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哈巴苷对急性脑缺血及线粒体介导的Caspase依赖性细胞凋亡信号通路的影响 被引量：13
1
作者 楼烨亮 陈梦静 +5 位作者 王可 龚雪媛 龚恒佩 钟晓明 程汝滨 黄真 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期563-567,共5页
目的探讨哈巴苷对急性脑缺血及线粒体介导的caspase依赖性细胞凋亡通路的影响。方法采用MCAO法建立小鼠急性脑缺血模型,造模后各组立即尾静脉注射(iv)哈巴苷(4、8、12 mg·kg^(-1))、依达拉奉(3.2 mg·kg^(-1)),模型组及假手术... 目的探讨哈巴苷对急性脑缺血及线粒体介导的caspase依赖性细胞凋亡通路的影响。方法采用MCAO法建立小鼠急性脑缺血模型,造模后各组立即尾静脉注射(iv)哈巴苷(4、8、12 mg·kg^(-1))、依达拉奉(3.2 mg·kg^(-1)),模型组及假手术组同法给予等量生理盐水,0.1 mL·(10 g)^(-1)。造模6h后,观测小鼠神经功能评分、脑梗死体积及脑组织形态病理学变化;采用Western blot法测定各组脑组织线粒体中Cyt C及胞质中pro-caspase-3的含量。结果造模6 h后,哈巴苷各剂量组均能明显降低因缺血而增加的小鼠神经功能评分及脑梗死体积(P<0.01,P<0.05);均能不同程度减轻脑组织神经元核固缩、核溶解程度,改善脑组织因缺血造成的病理损伤;能明显上调脑组织线粒体中Cyt C及胞质中pro-caspase-3的表达。结论哈巴苷对急性脑缺血具有保护作用,其保护作用可能与抑制线粒体介导的caspase依赖性细胞凋亡信号通路相关。 展开更多
关键词 哈巴苷 急性脑缺血 线粒体 caspase依赖性细胞凋亡 细胞色素C pro-caspase-3
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葫芦素B通过NAMPT-FoxO3a轴调控线粒体依赖性凋亡影响非小细胞肺癌细胞生物学行为
2
作者 丘楠 任宇虹 +1 位作者 刘加夫 林清华 《华中科技大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第5期626-634,共9页
目的探讨葫芦素B(cucurbitacin B,CuB)通过烟酰胺磷酸核糖基转移酶(nicotinamide phosphoribosyltransferase,NAMPT)/叉头转录因子O亚家族成员3a(forkhead transcription factor O subfamily member 3a,FoxO3a)轴调控线粒体依赖性凋亡... 目的探讨葫芦素B(cucurbitacin B,CuB)通过烟酰胺磷酸核糖基转移酶(nicotinamide phosphoribosyltransferase,NAMPT)/叉头转录因子O亚家族成员3a(forkhead transcription factor O subfamily member 3a,FoxO3a)轴调控线粒体依赖性凋亡途径进而影响非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞生物学行为的分子机制。方法以吉非替尼(gefitinib,GEF)与CuB干预A549细胞,通过网络药理学分析作用靶点与下游通路,并设置不同载体转染组细胞。CCK-8检测细胞活力,Transwell检测细胞侵袭,流式细胞术检测细胞凋亡,JC-1试剂盒检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)水平,试剂盒检测细胞ROS水平,Western blot检测线粒体动力学相关蛋白(DRP1、Mfn1)以及NAMPT和FoxO3a蛋白表达水平,qRT-PCR检测细胞中NAMPT mRNA表达。通过建立裸鼠异种移植瘤模型验证CuB在体内的治疗效果。结果与Control组相比,GEF与CuB干预显著抑制A549细胞活力与侵袭,诱导细胞凋亡,CuB干预显著降低A549细胞MMP水平,促进ROS产生,并上调A549细胞中DRP1水平,抑制Mfn1表达(均P<0.05)。网络药理分析预测NAMPT为CuB治疗靶点,其在A549细胞中高表达。与Vector组相比,过表达NAMPT显著促进A549细胞生长,抑制线粒体依赖性凋亡;与Vector+CuB(100 nmol/L)组相比,过表达NAMPT逆转CuB对A549细胞的作用(P<0.05)。相较于si-NAMPT-NC组,沉默NAMPT显著抑制A549细胞生长,促进线粒体依赖性凋亡,而敲低FoxO3a促进A549细胞活力与侵袭,逆转si-NAMPT对A549细胞的生长抑制作用(P<0.05)。体内实验结果显示,CuB以剂量依赖性抑制裸鼠移植瘤的生长。结论CuB调控NAMPT-FoxO3a轴通过线粒体依赖性凋亡途径抑制NSCLC进展。 展开更多
关键词 葫芦素B 烟酰胺磷酸核糖基转移酶 线粒体依赖性凋亡 非小细胞肺癌
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跑台运动对Sarcopenia小鼠Caspase依赖与非依赖性细胞凋亡基因mRNA表达的影响 被引量：5
3
作者 李海鹏 杨东升 +3 位作者 王立丰 关尚一 丁树哲 卢健 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期625-629,共5页
目的:探讨跑台运动对Sarcopenia小鼠骨骼肌线粒体介导的Caspase依赖与非依赖性细胞凋亡信号通路中凋亡基因mRNA的影响。方法:以30只快速老化小鼠(SAMP8)为研究对象,将其分为青年安静组(YC组,12周龄)、老年安静组(OC组,29周龄)和老年跑... 目的:探讨跑台运动对Sarcopenia小鼠骨骼肌线粒体介导的Caspase依赖与非依赖性细胞凋亡信号通路中凋亡基因mRNA的影响。方法:以30只快速老化小鼠(SAMP8)为研究对象,将其分为青年安静组(YC组,12周龄)、老年安静组(OC组,29周龄)和老年跑台运动组(OE组,29周龄),每组10只。OE组适应性饲养1周后开始跑台运动,每天1次,每周运动5天,持续8周,末次训练结束后24～48 h内将3组小鼠分别断头处死取腓肠肌,以小鼠腓肠肌质量(mg)除以对应体重(g)求得Sarcopenia Index(SI)。采用实时荧光定量PCR方法,分别检测各组腓肠肌Caspase依赖性凋亡通路相关基因(Cyt C、apaf-1、Caspase-9和Caspase-3)和Caspase非依赖性凋亡通路相关基因(PARP、AIF和Endo G)mRNA表达。结果:(1)OC组腓肠肌SI值显著低于YC组,OE组SI值与OC组比较未见显著性差异。(2)与YC组相比,OC组腓肠肌apaf-1、Caspase-3和PARP mRNA表达均显著上调,AIF mRNA表达显著下调,而Cyt C、Caspase-9和Endo G mRNA表达未见显著变化。(3)与OC组相比,OE组腓肠肌Cyt C和AIF mRNA表达显著上调,Caspase-3和PARP mRNA表达显著下调,而apaf-1、Caspase-9和Endo G mRNA未见显著变化。结论:与Caspase非依赖性凋亡途径相比,Caspase依赖性凋亡途径在Sarcopenia发生中发挥更重要的作用;跑台运动一定程度上弱化衰老骨骼肌Caspase依赖性凋亡通路的促凋亡基因mRNA表达,但对AIF诱导的Caspase非依赖性凋亡基因mRNA表达却呈现上调作用。 展开更多
关键词 跑台运动 肌肉衰减征 细胞凋亡 caspase
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哈巴苷对急性脑缺血小鼠神经细胞及caspase非依赖性凋亡通路的影响 被引量：8
4
作者 周炳文 楼烨亮 +1 位作者 钟晓明 黄真 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1754-1761,共8页
目的研究哈巴苷对急性脑缺血小鼠海马神经细胞、线粒体功能及caspase非依赖性细胞凋亡通路的影响。方法采用大脑中动脉阻塞法(middle cerebral artery occlusion,MCAO)复制小鼠急性脑缺血模型。造模后,各组分别立即尾静脉注射哈巴苷(4、... 目的研究哈巴苷对急性脑缺血小鼠海马神经细胞、线粒体功能及caspase非依赖性细胞凋亡通路的影响。方法采用大脑中动脉阻塞法(middle cerebral artery occlusion,MCAO)复制小鼠急性脑缺血模型。造模后,各组分别立即尾静脉注射哈巴苷(4、8、12 mg·kg^(-1))、依达拉奉(3.2 mg·kg^(-1)),模型组及假手术组同法给予等量生理盐水(10 m L·kg^(-1))。造模6 h后,采用流式细胞术检测MCAO小鼠海马神经细胞凋亡率及线粒体膜电位;透射电镜观察MCAO小鼠海马神经细胞线粒体内外膜的清晰度、线粒体嵴的完整性、线粒体基质电子密度的高低变化及线粒体肿胀情况;采用Western blot法检测MCAO小鼠脑组织线粒体中AIF及Endo G的蛋白表达;采用q PCR法检测MCAO小鼠海马组织中AIF及Endo G mRNA的表达。结果造模6 h后,与假手术组相比,模型组小鼠脑组织海马神经细胞凋亡率明显增加(P<0.01);海马神经细胞线粒体膜电位明显降低(P<0.01);神经细胞线粒体超微结构受损严重,线粒体结构松散,可见明显肿胀;脑组织线粒体中AIF及Endo G蛋白表达明显降低,线粒体AIF及Endo G蛋白释放增加(P<0.01);海马组织AIF及Endo G mRNA表达明显增加(P<0.01);与模型组相比,哈巴苷各剂量组小鼠脑组织海马神经细胞凋亡率明显降低(P<0.05,P<0.01);海马神经细胞线粒体膜电位明显升高(P<0.01);神经细胞线粒体超微结构明显改善;哈巴苷8、12 mg·kg^(-1)组小鼠脑组织线粒体中AIF及Endo G蛋白表达明显增加,线粒体AIF及Endo G蛋白释放减少(P<0.05,P<0.01),哈巴苷4 mg·kg^(-1)组小鼠脑组织线粒体中Endo G蛋白表达明显增加,线粒体Endo G蛋白释放明显减少(P<0.05);哈巴苷8、12 mg·kg^(-1)组小鼠海马组织AIF及Endo G mRNA表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论哈巴苷对急性脑缺血有保护作用,其机制可能与保护大脑神经细胞及线粒体生理活性,抑制caspase非依赖性细胞凋亡通路相关。 展开更多
关键词 哈巴苷 MCAO 神经细胞凋亡 线粒体膜电位 线粒体超微结构 caspase非依赖性凋亡通路
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FAM105A通过caspase依赖性途径和Bcl-2家族诱导细胞凋亡
5
作者 袁梦 赵永浩 +4 位作者 王云姝 刘亦倩 张弦 许华曦 张云武 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1065-1069,共5页
在多细胞有机体中,细胞凋亡对调节正常细胞活动和发育起着关键作用.对参与细胞凋亡的蛋白的鉴定及其机制的阐明具有重要意义.FAM 105 A是新发现的促凋亡基因,过表达会导致细胞凋亡.研究了FAM105A促进细胞凋亡的潜在机制,结果表明,在HEK2... 在多细胞有机体中,细胞凋亡对调节正常细胞活动和发育起着关键作用.对参与细胞凋亡的蛋白的鉴定及其机制的阐明具有重要意义.FAM 105 A是新发现的促凋亡基因,过表达会导致细胞凋亡.研究了FAM105A促进细胞凋亡的潜在机制,结果表明,在HEK293T细胞中过表达FAM105A会导致caspase-3和caspase-9的剪切/激活,同时伴随着多聚ADP-核糖聚合酶(poly ADP ribose polymerase,PARP)的切割/失活.此外,过表达FAM105A能诱导细胞色素c(Cyt c)从线粒体释放到胞质,促凋亡蛋白Bax的表达水平升高,而抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平下降.这些结果表明FAM105A诱导的细胞凋亡过程需要caspase依赖性途径和Bcl-2家族共同参与. 展开更多
关键词 FAM105A 细胞凋亡 caspaseS 细胞色素C BCL-2家族
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槲皮素诱导人鼻咽癌CNE2细胞发生Caspase非依赖性细胞凋亡的研究 被引量：8
6
作者 陈秋生 林春燕 +1 位作者 何康 李明勇 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第7期1038-1041,共4页
目的探讨槲皮素抗鼻咽癌(NPC)CNE2细胞的机制。方法通过CCK-8实验检测槲皮素在CNE2中的抗肿瘤活性;流式细胞术Annexin V-FITC//PI双染法检测细胞凋亡情况;采用Western blot检测槲皮素对CNE2细胞中凋亡标志蛋白、凋亡相关蛋白和凋亡诱导... 目的探讨槲皮素抗鼻咽癌(NPC)CNE2细胞的机制。方法通过CCK-8实验检测槲皮素在CNE2中的抗肿瘤活性;流式细胞术Annexin V-FITC//PI双染法检测细胞凋亡情况;采用Western blot检测槲皮素对CNE2细胞中凋亡标志蛋白、凋亡相关蛋白和凋亡诱导因子(AIF)以及细胞色素C(Cyt-C)的影响。结果槲皮素能抑制CNE2细胞生长、诱导细胞凋亡;Western blot结果显示,槲皮素能下调B淋巴细胞瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)和上调Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达;虽不能激活半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3),但能通过切割DNA修复酶(PARP),促进AIF和Cyt-C从线粒体释放,从而诱导NPC细胞凋亡。结论槲皮素诱导鼻咽癌CNE2细胞发生了Caspase非依赖性细胞凋亡。 展开更多
关键词 槲皮素 鼻咽癌 非caspase依赖性凋亡
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金喜素诱导HL-60细胞凋亡依赖caspase活化 被引量：6
7
作者 陈协群 万幼峰 曹云新 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期650-653,共4页
目的　探讨金喜素诱导急性白血病细胞凋亡的生化机制。方法　采用MTT法测定金喜素对HL 6 0细胞的杀伤作用 ;通过形态学、DNA凝胶电泳及AnnexinVFITC染色 ,研究金喜素对靶细胞的促凋亡活性 ;采用caspase 8、3特异性抑制剂IETD fmk、DEVD ... 目的　探讨金喜素诱导急性白血病细胞凋亡的生化机制。方法　采用MTT法测定金喜素对HL 6 0细胞的杀伤作用 ;通过形态学、DNA凝胶电泳及AnnexinVFITC染色 ,研究金喜素对靶细胞的促凋亡活性 ;采用caspase 8、3特异性抑制剂IETD fmk、DEVD CHO ,分析金喜素介导的靶细胞凋亡与caspase活化的关系。结果　经 0 1μmol·L-1金喜素处理至 8、12及 16h时 ,HL 6 0细胞的存活率依次降至6 2 %± 12 %、、43%± 15 %及 32 %± 10 % ,低于对照 (P <0 0 5 ) ,同时 ,靶细胞逐渐出现磷脂酰丝氨酸外化 ,并产生梯状DNA及凋亡小体 ;经caspase抑制剂与金喜素联合处理12、16h时 ,HL 6 0细胞的存活率高于单用金喜素组 ,分别为77%± 14%、6 5 %± 16 % (IETD fmk组 )与 74%± 12 %、6 0 %± 11% (DEVD CHO组 ) ,同时 ,靶细胞的梯状DNA与凋亡小体的诱生也明显受抑。结论　金喜素对HL 6 0细胞具有较强的促凋亡作用 ,该过程可能依赖caspase 8、caspase 展开更多
关键词 金喜素 HL-60细胞 caspase 细胞凋亡 白血病 抗癌药 药物
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Etoposide经由caspase依赖途径诱导RGC-5细胞凋亡 被引量：1
8
作者 李光宇 范斌 李亚萍 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2008年第8期598-601,共4页
目的研究etoposide诱导视网膜神经节细胞RGC-5细胞死亡的分子机制。方法建立etoposide诱导的RGC-5细胞死亡模型,应用APOPercentageTM及原位TUNEL染色确定RGC-5细胞的死亡方式,并进而利用Westernblot检测细胞内活化caspase-3及PARP-1的... 目的研究etoposide诱导视网膜神经节细胞RGC-5细胞死亡的分子机制。方法建立etoposide诱导的RGC-5细胞死亡模型,应用APOPercentageTM及原位TUNEL染色确定RGC-5细胞的死亡方式,并进而利用Westernblot检测细胞内活化caspase-3及PARP-1的变化情况,并通过广谱caspase抑制剂间接证明是否有caspase依赖途径的激活。结果相对高浓度的etoposide(1～10μmol/L)可以迅速降低RGC-5细胞的活性并诱导死亡;APOPercentageTM及原位TUNEL染色确定etoposide是以凋亡的方式诱导RGC-5细胞死亡;Westernblot显示etoposide诱导后的RGC-5细胞中caspase-3被激活并伴有PARP-1的降解片段出现;广谱caspase抑制剂Z-VAD-fmk可以保护etoposide诱导的RGC-5细胞,提高细胞活性。结论Etoposide经由caspase依赖途径诱导RGC-5细胞凋亡。 展开更多
关键词 视网膜神经节细胞 RGC-5细胞 ETOPOSIDE 细胞凋亡 caspase依赖途径
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Caspase非依赖性细胞死亡的研究进展 被引量：3
9
作者 宋佰芬 崔玉东 曹红伟 《吉林畜牧兽医》 2005年第5期10-13,共4页
细胞凋亡是一种生理性细胞死亡机制,它是由多基因调控的一种细胞的主动的自杀性过程。一般认为它是由蛋白酶caspases通过两种途径激活的。但是,近年来研究发现除caspases引起的细胞凋亡外,还有caspases非依赖性的细胞死亡形式存在,包括... 细胞凋亡是一种生理性细胞死亡机制,它是由多基因调控的一种细胞的主动的自杀性过程。一般认为它是由蛋白酶caspases通过两种途径激活的。但是,近年来研究发现除caspases引起的细胞凋亡外,还有caspases非依赖性的细胞死亡形式存在,包括细胞的自我吞噬作用、细胞蛋白酶体的降解和线粒体途径。这些途径无论是在试验的条件下还是在生理或病理的情况下都可以观察到。目前认为凋亡诱导因子(AIF)在caspases非依赖性的细胞死亡中起关键作用。 展开更多
关键词 caspase 非依赖性 细胞凋亡 AIF
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冬凌草甲素通过激活caspase诱导HeLa细胞凋亡 被引量：37
10
作者 张春玲 吴立军 +2 位作者 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期521-525,共5页
目的　研究冬凌草甲素诱导人子宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用机制。方法　采用形态学观察、DNA凝胶电泳及LDH法。结果　冬凌草甲素能显著诱导HeLa细胞发生凋亡 ,其作用呈明显的量效关系和时间依赖性。形态学观察可见凋亡小体的形成 ,琼脂糖... 目的　研究冬凌草甲素诱导人子宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用机制。方法　采用形态学观察、DNA凝胶电泳及LDH法。结果　冬凌草甲素能显著诱导HeLa细胞发生凋亡 ,其作用呈明显的量效关系和时间依赖性。形态学观察可见凋亡小体的形成 ,琼脂糖凝胶电泳可见凋亡典型的DNA梯带 ;caspase家族抑制剂 ,caspase 1和 3抑制剂能抑制冬凌草甲素诱导HeLa细胞的凋亡 ,6 8 7μmol·L-1冬凌草甲素作用HeLa细胞 12h使caspase 3的活力提高 2倍。 结论　适宜浓度以下 ,冬凌草甲素 (6 8 7μmol·L-1)诱导HeLa细胞凋亡具有浓度与时间依赖性 ,大剂量 (137 4 μmol·L-1)时 ,冬凌草甲素诱导HeLa细胞坏死的程度强于凋亡 ,且通过激活caspase途径诱导HeLa细胞凋亡。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 HELA细胞 凋亡 caspase
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紫草素诱导HeLa细胞凋亡经过caspase激活的机制 被引量：40
11
作者 吴振 吴立军 +2 位作者 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期540-544,共5页
目的　研究紫草素诱导HeLa细胞凋亡的作用机制。方法　MTT法测定紫草素对HeLa细胞的生长抑制实验 ,荧光染色等观察细胞形态学变化 ;DNA电泳、LDH法研究细胞死亡的途径。免疫印迹实验检测相关蛋白的表达。结果　紫草素具有明显的抑制HeL... 目的　研究紫草素诱导HeLa细胞凋亡的作用机制。方法　MTT法测定紫草素对HeLa细胞的生长抑制实验 ,荧光染色等观察细胞形态学变化 ;DNA电泳、LDH法研究细胞死亡的途径。免疫印迹实验检测相关蛋白的表达。结果　紫草素具有明显的抑制HeLa细胞生长的作用 ,并呈明显的量效关系和时间依赖性 ,4 0 μmol·L- 1 的紫草素在 2 4h内可诱导细胞凋亡 ,凋亡途经与死亡受体信号途径相似 ,经历了半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 3和 8(caspase 3和caspase 8)的激活。结论　 4 0 μmol·L- 1 的紫草素可明显地诱导HeLa细胞凋亡 。 展开更多
关键词 紫草素 人宫颈癌HELA细胞 凋亡 caspase 抗肿 瘤活性
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益气养阴通络法对急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡Bax、Bcl-2、Caspase3表达的影响 被引量：20
12
作者 秦琦 李文杰 +3 位作者 王有雪 杨莺 张嘉敏 杨丽 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2019年第6期1392-1395,共4页
目的:观察益气养阴通络法对大鼠心肌细胞凋亡Bax、Bcl-2和Caspase3表达的影响,并探讨其作用机制。方法:健康SD大鼠60只,随机分为6组,正常组、模型组、西药组(盐酸地尔硫卓片)、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组。对模型组、中... 目的:观察益气养阴通络法对大鼠心肌细胞凋亡Bax、Bcl-2和Caspase3表达的影响,并探讨其作用机制。方法:健康SD大鼠60只,随机分为6组,正常组、模型组、西药组(盐酸地尔硫卓片)、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组。对模型组、中药组、西药组实验动物进行造模,复制急性心肌缺血的模型。西药组及中药组分别给予盐酸地尔硫卓片、中药双参通脉颗粒灌胃2周。采用Western Blotting法检测各组心肌组织中Bax、Bcl-2、Caspase3的表达水平。结果:与正常组比较,模型组Bcl-2表达均显著降低,Bax、Caspase3表达升高(P<0.01或P<0.05)。与模型组比较,各组Bcl-2表达均显著升高,Bax、Caspase3表达均降低(P<0.01或P<0.05)。与模型组比较,中药治疗组中,高剂量组Bcl-2表达明显升高,Bax、Caspase3表达明显降低(P<0.05);西药组与模型组相比,Bcl-2表达明显升高(P<0.01),Caspase3表达明显降低(P<0.05),Bax表达有降低趋势(P>0.05)。中药组高剂量组与西药组相比,Bcl-2表达无明显差异(P>0.05)。结论:益气养阴通络法能够上调急性心肌梗死大鼠心肌细胞Bcl-2表达,下调Bax、Caspase3表达。 展开更多
关键词 益气养阴通络法 心肌细胞凋亡 BAX BCL-2 caspase3
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Caspase-3、-9表达上调参与缺氧诱导心肌细胞凋亡 被引量：8
13
作者 周舟 王小华 +1 位作者 朱光旭 余争平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期185-188,共4页
目的　研究缺氧对心肌细胞天冬氨酸特异性的半胱氨酸蛋白酶 (caspase)的激活效应。方法　培养的心肌细胞分别缺氧 0、3、6、12、2 4h后 ,Hoechst 3 3 3 42染色法检测细胞凋亡 ,MTT法检测细胞存活率 ,Westernblot、RT PCR方法分别检测细... 目的　研究缺氧对心肌细胞天冬氨酸特异性的半胱氨酸蛋白酶 (caspase)的激活效应。方法　培养的心肌细胞分别缺氧 0、3、6、12、2 4h后 ,Hoechst 3 3 3 42染色法检测细胞凋亡 ,MTT法检测细胞存活率 ,Westernblot、RT PCR方法分别检测细胞线粒体与胞浆中细胞色素c(Cytc)蛋白的变化以及caspase 9, 3mRNA表达的改变。结果　缺氧 2 4h心肌细胞出现典型的凋亡 ,细胞存活率显著降低 ;缺氧 3h线粒体Cytc未见显著变化 ,而胞浆中Cytc开始增多 ,缺氧 2 4h线粒体中已不能检测到Cytc ,胞浆中维持在峰值水平。缺氧可上调心肌细胞caspase 9, 3基因表达 ,两者表达变化趋势一致 ,缺氧 3h即开始明显增高 ,在观察的 2 4h内持续处于高表达状态。结论　缺氧可致心肌细胞线粒体Cytc大量释放至胞浆中 ,cas pase 9基因表达增高 ,并进一步导致caspase 3激活 ,从而证明缺氧可诱导心肌细胞中线粒体依赖的caspases途径激活 ,从而导致细胞凋亡。 展开更多
关键词 缺氧 凋亡 caspase 细胞色素C 心肌细胞
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靶向Livin的RNA干扰对食管癌Eca-109细胞凋亡相关蛋白Caspase-3和Caspase-9表达的影响 被引量：14
14
作者 陈力 李凡 任国胜 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期298-302,共5页
目的:探讨靶向Livin的RNA干扰对食管癌凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9的影响。方法:采用慢病毒载体转染Livin高表达的食管癌Eca-109细胞株,从而有效地进行靶向Livin的RNA干扰。分别采用实时荧光定量PCR和Western blot检测各组细胞中L... 目的:探讨靶向Livin的RNA干扰对食管癌凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9的影响。方法:采用慢病毒载体转染Livin高表达的食管癌Eca-109细胞株,从而有效地进行靶向Livin的RNA干扰。分别采用实时荧光定量PCR和Western blot检测各组细胞中Livin、Caspase-3、Caspase-9 mRNA和蛋白表达情况。结果:与空白对照组和阴性组相比,实验组中Livin的mRNA及其蛋白的表达都明显降低(P<0.01),而Caspase-3和Caspase-9的mRNA及其蛋白的表达都明显增加(P<0.01)。结论:针对Livin的RNA干扰可有效降低Livin高表达的食管癌Eca-109细胞株中Livin mRNA和蛋白水平。同时,与细胞凋亡相关的信号分子Caspase-3和Caspase-9 mRNA和蛋白水平均明显升高。 展开更多
关键词 RNA干扰 食管癌 细胞凋亡 LIVIN caspase
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Caspase的活化及其在细胞凋亡中的作用 被引量：58
15
作者 袁长青 丁振华 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期220-224,共5页
Caspase是执行细胞凋亡的主要酶类 ,目前已鉴定的哺乳动物Caspase有 14种。Caspase以酶原的形式合成 ,催化活性很低 ,必须激活以后才能发挥作用。活化的Caspase通过特异性的裂解一套底物而导致细胞凋亡。与Caspase有关的细胞凋亡通路至... Caspase是执行细胞凋亡的主要酶类 ,目前已鉴定的哺乳动物Caspase有 14种。Caspase以酶原的形式合成 ,催化活性很低 ,必须激活以后才能发挥作用。活化的Caspase通过特异性的裂解一套底物而导致细胞凋亡。与Caspase有关的细胞凋亡通路至少有三种 :线粒体 /细胞色素c通路、死亡受体通路和内质网通路。Caspase总是与其抑制剂共存 。 展开更多
关键词 caspase 活化 细胞凋亡 作用 信号转导 底物 抑制剂
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桑根酮C通过激活caspase 3及caspase 9诱导前列腺癌PC3细胞凋亡 被引量：16
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作者 周萍 董晓先 汤平 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1206-1210,共5页
目的探讨桑根酮C诱导雄激素非依赖型前列腺癌PC3细胞凋亡的作用及其可能机制。方法 MTT法检测桑根酮C对PC3细胞増殖的抑制作用:实验分6组,分别加入不同浓度的桑根酮C(0、1、5、20、50、100μmol/L),作用24 h检测细胞生长抑制率;20μmol/... 目的探讨桑根酮C诱导雄激素非依赖型前列腺癌PC3细胞凋亡的作用及其可能机制。方法 MTT法检测桑根酮C对PC3细胞増殖的抑制作用:实验分6组,分别加入不同浓度的桑根酮C(0、1、5、20、50、100μmol/L),作用24 h检测细胞生长抑制率;20μmol/L桑根酮C加入PC3细胞,分别于0、6、12、24、48 h收集细胞,MTT法检测生长抑制率。流式细胞技术检测细胞凋亡率:20μmol/L桑根酮C加入PC3细胞,分别于0、12、24、48 h收集细胞检测凋亡率。荧光分光光度计检测caspase 3的活性:20μmol/L桑根酮C作用PC3细胞,分别在0、6、12、18、24、48 h收集细胞,检测caspases 3的活性。MTT法检测caspase 3、caspase 8及caspase 9抑制剂对桑根酮C抑制PC3细胞增殖的影响:实验分4组,分别加入DMSO、z-DEVD-fmk、z-LEHD-fmk及z-IETD-fmk,1 h加入桑根酮C,24 h收集细胞,MTT法计算细胞生长抑制率。结果桑根酮C能抑制PC3细胞的增殖,呈剂量、时间依赖性,桑根酮C 1、5、20、50、100μmol/L作用PC3细胞24 h的增值抑制率分别为:4.86%、12.92%、52.34%、82.05%、87.45%,1μmol/L组与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),其他组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。半数有效抑制浓度IC50为18.76μmol/L。20μmol/L桑根酮C作用PC3细胞,分别在6、12、24、48、72 h检测增值抑制率为:10.57%、27.09%、51.88%、80.73%、87.99%,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。20μmol/L桑根酮C可诱导PC3细胞的凋亡,在12、24、48 h的凋亡率分别为:7.43%、20.91%、37.56%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。检测caspases 3的活性18 h比对照组增加了7.6倍,应用caspase抑制剂后发现caspase 3及caspase 9的抑制剂可显著逆转桑根酮C对PC3细胞增殖的抑制作用,抑制率从52.48%降到24.29%及28.81%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。而caspase8抑制剂作用不明显,与对照组相比差异没有统计学意义(P>0.05)。结论桑根酮C可通过激活caspase 3及caspase 9途径诱导PC3细胞的凋亡。 展开更多
关键词 桑根酮C 前列腺癌 PC3细胞 caspase 凋亡
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Caspases与细胞凋亡(综述) 被引量：33
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作者 卢晓晔 钟雪云 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 2000年第6期121-124,共4页
Caspases是一组天门冬氨酸特异性的半胱氨酸蛋白酶。Caspases在凋亡信号作用下发生逐级水解活化 ,最后裂解细胞的结构蛋白和功能蛋白 ,使细胞分解引起凋亡 ,故Caspases的活化是导致凋亡的中心环节。本文阐述了Caspase家族的一般特性及... Caspases是一组天门冬氨酸特异性的半胱氨酸蛋白酶。Caspases在凋亡信号作用下发生逐级水解活化 ,最后裂解细胞的结构蛋白和功能蛋白 ,使细胞分解引起凋亡 ,故Caspases的活化是导致凋亡的中心环节。本文阐述了Caspase家族的一般特性及其在凋亡中的作用 ,Caspases与凋亡调控基因蛋白的相互关系及Caspases在凋亡相关疾病防治中的应用前景。 展开更多
关键词 细胞凋亡 caspase 程序性细胞死亡 调控机制
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和厚朴酚对结肠癌细胞生长影响及Caspase凋亡途径相关蛋白的表达研究 被引量：10
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作者 谭茵 莫立乾 +1 位作者 蔡玉婷 张超 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第14期2509-2512,共4页
目的:探讨和厚朴酚对人结肠癌(SW480)细胞增殖抑制作用及诱导Caspase凋亡途径的研究。方法:利用MTT检测和厚朴酚在不同浓度和时间下对SW480细胞体外增殖的影响;用流式细胞术、Hoechst33258荧光染色检测及Caspase-3,-8,-9酶活性检测方法... 目的:探讨和厚朴酚对人结肠癌(SW480)细胞增殖抑制作用及诱导Caspase凋亡途径的研究。方法:利用MTT检测和厚朴酚在不同浓度和时间下对SW480细胞体外增殖的影响;用流式细胞术、Hoechst33258荧光染色检测及Caspase-3,-8,-9酶活性检测方法和厚朴酚诱导下结肠癌SW480细胞凋亡指标及路径。结果:MTT结果显示和厚朴酚具明显抑制SW480细胞的体外增殖,其抑制率存在剂量和时间依赖性;药物处理24,48,72h的IC50值分别是54.36、44.72、36.20μmol/L。和厚朴酚作用细胞后,G0/G1期的细胞比例随药物浓度增加而逐渐增多(P<0.05),表明和厚朴酚能阻滞细胞于G0/G1期。荧光染料Hoechst33258染色结果显示,细胞核出现典型的凋亡小体。Caspase家族蛋白酶活性检测结果,胞内Caspase-3,-8,-9酶家族分别被激活,其活性随不同时间点升高(P<0.05)。结论:和厚朴酚能明显抑制人结肠癌SW480细胞体外增殖,并诱导大肠癌细胞SW480通过激活Caspase途径发生凋亡。 展开更多
关键词 和厚朴酚 SW480细胞 凋亡 caspase家族
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caspase3蛋白在胃癌及非典型增生中的表达及其与细胞凋亡的关系 被引量：15
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作者 徐进 文继舫 +1 位作者 郑晖 傅春燕 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第2期181-182,共2页
关键词 caspase3蛋白 胃癌 非典型增生 细胞凋亡
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caspase-8在胶质母细胞瘤抵抗TRAIL诱导凋亡中的作用 被引量：9
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作者 齐玲 于洪泉 +4 位作者 金宏 丁丽娟 温娜 唐泽波 李蕴潜 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期612-616,共5页
目的:对人脑胶质母细胞瘤SC189细胞株中单克隆细胞株进行研究,探讨caspase-8在胶质母细胞瘤抵抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导凋亡分子机制中的作用。方法:获取SC189单克隆细胞株,应用酸性磷酸酶法检测SC189单克隆细胞株对TR... 目的:对人脑胶质母细胞瘤SC189细胞株中单克隆细胞株进行研究,探讨caspase-8在胶质母细胞瘤抵抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导凋亡分子机制中的作用。方法:获取SC189单克隆细胞株,应用酸性磷酸酶法检测SC189单克隆细胞株对TRAIL敏感性;Western blotting检测各单克隆细胞株表达FADD、DR5、DR4及caspase-8情况;经TRAIL作用后发生caspase-8、caspase-3、caspase-9、DFF-45凋亡级联裂解反应情况。结果:获得的5株SC189单克隆细胞株,经不同浓度TRAIL作用后细胞死亡率为-5.25%～45.80%,其中4株对TRAIL抵抗,1株对TRAIL相对敏感;Western blotting检测发现FADD、DR5、DR4表达相似,caspase-8表达不同,发生抵抗的细胞株caspase-8表达明显减少,经TRAIL作用后不发生凋亡级联裂解反应;相对敏感的细胞株caspase-8表达增多,经TRAIL作用后可出现明显的凋亡级联裂解反应。结论:SC189单克隆细胞株中caspase-8表达量直接与TRAIL反应敏感性有关联。 展开更多
关键词 脑胶质母细胞瘤 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 caspase一8
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