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慢病毒介导的CARMA1稳定沉默抑制K562细胞的侵袭和转移能力
被引量：
1
1
作者
刘枋
王凌燕
+2 位作者
李洁羽
陈淑萍
叶韵斌
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第7期691-695,共5页
目的研究RNAi技术稳定沉默caspase募集结构域膜相关鸟苷酸激酶蛋白1(CARMA1)基因后对K562细胞增殖、克隆形成和侵袭转移的影响。方法应用慢病毒介导的RNAi技术构建稳定沉默CARMA1基因的K562细胞,反转录PCR和Western blot法分别检测CARMA...
目的研究RNAi技术稳定沉默caspase募集结构域膜相关鸟苷酸激酶蛋白1(CARMA1)基因后对K562细胞增殖、克隆形成和侵袭转移的影响。方法应用慢病毒介导的RNAi技术构建稳定沉默CARMA1基因的K562细胞,反转录PCR和Western blot法分别检测CARMA1 mRNA和蛋白的抑制情况。应用台盼蓝拒染法分析细胞增殖情况,克隆形成实验观察细胞克隆形成,TranswellTM实验(含Matrigel或不含Matrigel)检测体外迁移与侵袭能力的改变。反转录PCR和Western blot技术分析相关信号通路分子的改变,并探讨可能机制。结果成功构建6株细胞株:其中1株为阴性对照(K562/sh-eGFP),另5株为CARMA1基因沉默的细胞株。K562/shCARMA 1-93对CARMA1的抑制效果最好,利用该模型进行后续研究。台盼蓝拒染法和克隆形成实验表明,K562/shCARMA 1-93的生长和克隆形成能力受到明显抑制(P<0.01)。与空白对照K562和阴性对照K562/sh-eGFP相比,细胞生长抑制率分别为29.3%和28.6%;克隆形成抑制率分别为37.6%和34.1%。体外迁移和侵袭转移实验证实,与对照组相比,K562/shCARMA1-93穿膜细胞数明显减少,有统计学差异(P<0.01)。CARMA1受抑制后,信号通路分子核转录因子-κB(NF-κB)及早期生长反应基因1(EGR1)的表达也随之下降。结论 CARMA1的稳定沉默会抑制K562细胞的增殖、克隆形成和侵袭转移,这可能与NF-κB、JNK/EGR-1信号通路受抑制有关。
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关键词
caspase
募集
结构域
膜
相关
鸟苷
酸
激酶
蛋白
1(
carma
1)
慢性粒细胞性白血病
慢病毒
迁移
侵袭
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职称材料
CARMA3调控NF-κB信号通路激活的研究进展
被引量：
2
2
作者
周洋
郑文燕
+3 位作者
胡帝宇
童智子
蒋松宏
王怡丹
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第4期149-154,共6页
含半胱天冬酶募集结构域的膜相关鸟苷酸激酶蛋白3(caspase recruitment domain and membrane-associated guanylate kinase-like domain protein 3,CARMA3)属于CARMA家族,是一个新型的骨架蛋白。CARMA3通过调控NF-κB信号通路的激活,影...
含半胱天冬酶募集结构域的膜相关鸟苷酸激酶蛋白3(caspase recruitment domain and membrane-associated guanylate kinase-like domain protein 3,CARMA3)属于CARMA家族,是一个新型的骨架蛋白。CARMA3通过调控NF-κB信号通路的激活,影响细胞的周期进程、增殖和信号转导,从而影响癌症的发生和细胞应答。论文介绍了NF-κB信号通路的激活过程、G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptors,GPCRs)的配体、DNA损伤和感染可激活CARMA3介导的NF-κB信号通路、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的活性水平受CARMA3介导的NF-κB信号通路的影响、A20负调控CARMA3介导的NF-κB信号通路,以及CARMA3与癌症发生的关联,旨在为基于NF-κB信号通路的细胞周期进程、增殖和细胞应答方面的研究提供参考。
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关键词
含半胱天冬酶
募集
结构域
的
膜
相关
鸟苷
酸
激酶
蛋白
3(
carma
3)
NF-ΚB
G
蛋白
偶联受体(GPCRs)
血管内皮生长因子(VEGF)
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职称材料
题名
慢病毒介导的CARMA1稳定沉默抑制K562细胞的侵袭和转移能力
被引量：
1
1
作者
刘枋
王凌燕
李洁羽
陈淑萍
叶韵斌
机构
福建医科大学教学医院
福建省肿瘤转化医学重点实验室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第7期691-695,共5页
基金
福建省自然科学基金(2012J01327)
文摘
目的研究RNAi技术稳定沉默caspase募集结构域膜相关鸟苷酸激酶蛋白1(CARMA1)基因后对K562细胞增殖、克隆形成和侵袭转移的影响。方法应用慢病毒介导的RNAi技术构建稳定沉默CARMA1基因的K562细胞,反转录PCR和Western blot法分别检测CARMA1 mRNA和蛋白的抑制情况。应用台盼蓝拒染法分析细胞增殖情况,克隆形成实验观察细胞克隆形成,TranswellTM实验(含Matrigel或不含Matrigel)检测体外迁移与侵袭能力的改变。反转录PCR和Western blot技术分析相关信号通路分子的改变,并探讨可能机制。结果成功构建6株细胞株:其中1株为阴性对照(K562/sh-eGFP),另5株为CARMA1基因沉默的细胞株。K562/shCARMA 1-93对CARMA1的抑制效果最好,利用该模型进行后续研究。台盼蓝拒染法和克隆形成实验表明,K562/shCARMA 1-93的生长和克隆形成能力受到明显抑制(P<0.01)。与空白对照K562和阴性对照K562/sh-eGFP相比,细胞生长抑制率分别为29.3%和28.6%;克隆形成抑制率分别为37.6%和34.1%。体外迁移和侵袭转移实验证实,与对照组相比,K562/shCARMA1-93穿膜细胞数明显减少,有统计学差异(P<0.01)。CARMA1受抑制后,信号通路分子核转录因子-κB(NF-κB)及早期生长反应基因1(EGR1)的表达也随之下降。结论 CARMA1的稳定沉默会抑制K562细胞的增殖、克隆形成和侵袭转移,这可能与NF-κB、JNK/EGR-1信号通路受抑制有关。
关键词
caspase
募集
结构域
膜
相关
鸟苷
酸
激酶
蛋白
1(
carma
1)
慢性粒细胞性白血病
慢病毒
迁移
侵袭
Keywords
caspase
recruitment domain membrane-associated guanylate kinase protein 1 （
carma
1 ）
chronic myelogenous leukemia
lentivirus
migration
invasion
分类号
R557.3 [医药卫生—血液循环系统疾病]
R392-33 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
CARMA3调控NF-κB信号通路激活的研究进展
被引量：
2
2
作者
周洋
郑文燕
胡帝宇
童智子
蒋松宏
王怡丹
机构
西南大学动物科学学院
出处
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第4期149-154,共6页
基金
国家自然科学基金项目(31802158)
重庆市基础科学与前沿技术研究专项(cstc2017jcyjAX0361)
西南大学博士基金(含引进人才计划)项目(20700504)
文摘
含半胱天冬酶募集结构域的膜相关鸟苷酸激酶蛋白3(caspase recruitment domain and membrane-associated guanylate kinase-like domain protein 3,CARMA3)属于CARMA家族,是一个新型的骨架蛋白。CARMA3通过调控NF-κB信号通路的激活,影响细胞的周期进程、增殖和信号转导,从而影响癌症的发生和细胞应答。论文介绍了NF-κB信号通路的激活过程、G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptors,GPCRs)的配体、DNA损伤和感染可激活CARMA3介导的NF-κB信号通路、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的活性水平受CARMA3介导的NF-κB信号通路的影响、A20负调控CARMA3介导的NF-κB信号通路,以及CARMA3与癌症发生的关联,旨在为基于NF-κB信号通路的细胞周期进程、增殖和细胞应答方面的研究提供参考。
关键词
含半胱天冬酶
募集
结构域
的
膜
相关
鸟苷
酸
激酶
蛋白
3(
carma
3)
NF-ΚB
G
蛋白
偶联受体(GPCRs)
血管内皮生长因子(VEGF)
Keywords
caspase
recruitment domain and membrane-associated guanylate kinase-like domain protein 3 (
carma
3)
NF-κB
GPCRs
VEGF
分类号
Q71 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
慢病毒介导的CARMA1稳定沉默抑制K562细胞的侵袭和转移能力
刘枋
王凌燕
李洁羽
陈淑萍
叶韵斌
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
1
在线阅读
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职称材料
2
CARMA3调控NF-κB信号通路激活的研究进展
周洋
郑文燕
胡帝宇
童智子
蒋松宏
王怡丹
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
2
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