c-myc反义寡核苷酸抑制半乳糖性白内障晶状体上皮细胞凋亡的机制 被引量：3

1

作者 范芳 林宏华 +4 位作者 葛正龙 刘华庆 曾小平 蔡善君 李海祥 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期203-206,共4页

目的研究c-myc反义寡核苷酸(ASODN)对半乳糖性白内障晶状体上皮细胞(LECs)凋亡的影响。方法将Wistar大鼠按随机数字表法分为生理盐水组、半乳糖组和半乳糖+c-myc ASODN组,每组36只。半乳糖组及半乳糖+c-myc ASODN组每日球后注射0.2mL20... 目的研究c-myc反义寡核苷酸(ASODN)对半乳糖性白内障晶状体上皮细胞(LECs)凋亡的影响。方法将Wistar大鼠按随机数字表法分为生理盐水组、半乳糖组和半乳糖+c-myc ASODN组,每组36只。半乳糖组及半乳糖+c-myc ASODN组每日球后注射0.2mL20%半乳糖,制作大鼠半乳糖性白内障模型,半乳糖+c-mycASODN组球后注射半乳糖4h后加注Lipo-c-myc ASODN复合液0.2mL,隔日1次。分别于给药后7、14、24d处死动物,取出晶状体,检测LECs的凋亡情况,采用TUNEL法检测c-myc ASODN对半乳糖诱导LECs凋亡的影响,透射电镜下观察LECs超微结构的改变。结果各组在7、14、24d的LECs凋亡率比较,差异均有统计学意义(F7days=3418.495,P<0.01;F14days=1137.555,P<0.01;F24days=2198.871,P<0.01);24d时半乳糖组LECs的凋亡率为56.57±3.20,生理盐水组为0.37±0.11,差异有统计学意义(P<0.01);半乳糖+c-myc ASODN组细胞凋亡率为29.35±1.63,较半乳糖组明显降低(P<0.05)。透射电镜下观察发现,半乳糖组可见LECs呈凋亡细胞的早期改变;随着高糖诱导时间的延长,凋亡细胞逐渐增多;生理盐水组几乎未见到凋亡细胞;半乳糖+c-myc ASODN组凋亡细胞数量较同期半乳糖组少。结论在白内障形成过程中半乳糖能诱导LECs凋亡,c-myc ASODN能够抑制半乳糖诱导的LECs凋亡。 展开更多

关键词 c—myc反义寡核苷酸 半乳糖 白内障 细胞凋亡

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c-myc反义寡核苷酸对HL-60细胞端粒酶活性影响及诱导凋亡作用 被引量：9

2

作者 孙玲 王峰 +7 位作者 孙慧 乐晓萍 刘林湘 刘延方 王芳 王一浩 马鸿雁 张钦宪 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第4期605-609,共5页

为了研究c-myc基因反义寡核苷酸(ASODN)对HL-60细胞端粒酶活性的影响及其诱导凋亡作用,探讨HL-60细胞端粒酶活性与c-myc基因表达的关系,应用反义寡核苷酸封闭HL-60细胞c-myc基因的表达,RT-PCR方法检测该基因表达抑制情况,采用流式细胞... 为了研究c-myc基因反义寡核苷酸(ASODN)对HL-60细胞端粒酶活性的影响及其诱导凋亡作用,探讨HL-60细胞端粒酶活性与c-myc基因表达的关系,应用反义寡核苷酸封闭HL-60细胞c-myc基因的表达,RT-PCR方法检测该基因表达抑制情况,采用流式细胞术进行细胞凋亡检测及细胞周期分析,琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞的DNA断裂情况,应用TRAP-ELISA法测定HL-60细胞端粒酶的活性。结果表明:反义硫代寡核苷酸作用于HL-60细胞72小时后,c-myc基因表达明显受抑;S期细胞百分数由55.6%降至30%,并出现早期凋亡峰(凋亡细胞比例占25.2%);琼脂糖凝胶电泳显示DNA凋亡梯形带;端粒酶活性检测发现反义寡核苷酸3,4,5μmol/L作用组OD450-690分别为1.952±0.14,1.805±0.40,1.616±0.41,与未作用组(OD450-690为2.648±0.42)比较,差异有显著性(P<0.05);反义寡核苷酸1和2μmol/L作用组及正义寡核苷酸5μmol/L作用组OD450-690分别为2.324±0.36,2.162±0.38,2.466±0.29,与未作用组比较,差异无显著性(P>0.05)。结论:c-myc基因反义寡核苷酸能够通过封闭c-myc基因的表达而诱导HL-60细胞凋亡,阻止细胞由G1期进入S期,并具有下调端粒酶活性作用。 展开更多

关键词 HL-60细胞 c—myc基因 反义核酸 细胞凋亡 端粒酶活性

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c-myc反义寡核苷酸对粘液表皮样癌细胞生长的抑制作用 被引量：6

3

作者 王石光 司徒镇强 +1 位作者 吴军正 刘斌 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期391-393,共3页

目的 :探讨 c- myc基因的反义寡核苷酸 (ASODN)在涎腺粘液表皮样癌基因治疗中的作用。方法 :人工合成与 c- myc基因第二外显子翻译起始区序列互补的寡核苷酸 ,处理培养的人涎腺粘液表皮样癌 MEC- 1细胞。应用 MTT比色法观察其对细胞增... 目的 :探讨 c- myc基因的反义寡核苷酸 (ASODN)在涎腺粘液表皮样癌基因治疗中的作用。方法 :人工合成与 c- myc基因第二外显子翻译起始区序列互补的寡核苷酸 ,处理培养的人涎腺粘液表皮样癌 MEC- 1细胞。应用 MTT比色法观察其对细胞增殖的影响 ;流式细胞仪检测对细胞周期的影响 ;并采用免疫组化法检测 C- MYC蛋白的表达。结果 :c- myc反义寡核苷酸能抑制粘液表皮样癌 MEC- 1细胞的增殖 ,抑制作用具有浓度及时间依赖性。 5 0 %抑制浓度 (IC5 0 )为 8.2 μmol/ L。用浓度为 10 μmol/ L 的 c- myc ASODN处理 72 h,对 MEC- 1细胞的抑制率达 5 9%。c- myc ASODN抑制 MEC- 1细胞从 G1 期进入 S期 ;并能抑制 C- MYC蛋白的表达。结论 :c- myc反义寡核苷酸对粘液表皮样癌 MEC- 展开更多

关键词 粘液表皮样癌 myc基因 反义寡核苷酸 抑制作用

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反义c-myc寡核苷酸诱导骨肉瘤细胞MG-63凋亡的实验研究 被引量：1

4

作者 胡军 王桂龙 +3 位作者 向阳 刘义 陈一升 丁茹虎 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期1343-1346,共4页

目的:研究反义c-myc寡核苷酸诱导人骨肉瘤MG-63细胞凋亡的作用。方法:设计反义c-myc寡核苷酸片段,转染入人骨肉瘤MG-63细胞,通过MTT法、流式细胞仪、HE染色及透射电镜方法,观察和分析其对人骨肉瘤MG-63细胞作用的效果。结果:MTT法示反义... 目的:研究反义c-myc寡核苷酸诱导人骨肉瘤MG-63细胞凋亡的作用。方法:设计反义c-myc寡核苷酸片段,转染入人骨肉瘤MG-63细胞,通过MTT法、流式细胞仪、HE染色及透射电镜方法,观察和分析其对人骨肉瘤MG-63细胞作用的效果。结果:MTT法示反义c-myc寡核苷酸可抑制人骨肉瘤MG-63细胞的增殖,10.0μmol/L、作用48h效果最明显;流式细胞仪检测证实反义c-myc寡核苷酸(终浓度10.0μmol/L)诱导瘤细胞的凋亡率达37.92%,出现明显的凋亡峰,并可抑制c-myc基因蛋白的表达;细胞呈典型凋亡特征。结论:反义c-myc寡核苷酸能有效诱导人骨肉瘤MG-63细胞的凋亡。 展开更多

关键词 基因 c—myc 寡核苷酸类 反义 骨肉瘤 细胞凋亡

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反义c-myc寡核苷酸抑制大鼠胸腺淋巴细胞增殖

5

作者 刘颖格 戚好文 +3 位作者 李焕章 苏明权 于文彬 马越云 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期745-747,共3页

目的 :观察反义c-myc寡核苷酸对大鼠胸腺淋巴细胞增殖的抑制作用。方法 :Ficoll密度梯度离心法分离大鼠胸腺淋巴细胞。利用Iipofectin将正义、反义及错配c -myc寡核苷酸导入大鼠胸腺淋巴细胞 ,[3 H]-TdR掺入法及MTS法检测淋巴细胞增殖 ,... 目的 :观察反义c-myc寡核苷酸对大鼠胸腺淋巴细胞增殖的抑制作用。方法 :Ficoll密度梯度离心法分离大鼠胸腺淋巴细胞。利用Iipofectin将正义、反义及错配c -myc寡核苷酸导入大鼠胸腺淋巴细胞 ,[3 H]-TdR掺入法及MTS法检测淋巴细胞增殖 ,RT -PCR检测c-mycmRNA的表达。结果 :反义c-myc寡核苷酸可抑制大鼠胸腺淋巴细胞的增殖 [(0 14± 0 0 3)Avs (0 32± 0 16 )A ,P <0 0 5 ],但此抑制作用无浓度依赖性 ,反义c -myc寡核苷酸可降低胸腺淋巴细胞c-mycmRNA的表达。结论 :反义c -myc寡核苷酸可抑制大鼠胸腺淋巴细胞的增殖。 展开更多

关键词 基因 myc 寡核苷酸类 反义 淋巴细胞

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VEGF反义寡核苷酸抑制C_6胶质瘤细胞VEGF表达的作用和效果 被引量：8

6

作者 李维方 张光霁 +2 位作者 朱诚 金由辛 卢亦成 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期156-158,共3页

目的 :设计了针对 VEGF的第 外显子 (exon,E3)的反义、错义和正义寡核苷酸 ,观察 VEGF反义寡核苷酸抑制 C6胶质瘤细胞 VEGF表达的作用。 方法 :免疫细胞化学法观察反义、正义、错义寡核苷酸对 C6 胶质瘤细胞 VEGF表达的影响 ;观察制备... 目的 :设计了针对 VEGF的第 外显子 (exon,E3)的反义、错义和正义寡核苷酸 ,观察 VEGF反义寡核苷酸抑制 C6胶质瘤细胞 VEGF表达的作用。 方法 :免疫细胞化学法观察反义、正义、错义寡核苷酸对 C6 胶质瘤细胞 VEGF表达的影响 ;观察制备反义、正义、错义寡核苷酸的条件培养液对内皮细胞生长的抑制作用。 结果 :VEGF反义寡核苷酸对 C6 胶质瘤细胞VEGF的表达有明显抑制作用。 结论 :反义 VEGF寡核苷酸通过抑制 C6 胶质瘤细胞 VEGF的表达 ,进而抑制内皮细胞的生长。 展开更多

关键词 神经胶质瘤 血管内皮 血管内皮生长因子 反义寡核苷酸类 c6胶质瘤 VEGF

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c-sis反义寡核苷酸对肺血管平滑肌细胞增殖和细胞周期的影响 被引量：7

7

作者 刘瀚旻 熊英 +2 位作者 袁粒星 李谧 罗春华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期1227-1230,共4页

目的 :探讨从血小板源生长因子 -B链 (PDGF -B)的基因水平阻断对肺血管平滑肌细胞增殖的影响。方法 :给肺动脉平滑肌细胞 (VSMC)分别施加不同剂量的c -sis癌基因反义寡核苷酸 (ASON) ,通过四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法观察细胞不同时相的增... 目的 :探讨从血小板源生长因子 -B链 (PDGF -B)的基因水平阻断对肺血管平滑肌细胞增殖的影响。方法 :给肺动脉平滑肌细胞 (VSMC)分别施加不同剂量的c -sis癌基因反义寡核苷酸 (ASON) ,通过四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法观察细胞不同时相的增殖曲线 ;采用流式细胞术观察不同干预条件下VSMC细胞周期的变化。结果 :中、大浓度ASON对细胞增殖有明显抑制作用。在中浓度的ASON作用下 ,加入PDGF -BB能促进VSMC的增殖。ASON干预前后 ,VSMC增殖周期中各期细胞构成发生显著的变化 ,以G0 +G1期细胞增多、S +G2 +M期细胞减少为特征。各组的G0 +G1期细胞均显著多于对照组 (P <0 0 5 )。小剂量与中剂量、中剂量与大剂量间G0 +G1期细胞有显著差异 (P <0 0 5 )。结论 :中、大剂量ASON能明显抑制肺VSMC的增殖 ,可使G0 +G1期细胞数明显增多 。 展开更多

关键词 原癌基因蛋白质c—sis 寡核苷酸类 反义 肌 平滑 血管 细胞周期

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c-erbB2反义寡核苷酸对人卵巢癌细胞放射敏感性的影响 被引量：3

8

作者 任庆兰 吴永忠 +1 位作者 刘渝 李少林 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2003年第4期421-423,共3页

目的 :探讨癌基因c -erbB2的反义寡苷酸对人卵巢癌细胞放射敏感性的影响。方法 :设立c -erbB2正义寡核苷酸组和非处理组作对照 ,用RT -PCR检测卵巢癌细胞处理前后c -erbB2表达水平的变化。用MTT法及平板克隆形成试验检测人卵巢癌细胞株S... 目的 :探讨癌基因c -erbB2的反义寡苷酸对人卵巢癌细胞放射敏感性的影响。方法 :设立c -erbB2正义寡核苷酸组和非处理组作对照 ,用RT -PCR检测卵巢癌细胞处理前后c -erbB2表达水平的变化。用MTT法及平板克隆形成试验检测人卵巢癌细胞株SKOV3在脂质体c-erbB2反义寡核苷酸作用前后受60 Coγ射线不同剂量照射后的细胞存活分数和集落形成率。结果 :c -erbB2反义寡核苷酸能抑制c-erbB2癌基因的表达 ,经脂质体介导的c-erbB2反义寡核苷酸作用的卵巢癌细胞经γ射线照射后其存活分数和集落形成率较转染正义寡核苷酸组及单纯照射组明显下降 (P <0 .0 1) ,而转染c -erbB2正义寡核苷酸组的存活分数和集落形成率与单纯照射组相比无明显差异 (P >0 .0 5 )。结论 :c -erbB2反义寡核苷酸通过抑制c -erbB2的表达降低人卵巢癌细胞株SKOV3放射抗拒性。该作用可能与c-erbB2反义寡核苷酸抑制了引起细胞辐射抗拒的细胞信号转导途径有关。 展开更多

关键词 卵巢癌细胞株 脂质体 c—erbB2反义寡核苷酸 放射敏感性

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蛋白激酶Cα反义寡核苷酸对人胰腺癌BXPC-3细胞体外侵袭力的影响 被引量：1

9

作者 黄涛 冯延平 +3 位作者 高军 常青 秦仁义 裘法祖 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2006年第5期892-894,共3页

目的:观察蛋白激酶Cα(PKCα)反义寡核苷酸(ASODN)对人胰腺癌BXPC-3细胞体外侵袭力的影响。方法:将BXPC-3细胞分为7组:对照组,64mg/L随机寡核苷酸序列(RODN)转染组,4mg/L、8mg/L、16mg/L、32mg/L和64mg/LASODN转染组,RT-PCR方法检测PKC... 目的:观察蛋白激酶Cα(PKCα)反义寡核苷酸(ASODN)对人胰腺癌BXPC-3细胞体外侵袭力的影响。方法:将BXPC-3细胞分为7组:对照组,64mg/L随机寡核苷酸序列(RODN)转染组,4mg/L、8mg/L、16mg/L、32mg/L和64mg/LASODN转染组,RT-PCR方法检测PKCαmRNA表达情况;以有效转染浓度的ASODN转染BXPC-3细胞,并设对照和RODN组,Transwell侵袭小室方法检测BXPC-3细胞体外侵袭能力。结果:16mg/L、32mg/L和64mg/LASODN转染组PKCα/GADPHmRNA灰度值(0.6371±0.0360,0.5632±0.0080,0.2389±0.0200)均低于对照组(0.9121±0.0250)(P<0.05),RODN组(0.9147±0.0170)、4mg/LASODN组(0.9123±0.0180)和8mg/LASODN组(0.9116±0.0290)与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与对照组穿膜细胞数(286±10)和RODN组(268±3)比较,转染16mg/LPKCαASODN(119±9)可降低胰腺癌BXPC-3细胞的体外侵袭力(P<0.05)。结论:靶向PKCα的ASODN可有效阻断其在人胰腺癌BXPC-3细胞中的表达,并降低癌细胞体外侵袭力。 展开更多

关键词 反义寡核苷酸 蛋白激酶cΑ 胰腺肿瘤 癌 BXPc-3细胞

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c-FLIP反义寡核苷酸纳米粒抑制人眼眶横纹肌肉瘤裸鼠移植瘤的生长

10

作者 梁莉 魏锐利 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期852-856,共5页

目的探讨c-FLIP反义寡核苷酸(c-FLIP ASODN)纳米粒(NP)对裸鼠体内人眼眶横纹肌肉瘤移植瘤生长的影响,评估纳米粒作为基因载体的可行性。方法皮下种植法建立裸鼠人眼眶横纹肌肉瘤动物模型,瘤体内分别注射c-FLIP反义寡核苷酸纳米粒(ASODN... 目的探讨c-FLIP反义寡核苷酸(c-FLIP ASODN)纳米粒(NP)对裸鼠体内人眼眶横纹肌肉瘤移植瘤生长的影响,评估纳米粒作为基因载体的可行性。方法皮下种植法建立裸鼠人眼眶横纹肌肉瘤动物模型,瘤体内分别注射c-FLIP反义寡核苷酸纳米粒(ASODN NP组)、未包裹的c-FLIP反义寡核苷酸(ASODN组)及生理盐水(NS组),观察肿瘤体积、组织形态学改变;应用蛋白质印迹分析法及免疫组化染色检测各组肿瘤组织c-FLIP的表达情况;应用TUNEL细胞凋亡检测试剂盒检测肿瘤组织细胞凋亡情况。结果与其他两组相比,ASODN NP组肿瘤的生长受到抑制;蛋白质印迹分析显示ASODN NP组和ASODN组的c-FLIP表达均较NS组减少(P<0.05);免疫组化显示c-FLIP表达于胞质,ASODN NP组c-FLIP阳性细胞较其余两组减少(P<0.05);ASODN NP组及ASODN组肿瘤组织凋亡细胞增多,ASODN NP组更加明显,NS组仅见个别细胞凋亡。结论 c-FLIP ASODN NP可有效抑制人眼眶横纹肌肉瘤裸鼠移植瘤的生长。NP可作为一种安全有效的ASODN导入载体。 展开更多

关键词 反义寡核苷酸类 纳米粒子 c—FLIP 横纹肌肉瘤 裸小鼠

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受体介导的c-myc反义核酸提高肝癌细胞对不同化疗药物的敏感性 被引量：3

11

作者 蒋建伟 张洹 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2005年第13期725-728,共4页

目的:探讨半乳糖(Galactose,Gal)-聚乙烯亚胺(Polyethyleneimine,PEI)-c-myc反义核酸(Antisense鄄Oligonucleotides,ASODN)复合物联合化疗药物三氧化二砷(ArsenicTrioxideAs2O3),5-氟脲嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU),表阿霉素(Pharmorbinci... 目的:探讨半乳糖(Galactose,Gal)-聚乙烯亚胺(Polyethyleneimine,PEI)-c-myc反义核酸(Antisense鄄Oligonucleotides,ASODN)复合物联合化疗药物三氧化二砷(ArsenicTrioxideAs2O3),5-氟脲嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU),表阿霉素(Pharmorbincin,PHA)对人肝癌Bel-7402细胞增殖的抑制作用。方法:选用不同浓度的As2O3、5-FU、PHA单独使用、联合c-mycASODN、联合Gal-PEI-ASODN,作用于Bel-7402细胞,采用WST-8法检测细胞增殖的抑制率,并计算药物作用的IC50。结果:不同浓度的化疗药物(As2O3,5-FU,PHA)联合0.25μmol/LGal-PEI-ASODN均明显降低了化疗药物的IC50,提高了Bel-7402细胞对化疗药物的敏感性(分别提高药效3.38,1.58,2.05倍)。结论:半乳糖受体介导的c-myc反义核酸能提高人肝癌Bel-7402细胞对As2O3,5-FU,PHA的敏感性,与As2O3联合作用效果最好。 展开更多

关键词 半乳糖 受体 c—myc反义核酸 化学治疗

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c—myc反义RNA转录体的构建及其对HL60细胞恶性表型的影响

12

作者 李尹雄 范慕贞 +1 位作者 张京俐 梁植权 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第1期34-38,共5页

本研究构建了c-myc反义RNA真核细胞可诱导表达质粒PGXC.用PGXC及PSV_(2)neo质粒共转染人早幼粒细胞白血病细胞HL60,经G418抗性筛选得到转染细胞HL_(60)L^R,与亲本细胞相比其生长速率明显减低;细胞周期中G1期细胞增多,而S期细胞相应减少... 本研究构建了c-myc反义RNA真核细胞可诱导表达质粒PGXC.用PGXC及PSV_(2)neo质粒共转染人早幼粒细胞白血病细胞HL60,经G418抗性筛选得到转染细胞HL_(60)L^R,与亲本细胞相比其生长速率明显减低;细胞周期中G1期细胞增多,而S期细胞相应减少;细胞形态及功能呈现分化诱导;在软琼脂上不能形成集落;该细胞在裸鼠体内的致瘤性亦显著减弱以至消失. 展开更多

关键词 c—myc 反义RNA 恶性表型 HL60细胞 转录体 集落 共转染 诱导表达 真核细胞 抗性筛选

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耐药乳腺癌MCF-7/Adr细胞c-myc的表达上调及与耐药的关系 被引量：4

13

作者 陈俊 袁亚维 +1 位作者 张积仁 周殿元 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第2期124-126,共3页

目的观察耐药乳腺癌细胞c-myc表达及其反义寡核苷酸对耐药的逆转效应,探讨c-myc在耐药调控中的作用。方法运用流式细胞仪检测乳腺癌耐药细胞MCF-7/Adr和其药敏亲本系MCF-7的c-myc表达水平。MTT法测定阿霉素作用于上述细胞的药物半数抑... 目的观察耐药乳腺癌细胞c-myc表达及其反义寡核苷酸对耐药的逆转效应,探讨c-myc在耐药调控中的作用。方法运用流式细胞仪检测乳腺癌耐药细胞MCF-7/Adr和其药敏亲本系MCF-7的c-myc表达水平。MTT法测定阿霉素作用于上述细胞的药物半数抑制浓度(IC50)。结果MCF-7/Adr耐药细胞c-myc的表达率为70.48%,其亲本药敏细胞系MCF-7c-myc表达率仅46.02%,前者显著高于后者(P<0.05)。阿霉素单独作用于MCF-7/Adr,IC50值为(22.00±1.92)μmol/L,但与4μmol/Lc-myc反义寡核苷酸共孵育后,阿霉素的IC50值则显著下降为(9.60±1.04)μmol/L。结论与其亲本药敏细胞相比较,MCF-7/Adr的c-myc表达显著上调,抑制c-myc的过表达可部分逆转MCF-7/Adr的阿霉素抵抗,提示c-myc参与肿瘤耐药的发生。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 myc基因 反义寡核苷酸类 多药抗药性 阿霉素

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脂质体介导反义C-FLIP对BGC823细胞凋亡的影响 被引量：1

14

作者 张国强 庞达 +2 位作者 蔡莉 张岂凡 赵家宏 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2005年第19期1100-1103,共4页

目的:探讨脂质体介导下c-FLIP(Cellular-FLICEInhibitoryProtein)反义寡核苷酸对胃癌细胞系BGC823的作用。方法:RT-PCR和WesternBlot方法检测c-FLIPL、c-FLIPS的mRNA和蛋白的表达;MTT法检测细胞抑制率;原位末端标记法、流式细胞术检测... 目的:探讨脂质体介导下c-FLIP(Cellular-FLICEInhibitoryProtein)反义寡核苷酸对胃癌细胞系BGC823的作用。方法:RT-PCR和WesternBlot方法检测c-FLIPL、c-FLIPS的mRNA和蛋白的表达;MTT法检测细胞抑制率;原位末端标记法、流式细胞术检测细胞凋亡;WesternBlot检测蛋白表达变化。结果:c-FLIP基因编码的2种mRNA和蛋白在Hela、BGC823细胞中呈阳性表达。MTT显示脂质体介导反义寡核苷酸可显著抑制BGC823细胞增殖;反义寡核苷酸作用细胞36h后,TUNEL检测可见明显阳性染色,流式细胞分析发现在G1峰前出现凋亡峰;WesternBlot可见c-FLIPL和c-FLIPS蛋白表达显著下降。结论:c-FLIPL、c-FLIPSmRNA和蛋白在Hela、BGC823细胞中表达。脂质体介导c-FLIP反义寡核苷酸转染BGC823细胞后抑制目的蛋白表达,抑制细胞生长、促进凋亡,其作用呈剂量依赖性。研究靶向c-FLIP的反义基因治疗药物可能为胃癌的临床治疗提供新的方法和思路。 展开更多

关键词 反义寡核苷酸 c—FLIP BGc823细胞 凋亡

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反义PKCα对CNE-2Z细胞周期的影响

15

作者 鲍波 黄培春 +3 位作者 董传仁 陈锦 陈南岳 何志巍 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第7期782-784,I002,共4页

目的 :观察蛋白激酶Cα亚型 (PKCα)的反义寡核苷酸对鼻咽癌CNE - 2Z细胞生长、细胞周期和cyclinE表达的影响。方法 :脂质体法转染反义PKCα,MTT法测细胞生长 ,流式细胞仪检测细胞周期 ,免疫细胞化学及点印迹法检测cyclinE表达。结果 :... 目的 :观察蛋白激酶Cα亚型 (PKCα)的反义寡核苷酸对鼻咽癌CNE - 2Z细胞生长、细胞周期和cyclinE表达的影响。方法 :脂质体法转染反义PKCα,MTT法测细胞生长 ,流式细胞仪检测细胞周期 ,免疫细胞化学及点印迹法检测cyclinE表达。结果 :①随着反义PKCα的浓度增加 ,细胞生长指数逐渐降低 (P <0 0 1)。②反义PKCα使细胞G1期百分比增高 (P <0 0 5 )。③反义PKCα使细胞cyclinE的表达减弱 ,扫描定量反义PKCα组为对照组的 6 6 5 %± 18 4 % (P <0 0 5 )。结论 :反义PKCα可通过抑制cyclinE表达、阻滞细胞于G1期从而抑制CNE - 展开更多

关键词 蛋白激酶c 鼻咽肿瘤 细胞周期 反义寡核苷酸类

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核仁素表达下调对C_2C_(12) 细胞增殖与凋亡的影响 被引量：7

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作者 王慷慨 蒋磊 +4 位作者 鄂顺梅 刘可 张玲莉 刘梅冬 肖献忠 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期125-129,共5页

目的:探讨核仁素反义寡核苷酸对细胞增殖与凋亡的影响。方法:采用反义寡核苷酸技术以抑制CC12细胞中核仁素的表达后,用MTT法检测细胞增殖状况,流式细胞术及DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡。结果:免疫印迹结果显示,反义寡核苷酸导入细胞... 目的:探讨核仁素反义寡核苷酸对细胞增殖与凋亡的影响。方法:采用反义寡核苷酸技术以抑制CC12细胞中核仁素的表达后,用MTT法检测细胞增殖状况,流式细胞术及DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡。结果:免疫印迹结果显示,反义寡核苷酸导入细胞后24h,核仁素的表达受到明显抑制,同时反义寡核苷酸处理组细胞的增殖能力亦明显受到抑制,细胞凋亡百分率显著升高,并能检测到清晰的“梯状条带”。而正义及随机核酸导入细胞后不能降低核仁素的表达,对细胞增殖及凋亡均无明显影响。结论:核仁素表达下调能抑制C2C12细胞增殖并能触发C2C12细胞凋亡。 展开更多

关键词 细胞增殖 表达下调 核仁素 c2c12细胞凋亡 反义寡核苷酸技术 MTT法检测 凝胶电泳检测 流式细胞术 免疫印迹 增殖能力 抑制 琼脂糖 DNA 24h 组细胞 酸处理 百分率 导入

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氯通道ClC-3对脑血管平滑肌细胞Ca^(2+)池操纵性Ca^(2+)内流的影响 被引量：1

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作者 陈临溪 关永源 +3 位作者 贺华 丁岩 熊大志 丘钦英 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1549-1550,共2页

关键词 氯通道 c1c-3 脑血管平滑肌细胞 ca^2+池操纵性 cA^2+内流 反义寡核苷酸

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核仁素表达下调对顺铂诱导人骨肉瘤细胞株SaOS-2增殖抑制和凋亡的影响 被引量：1

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作者 吴蓓 王万春 黎志宏 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期32-37,共6页

目的:观察核仁素(C23)表达下调对顺铂(DDP)诱导人骨肉瘤细胞株SaOS-2增殖抑制和凋亡的影响。方法:将细胞随机分为5组:对照组、DDP组、S+DDP组(转染C23正义寡核苷酸后再用DDP)、AS+DDP(转染C23反义寡核苷酸后再用DDP)与R+DDP(转染随机寡... 目的:观察核仁素(C23)表达下调对顺铂(DDP)诱导人骨肉瘤细胞株SaOS-2增殖抑制和凋亡的影响。方法:将细胞随机分为5组:对照组、DDP组、S+DDP组(转染C23正义寡核苷酸后再用DDP)、AS+DDP(转染C23反义寡核苷酸后再用DDP)与R+DDP(转染随机寡核苷酸后再用DDP);用MTT法检测各组细胞增殖率;用Western印迹和RT-PCR检测各组C23,Bcl-2和Bax蛋白与mRNA的表达;用DAPI染色方法和流式细胞术检测各组细胞凋亡核百分率、细胞凋亡率。结果:C23反义寡核苷酸显著抑制了C23蛋白和mRNA的表达,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);AS+DDP组与DDP组比较,细胞增殖率下降约18%(P<0.01),C23与Bcl-2蛋白和mRNA表达均降低(P<0.01),但Bax表达增高(P<0.01);细胞凋亡核百分率与细胞凋亡率均增高(P<0.01)。结论:C23表达下调能促进DDP诱导的SaOS-2细胞增殖抑制和凋亡。 展开更多

关键词 c23 顺铂 反义寡核苷酸 骨肉瘤

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后发性白内障基因治疗的研究进展 被引量：1

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作者 董敏 康刚劲 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2013年第10期997-1000,共4页

后发性白内障是白内障术后最常见的并发症,亦是白内障患者术后视力下降的主要原因。目前尚无安全的药物治疗方法,Nd:YAG激光虽然有效,但存在一定的并发症。随着分子生物学的不断发展,基因治疗为后发性白内障的防治开辟了一条新途径。本... 后发性白内障是白内障术后最常见的并发症,亦是白内障患者术后视力下降的主要原因。目前尚无安全的药物治疗方法,Nd:YAG激光虽然有效,但存在一定的并发症。随着分子生物学的不断发展,基因治疗为后发性白内障的防治开辟了一条新途径。本文对后发性白内障自杀基因和基因干扰治疗的研究进展作一综述。 展开更多

关键词 后发性白内障 自杀基因 基因治疗 BAX基因 反义c—myc基因 RNAi

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