犬Ⅰ型腺病毒TN株的分离鉴定 被引量：5

1

作者 乔军 孟庆龄 +2 位作者 夏咸柱 何宏彬 范泉水 《动物医学进展》 CSCD 2001年第4期97-99,共3页

应用 MDCK细胞采用单层吸附接毒和带毒传代的方法 ,从新疆阿克苏送检的犬粪便中分离出 1株犬腺病毒 ,并对其进行了形态学、理化学、血清学、动物感染试验、分子生物学鉴定。结果证明所分离的 TN株为 1株CAV-

关键词 犬ⅰ型腺病毒 TN株 分离鉴定

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Ⅰ群4型禽腺病毒DC株灭活苗对流行毒株的保护力试验 被引量：5

2

作者 赵蕾 张建伟 +5 位作者 李林 史爱华 习硕 沈佳 姜北宇 章振华 《动物医学进展》 北大核心 2019年第9期34-37,共4页

为了检验Ⅰ群4型禽腺病毒(FAdV-4)DC株对几个流行毒株的保护力,使用含有DC株的鸡新城疫、禽流感(H9亚型)、传染性法氏囊病、禽腺病毒病(Ⅰ群4型)(La Sota株+BX13株+BJQ902株+DC株)四联灭活疫苗免疫SPF鸡,免疫接种后21 d采血测定FAdV-4... 为了检验Ⅰ群4型禽腺病毒(FAdV-4)DC株对几个流行毒株的保护力,使用含有DC株的鸡新城疫、禽流感(H9亚型)、传染性法氏囊病、禽腺病毒病(Ⅰ群4型)(La Sota株+BX13株+BJQ902株+DC株)四联灭活疫苗免疫SPF鸡,免疫接种后21 d采血测定FAdV-4中和抗体,然后分别用DC株和2015年-2017年分离的5个FAdV-4分离株(ZB2016株、ZD2015株、SC2016株、DT1-2017株和DT2-2017株)进行攻击,观察新流法腺四联苗对FAdV-4流行毒株的保护效果。结果显示,免疫组鸡FAdV-4中和抗体效价达到9.6 log2~10.1 log2,而对照组鸡中和抗体为0;免疫鸡用DC株、ZB2016株、ZD2015株、SC2016株、DT1-2017株和DT2-2017株攻毒后,免疫组鸡得到100%(10/10)保护,对照组鸡90%(9/10)~100%(10/10)发病。试验证明,用含DC株制备出的新流法腺四联苗对腺病毒的流行毒株具有较好的保护效力。 展开更多

关键词 ⅰ群4型禽腺病毒 流行毒株 免疫 保护力

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犬Ⅰ型腺病毒荧光定量PCR检测方法的建立 被引量：1

3

作者 薛向红 赵辉 +5 位作者 卜研 闫喜军 廉士珍 朱言柱 刘昊 吕娇 《动物医学进展》 北大核心 2019年第3期36-40,共5页

通过分析对比GenBank公布的几株犬Ⅰ型腺病毒序列,针对犬Ⅰ型腺病毒特有的E3区,设计了1对特异性引物。对引物浓度、退火温度、扩增体系等条件优化后,建立了犬Ⅰ型腺病毒荧光定量PCR检测方法,并对40份CAV-Ⅰ人工感染银黑狐的粪便样品进... 通过分析对比GenBank公布的几株犬Ⅰ型腺病毒序列,针对犬Ⅰ型腺病毒特有的E3区,设计了1对特异性引物。对引物浓度、退火温度、扩增体系等条件优化后,建立了犬Ⅰ型腺病毒荧光定量PCR检测方法,并对40份CAV-Ⅰ人工感染银黑狐的粪便样品进行了检测。结果表明,与普通PCR相比,建立的犬Ⅰ型腺病毒荧光定量PCR检测方法具有特异性好、灵敏度高、重复性强的特点。该检测方法可用于Ⅰ型犬腺病毒的快速诊断与监测,并能够定量分析CAV-Ⅰ的感染程度。 展开更多

关键词 犬ⅰ型腺病毒 荧光定量PCR 检测方法

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广西某健康鸡群Ⅰ群禽腺病毒的hexon蛋白loop 1基因遗传进化分析 被引量：2

4

作者 张民秀 谢芝勋 +7 位作者 谢志勤 高约 谢丽基 刘加波 邓显文 罗思思 张艳芳 曾婷婷 《中国兽药杂志》 2019年第8期8-14,共7页

为调查广西某规模化鸡场健康鸡群Ⅰ群禽腺病毒(FAdV-Ⅰ)的感染情况,于2017年11月-2018年12月采集不同日龄鸡群咽喉拭子和泄殖腔拭子样品4700份,对样品进行FAdV-Ⅰ检测和hexon蛋白loop 1基因扩增,应用LaserGene7.1和MEGA4.1软件对loop1... 为调查广西某规模化鸡场健康鸡群Ⅰ群禽腺病毒(FAdV-Ⅰ)的感染情况,于2017年11月-2018年12月采集不同日龄鸡群咽喉拭子和泄殖腔拭子样品4700份,对样品进行FAdV-Ⅰ检测和hexon蛋白loop 1基因扩增,应用LaserGene7.1和MEGA4.1软件对loop1基因序列进行核苷酸和遗传进化分析。结果显示,FAdV-Ⅰ的阳性检出率为8.72%;40~70日龄和71~99日龄鸡群阳性FAdV-Ⅰ的检出率分别为28.17%和22.91%;测序获得的38条loop 1基因序列分析表明该鸡场健康鸡群感染了5个不同种的FAdV-Ⅰ,其中26.32%的序列为A种(FAdV-A)、2.63%为B种(FAdV-B)、10.53%为C种(FAdV-C)、39.47%为D种(FAdV-D)和21.05%为E种(FAdV-E);遗传进化分析表明该鸡场健康鸡群主要感染的种为FAdV-D,血清2型(FAdV-2)为优势血清型,其次为A种的血清1型(FAdV-1)和E种的血清8a型(FAdV-8a)和8b型(FAdV-8b)。结果表明,40~70日龄健康鸡群的FAdV-Ⅰ的检出率最高,在健康鸡群中感染的FAdV-Ⅰ主要为FAdV-D种中的FAdV-2。 展开更多

关键词 ⅰ群禽腺病毒 loop1基因 遗传进化

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Ⅰ群禽腺病毒4型IgG抗体间接ELISA检测方法的建立 被引量：2

5

作者 张启龙 孙丹 +4 位作者 韦海涛 宋彦军 周德刚 冯小宇 王林 《中国兽药杂志》 2019年第8期1-7,共7页

利用纯化的 Ⅰ 群禽腺病毒4型重组Hexon蛋白,通过各反应条件筛选,建立了 Ⅰ 群禽腺病毒4型IgG抗体间接ELISA检测方法.结果显示,抗原最佳包被浓度为1μg/mL;最佳封闭液为1% 牛血清白蛋白;待检血清最佳作用浓度是400倍稀释,37℃孵育60 min... 利用纯化的 Ⅰ 群禽腺病毒4型重组Hexon蛋白,通过各反应条件筛选,建立了 Ⅰ 群禽腺病毒4型IgG抗体间接ELISA检测方法.结果显示,抗原最佳包被浓度为1μg/mL;最佳封闭液为1% 牛血清白蛋白;待检血清最佳作用浓度是400倍稀释,37℃孵育60 min;酶标抗体的最佳作用条件为稀释度1:8000,37℃孵育60 min;最佳显色时间为10 min.用所建方法对160只临床鸡只进行检测,同时与拭子PCR检测对比,一致性较好,表明该方法可有效用于临床检测. 展开更多

关键词 ⅰ群禽腺病毒4型 Hexon蛋白 间接ELISA 检测

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表达外源基因SPAM1重组CAV-2溶瘤病毒的构建与拯救

6

作者 高龙 常心怡 +4 位作者 李程 赵晓亚 李汶洁 范浩谦 马静云 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期1228-1237,共10页

旨在研究犬腺病毒-2型(canine adenovirus type 2,CAV-2)作为溶瘤病毒的潜力并进一步探索精子黏附因子(SPAM1)协同CAV-2重塑肿瘤微环境在肿瘤免疫治疗中的应用价值。本研究以P15A-CAV-2反向遗传操作平台为基础,使用RED/ET同源重组系统... 旨在研究犬腺病毒-2型(canine adenovirus type 2,CAV-2)作为溶瘤病毒的潜力并进一步探索精子黏附因子(SPAM1)协同CAV-2重塑肿瘤微环境在肿瘤免疫治疗中的应用价值。本研究以P15A-CAV-2反向遗传操作平台为基础,使用RED/ET同源重组系统构建携带SPAM1外源基因的中间载体,使用中间载体将CAV-2骨架载体E3区域缺失并替换SPAM1外源基因表达盒。再利用合成引物敲除kmccdB反向筛选表达盒构建P15A-CAV-2-mCMV-SPAM1-SV40 polyA感染性克隆质粒并在MDCK-E1A细胞系中拯救重组溶瘤病毒,对重组病毒体外溶瘤效应进行验证。根据测序与酶切验证结果证明,本研究成功构建并拯救出稳定表达外源基因SPAM1的重组溶瘤病毒1株;IFA试验证明,重组毒株能够高水平稳定表达外源基因且外源蛋白具有可弥散分布于细胞间的特点。缺失E3区域表达外源基因SPAM1的重组溶瘤病毒通过光镜观察和CCK8检测发现具有对犬癌细胞系A72强烈的杀伤效应。综上,本研究成功构建1株具有良好溶瘤效应的重组CAV-2,为后续应用于宠物肿瘤治疗奠定了基础。 展开更多

关键词 溶瘤病毒 精子黏附因子 病毒反向遗传操作 犬腺病毒-2

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CDV、CPV、CAV-2及CPIV多重PCR的建立及应用 被引量：6

7

作者 刘畅 逄春华 +6 位作者 刘存 王静 刘琪 梁琳 袁维峰 钱爱东 崔尚金 《中国动物检疫》 CAS 2017年第11期89-93,共5页

为建立一种快速检测犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)、犬腺病毒Ⅱ型(CAV-2)和犬副流感病毒(CPIV)的多重PCR方法,参照Gen Bank中的相关病毒基因序列,分别设计了4对引物,用于特异性扩增CDV H基因、CPV VP2基因、CAV-2 E3基因和CPIV NP... 为建立一种快速检测犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)、犬腺病毒Ⅱ型(CAV-2)和犬副流感病毒(CPIV)的多重PCR方法,参照Gen Bank中的相关病毒基因序列,分别设计了4对引物,用于特异性扩增CDV H基因、CPV VP2基因、CAV-2 E3基因和CPIV NP基因上的目的片段。通过优化反应条件,建立了同时扩增CDV(410 bp)、CPV(253 bp)、CVA-2(655 bp)和CPIV(868 bp)的多重PCR方法。利用建立的多重PCR方法,对CDV、CPV、CAV-2、CPIV、CDV+CPV+CAV-2+CPIV和犬冠状病毒(CCV)的DNA或c DNA模板进行扩增,发现该方法的特异性良好。利用建立的多重PCR方法与单一PCR方法进行敏感性比较,发现两者敏感性相差10倍,证明多重PCR方法敏感性良好。利用该方法对从北京市采集的30份犬病料样品进行检测,发现CDV阳性率为63.33%(19/30)、CPV阳性率为33.33%(10/30)、CAV-2阳性率为6.66%(2/30)、CPIV阳性率为0(0/30)。检测结果证明建立的多重PCR方法可用于临床诊断。 展开更多

关键词 多重PCR 犬瘟热病毒 犬细小病毒 犬腺病毒Ⅱ型 犬副流感病毒

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犬瘟热病毒和犬腺病毒2型双重PCR方法的建立及应用 被引量：5

8

作者 耿庆华 林颖 +2 位作者 裴程程 胡殊 林书铭 《中国动物检疫》 CAS 2012年第5期38-41,共4页

根据犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)和犬腺病毒2型(Canineadenovirus type2,CAV-2)GeneBank登陆的基因序列各设计一对引物,经试验条件优化,建立了检测CAV-2的PCR方法和CDV的RT-PCR方法,CAV-2可扩增1108bp片段、CDV可扩增560bp... 根据犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)和犬腺病毒2型(Canineadenovirus type2,CAV-2)GeneBank登陆的基因序列各设计一对引物,经试验条件优化,建立了检测CAV-2的PCR方法和CDV的RT-PCR方法,CAV-2可扩增1108bp片段、CDV可扩增560bp的目的片段,特异性试验表明建立的方法只能特异扩增CAV-2和CDV,不能扩增犬细小病毒、犬冠状病毒、犬副流感病毒、犬钩端螺旋体和犬黄胆出血群、狂犬病病毒。敏感性试验表明,所建立的双重PCR方法可以扩增4.63ng总核酸量。在上述试验基础上继续优化条件建立了能同时检测CAV-2和CDV两种病毒的双重PCR检测方法,并用该方法检测来自辽宁、吉林等15家动物医院134份鼻液和眼眵样品,与商品化试纸条检测结果相比,本方法更加敏感和方便。研究结果表明,本实验建立的方法敏感、特异,适用于动物犬瘟热病毒和犬腺病毒2型的快速检测和鉴别诊断。 展开更多

关键词 犬瘟热病毒 犬腺病毒2型 双重PCR 鉴别诊断

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狐狸传染性脑炎病原学研究进展 被引量：5

9

作者 罗国良 闫喜军 钟伟 《动物医学进展》 CSCD 2008年第8期63-66,共4页

论文概述了狐狸传染性脑炎病原犬腺病毒的生物学特性、基因组结构、编码蛋白、病原流行特性、病原检测及疫苗研制等方面的研究进展,为该病毒的深入研究和狐狸传染性脑炎的防控提供资料。

关键词 狐狸传染性脑炎 犬腺病毒 病原

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大鼠心肌肌钙蛋白I基因Lys184缺失突变重组腺病毒载体的构建 被引量：5

10

作者 万文辉 吴恒芳 +1 位作者 杨笛 张寄南 《医学研究生学报》 CAS 2008年第4期367-371,共5页

目的:构建SD大鼠心肌肌钙蛋白I(cTnI)赖氨酸(Lys)184缺失突变重组腺病毒载体。方法:利用PCR定点突变方法给大鼠cTn I基因引入Lys184缺失突变,将扩增片段克隆至pMD18-T载体,在C末端用PCR法加6×组氨酸(His)标签序列后,再亚克隆至Aden... 目的:构建SD大鼠心肌肌钙蛋白I(cTnI)赖氨酸(Lys)184缺失突变重组腺病毒载体。方法:利用PCR定点突变方法给大鼠cTn I基因引入Lys184缺失突变,将扩增片段克隆至pMD18-T载体,在C末端用PCR法加6×组氨酸(His)标签序列后,再亚克隆至Adeno-X腺病毒DNA,转染HEK 293细胞,包装形成重组腺病毒(Ad-cTnILys184del)。结果:PCR及测序结果表明,重组腺病毒序列正确,Western blot证明有融合突变蛋白表达。结论:本研究成功地构建了大鼠cTnI Lys184缺失突变重组腺病毒载体,为后续的功能研究提供了有价值的研究材料。 展开更多

关键词 心肌肌钙蛋白ⅰ 定点突变 重组腺病毒

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犬腺病毒SY-45株不同大小蚀斑特性研究 被引量：2

11

作者 范泉水 夏咸柱 +6 位作者 邱薇 黄耕 何洪彬 余春 乔军 武银莲 殷震 《动物医学进展》 CSCD 2001年第4期86-87,99,共3页

应用蚀斑方法将 SY- 4 5毒株经过 3次蚀斑纯化直到蚀斑大小相对稳定。从不同大小的蚀斑中挑选出三种蚀斑 ,大斑直径约 3mm (简称 LP)、中斑约 2 mm(简称 MP)、小斑约 1 mm(简称 SP)。分别在 MDCK细胞上增殖并进行了三种不同大小斑毒对... 应用蚀斑方法将 SY- 4 5毒株经过 3次蚀斑纯化直到蚀斑大小相对稳定。从不同大小的蚀斑中挑选出三种蚀斑 ,大斑直径约 3mm (简称 LP)、中斑约 2 mm(简称 MP)、小斑约 1 mm(简称 SP)。分别在 MDCK细胞上增殖并进行了三种不同大小斑毒对犬的毒力、免疫原性和在 MDCK细胞上产毒量比较 ,以筛选最佳的疫苗株 ,试验结果表明用不同大小蚀斑病毒大剂量人工感染易感犬后 ,所有的试验犬临床症状和病理解剖学和病理组织学表现均正常 ;对挑选的 4窝 CAV HI抗体效价小于等于 1 :2的健康幼犬进行免疫试验 ,测定血清的中和抗体效价和血凝抑制抗体效价 ,结果表明 :大斑毒的免疫原性要稍高于中斑毒 ,而明显高于小斑毒 ;不同大小蚀斑毒在 MDCK细胞上产毒量差异很大 ,大斑毒可达 1 0 7TCID50 / m L、小斑毒达 1 0 6 TCID50 /ml、小斑毒达 1 0 4 .5TCID50 / m L。综合所有试验结果表明 :大斑毒株具有产毒量高、安全性好、免疫原性强的优点 ,是较为理想的疫苗株。 展开更多

关键词 犬传染性喉气管炎病毒 犬2型腺病毒 蚀斑特性

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应用电镜技术和血凝试验检测犬细小病毒和犬腺病毒 被引量：4

12

作者 李六金 押宗保 +6 位作者 李成 姜焕宏 陈慧茹 刘建荣 马伟辉 王新建 李宏 《中国兽药杂志》 2002年第7期33-35,共3页

电镜技术和血凝试验是检测犬细小病毒和犬腺病毒快速而简便的方法。本试验结果表明,两种方法检验结果大部分相符,但各具特色。电镜技术的优势在于能够直观地显示目标病毒的生长发育、粒子的完整性以及有无非目标病毒、细菌、支原体等污... 电镜技术和血凝试验是检测犬细小病毒和犬腺病毒快速而简便的方法。本试验结果表明,两种方法检验结果大部分相符,但各具特色。电镜技术的优势在于能够直观地显示目标病毒的生长发育、粒子的完整性以及有无非目标病毒、细菌、支原体等污染情况,这对于动物病毒疫苗种毒质量的检测是十分重要的。 展开更多

关键词 电镜技术 血凝试验 检测 犬细小病毒 犬腺病毒

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犬2型腺病毒SY株的致弱驯化 被引量：2

13

作者 范泉水 夏咸柱 +6 位作者 邱薇 黄耕 何洪彬 余春 乔军 武银莲 殷震 《中国兽药杂志》 2001年第6期7-9,共3页

作者对分离和系统鉴定的一株犬传染性喉气管炎病毒 (犬 2型腺病毒 ) SY(沈阳 )株 ,用犬肾传代细胞 MDCK进行了致弱驯化 ,每驯化 1 5代做一次初步的犬的安全性试验 ,用大剂量不同代次病毒对易感犬进行人工感染试验 ,每天观察犬的临床症... 作者对分离和系统鉴定的一株犬传染性喉气管炎病毒 (犬 2型腺病毒 ) SY(沈阳 )株 ,用犬肾传代细胞 MDCK进行了致弱驯化 ,每驯化 1 5代做一次初步的犬的安全性试验 ,用大剂量不同代次病毒对易感犬进行人工感染试验 ,每天观察犬的临床症状及白细胞总数 ,并于接毒后的第 5 d安乐死 ,作病理解剖学和病理组织学检查。易感犬的感染试验结果表明 ,SY株在犬肾细胞上传 1 5代时对犬的致病力已降低 ,3 0代时对犬已不引起发烧、精神沉郁和厌食等症状 ,仅引起轻度的鼻炎、中度的咽炎 ,剖检肺表现正常 ,仅见支气管淋巴结肿大 ,45代时无临床症状 ,剖检除扁桃体肿大外没有见到其它症状 ,6 0代毒已完全失去致病力 ,未见任何临床症状及病理变化。 展开更多

关键词 犬 2型腺病毒 传染性喉气管炎病毒 传代驯化 免疫原性 安全性 噬斑克隆

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LAMP快速检测犬传染性肝炎方法的建立及应用 被引量：1

14

作者 曹丙蕾 凌宗帅 邱洪凯 《中国动物检疫》 CAS 2014年第8期73-76,共4页

根据GenBank上公布的犬腺病毒I型(CAV-I)E3基因序列,设计了3对特异性环介导等温扩增(LAMP)引物,以CAV-I DNA为模板,通过条件优化建立了犬传染性肝炎LAMP快速检测方法,该方法能够在63℃恒温下30min内实现目的核酸的大量扩增,在可见光下... 根据GenBank上公布的犬腺病毒I型(CAV-I)E3基因序列,设计了3对特异性环介导等温扩增(LAMP)引物,以CAV-I DNA为模板,通过条件优化建立了犬传染性肝炎LAMP快速检测方法,该方法能够在63℃恒温下30min内实现目的核酸的大量扩增,在可见光下即可直接观察扩增产物荧光颜色变化来判定结果。特异性和灵敏度试验表明,该LAMP检测方法只对CAV-I有特异性扩增,对其他无关核酸无扩增。与常规PCR检测相比,LAMP的检测灵敏度较好,最低检出限为10-7TCID50,是PCR检测方法的100倍。临床样品检测结果表明,LAMP阳性检出率为36%,与病毒分离鉴定的结果符合率达96.8%,与PCR检测的结果符合率达100%,且快速简便,成本低,适用于基层实验室的快速疾病诊断。 展开更多

关键词 LAMP 犬传染性肝炎 犬腺病毒I型

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犬2型腺病毒对犬的口服免疫研究

15

作者 范泉水 夏咸柱 +4 位作者 王度林 齐桂凤 邱薇 何洪彬 黄耕 《中国兽药杂志》 北大核心 2000年第4期17-19,共3页

对未经犬腺病毒免疫的两月龄左右杂交狼犬 ,随机分为 6组每组 5只 ,另设 5只对照 ,用作者分离鉴定和致弱驯化的犬喉气管炎病毒 (犬 2型腺病毒 )的第 60代 DK细胞培养物 ( SYCAV- 2 DK60 )对犬进行口服免疫试验 ,在免疫第 4周采血分离血... 对未经犬腺病毒免疫的两月龄左右杂交狼犬 ,随机分为 6组每组 5只 ,另设 5只对照 ,用作者分离鉴定和致弱驯化的犬喉气管炎病毒 (犬 2型腺病毒 )的第 60代 DK细胞培养物 ( SYCAV- 2 DK60 )对犬进行口服免疫试验 ,在免疫第 4周采血分离血清 ,测定犬腺病毒的血凝抑制抗体 ( HI)效价 ,结果 30只试验犬全部产生了 HI抗体 ,表明 SY CAV- 2可通过口服或饵料的途径对犬实施免疫 ,为犬口服联合疫苗以及犬 2型腺病毒为载体的口服狂犬 展开更多

关键词 犬腺病毒 口服免疫 血凝抑制抗体效价 载体

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驯化克隆的CAV-2大斑株的实验免疫研究

16

作者 范泉水 夏咸柱 +6 位作者 邱薇 黄耕 何洪彬 余春 乔军 武银莲 殷震 《中国兽药杂志》 2002年第2期25-29,共5页

对MDCK细胞上驯化克隆产毒量高的大斑株 (LP)的第 5 0代毒和 75代毒进行了实验免疫研究 ,结果表明该毒株具有安全性好 ,通过静脉和口鼻接种CAV易感犬 ,无任何致病反应 ;用10 4 .0 TCID50 以上的该毒免疫CAV易感犬 ,即获得 97.5 %以上的... 对MDCK细胞上驯化克隆产毒量高的大斑株 (LP)的第 5 0代毒和 75代毒进行了实验免疫研究 ,结果表明该毒株具有安全性好 ,通过静脉和口鼻接种CAV易感犬 ,无任何致病反应 ;用10 4 .0 TCID50 以上的该毒免疫CAV易感犬 ,即获得 97.5 %以上的免疫保护 ;将其在CAV易感犬连续传 5代 ,其安全性与原毒相同 ,表明该毒株在 5 0～ 75代之间遗传性稳定 ,免疫原性良好 ;与CPV和CDV弱毒联合免疫 ,结果与各弱毒单独免疫所产生的抗体无差异 ,说明该毒株不但可以单独用于免疫 ,也可与其他弱毒联合免疫。是一株较好的疫苗候选株 ,具有开发应用价值。 展开更多

关键词 犬 传染性喉气管炎病毒 犬2型腺病毒 大蚀斑 免疫原性 安全性 驯化 克隆

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犬腺病毒CAV-BJ02株的分离与鉴定 被引量：4

17

作者 由欣月 刘畅 +3 位作者 郝雲峰 梁琳 秦彤 崔尚金 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期2016-2021,共6页

本研究旨在分离犬腺病毒(CAV)的北京地区流行株,采集北京地区某宠物医院2~4月龄发生咳嗽等呼吸道症状犬的鼻咽拭子,经胶体金和PCR检测,初筛为犬腺病毒阳性。经过处理后,将其处理液接种于MDCK细胞,进行连续传代培养,出现变圆、脱落、葡... 本研究旨在分离犬腺病毒(CAV)的北京地区流行株,采集北京地区某宠物医院2~4月龄发生咳嗽等呼吸道症状犬的鼻咽拭子,经胶体金和PCR检测,初筛为犬腺病毒阳性。经过处理后,将其处理液接种于MDCK细胞,进行连续传代培养,出现变圆、脱落、葡萄串样等特征性细胞病变。通过形态学观察、PCR鉴定及动物回归试验等方法对其进行鉴定。PCR扩增片段测序结果表明,该分离株为犬腺病毒Ⅱ型,遂将其命名为CAV-BJ02(GenBank:MN744708)株。用Reed-Muench法测得CAV-BJ02株的TCID 50为106.7·(100μL)-1。电镜下可清晰地观察到呈正六边形的二十面体、直径在86 nm左右的犬腺病毒颗粒。遗传进化分析结果表明,本株病毒为CAV-Ⅱ型。动物回归试验结果表明,CAV-BJ02株可引起犬发热等轻微临床症状,以口鼻分泌物为主要排毒方式,排毒期为5~6 d,不导致犬死亡。上述研究结果为深入了解北京地区CAV的流行情况,为犬腺病毒病的诊断、防治及后续相关研究奠定了理论基础。 展开更多

关键词 犬腺病毒 分离鉴定 进化分析 动物试验

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犬Ⅱ型腺病毒自然弱毒株的分离与鉴定 被引量：9

18

作者 夏咸柱 范泉水 +4 位作者 胡桂学 黄耕 武银莲 邹啸环 李金中 《中国兽药杂志》 北大核心 2000年第3期1-4,共4页

从一只 3月龄病犬中分离出一株犬腺病毒 ( CAV) ,暂定名为 YCA1 8。从一系列形态学、生理化学、生物学和分子病毒学实验证明这是一株 型犬腺病毒自然弱毒。此毒株能在犬、猪肾原代细胞和传代细胞系上生长 ,能产生腺病毒感染的特征性细... 从一只 3月龄病犬中分离出一株犬腺病毒 ( CAV) ,暂定名为 YCA1 8。从一系列形态学、生理化学、生物学和分子病毒学实验证明这是一株 型犬腺病毒自然弱毒。此毒株能在犬、猪肾原代细胞和传代细胞系上生长 ,能产生腺病毒感染的特征性细胞病变 ,细胞肿胀、变圆和呈“葡萄串样”。在细胞核内可见病毒粒子及其前体的晶格状排列 ,病毒粒子呈 2 0面体立体对称 ,表面有排列整齐的壳粒 ;能抵抗乙醚的处理 ,在 p H3及 50℃温度中稳定 ,但受到 5- IUDR的抑制。可以凝集鸡、大鼠和人 O型红细胞 ,不凝集豚鼠红细胞。以 CAV特异性引物进行 PCR和以特异性探针进行核酸杂交试验 ,出现了与对照 ( 型 CAV株 )同样的电泳组分的阳性杂交印迹。经静脉、眼和鼻接种的SN抗体价低于 1 :2的犬和狐 ,观察 1 展开更多

关键词 犬 腺病毒 Ⅱ型 分离 鉴定 弱毒株

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犬腺病毒(Ⅱ型)阳性血清的研制及应用 被引量：5

19

作者 赵炜 孙淼 +3 位作者 薛青红 陈延飞 韩爽 印春生 《中国兽药杂志》 2019年第3期54-60,共7页

为研制犬腺病毒相关制品的检验用阳性血清,以健康易感山羊为免疫靶动物,深入优化免疫原和免疫程序,无菌采血后分离血清,并分装冻干。通过常规检验方法进行纯净性检测、特异性检测、抗体效价测定和中和指数测定,并将其应用于代表性的含... 为研制犬腺病毒相关制品的检验用阳性血清,以健康易感山羊为免疫靶动物,深入优化免疫原和免疫程序,无菌采血后分离血清,并分装冻干。通过常规检验方法进行纯净性检测、特异性检测、抗体效价测定和中和指数测定,并将其应用于代表性的含犬腺病毒组分的活疫苗制品的外源病毒检验和鉴别检验等。结果显示,该批血清的纯净性检验和特异性满足要求,中和抗体效价为1∶9364,中和指数>10^(6.0)。结果表明,该血清对犬腺病毒具有良好的中和作用,能够应用于犬腺病毒相关制品的外源病毒检验和特异性检验等,是兽用生物制品国家标准物质的重要候选标准品。 展开更多

关键词 犬腺病毒 阳性血清 标准物质

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犬腺病毒2型E3基因自然缺失毒株的分离鉴定及其致病性 被引量：1

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作者 王佳丽 周宁 +2 位作者 陈曦 岳华 汤承 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期2982-2990,共9页

犬腺病毒2型(canine adenovirus type 2,CAV-2)是重要的犬呼吸道病原,本试验旨在调查CAV-2在川渝部分地区的流行情况及其分离毒株致病性。采用检测CAV-2的特异性PCR方法,对2021—2022年采集自川渝部分地区的121份患呼吸道疾病的犬鼻咽... 犬腺病毒2型(canine adenovirus type 2,CAV-2)是重要的犬呼吸道病原,本试验旨在调查CAV-2在川渝部分地区的流行情况及其分离毒株致病性。采用检测CAV-2的特异性PCR方法,对2021—2022年采集自川渝部分地区的121份患呼吸道疾病的犬鼻咽拭子进行检测,分离流行毒株并研究其基因组特征及致病性。结果显示:CAV-2的阳性率为29.8%,值得注意的是,69.4%的阳性样本在E3基因存在9个核苷酸连续缺失(1035—1043 nt),导致4个氨基酸缺失(345—348 aa)。成功分离出1株E3基因自然缺失毒株,噬斑纯化后的细胞半数感染值为10-9.46TCID50·0.1 mL^(-1);该毒株经口鼻感染幼犬后,幼犬出现体温升高、打喷嚏、流鼻涕及咳嗽等典型呼吸道症状。该分离毒株基因组全长31786 bp,与GenBank中CAV-2基因组的核苷酸相似性为98.8%~98.9%。与已知的CAV-2基因组相比,本研究分离毒株除了E3基因的独特突变外,还在Fiber、Hexon和E1A等蛋白有独特的氨基酸突变,使得该毒株在基因组进化树上区别于已知的CAV-2毒株。本试验首次获得了中国CAV-2毒株的基因组序列,发现了E3基因的自然缺失现象,有助于了解CAV-2的流行及遗传进化。 展开更多

关键词 犬腺病毒2型 E3基因自然缺失株 分离鉴定 基因组 致病性

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