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中药菩人丹对OLETF大鼠视网膜磷酸化c-Jun氨基末端激酶和半胱氨酸天冬氨酸激酶-3表达的干预作用 被引量:4
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作者 张自然 董志军 +4 位作者 董微丽 张铁民 贾璐瑶 戴慧 邢薇 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1397-1401,共5页
目的探讨菩人丹超微粉(PRD)对糖尿病大鼠视网膜磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)和半胱氨酸天冬氨酸激酶-3(Caspase-3)表达的影响。方法以自发性雄性2型糖尿病大鼠模型OLETF大鼠和其同系非糖尿病对照鼠LETO雄性大鼠为实验对象,血糖峰值&g... 目的探讨菩人丹超微粉(PRD)对糖尿病大鼠视网膜磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)和半胱氨酸天冬氨酸激酶-3(Caspase-3)表达的影响。方法以自发性雄性2型糖尿病大鼠模型OLETF大鼠和其同系非糖尿病对照鼠LETO雄性大鼠为实验对象,血糖峰值>16.7 mmol/L和负荷后120 min血糖>11.1 mmol/L作为成模标准,将24只成模雄性OLETF大鼠随机分为模型组、菩人丹超微粉治疗组,每组12只,同周龄12只雄性LETO大鼠为空白对照组。模型成功建立后,菩人丹超微粉治疗组大鼠给予菩人丹超微粉[1.8 g·(kg·d)-1]灌胃2个月。HE染色观察视网膜形态结构的变化;采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测大鼠视网膜神经细胞的凋亡情况;SP免疫组织化学染色法和Western blot法检测视网膜磷酸化JNK(p-JNK)、Caspase-3蛋白的表达;采用逆转录聚合酶链法(RT-PCR)检测大鼠视网膜Jnk、caspase-3 mRNA的表达。结果糖尿病模型组大鼠视网膜出现明显的病理变化,神经细胞凋亡指数p-JNK、Caspase-3蛋白及mRNA的表达明显高于正常对照组大鼠(P<0.01)。菩人丹超微粉治疗组大鼠视网膜的病理变化明显减轻,神经细胞凋亡指数、p-JNK、Caspase-3蛋白及mRNA的表达明显低于模型组大鼠(P<0.01)。结论菩人丹超微粉可以改善糖尿病视网膜病变中神经组织的损伤,表现为神经细胞凋亡的减少,这可能与下调p-JNK、Caspase-3的表达相关。 展开更多
关键词 菩人丹超微粉 OLETF大鼠 糖尿病视网膜病变 细胞凋亡 磷酸化c-jun氨基末端激酶 半胱氨酸天冬氨酸激酶-3
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瑞香素抑制c-Jun氨基末端激酶/核因子κB(JNK/NF-κB)通路减轻大鼠心肌缺血损伤 被引量:10
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作者 李静 王东亮 +3 位作者 衣蕾 李婷 王苗苗 朱海慧 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期513-519,共7页
目的研究瑞香素(DAP)对于心肌缺血损伤大鼠的保护作用及其作用机制。方法将75只SD大鼠随机分为空白组、模型组、(30、60、90)mg/kg DAP处理组。模型的建立则是采用皮下注射85 mg/kg异丙基肾上腺素(ISO)连续2 d建立大鼠心肌缺血模型,持... 目的研究瑞香素(DAP)对于心肌缺血损伤大鼠的保护作用及其作用机制。方法将75只SD大鼠随机分为空白组、模型组、(30、60、90)mg/kg DAP处理组。模型的建立则是采用皮下注射85 mg/kg异丙基肾上腺素(ISO)连续2 d建立大鼠心肌缺血模型,持续灌胃给予相应剂量DAP处理7 d,观察DAP对心肌损伤的保护作用。采用大鼠心电图测量装置测定各组实验大鼠的心电图变化,采用分光光度法测定血清超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)酶活性和丙二醛(MDA)含量,ELISA检测血清肌肉B型肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CPK)水平以及心肌组织匀浆白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量的变化;采用HE染色以及Masson染色观察心肌细胞的损伤及纤维化情况,实时定量PCR检测心肌组织c-Jun氨基末端激酶(JNK)和核因子κB(NF-κB)的mRNA水平,Western blot法检测JNK、NF-κB的磷酸化情况。结果DAP能增加心肌组织SOD、CAT、GSH-Px酶活性,降低MDA,并能降低血清组织中CK-MB、LDH、CPK、TNF-α和IL-1β水平,减少心肌细胞纤维化,抑制JNK和NF-κBp65的表达和磷酸化。结论DAP通过抑制JNK/NF-κB信号通路活化,抑制心肌缺血诱发的心肌细胞凋亡和纤维化。 展开更多
关键词 心肌缺血 瑞香素(DAP) 过氧化物 氧化应激 炎症反应 c-jun氨基末端激酶/核因子κB(jnk/NF-κB) 大鼠
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c-Jun氨基末端激酶3结构域突变质粒的构建、鉴定与转染
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作者 王帝 李振玲 +1 位作者 宋远见 刘志安 《科学技术与工程》 北大核心 2019年第26期118-123,共6页
为构建c-Jun氨基末端激酶3 (c-Jun N-terminal kinase3,JNK3)的p VP16-eGFP-Myc-JNK3活化环(activation-loop,A-loop)结构域突变型重组质粒,通过A-loop突变型JNK3的c DNA序列以及pVP16-eGFP-Myc的酶切位点设计引物,PCR扩增目的基因,使... 为构建c-Jun氨基末端激酶3 (c-Jun N-terminal kinase3,JNK3)的p VP16-eGFP-Myc-JNK3活化环(activation-loop,A-loop)结构域突变型重组质粒,通过A-loop突变型JNK3的c DNA序列以及pVP16-eGFP-Myc的酶切位点设计引物,PCR扩增目的基因,使用限制性内切酶Mlu I与Xba I将基因克隆到pVP16-eGFP-Myc真核表达载体中,构建pVP16-eGFP-Myc-JNK3(A-loop)结构域突变型重组质粒。转化后,通过双酶切鉴定与DNA测序判断是否成功构建重组质粒,使用Trans IntroTM EL Transfection Reagent转染人胚肾(human emborynic kidney,HEK) 293T细胞,通过荧光显微镜下观察融合蛋白表达情况。结果表明:构建pVP16-eGFP-Myc-JNK3 (A-loop)结构域突变型重组质粒,双酶切鉴定和测序结果显示构建成功;pVP16-eGFP-MycJNK3 (A-loop)成功转染HEK293T细胞且表达。鼠源JNK3结构域突变型质粒构建成功,对进一步研究JNK3结构域在相关疾病的作用和机制提供实验工具。 展开更多
关键词 c-jun氨基末端激酶3 活化环 真核表达质粒 结构域 突变
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四川新康温石棉通过活性氧/c-Jun氨基末端激酶(ROS/JNK)通路诱导A549细胞凋亡 被引量:1
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作者 刘琬薰 邓建军 +3 位作者 董发勤 霍婷婷 王玉琳 王利民 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1217-1222,共6页
目的研究活性氧/c-Jun氨基末端激酶(ROS/JNK)途径在四川新康温石棉诱导A549人肺上皮细胞凋亡过程的作用。方法采用(12.5、25、50、100、200)μg/m L温石棉作用A549细胞24 h,MTT法检测细胞存活率;设置ROS抑制组,异硫氰酸荧光素标记的膜... 目的研究活性氧/c-Jun氨基末端激酶(ROS/JNK)途径在四川新康温石棉诱导A549人肺上皮细胞凋亡过程的作用。方法采用(12.5、25、50、100、200)μg/m L温石棉作用A549细胞24 h,MTT法检测细胞存活率;设置ROS抑制组,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双染色结合流式细胞术检测细胞凋亡、JC-1标记检测线粒体膜电位、二氯二氢荧光黄乙酰乙酯(DCFH-DA)负载检测ROS水平,Western blot法检测磷酸化的c-JNK1(p-JNK1)、p-JNK2、裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)蛋白水平。结果随着温石棉剂量增大,细胞存活率下降,温石棉半数抑制剂量为223.43μg/m L;细胞凋亡率呈现剂量-效应关系,胞内ROS水平升高,p-JNK1、p-JNK2、c-caspase-3蛋白水平明显上调,线粒体膜电位降低;与相同剂量温石棉组比较,ROS抑制剂能显著抑制细胞凋亡,降低ROS水平,减少线粒体膜电位的降低程度,并下调p-JNK1、p-JNK2和c-caspase-3蛋白的表达。结论四川新康温石棉可能通过ROS/JNK途径诱导A549细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 温石棉 A549细胞 细胞凋亡 活性氧(ROS) c-jun氨基末端激酶(jnk)
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JNK抑制剂对D-氨基葡萄糖衍生物诱导Eca-109细胞Caspase-3活化的影响 被引量:1
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作者 强占荣 吴静 +5 位作者 杨国栋 周永宁 姬瑞 李娟 王爱勤 薛群基 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期367-370,共4页
目的:观察特异性c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125对D-氨基葡萄糖衍生物(COPADG)诱导的Eca-109细胞Caspase-3激活及细胞凋亡的影响,并探讨COPADG诱导Eca-109细胞凋亡的潜在分子机制。方法:体外培养Eca-109细胞,以COPADG及SP600125... 目的:观察特异性c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125对D-氨基葡萄糖衍生物(COPADG)诱导的Eca-109细胞Caspase-3激活及细胞凋亡的影响,并探讨COPADG诱导Eca-109细胞凋亡的潜在分子机制。方法:体外培养Eca-109细胞,以COPADG及SP600125与细胞作用,细胞间接免疫荧光染色观察P-JNK蛋白表达的改变,流式细胞术检测细胞凋亡率及Caspase-3活性的变化。结果:经SP600125处理后,COPADG诱导的Eca-109细胞P-JNK蛋白表达明显减弱,凋亡率明显减低,Caspase-3活性显著下调,与COPADG单作用组之间有显著性差异。结论:SP600125能够显著抑制COPADG诱导Eca-109细胞Caspase-3激活以及COPADG诱导Eca-109细胞凋亡,并间接证明JNK信号转导通路在COPADG诱导Eca-109细胞凋亡过程中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖 食菅癌 c-jun氨基末端激酶 Caspase-3 特异性jnk抑制剂(SP600125)
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脑缺血预适应大鼠脑内c-Jun氨基末端激酶磷酸化水平和蛋白表达量的改变 被引量:1
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作者 赵兰峰 郭社卫 +1 位作者 安仰原 刘明刚 《中国康复理论与实践》 CSCD 2007年第7期623-625,共3页
目的初步探讨c-Jun氨基末端激酶(JNK)在大鼠脑缺血预适应中(IPC)的作用。方法将大鼠随机分为正常对照(control)、假手术(SI)、缺血预适应或缺血耐受(IT)、单纯蜜蜂毒(BV)、外周伤害耐受(PNT)5组。应用SDS-PAGE、Western blot等实验方法... 目的初步探讨c-Jun氨基末端激酶(JNK)在大鼠脑缺血预适应中(IPC)的作用。方法将大鼠随机分为正常对照(control)、假手术(SI)、缺血预适应或缺血耐受(IT)、单纯蜜蜂毒(BV)、外周伤害耐受(PNT)5组。应用SDS-PAGE、Western blot等实验方法,借助GelDoc和Versa Doc凝胶成像系统,半定量检测大脑躯体感觉皮层、海马组织内JNK的磷酸化水平和蛋白表达量的变化。结果IPC大鼠大脑躯体感觉皮层内JNK46KD的磷酸化水平(激活程度)增高(P<0.05),JNK54KD及海马组织内JNK46KD和JNK54KD的磷酸化水平无明显变化。IPC大鼠躯体感觉皮层JNK46KD蛋白表达量回落(P<0.05),JNK54KD及海马组织内JNK46KD和JNK54KD的蛋白表达量均无明显变化。结论大鼠躯体感觉皮层内JNK46kDa磷酸化水平的增高及其蛋白表达量的回落可能参与了脑缺血预适应的形成。 展开更多
关键词 脑缺血预适应 c-jun氨基末端激酶(jnk) 磷酸化 蛋白表达
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糖代谢异常对大鼠肝脏组织中巨噬细胞移动抑制因子及C-Jun氨基端激酶表达水平的影响 被引量:2
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作者 樊林花 刘建新 +4 位作者 李丹 卫兵艳 刘茂林 王春芳 刘田福 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期165-170,共6页
目的观察巨噬细胞移动抑制因子(MIF)和C-Jun氨基端激酶(JNK)在糖代谢异常大鼠肝脏组织中表达水平的变化,探讨糖代谢异常合并非酒精性脂肪肝(NAFLD)的病理机制。方法将60只大鼠随机分为糖耐量受损(IGT)模型组(n=20)、2型糖尿病(T2DM)模型... 目的观察巨噬细胞移动抑制因子(MIF)和C-Jun氨基端激酶(JNK)在糖代谢异常大鼠肝脏组织中表达水平的变化,探讨糖代谢异常合并非酒精性脂肪肝(NAFLD)的病理机制。方法将60只大鼠随机分为糖耐量受损(IGT)模型组(n=20)、2型糖尿病(T2DM)模型组(n=20)、IGT对照组(n=10)及T2DM对照组(n=10),高脂饲料喂养复制IGT大鼠模型,高脂饲料喂养加腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ)制备T2DM大鼠模型,采用TUNEL法检测各组大鼠肝脏细胞凋亡;实时荧光PCR技术检测肝脏组织中MIF mRNA的表达;Western blot方法检测肝脏组织中MIF、caspase-3、JNK蛋白表达及磷酸化JNK(p-JNK)的表达。结果 IGT大鼠及T2DM大鼠肝组织凋亡细胞明显增多;IGT组和T2DM组肝组织MIF基因表达较各自对照组明升高(P<0.01),MIF、caspase-3、JNK蛋白表达及JNK磷酸化水平也明显升高(P<0.05或P<0.01);与IGT组相比,T2DM组caspase-3、MIF、JNK蛋白表达水平明显降低(P<0.01),而JNK磷酸化水平是明显升高(P<0.01)。结论糖代谢异常合并非酒精性脂肪肝的发生可能与MIF、caspase-3、JNK表达水平的升高及JNK磷酸化水平的增强有关。 展开更多
关键词 巨噬细胞移动抑制因子 c-jun氨基激酶 CASPASE-3 糖耐量受损 2型糖尿病
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JNK3信号介导亚低温治疗对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用 被引量:4
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作者 田和平 褚正民 +1 位作者 金城胜 沈建国 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2015年第6期611-615,共5页
目的:探讨JNK3信号通路在亚低温治疗脑缺血再灌注性损伤中的作用及其具体机制。方法:采用四动脉阻断法诱导大鼠全脑缺血,将SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注对照组、亚低温处理组、SP600125(JNK3抑制剂)处理组及溶剂组;采用亚甲基蓝... 目的:探讨JNK3信号通路在亚低温治疗脑缺血再灌注性损伤中的作用及其具体机制。方法:采用四动脉阻断法诱导大鼠全脑缺血,将SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注对照组、亚低温处理组、SP600125(JNK3抑制剂)处理组及溶剂组;采用亚甲基蓝染色检测大鼠缺血再灌注后海马CA1区神经元的损伤情况;采用免疫印迹法检测脑组织中JNK3及c-jun蛋白的磷酸化水平。结果:亚低温处理组、SP600125(JNK3抑制剂)处理组与缺血再灌注对照组相比海马CA1区神经元损伤明显减轻,蛋白JNK3、c-jun磷酸化水平显著降低(P<0.05)。结论:亚低温治疗通过抑制脑缺血再灌注损伤后JNK3的磷酸化激活参与了对海马CA1区神经元的保护性作用。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注 亚低温 c-jun氨基末端激酶3(jnk3) c-jun(jnk蛋白天然底物)
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纳洛酮对大鼠脑缺血再灌注后JNK3蛋白表达的影响 被引量:7
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作者 田和平 褚正民 +1 位作者 金成胜 沈建国 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2013年第3期258-262,共5页
目的:观察纳洛酮对脑缺血再灌注损伤后海马区c-jun氨基末端激酶3(JNK3)表达的影响,探讨纳洛酮的脑保护作用机制。方法:采用线栓法制造大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,将SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注对照组、小剂量纳洛酮给药组、高... 目的:观察纳洛酮对脑缺血再灌注损伤后海马区c-jun氨基末端激酶3(JNK3)表达的影响,探讨纳洛酮的脑保护作用机制。方法:采用线栓法制造大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,将SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注对照组、小剂量纳洛酮给药组、高剂量纳洛酮给药组、SP600125(JNK3抑制剂)给药组及其溶剂组;采用氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测大鼠缺血再灌注后脑梗死范围;采用免疫印迹法检测海马区JNK3的磷酸化水平。结果:高剂量纳洛酮干预组、SP600125干预组与缺血再灌注组相比脑梗死范围缩小,蛋白JNK3磷酸化水平显著降低;随着干预剂量增加,纳洛酮抑制蛋白JNK3磷酸化水平作用增强。结论:纳洛酮通过抑制脑缺血再灌注损伤后JNK3的磷酸化激活参与了对脑组织的部分保护性作用,其作用呈剂量依赖性。 展开更多
关键词 纳洛酮 脑缺血再灌注 c—jun氨基末端激酶3
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PTSD样大鼠记忆损害与海马区JNK3/ERK5差异性表达的相关研究
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作者 刘超猛 李浩浩 +1 位作者 王梅子 张桂青 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第10期1516-1520,共5页
目的探讨创伤后应激障碍(PTSD)样大鼠记忆损害与不同时间点海马区氨基末端激酶3(JNK3)、细胞外信号调节激酶5(ERK5)表达的关系。方法将32只清洁级SD大鼠随机分为两组:Control组8只,PTSD组24只(PTSD2 d组、PTSD5 d组与PTSD8 d组,各8只),... 目的探讨创伤后应激障碍(PTSD)样大鼠记忆损害与不同时间点海马区氨基末端激酶3(JNK3)、细胞外信号调节激酶5(ERK5)表达的关系。方法将32只清洁级SD大鼠随机分为两组:Control组8只,PTSD组24只(PTSD2 d组、PTSD5 d组与PTSD8 d组,各8只),使用国际认定的单次延长应激(SPS)方法制作大鼠PTSD模型。分别通过拒缚反射评分、旷场实验和Morris水迷宫实验测试大鼠的恐惧反应、焦虑水平和空间记忆能力,采用HE染色观察大鼠海马组织形态变化,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法分别检测大鼠海马组织中JNK3/ERK5 mRNA及蛋白水平的变化。结果与Control组比较,PTSD组大鼠拒缚反射评分升高,站立与跨格次数减少,平均上台潜伏期延长,差异有统计学意义(P<0.05);HE染色结果表明,PTSD组大鼠海马神经元排列紊乱,结构异常;与Control组比较,PTSD2 d组、PTSD5 d组大鼠海马组织JNK3 mRNA及蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05),PTSD2 d、5 d与8 d组大鼠海马组织ERK5 mRNA及蛋白表达水平与Control组相比明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PTSD样大鼠记忆损害可能与海马区JNK3/ERK5差异性表达有关,ERK5基因及蛋白表达的持续上调,可能对JNK3的表达起抑制作用。 展开更多
关键词 创伤后应激障碍 氨基末端激酶3 细胞外信号调节激酶5 记忆损害
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人参皂苷20(s)-Rg3对llc-pk1细胞中顺铂所致肾毒性的保护作用 被引量:10
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作者 吴胜斌 王应灯 《世界中医药》 CAS 2018年第8期2010-2014,共5页
目的:探讨人参皂苷20(s)-Rg3对llc-pk1细胞中顺铂所致肾毒性的保护作用。方法:通过基于细胞的肾脏保护试验,研究了发酵黑参(FBG)及其活性成分人参皂苷20(S)-Rg3对猪肾(LLC-PK1)细胞中顺铂(化疗药物)诱导的损伤的保护作用。结果:由顺铂... 目的:探讨人参皂苷20(s)-Rg3对llc-pk1细胞中顺铂所致肾毒性的保护作用。方法:通过基于细胞的肾脏保护试验,研究了发酵黑参(FBG)及其活性成分人参皂苷20(S)-Rg3对猪肾(LLC-PK1)细胞中顺铂(化疗药物)诱导的损伤的保护作用。结果:由顺铂诱导的细胞活力降低,再使用FBG提取物和人参皂苷20(S)-Rg3依赖剂量后明显恢复。用FBG提取物或人参皂苷20(S)-Rg3处理后会降低顺铂诱导升高与磷酸化c-Jun N-末端激酶(JNK),p53和裂解的半胱天冬酶-3升高的蛋白。通过用FBG和人参皂苷20(S)-Rg3的共同处理,由于顺铂的诱导导致凋亡LLC-PK1细胞升高的百分比显著降低。结论:人参皂苷20(s)-Rg3可改善LLC-PK1的细胞毒性,人参皂苷20(S)-RG3可能是通过阻断JNK-P53-caspase-3信号级联反应来介导这种作用的重要组成部分。 展开更多
关键词 顺铂 人参皂苷20(S)-Rg3 llc-pk1细胞 c-jun N-末端激酶 肾毒性 发酵黑参 丝裂原活化蛋白激酶 细胞外调节蛋白激酶 磷酸脱氢酶 甘油醛-3-磷酸脱氢酶
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咪达唑仑通过调控JNK/STAT3通路对心肌梗死大鼠心脏功能及促血管生成作用的保护机制研究
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作者 李艾芳 梁栋 +1 位作者 戴远辉 陈思宇 《中国临床药理学与治疗学》 2025年第10期1342-1350,共9页
目的:探讨咪达唑仑(MID)对心肌梗死(MI)大鼠心脏功能及促血管生成的保护作用和对c-Jun氨基末端激酶-信号转导及转录激活因子3(JNK/STAT3)通路的影响。方法:通过冠状动脉左前降支结扎法建立心肌梗死大鼠模型。对68只大鼠进行造模处理,排... 目的:探讨咪达唑仑(MID)对心肌梗死(MI)大鼠心脏功能及促血管生成的保护作用和对c-Jun氨基末端激酶-信号转导及转录激活因子3(JNK/STAT3)通路的影响。方法:通过冠状动脉左前降支结扎法建立心肌梗死大鼠模型。对68只大鼠进行造模处理,排除死亡(n=3,死亡率≈4.4%)或造模失败(n=5)的大鼠,将纳入本次实验的60只MI大鼠随机分为模型组(Model组)、MID低、中、高剂量组(1mg/kgMID-L组;3mg/kgMID-M组;6mg/kgMID-H组)、MID高剂量+JNK激活剂Anisomycin组(6 mg/kg MID-H+Anisomycin组),每组12只大鼠。另取12只假手术大鼠作为对照组(Control组)。对所有大鼠进行超声心动图检查并评估心脏功能。采用苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察心肌组织病理形态及心肌纤维化程度;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清心肌损伤标记物[肌酸激酶同工酶(CK-MB)和脑利钠肽(BNP)]及炎性因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和C反应蛋白(CRP)]水平、心肌组织氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和还原型谷胱甘肽(GSH)]水平;蛋白印迹法(Western blot)检测血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)、p-JNK、JNK与p-STAT3、STAT3蛋白表达量。结果:与Control组比较,Model组大鼠心肌组织病损程度严重,心肌组织间质纤维化程度大大加深,胶原容积分数明显升高,心功能左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)、CK-MB、BNP、CRP、TNF-α、IL-1β和MDA水平显著升高,左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、GSH和SOD水平显著降低,VEGF、VEGFR2蛋白表达水平显著降低,p-JNK/JNK与p-STAT3/STAT3显著升高(P<0.05);与Model组比较,随着咪达唑仑剂量增加,MID-L、MID-M、MID-H组大鼠心肌组织病损程度明显减轻、心肌组织间质纤维化程度减轻,胶原容积分数降低,LVESD、LVEDD、CK-MB、BNP、CRP、TNF-α、IL-1β和MDA水平显著降低,LVEF、LVFS、GSH和SOD水平显著升高,VEGF、VEGF2R蛋白表达水平显著升高,p-JNK/JNK与p-STAT3/STAT3显著降低(P<0.05);与MID-H组比较,MID-H+An-isomycin组大鼠心肌组织病损程度较重、心肌组织间质纤维化程度大大加深,胶原容积分数明显升高,心功能减弱,氧化应激反应和炎症加剧,LVESD、LVEDD、CK-MB、BNP、CRP、TNF-α、IL-1β和MDA水平升高,LVEF、LVFS、GSH、SOD、VEGF、VEG-FR2蛋白表达水平显著降低,p-JNK/JNK与p-STAT3/STAT3显著升高(P<0.05)。结论:咪达唑仑可能通过调控JNK/STAT3通路改善心肌梗死大鼠心肌组织病损情况,减轻机体氧化应激和炎症反应,促进血管生成,从而发挥心脏保护作用。 展开更多
关键词 咪达唑仑 心肌梗死 大鼠 心脏功能 血管生成 c-jun氨基末端激酶-信号转导及转录激活因子3通路
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白藜芦醇抑制海马组织NF-κB/JNK通路改善严重烧伤大鼠认知功能 被引量:3
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作者 邢亮 魏伟 +3 位作者 张翠娜 高兵权 冯建科 马磊磊 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期604-609,共6页
目的探讨白藜芦醇(RSV)对严重烧伤大鼠认知功能的改善作用及其可能的机制。方法将雄性SD大鼠,随机分为对照组、模型组和RSV组,每组6只。建模成功后,RSV组大鼠每日灌胃20 mg/kg的RSV,对照组和模型组每日灌胃等体积的生理盐水溶液。4周后... 目的探讨白藜芦醇(RSV)对严重烧伤大鼠认知功能的改善作用及其可能的机制。方法将雄性SD大鼠,随机分为对照组、模型组和RSV组,每组6只。建模成功后,RSV组大鼠每日灌胃20 mg/kg的RSV,对照组和模型组每日灌胃等体积的生理盐水溶液。4周后,跳台实验检测大鼠认知功能;ELISA检测大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)含量;实时定量PCR和Western blot法分别检测海马组织中TNF-α、IL-6 mRNA和蛋白的表达;原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测海马神经细胞凋亡情况;Western blot法检测海马组织中核因子κB/c-Jun N-氨基末端激酶(NF-κB/JNK)通路相关蛋白表达情况。结果与模型组大鼠相比,RSV组大鼠认知功能提高,大鼠血清TNF-α和IL-6含量明显降低,海马组织中TNF-α、IL-6 mRNA及蛋白表达降低,海马神经元凋亡率降低,磷酸化的NF-κB p65/NF-κB p65(p-NF-κB p65/NF-κB p65)、p-JNK/JNK比值降低。结论RSV通过阻断NF-κB/JNK信号通路,抑制炎症反应和海马神经元凋亡,从而改善严重烧伤大鼠认知功能。 展开更多
关键词 白藜芦醇(RSV) 严重烧伤 认知功能 炎症 凋亡 核因子κB(NF-κB) c-jun N-氨基末端激酶(jnk)
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基于JNK信号通路探究半胱氨酸在非酒精性脂肪性肝炎发病机制中的作用 被引量:2
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作者 刘庆生 丁滨 +4 位作者 窦晓兵 潘然 张福利 丁蕾 桑怡 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2016年第4期366-371,共6页
目的:通过体外细胞实验,研究半胱氨酸(cysteine,CYS)加剧棕榈酸(palmitate,PAL)诱导肝细胞死亡的作用机制。方法:以人肝细胞株Hep G2为细胞模型,采用LDH、MTT技术以及Hoechst染色法检测细胞增殖活性,通过酶化学方法检测细胞内谷胱甘肽(g... 目的:通过体外细胞实验,研究半胱氨酸(cysteine,CYS)加剧棕榈酸(palmitate,PAL)诱导肝细胞死亡的作用机制。方法:以人肝细胞株Hep G2为细胞模型,采用LDH、MTT技术以及Hoechst染色法检测细胞增殖活性,通过酶化学方法检测细胞内谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,应用DCFH-DA探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,利用Western blot技术检测细胞内质网应激相关蛋白C/EBP同源转录因子(C/EBP homologous transcription factor,CHOP),GRP-78以及磷酸化的c-Jun氨基末端激酶(phosphorylated c-jun N-terminal kinase,p-JNK)的表达量。结果:(1)PAL可以显著抑制Hep G2细胞的增殖活性。(2)PAL提高Hep G2细胞内的GSH水平,但不影响MDA和ROS水平。(3)CYS显著加剧PAL诱导肝细胞死亡的作用。(4)CYS/PAL协同作用不影响细胞内MDA和ROS水平。(5)CYS/PAL协同作用可显著提高肝细胞内质网应激相关蛋白GRP-78、CHOP和p-JNK的表达。(6)抑制JNK通路可抑制PAL诱导的细胞死亡。结论:CYS通过激活JNK通路导致内质网应激加强,从而加剧PAL诱导细胞死亡,参与NASH发病机制。 展开更多
关键词 半胱氨酸 棕榈酸 内质网应激 肝细胞 c-jun氨基末端激酶(jnk)
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小鼠小肠缺血再灌注损伤早期JNK磷酸化的作用 被引量:2
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作者 郑德义 王建明 +4 位作者 贾一韬 付晋凤 吕开阳 郑兴锋 夏照帆 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期140-143,共4页
目的探讨c-Jun氨基端激酶(JNK)活化及其介导凋亡信号通路在小鼠小肠缺血再灌注损伤中的作用。方法C57 BL/6小鼠随机分为假手术组(S)和缺血再灌注不同时间[即刻(0)、0.5、1、4、6、12 h]组,夹闭肠系膜前动脉40 min后再灌注造成小肠缺血... 目的探讨c-Jun氨基端激酶(JNK)活化及其介导凋亡信号通路在小鼠小肠缺血再灌注损伤中的作用。方法C57 BL/6小鼠随机分为假手术组(S)和缺血再灌注不同时间[即刻(0)、0.5、1、4、6、12 h]组,夹闭肠系膜前动脉40 min后再灌注造成小肠缺血再灌注损伤模型,假手术组不夹闭动脉。假手术后及再灌注后不同时间处死小鼠取小肠标本,Western印迹法检测小肠JNK、磷酸化JNK、Cleaved-caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表达水平,观察回肠组织病理学改变。结果肠缺血再灌注早期肠组织病理损伤最重,至12 h肠组织结构基本恢复正常。肠缺血及再灌注早期,小肠组织JNK持续活化,与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.01);与假手术组比较,再灌注0.5、1 h小肠组织Cleaved-caspase-3明显增加(P<0.01),同时抗凋亡Bcl-2蛋白明显下调(P<0.01),各组间促凋亡蛋白Bax表达无统计学差异。结论肠缺血再灌注早期小肠组织JNK活化、抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调,可能参与了caspase-3依赖的细胞凋亡和组织损害。 展开更多
关键词 小肠 再灌注损伤 细胞凋亡 c-jun氨基激酶 半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3
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TGF-β/SMAD/JNK通路参与异氟醚后处理减轻大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤 被引量:10
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作者 殷姜文 葛明月 +5 位作者 李燕 谢丽萍 秦新磊 王瑞雪 代志刚 王胜 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期574-578,共5页
目的探讨异氟醚后处理通过调节转化生长因子β(TGF-β)信号通路发挥脑缺血后神经保护效应,及其对下游c-Jun氨基末端激酶(JNK)的影响。方法雄性SD大鼠50只,体重250~300 g,随机分为五组,每组10只:假手术组(S组)、脑缺血-再灌注损伤组(IR组... 目的探讨异氟醚后处理通过调节转化生长因子β(TGF-β)信号通路发挥脑缺血后神经保护效应,及其对下游c-Jun氨基末端激酶(JNK)的影响。方法雄性SD大鼠50只,体重250~300 g,随机分为五组,每组10只:假手术组(S组)、脑缺血-再灌注损伤组(IR组)、异氟醚后处理组(ISO组)、TGF-β1抑制剂组(LY组)和TGF-β1激动剂组(SR组)。S组仅做分离颈部血管的探查手术;IR组采用大脑中动脉栓塞模型(MCAO)建立脑缺血-再灌注损伤,缺血90 min,再灌注24 h;ISO组在MCAO再灌注即刻吸入1.5%异氟醚后处理60 min;LY组和SR组分别在MCAO前30 min经脑立体定位仪侧脑室分别注射抑制剂(LY2157299)和激动剂(SRI-011381),总量为50μl,注射10 min,注射完成后常规行MCAO和异氟醚后处理。TTC染色法及神经行为学评分判断神经损伤程度,采用TUNEL法检测神经元凋亡程度,免疫荧光染色法观察海马CA1区TGF-β1的蛋白定位,Western blot法检测海马TGF-β1及p-SMAD2/3、p-JNK1/2蛋白含量。结果与S组比较,IR组和ISO组神经行为学评分明显升高,神经元凋亡明显加重,TGF-β1、p-SMAD2/3和p-JNK1/2蛋白含量明显升高(P<0.05)。与IR组比较,ISO组和SR组神经行为学评分明显降低,神经元凋亡明显减轻,TGF-β1和p-SMAD2/3蛋白含量明显升高,p-JNK1/2蛋白含量明显降低(P<0.05)。与ISO组比较,LY组神经行为学评分明显升高,神经元凋亡明显加重,TGF-β1蛋白含量明显降低,p-JNK1/2蛋白含量明显升高(P<0.05)。结论异氟醚后处理可通过调节TGF-β1/SMAD信号通路进而抑制p-JNK1/2的表达,发挥对大鼠脑缺血-再灌注损伤的神经保护作用。 展开更多
关键词 异氟醚 后处理 脑缺血-再灌注损伤 转化生长因子-β c-jun氨基-末端激酶 TGF-β/SMAD/jnk通路
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多效生长因子通过JNK信号通路负调控Schlafen2基因表达 被引量:2
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作者 方玲 胡迎春 +5 位作者 杨柳 刘梦伊 刘昕 潘兴斌 吴德昌 霍艳英 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1135-1139,共5页
实验室前期研究发现,多效生长因子(pleiotrophin,PTN)基因稳定沉默的小鼠胚胎成纤维细胞中Schlafen2(Slfn2)基因高表达.为了探讨Ptn沉默诱导Slfn2基因表达可能涉及的信号通路,应用Western印迹检测外源性PTN因子(终浓度50ng/μl)对Ptn沉... 实验室前期研究发现,多效生长因子(pleiotrophin,PTN)基因稳定沉默的小鼠胚胎成纤维细胞中Schlafen2(Slfn2)基因高表达.为了探讨Ptn沉默诱导Slfn2基因表达可能涉及的信号通路,应用Western印迹检测外源性PTN因子(终浓度50ng/μl)对Ptn沉默细胞JNK磷酸化水平的影响;应用Northern印迹分别检测JNK和p38通路特异性抑制剂对Ptn沉默细胞Slfn2基因转录水平的影响.结果发现,Ptn沉默细胞内JNK磷酸化水平高于对照细胞,外源性PTN处理后沉默细胞内JNK磷酸化水平下调;阻断JNK通路呈时间依赖性抑制Ptn沉默细胞中Slfn2基因转录,阻断p38通路对Ptn沉默细胞中Slfn2转录水平没有明显影响.结果提示,Ptn可能通过抑制其下游JNK/MAPK通路来负调控Slfn2的表达. 展开更多
关键词 多效生长因子 基因沉默 c-jun氨基末端激酶(jnk信号通路) Schlafen2
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过表达JNK2增强SCL-1人皮肤鳞状细胞癌细胞的增殖及抗凋亡能力 被引量:2
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作者 刘慧旭 董辉 +3 位作者 张旭 陈源昊琪 焦亚宁 葛新红 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1000-1007,共8页
目的探讨c-Jun氨基末端激酶1(JNK1)或JNK2过表达对SCL-1人皮肤鳞状细胞癌细胞增殖和凋亡的影响及分子机制。方法将JNK1、JNK2分别与p HBAD-EF1-MCS-3FLAG-CMV-GFP载体结合,构建JNK1和JNK2的重组腺病毒表达载体,感染SCL-1细胞,优化感染条... 目的探讨c-Jun氨基末端激酶1(JNK1)或JNK2过表达对SCL-1人皮肤鳞状细胞癌细胞增殖和凋亡的影响及分子机制。方法将JNK1、JNK2分别与p HBAD-EF1-MCS-3FLAG-CMV-GFP载体结合,构建JNK1和JNK2的重组腺病毒表达载体,感染SCL-1细胞,优化感染条件,实时荧光定量PCR和Western blot法鉴定过表达效果。CCK-8法测定SCL-1细胞的增殖活性,细胞克隆形成实验观察细胞集落形成能力,划痕实验检测细胞划痕愈合率;流式细胞术检测细胞凋亡水平,实时荧光定量PCR检测JNK1、JNK2、c-Jun mRNA水平; Western blot法检测磷酸化c-Jun的蛋白水平。结果 JNK1、JNK2过表达腺病毒载体最佳感染条件为感染复数(MOI)=100,感染48 h后,SCL-1细胞的JNK1和JNK2的表达水平显著升高。与对照组相比,过表达JNK1对SCL-1细胞的增殖和抗凋亡能力无显著影响,过表达JNK2的SCL-1细胞增殖和抗凋亡能力明显增强,且磷酸化c-Jun蛋白水平上调。结论过表达JNK2可以增强SCL-1人皮肤鳞状细胞癌细胞的增殖能力和抗凋亡能力。 展开更多
关键词 皮肤鳞状细胞癌 SCL-1细胞 c-jun氨基末端激酶1(jnk1) jnk2 细胞增殖 细胞凋亡
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植物黄酮调控JNK通路干预氧化应激相关疾病的研究进展 被引量:5
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作者 宋欣豫 李大鹏 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2021年第24期454-460,共7页
c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)是丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)家族的成员。JNK信号传导途径由一系列激酶调节,参与细胞增殖、分化、凋亡、神经元功能和应激反应等生理功能的调控,介导... c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)是丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)家族的成员。JNK信号传导途径由一系列激酶调节,参与细胞增殖、分化、凋亡、神经元功能和应激反应等生理功能的调控,介导多种疾病的发生。植物膳食中的黄酮类化合物具有抗氧化、抗炎、调节血管渗透等能力,可以通过调控氧化应激反应对JNK相关的疾病产生显著的干预效果。本文介绍了植物黄酮通过调控JNK通路干预氧化应激相关疾病的研究进展,为今后的研究和应用提供借鉴。 展开更多
关键词 c-jun氨基末端激酶(jnk) 植物膳食 黄酮 氧化应激 疾病
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过表达Bax抑制子1(BI-1)通过内质网IRE1-JNK通路抑制蛛网膜下腔出血大鼠海马神经元凋亡 被引量:4
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作者 刘佳鑫 周帅 +2 位作者 钱希颖 张月婷 赵建华 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1316-1322,共7页
目的探讨慢病毒介导Bax抑制子1(BI-1)过表达对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠海马神经元保护作用以及与内质网膜蛋白肌醇酶1-c-Jun氨基末端激酶(IRE1-JNK)信号通路的关系。方法制备BI-1过表达慢病毒并经侧脑注射,24 h后采用血管内穿刺法建立SA... 目的探讨慢病毒介导Bax抑制子1(BI-1)过表达对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠海马神经元保护作用以及与内质网膜蛋白肌醇酶1-c-Jun氨基末端激酶(IRE1-JNK)信号通路的关系。方法制备BI-1过表达慢病毒并经侧脑注射,24 h后采用血管内穿刺法建立SAH大鼠模型。于造模后24 h,对大鼠进行神经行为学评估和脑含水量检测,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)观察大鼠海马神经元凋亡情况,Western blot法检测BI-1蛋白以及内质网应激标志蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和IRE1蛋白水平。采用IRE1α特异性抑制剂KIRA6处理SAH后大鼠,Western blot法检测BI-1过表达对IRE1-JNK信号通路相关蛋白磷酸化的IRE1(p-IRE1)、磷酸化的JNK(p-JNK)及凋亡相关蛋白Bax、Bcl2和caspase-3蛋白水平的影响。结果过表达BI-1提高SAH模型大鼠的神经行为学评估得分,降低SAH模型大鼠的脑含水量和海马神经元凋亡率,并且BI-1过表达可以下调SAH后大鼠海马神经元中GRP78和IRE1蛋白水平。KIRA6处理和BI-1过表达均可抑制p-IRE1、p-JNK、Bax的表达和caspase-3的活化,促进Bcl2的表达。结论过表达BI-1可通过阻断IRE1-JNK通路抑制SAH后大鼠海马神经元凋亡。 展开更多
关键词 Bax抑制子1(BI-1) 肌醇酶1(IRE1) c-jun氨基末端激酶(jnk) 蛛网膜下腔出血 细胞凋亡
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