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激活大麻素受体1诱导的单核巨噬细胞J774A.1的迁移依赖RNA结合蛋白HuR 被引量:2
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作者 赵中新 常娜 +2 位作者 盖菁菁 田蕾 李丽英 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第1期76-82,共7页
目的研究大麻素受体1(cannabinoid receptor 1,CB1)在单核巨噬细胞迁移中的重要作用以及RNA结合蛋白人抗原R(human antigen R,HuR)参与其中的可能机制。方法选用单核巨噬细胞系J774A.1,应用琼脂糖凝胶电泳和免疫荧光染色技术鉴定J774A.1... 目的研究大麻素受体1(cannabinoid receptor 1,CB1)在单核巨噬细胞迁移中的重要作用以及RNA结合蛋白人抗原R(human antigen R,HuR)参与其中的可能机制。方法选用单核巨噬细胞系J774A.1,应用琼脂糖凝胶电泳和免疫荧光染色技术鉴定J774A.1中CB1以及HuR的表达;ACEA和AM281分别为CB1的药理学激动剂和拮抗剂,应用Boyden chamber法检测ACEA和AM281对J774A.1迁移活性的影响。HuR的基因干扰用于确定激活CB1诱导的J774A.1迁移功能是否依赖HuR;胞质蛋白的分离用于探究激活CB1是否能引起J774A.1胞质中HuR的富集;RT-qPCR和Western blotting法检测CB1和HuR mRNA和蛋白质的变化情况。结果该研究证明J774A.1在基因和蛋白质水平上均表达CB1和HuR;激活CB1能够促进J774A.1的迁移(P<0.01)并且能够被其药理学拮抗剂AM281所抑制;激活CB1诱导的J774A.1的迁移依赖HuR;激活CB1促进了J774A.1胞质中HuR的富集进一步影响了CB1的表达,由此HuR参与了激活CB1诱导的J774A.1的迁移。结论激活CB1能够诱导单核巨噬细胞系J774A.1的迁移,且此过程依赖RNA结合蛋白HuR。 展开更多
关键词 人抗原R 大麻素受体1 细胞迁移
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大麻素受体1介导人类中性粒细胞dHL60的迁移功能
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作者 樊晓婷 田蕾 +1 位作者 杨琳 李丽英 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第3期417-422,共6页
目的研究大麻素受体(cannabinoid receptors,CBs)对人类中性粒细胞(d HL60)迁移的影响。方法体外培养人早幼粒白血病细胞系HL60,使用二甲基亚砜(dimethylsulphoxide,DMSO)诱导为类中性粒细胞(d HL60),运用实时荧光定量聚合酶链反应检测... 目的研究大麻素受体(cannabinoid receptors,CBs)对人类中性粒细胞(d HL60)迁移的影响。方法体外培养人早幼粒白血病细胞系HL60,使用二甲基亚砜(dimethylsulphoxide,DMSO)诱导为类中性粒细胞(d HL60),运用实时荧光定量聚合酶链反应检测其分化标志物CD11b mRNA的表达;应用琼脂糖凝胶电泳、Western blotting法及免疫荧光技术检测其大麻素受体1(CB1)及受体2(CB2)的表达;ACEA、AM281分别为CB1的药理学激动剂和拮抗剂,JWH133、AM630分别为CB2的药理学激动剂和拮抗剂,应用Boyden chamber法检测ACEA和JWH133对d HL60迁移的影响,并从药理学阻断CB1、CB2后,检测其迁移功能的变化;使用鬼笔环肽染细胞肌动蛋白纤维,并应用高内涵扫描分析的方法对肌动蛋白纤维的聚合进行分析。结果 d HL60在mRNA和蛋白质水平上均表达CB1、CB2;ACEA能够诱导d HL60的迁移及其细胞骨架的聚合,且其所诱导的迁移能够被CB1的药理学阻断剂AM281所阻断,而CB2的药理学阻断剂AM630对ACEA所诱导的迁移并无影响;给予CB2的激动剂JWH133对d HL60的迁移及细胞骨架的聚合无明显作用。结论激活CB1能够促进d HL60的迁移。 展开更多
关键词 大麻素受体 人类中性粒细胞 细胞迁移
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