%CI=0.34~0.52,P<0.00001)和OS(HR=0.69,95%CI=0.51~0.94,P=0.02)。在基线无脑转移的患者中,与单纯EGFR-TKI治疗相比,EGFR-TKI联合化疗延长EGFR突变晚期NSCLC患者的PFS(HR=0.62,95%CI=0.53~0.72,P<0.00001)。EGFR-TKI联合化疗治疗EGFR突变晚期NSCLC患者的≥3级不良反应发生率高于单纯EGFR-TKI治疗(OR=4.25,95%CI=2.74~6.61,P<0.00001)。结论EGFR-TKI联合化疗可显著延长EGFR突变晚期NSCLC患者的一线PFS及OS,尤其是基线脑转移患者;但不良反应发生率增加,尤其是≥3级血液学相关毒副作用发生率,整体是安全可控的。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 表皮生长因子受体突变 表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂 联合治疗 META分析
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大网膜脂肪干细胞旁分泌HGF与加味补阳还五汤抑制腹膜间皮细胞EMT相关性的体外研究 被引量:1
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作者 郑敏麟 王亚楠 +2 位作者 范文江 詹倩倩 陈锋斌 《中华中医药学刊》 北大核心 2025年第1期11-18,I0006,I0007,共10页
目的通过体外研究,探讨加味补阳还五汤抑制的腹膜间皮细胞(PMC)上皮-间充质转化(EMT)防治术后腹腔粘连(PAA)的作用,是否主要通过促进大网膜脂肪干细胞(ADSCs)旁分泌肝细胞生长因子(HGF)。方法实验1明确加味补阳还五汤抑制PMC的EMT作用,... 目的通过体外研究,探讨加味补阳还五汤抑制的腹膜间皮细胞(PMC)上皮-间充质转化(EMT)防治术后腹腔粘连(PAA)的作用,是否主要通过促进大网膜脂肪干细胞(ADSCs)旁分泌肝细胞生长因子(HGF)。方法实验1明确加味补阳还五汤抑制PMC的EMT作用,是该方对PMC的直接作用,还是通过调控大网膜中的ADSCs旁分泌的间接作用:使用加味补阳还五汤与加味补阳还五汤培养ADSCs后制取其条件培养基(以下称“中药培养基”)分别干预EMT模型的PMC,Western Blot法检测EMT相关的蛋白E-钙黏蛋白(E-Cad)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平。实验2明确加味补阳还五汤抑制PMC的EMT作用,是否与大网膜中的ADSCs旁分泌HGF相关:用低表达HGF的ADSCs条件培养基(以下称“低HGF培养基”)、正常ADSCs条件培养基(以下称“普通培养基”)、中药培养基等3种培养基干预PMC,并检测以下指标:(1)用ELISA法检测在干预PMC之前和之后,3种培养基中HGF的含量。(2)Western Blot法、qPCR法、免疫荧光(IF)法检测干预后各组PMC的EMT相关蛋白表达水平,划痕实验检测各组PMC的迁移能力。结果实验1:加味补阳还五汤与中药培养基对EMT相关指标的影响。与模型组相比,加味补阳还五汤组上调E-Cad的蛋白表达(P<0.05),下调α-SMA的蛋白表达(P<0.05);中药培养基组显著上调了E-Cad的蛋白表达(P<0.01),显著下调α-SMA的蛋白表达(P<0.01)。与加味补阳还五汤组相比,中药培养基组上调E-Cad的蛋白表达(P<0.05),显著下调α-SMA的蛋白表达(P<0.01)。实验2:(1)作用于PMC前后,3种不同的培养基中HGF含量的比较:作用于PMC前,相比于普通培养基,低HGF培养基中含量显著降低(P<0.01),中药培养基中含量显著增加(P<0.01);作用于PMC后,各培养基组含量均显著性下降。(2)EMT相关蛋白表达情况:综合Western Blot、qPCR、IF结果,与模型组相比,各培养基组均可升高E-Cad表达(P<0.05或P<0.01),降低α-SMA、VIM表达(P<0.05或P<0.01),各培养基组均可抑制PMC的EMT,效果依次为中药培养基组>普通培养基组>低HGF培养基组。(3)发生EMT的细胞迁移能力变化情况:干预24、48 h后,与模型组相比,各组愈合率均有显著下降(P<0.01),各组培养基均可降低EMT模型的R的迁移能力,效果依次为中药培养基组>普通培养基组>低HGF培养基组。(4)EMT相关蛋白表达与HGF含量相关性分析:E-Cad蛋白表达量与HGF含量呈正相关性(P<0.05),α-SMA、VIM蛋白表达量与HGF含量呈负相关性(P<0.05或P<0.01)。结论加味补阳还五汤抑制PMC的EMT防治PAA的疗效可能是多靶点的,既有对PMC的直接作用,也有通过增强大网膜中的ADSCs旁分泌HGF的间接作用,而后者更为主要。 展开更多
关键词 加味补阳还五汤 术后腹腔粘连 腹膜间皮细胞 脂肪间充质干细胞 肝细胞生长因子 上皮-间充质转化
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红花多糖对结直肠癌小鼠肿瘤生长及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白信号通路的影响 被引量:1
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作者 王伟 王敏 +1 位作者 成敏敏 张婷婷 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第5期670-675,共6页
目的探讨红花多糖对结直肠癌小鼠肿瘤生长的作用及对磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路的影响。方法接种结直肠癌SW480... 目的探讨红花多糖对结直肠癌小鼠肿瘤生长的作用及对磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路的影响。方法接种结直肠癌SW480细胞建立结直肠癌肿瘤小鼠模型,将建模成功小鼠分为模型组、红花多糖低剂量组[15 mg/(kg·d)]、红花多糖中剂量组[45 mg/(kg·d)]、红花多糖高剂量组[135 mg/(kg·d)],给药结束后,测定小鼠肿瘤体积、质量和抑瘤率;免疫组化染色法检测增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡情况;苏木精伊红(HE)染色观察小鼠肿瘤组织形态;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组小鼠肿瘤组织PI3K、Akt、mTOR表达水平;免疫印迹法检测各肿瘤组织c-Myc、Bcl-2关联X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)、PI3K/Akt/mTOR通路蛋白表达水平。结果与模型组相比,红花多糖(低、中、高)剂量组小鼠肿瘤质量和肿瘤体积、PI3K、Akt、mTOR mRNA及p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR表达水平、c-Myc蛋白降低,Bax蛋白表达升高(P<0.05),随红花多糖浓度升高,抑瘤率也呈升高趋势(P<0.05)。模型组小鼠肿瘤组织中有较多的PCNA阳性细胞;TUNEL染色阳性细胞(绿色)表达很少,细胞凋亡率较低;肿瘤组织细胞排列紧密,体积较大,分化程度较低;红花多糖各剂量组小鼠肿瘤组织中PCNA表达显著减少,TUNEL染色阳性细胞(绿色)显著增加,细胞凋亡率升高(P<0.05),肿瘤组织细胞排列松散,细胞核皱缩,有较多坏死细胞。结论红花多糖可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路来抑制结直肠癌小鼠肿瘤生长。 展开更多
关键词 红花多糖 结直肠癌 PI3K/Akt/mTOR信号通路 肿瘤生长 增殖细胞核抗原 细胞凋亡 C-MYC Bcl-2关联X蛋白
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乳酸对地衣芽孢杆菌HK高密度发酵的影响 被引量:1
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作者 赵艳梅 鲁佳康 +4 位作者 史玥玡 王彦婷 黄亚男 陈雄 王志 《食品工业科技》 北大核心 2025年第7期151-160,共10页
为了提高地衣芽孢杆菌HK(Bacillus licheniformis HK)的生物量和芽孢率,在20 L罐水平考察了发酵16~32 h耦合pH7.0流加乳酸(终浓度2.0%)对其生长代谢及产孢的影响,并基于转录组与代谢组差异分析了乳酸的代谢调控机制。结果表明:乳酸补料... 为了提高地衣芽孢杆菌HK(Bacillus licheniformis HK)的生物量和芽孢率,在20 L罐水平考察了发酵16~32 h耦合pH7.0流加乳酸(终浓度2.0%)对其生长代谢及产孢的影响,并基于转录组与代谢组差异分析了乳酸的代谢调控机制。结果表明:乳酸补料组的峰值生物量(30 h)为5.43×10^(10)CFU/mL,较对照(基础发酵组)提高54.3%;芽孢数为5.36×10^(10)CFU/mL,较对照提高60.0%。乳酸补料组的糖异生和磷酸戊糖途径关键基因ldh、pckA、gapB、zwf、tkt较对照上调2.8~9.3倍;同时,其标志代谢物丙酮酸、6-磷酸果糖、1,3-二磷酸甘油酸、6-磷酸葡萄糖酸、5-磷酸-核酮糖、7-磷酸景天庚酮糖的丰度较对照增加1.55~12.6倍。TCA循环和氧化磷酸化关键基因citZ、icd、citB、odhB、atpAB、ndh、yumB、qcrABC、ctaODC、ythA、sdhAB表达较对照下调34.2%~96.8%,而硝酸盐呼吸代谢基因nasBCD较对照上调107.4~287.3倍。与之相应的胞内关键代谢物顺乌头酸、异柠檬酸和柠檬酸丰度较对照降低52.6%~62.5%,而NAD+、NADH丰度较对照增加1.6和2.7倍。同时,磷壁酸的前体3-磷酸甘油、肽聚糖的前体UDP-N-乙酰胞壁酸和UDP-N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酸-D-谷氨酸的丰度较对照提高了1.5~14倍;而且,芽孢生成相关基因phrAC、cotP、cotA、yeek、yheD、tasA、gerQ、yuzJ的表达较对照上调1.4~5.7倍,而rapAB、abrB、yisI、ynzD和spo0E较对照下调60.7%~96.7%。说明乳酸增强了糖异生、磷酸戊糖途径、硝酸盐呼吸、细胞壁合成,从而促进了细胞生长及芽孢的生成效率。本文结果为地衣芽孢杆菌高密度发酵生产提供了理论支撑。 展开更多
关键词 地衣芽孢杆菌 乳酸 细胞生长 芽孢 转录组分析 代谢组分析
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Regulation effect of vascular endothelial growth factor on vascularization and angiogenesis in developmental human fetal retinas
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作者 SONGYue WANGYi 《白求恩医科大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第3期221-225,共5页
目的 :研究血管内皮生长因子 ( Vascular endothelial growth factor VEGF)对人胚胎视网膜血管发生的调节作用。方法 :收集 54例 9~ 4 0周龄胎儿眼球后壁标本 ,免疫组织化学染色 ,光镜观察。结果 :1VEGF在视网膜的表达呈波峰式分布 ,... 目的 :研究血管内皮生长因子 ( Vascular endothelial growth factor VEGF)对人胚胎视网膜血管发生的调节作用。方法 :收集 54例 9~ 4 0周龄胎儿眼球后壁标本 ,免疫组织化学染色 ,光镜观察。结果 :1VEGF在视网膜的表达呈波峰式分布 ,高峰在 9~ 13周及 2 6周左右。 2节细胞层的梭形细胞(血管内皮细胞前体细胞 )、血管内皮细胞呈增殖细胞核抗原 ( Proliferation cell nucelear antigen,PCNA)免疫反应阳性 ,水平波动 ,高峰在 9~ 13周及 2 1周前后 ,此期间梭形细胞不断增殖、分化形成内皮细胞索 ,经改建形成视网膜内层血管 ,2 6、34周起见内核层内、外缘血管内皮细胞呈 PCNA免疫反应阳性 ,并保持至足月。 3视网膜 VEGF表达量与梭形细胞、血管内皮细胞 PCNA表达量呈显著正相关( r=0 .736,P<0 .0 1)。结论 展开更多
关键词 视网膜 血管内皮生长因子 血管发生 梭形细胞
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外泌体负载的miR-520a-5p对胎鼠宫内生长受限妊娠结局的改善作用及其机制
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作者 相萌 徐冰 +2 位作者 王培莎 刘思旗 张少华 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第5期1230-1239,共10页
目的:探讨外泌体(Exos)负载的微小RNA-520a-5p(miR-520a-5p)对胎鼠宫内生长受限(FGR)妊娠结局的影响,并阐明其作用机制。方法:体外培养小鼠胎盘间充质干细胞(MSCs),并利用miR-520a-5p腺病毒载体(Ad-miR-520a-5p)转染获得高负载miR-520a... 目的:探讨外泌体(Exos)负载的微小RNA-520a-5p(miR-520a-5p)对胎鼠宫内生长受限(FGR)妊娠结局的影响,并阐明其作用机制。方法:体外培养小鼠胎盘间充质干细胞(MSCs),并利用miR-520a-5p腺病毒载体(Ad-miR-520a-5p)转染获得高负载miR-520a-5p的Exos(miR-520a-5p-MSCs-Exos)并进行鉴定。C57BL/6小鼠按照雌雄2∶1的比例合笼交配成功妊娠,将40只怀孕小鼠分为对照组、FGR组、NC-MSCs-Exos组和miR-520a-5p-MSCs-Exos组,每组10只。除对照组外,其余组小鼠采用孕期过度暴露地塞米松(DEX)诱发妊娠期母体小鼠的FGR模型。检测胎鼠出生体质量和生后1、2、3及4周体质量,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组小鼠胎盘组织中miR-520a-5p、DNA甲基转移酶3b(DNMT3b)和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达水平,Western blotting法检测各组小鼠胎盘组织中DNMT3b和VEGF蛋白表达水平,甲基化特异性PCR(MSP)分析各组小鼠胎盘组织中VEGF启动子甲基化率,双荧光素酶报告基因实验验证miR-520a-5p与DNMT3b之间的靶向关系。结果:透射电子显微镜(TEM)和纳米粒子追踪分析(NTA)分析,Exos呈球形,粒径集中在100 nm附近;Western blotting法,Exos表面生物标志物CD63和CD81均呈阳性表达;RT-qPCR法,与NC-MSCs-Exos和Ad-NC-MSCs-Exos比较,Ad-miR-520a-5p-MSCs-Exos中miR-520a-5p表达水平升高(P<0.001)。4组子代小鼠出生体质量和生后1、2及3周体质量比较差异均有统计学意义(F=36.084,F=19.851,F=77.755,F=103.223;P<0.001)。与对照组比较,FGR组子代小鼠出生体质量和生后1、2及3周体质量均降低(P<0.05);与FGR组和NC-MSCs-Exos组比较,miR-520a-5p-MSCs-Exos组子代小鼠出生体质量和生后1、2及3周体质量均升高(P<0.05)。单因素方差分析,4组小鼠胎盘组织中miR-520a-5p、DNMT3b和VEGF mRNA表达水平比较差异有统计学意义(F=103.224,F=856.460,F=214.563;P<0.001);组间两两比较,与对照组比较,FGR组小鼠胎盘组织中miR-520a-5p和VEGF mRNA表达水平降低(P<0.05),DNMT3b mRNA表达水平升高(P<0.05);与FGR组和NC-MSCs-Exos组比较,miR-520a-5p-MSCs-Exos组小鼠胎盘组织中miR-520a-5p和VEGF mRNA表达水平升高(P<0.05),DNMT3b mRNA表达水平降低(P<0.05)。单因素方差分析,4组小鼠胎盘组织中DNMT3b和VEGF蛋白表达水平比较差异有统计学意义(F=245.601,F=149.360;P<0.001);组间两两比较,与对照组比较,FGR组小鼠胎盘组织中DNMT3b蛋白水平升高(P<0.05),VEGF蛋白表达水平降低(P<0.05);与FGR组和NC-MSCs-Exos组比较,miR-520a-5p-MSCs-Exos组小鼠胎盘组织中DNMT3b蛋白表达水平降低(P<0.05),VEGF蛋白表达水平升高(P<0.05)。单因素方差分析,4组小鼠胎盘组织中VEGF启动子甲基化率比较差异有统计学意义(F=687.096,P<0.001);组间两两比较,与对照组比较,FGR组小鼠胎盘组织中VEGF启动子甲基化率升高(P<0.05);与FGR组和NC-MSCs-Exos组比较,miR-520a-5p-MSCs-Exos组小鼠胎盘组织中VEGF启动子甲基化率降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验,与miR-NC组比较,miR-520a-5p组DNMT3b-WT报告载体细胞的荧光素酶活性明显降低(P<0.05);与miR-NC组比较,miR-520a-5p组DNMT3b-MUT报告载体细胞的荧光素酶活性无明显改变,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:高负载miR-520a-5p的MSCs来源的Exos可能通过靶向下调DNMT3b表达,抑制VEGF甲基化,促进VEGF表达,改善FGR胎鼠妊娠结局。 展开更多
关键词 胎儿宫内生长受限 外泌体 间充质干细胞 微小RNA-520a-5p DNA甲基转移酶3B 血管内皮生长因子
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FGF18通过上调BMP2诱导人牙龈成纤维细胞向成骨样细胞分化
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作者 侯亚丽 刘慧娟 +4 位作者 张昊 孙婧媛 宋鹏 刘月瑶 李荷香 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第2期279-285,共7页
目的研究成纤维细胞生长因子18(FGF18)是否能诱导体外分离培养的人牙龈成纤维细胞(HGFs)向成骨样细胞分化,并探究其成骨机制。方法组织块法分离培养HGFs并鉴定。取第3代HGFs,分为实验组和对照组。实验组加入FGF18和L-DMEM、对照组加入L-... 目的研究成纤维细胞生长因子18(FGF18)是否能诱导体外分离培养的人牙龈成纤维细胞(HGFs)向成骨样细胞分化,并探究其成骨机制。方法组织块法分离培养HGFs并鉴定。取第3代HGFs,分为实验组和对照组。实验组加入FGF18和L-DMEM、对照组加入L-DMEM。噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度FGF18(0、0.01、0.02、0.04、0.06 mg/L)对HGFs增殖影响;碱性磷酸酶(ALP)和茜素红染色检测成骨能力和矿化能力;RT-PCR、免疫细胞化学染色及Western blot检测成骨相关基因、蛋白和BMP信号通路中BMP2基因和蛋白表达情况。结果与对照组比较,实验组培养3、5、7、9、11 d均可促进HGFs增殖(P<0.05);培养14、21 d ALP活性、矿物盐沉积均增高(P<0.05),ALP、OPN、OCN及BMP信号通路中BMP2 mRNA表达均明显增高(P<0.01)。培养21 d OPN、OCN及BMP2蛋白表达较培养14 d明显增高(P<0.01)。结论FGF18能促进HGFs增殖,诱导HGFs向功能性成骨样细胞分化,其成骨机制与上调BMP2有关。 展开更多
关键词 人牙龈成纤维细胞 FGF18 成骨 诱导 细胞分化 增殖
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二甲双胍调控肺癌A549细胞上皮间质转化及机制研究
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作者 陈曦 汤涛 +4 位作者 俞鹏翼 胡源源 谢雯莹 李青 王辉 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第2期348-355,共8页
目的探讨二甲双胍在肺癌A549细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用及其可能机制。方法体外培养A549细胞,二甲双胍干预后,荧光染色观察细胞形态,RT-PCR检测E-cadherin、N-cadherin、SMA和Vimentin等mRNA表... 目的探讨二甲双胍在肺癌A549细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用及其可能机制。方法体外培养A549细胞,二甲双胍干预后,荧光染色观察细胞形态,RT-PCR检测E-cadherin、N-cadherin、SMA和Vimentin等mRNA表达。利用高通量测序研究二甲双胍对A549细胞上皮间质转化的调控作用。通过TGF-β1诱导构建细胞上皮间质转化模型,二甲双胍干预后,观察A549细胞形态。Western blot检测神经生长因子NGF、E-cadherin、N-cadherin、SMA和Vimentin等蛋白表达。转染si-NGF,检测A549细胞中E-cadherin、N-cadherin、SMA和Vimentin等蛋白表达,细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果二甲双胍干预后,细胞失去间质样形态,细胞变圆、集落变少,贴壁性能下降。RT-PCR和高通量测序结果均显示间质转化相关的基因如N-cadherin、SMA和Vimentin表达下调,上皮转化相关的基因如ZO-1、E-cadherin表达上调,并进一步发现神经生长因子NGF的表达显著上调。转染si-NGF后,二甲双胍处理的A549细胞上皮标志物E-cadherin的表达下调,间质标志物N-cadherin、Vimentin、SMA的表达上调。抑制NGF表达后,细胞迁移能力显著提高。结论二甲双胍可诱导肺癌A549细胞E-cadherin表达上调,N-cadherin、Vimentin、SMA表达下降,抑制细胞上皮间质转化,而NGF信号分子可能起重要作用。 展开更多
关键词 肺癌 二甲双胍 上皮间质转化 神经细胞生长因子 增殖 迁移
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姜花杂交群体极端株高的表型差异及转录组分析
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作者 梁漩国 王芳 +1 位作者 玉云祎 范燕萍 《华南农业大学学报》 北大核心 2025年第4期558-568,共11页
【目的】姜花Hedychium‘白泰’与金姜花杂交F1代群体内株高差异显著,本研究通过株高表型分析和转录组测序(RNA-seq)分析,深入挖掘影响姜花株高的关键基因,为姜花分子育种和株型改良提供重要的参考依据。【方法】选用姜花杂交群体中最高... 【目的】姜花Hedychium‘白泰’与金姜花杂交F1代群体内株高差异显著,本研究通过株高表型分析和转录组测序(RNA-seq)分析,深入挖掘影响姜花株高的关键基因,为姜花分子育种和株型改良提供重要的参考依据。【方法】选用姜花杂交群体中最高的20株及最矮的20株进行株高、节间长度和节间细胞长度统计。建立地上茎分区A~D,通过相关性分析确定影响株高差异的主要因素,通过节间长度与节间细胞长度的差异比较分析确定差异生长部位。利用RNA-seq检测高、矮单株差异生长部位的mRNA表达水平。利用生物信息学方法筛选差异表达基因(DEGs),结合文献支撑筛选株高调控相关基因并进行qRT-PCR验证。【结果】姜花杂交群体植株的节间长度与节间细胞长度呈显著正相关,且高、矮植株在C区间的节间长度及节间细胞生长差异最为显著。通过对高、矮表型植株进行RNA-seq分析过滤得到269个差异表达基因,基于转录组数据筛选出13个显著差异表达的株高调控相关基因,其中,HcMYB136、HcNAC140、HcEXPA4、HcEXPB3、HcXTH28、HcXTH8、HcCYCB1-1和HcCYCD3-2在3株极端矮单株中表达下调,而HcMYB238、HcMYB254、HcNAC126、HcbZIP50和HcCDC27B在3株极端矮单株中表达上调。qRT-PCR结果表明,这13个基因的表达变化趋势与转录组数据高度一致。【结论】姜花杂交群体植株极端株高的表型差异主要影响因素是节间细胞长度,高、矮植株在C区间的生长差异最为显著。姜花极端株高表型的差异是一个复杂的生物学过程,可能由多个基因的协同调控所致。 展开更多
关键词 姜花属 植株高度 节间长度 细胞生长 转录组测序
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利多卡因对结肠癌细胞增殖和迁移的作用及其机制
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作者 罗曼 宋振国 《天津师范大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第1期22-26,共5页
为了探究麻醉剂利多卡因对结肠癌的治疗作用及机制,选取人结肠癌细胞系LOVO和HCT116进行分组实验.用2 mmol/L的利多卡因(0 mmol/L为对照组)处理LOVO和HCT116细胞24 h,用CCK-8和克隆形成实验评估细胞生长,用Transwell和划痕实验评估细胞... 为了探究麻醉剂利多卡因对结肠癌的治疗作用及机制,选取人结肠癌细胞系LOVO和HCT116进行分组实验.用2 mmol/L的利多卡因(0 mmol/L为对照组)处理LOVO和HCT116细胞24 h,用CCK-8和克隆形成实验评估细胞生长,用Transwell和划痕实验评估细胞运动能力,用免疫印迹和铁检测试剂盒评估铁死亡,并通过免疫印迹实验评估PI3K/Akt/mTOR信号通路的激活.结果显示:①同对照组相比,利多卡因能够显著抑制人结肠癌细胞的生长和移动性;②利多卡因在结肠癌细胞中能够促进铁死亡;③利多卡因的抗肿瘤效应与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路有关,该通路对细胞生存和生长至关重要.总之,利多卡因可通过抑制结肠癌细胞生长和运动、促进铁死亡和抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路,对结肠癌产生一定的治疗效果. 展开更多
关键词 结肠癌 利多卡因 细胞生长 铁死亡 PI3K/Akt/mTOR信号通路
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酵母细胞壁对湖羊生长性能、血浆生化指标及抗氧化能力的影响 被引量:1
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作者 田亚原 安佳秀 +3 位作者 赵颖 付叶 吴文旋 杨艺 《饲料研究》 北大核心 2025年第5期8-11,共4页
试验旨在研究酵母细胞壁对育肥期湖羊生长性能、血浆生化指标及抗氧化能力的影响。随机选取体况良好、体重(31.70±1.38)kg的育肥期湖羊20只,随机分成2组,每组10个重复,每个重复1只羊。对照组饲喂基础饲粮,酵母细胞壁组在基础饲粮... 试验旨在研究酵母细胞壁对育肥期湖羊生长性能、血浆生化指标及抗氧化能力的影响。随机选取体况良好、体重(31.70±1.38)kg的育肥期湖羊20只,随机分成2组,每组10个重复,每个重复1只羊。对照组饲喂基础饲粮,酵母细胞壁组在基础饲粮中添加1.5 g/kg酵母细胞壁(以干物质计)。预试期7 d,正式试验期30 d。结果表明,与对照组相比,饲粮中添加酵母细胞壁后,湖羊的平均日采食量(ADFI)显著升高(P<0.05),血浆中甘油三酯(TG)和尿酸(UA)的含量显著降低(P<0.05),抗氧化指标差异均不显著(P>0.05)。研究表明,在饲粮中添加1.5 g/kg酵母细胞壁可提高育肥期湖羊的生长性能,维持代谢稳定,提高饲粮蛋白利用率。 展开更多
关键词 酵母细胞壁 湖羊 生长性能 血浆生化指标 抗氧化能力
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