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Effect of SHU555A labeling on differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells into neurocyte-like cells
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作者 Yong Zhang Jing-Liang Cheng Juan Wang Hua-Li Li Lan Zhang Yun-Jun Yang 《放射学实践》 北大核心 2011年第9期944-948,共5页
Objective:To investigate the effect of SHU555A,a clinically approved iron nanoparticle,labeling on differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells(BMSCs) into neurocyte-like cells in vitro.Methods:10 times dilut... Objective:To investigate the effect of SHU555A,a clinically approved iron nanoparticle,labeling on differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells(BMSCs) into neurocyte-like cells in vitro.Methods:10 times dilution of 10μl,20μl,40μl and 80μl SHU555A were added to 2ml of culture medium containing rat BMSCs to obtain four experimental groups of SHU555A labeling of BMSCs with ferri ion concentrations of 14μg/ml,28μg/ml,56μg/ml and 112μg/ml,respectively.2ml of culture medium with rat BMSCs did not contain SHU555A served as control group.The BMSCs of all the groups were pre-induced by bFGF,and induced by DMSO/butylated hydroxyanisole(BHA) for six hours,subsequently reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR) technique was employed to detect mRNA expression of nestin,neuronspecific analase(NSE) and glial fibrillary acid protein(GFAP).Western blot technique was used to detectprotein expression of nestin.Results:Quantitative-PCR revealed high mRNA expression of nestin,NSE and GFAP induced by DMSO/BHA in all the experimental groups,but the difference between the experimental groups and the control group was not significant(P>0.05).Western blot analysis demonstrated there was no statistically significant difference in nestin protein expression between the experimental groups and the control group(P>0.05).Conclusion:SHU555A labeling do not affect differentiation of rat BMSCs into neurocyte-like cells in vitro. 展开更多
关键词 骨髓 放射线 治疗方法 间叶细胞
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Bone marrow mesenchymal stem cell transplantation retards the natural senescence of rat hearts
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《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第B11期196-196,共1页
Aim Aging is an independent risk factor for heart disease, however the effective intervention has not been found so far. Bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) have been shown to offer a wide variety of cel- l... Aim Aging is an independent risk factor for heart disease, however the effective intervention has not been found so far. Bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) have been shown to offer a wide variety of cel- lular functions including the protective effects on damaged hearts. Here we investigated the antiaging properties of BMSCs and the underlying mechanism in a cellular model of cardiomyocyte senescence and a rat model of aging hearts. Methods In vitro study, neonatal rat ventricular cells (NRVCs) and BMSCs were cocultured in the same dish with a semipermeable membrane to separate the two populations. In vivo, the BMSCs were injected into the rat hearts to observe their antiaging effects. The expression of β-galactosidase and aging-related proteins, and the lev- els of oxidative stress were determined in vivo and in vitro. The heart function was measured by the High-Resolution Imaging System. Results Monocultured NRVCs displayed the senescence-associated phenotypes, characterized by an increase in the number of β-galaetosidase-positive cells and decreases in the degradation and disappearance of cellular organelles in a time-dependent manner. The levels of reactive oxygen species and malondialdehyde were el- evated, whereas the activities of antioxidant enzymes superoxide dismutase and glutathione peroxidase were de- creased, along with upregulation of p53, p21cipl/wafl and p16INK4a in the aging eardiomyoeytes. These deleterious alterations were abrogated in aging NRVCs cocultured with BMSCs. Qualitatively, the same senescent phenotypes were consistently observed in aging rat hearts. Notably, BMSC transplantation significantly prevented these detri- mental alterations and improved the impaired cardiac function in the aging rats. Conclusions BMSCs possess strong antiseneseence action on the aging NRVCs and hearts and can improve cardiac function after transplantation in aging rats. The present study, therefore, provides an alternative approach for the treatment of heart failure in the elderly population. 展开更多
关键词 Key words: SENESCENCE bone marrow mesenchymal stem cells HEART reactive oxygen species p53 p21Cipl/Wafl
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从“骨玄府-骨络-髓”论治骨质疏松症及BMSCs归巢、分化
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作者 吕浩 王久香 +2 位作者 胡芷苜 王岩 江渟 《中国骨质疏松杂志》 北大核心 2025年第4期614-617,624,共5页
骨质疏松症(osteoporosis,OP)是一种常见的代谢性骨病。OP病理机制涉及多个环节,骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)归巢及分化紊乱会引起OP,阻止其紊乱是防治OP的一个方向。目前中药可协同发挥多环节、多靶点的整合... 骨质疏松症(osteoporosis,OP)是一种常见的代谢性骨病。OP病理机制涉及多个环节,骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)归巢及分化紊乱会引起OP,阻止其紊乱是防治OP的一个方向。目前中药可协同发挥多环节、多靶点的整合效应,但中医诊治思路常重整体和宏观而轻微观。笔者将从“骨玄府-骨络-髓”理论模型入手探讨BMSCs归巢、分化及OP骨代谢紊乱的分子机制,旨在丰富OP的病因病机,以期为该病的治疗提供参考。并将传统的中医理论与现代医学相结合,从微观物质视角探索中医理论的科学内涵。 展开更多
关键词 骨质疏松症 骨髓间充质干细胞 骨玄府-骨络-髓 归巢 分化
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BMP⁃2/Smad信号通路探讨金匮肾气丸对BMSCs成骨分化的影响 被引量:4
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作者 孟菲菲 高志礼 +2 位作者 李娜 王花欣 WANG Jiayun 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期379-384,共6页
目的观察金匮肾气丸含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的影响并探讨其发生的作用机制。方法制备金匮肾气丸含药血清,CCK⁃8法筛选出最佳浓度的金匮肾气丸含药血清对BMSCs向成骨分化的... 目的观察金匮肾气丸含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的影响并探讨其发生的作用机制。方法制备金匮肾气丸含药血清,CCK⁃8法筛选出最佳浓度的金匮肾气丸含药血清对BMSCs向成骨分化的影响。将BMSCs分为空白组(control组)、成骨诱导组(OIS)、空白血清组(ROIS组)及含药血清组(JKSQ⁃OIS),分别对各组BMSCs进行成骨诱导。连续干预14 d及21 d后,分别进行碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红染色镜下观察各组碱性磷酸酶活性和成骨矿化水平;连续干预14 d后,实时荧光定量PCR(q⁃PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测各组BMSCs中骨形态发生蛋白2(BMP⁃2)、Smad1、ALP、Runt相关转录因子2(runt⁃related transcription factor 2,Runx2)及成骨细胞特异性转录因子(Osterix,OSX)mRNA和蛋白的相对表达量。结果与control组相比,OIS组与ROIS组出现点状矿化结节,ALP染色轻微变深,ALP和Runx2 mRNA及蛋白的表达上升(P<0.05,P<0.01),OSX的表达上升但不明显(P>0.05);与OIS组相比,JKSQ⁃OIS组矿化结节成片分布,ALP染色明显加深,BMP⁃2、Smad1、ALP和Runx2 mRNA及蛋白的表达上升(P<0.05,P<0.01),OSX mRNA及蛋白表达有上升趋势(P>0.05)。结论金匮肾气丸含药血清可能通过调控BMP⁃2/Smad信号通路,上调ALP、Runx2和OSX的表达,促进BMSCs向成骨分化,改善OP。 展开更多
关键词 金匮肾气丸 骨髓间充质干细胞 成骨 BMP⁃2/Smad信号通路
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基于FTO调控Notch1通路观察阳和平喘颗粒对哮喘BMSC归巢的影响
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作者 王坤 方昊翔 曹晓梅 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第7期585-592,共8页
目的观察N 6甲基腺嘌呤(m 6A)甲基化调控缺刻基因1(Notch1)通路对哮喘骨髓间充质干细胞(BMSC)归巢的影响,以及中药复方阳和平喘颗粒干预研究。方法采用大鼠BMSC和支气管上皮细胞共培养的方式。将提取的细胞分为支气管上皮细胞组、哮喘... 目的观察N 6甲基腺嘌呤(m 6A)甲基化调控缺刻基因1(Notch1)通路对哮喘骨髓间充质干细胞(BMSC)归巢的影响,以及中药复方阳和平喘颗粒干预研究。方法采用大鼠BMSC和支气管上皮细胞共培养的方式。将提取的细胞分为支气管上皮细胞组、哮喘支气管上皮细胞联合间充质干细胞共培养组(以下简称共培养组)、共培养细胞联合正常血清组、共培养细胞联合最佳含药血清组、siRNA-FTO联合正常血清组、siRNA-FTO-NC联合正常血清组、siRNA-FTO联合最佳含药血清组。检测共培养细胞活力和细胞周期变化;免疫荧光染色法检测BMSC归巢水平和归巢标志物;实时定量PCR检测Notch1通路相关基因的表达;Western blot法检测Notch1通路相关蛋白的表达。结果与支气管上皮细胞组比较,共培养细胞组BMSC归巢水平和趋化因子受体4(CXCR4)、人基质细胞衍生因子1(SDF-1)、Notch1、重组信号结合蛋白J(RBP-J)、发状分裂相关增强子1(Hes1)蛋白表达升高。与共培养细胞组、共培养细胞联合正常血清组比较,共培养细胞联合最佳含药血清组BMSC归巢水平及CXCR4、SDF-1表达升高,Notch1、Hes1蛋白mRNA表达降低。与siRNA-FTO-NC联合正常血清组比较,siRNA-FTO联合正常血清组Notch1、Activated Notch1、RBP-J、Hes1蛋白表达和细胞活力升高,BMSC归巢水平降低。与siRNA-FTO联合正常血清组比较,siRNA-FTO联合最佳含药血清组Notch1、RBP-J mRNA,Activated Notch1、Hes1蛋白表达降低,BMSC归巢水平升高,共培养细胞联合最佳含药血清组Notch1、RBP-J、Hes1 mRNA表达降低。与siRNA-FTO联合最佳含药血清组比较,共培养细胞联合最佳含药血清组细胞活力及Notch1、Activated Notch1、RBP-J、Hes1蛋白降低,BMSC归巢水平升高。结论阳和平喘颗粒可能通过上调FTO表达,抑制下游Notch1信号通路表达,从而促进哮喘BMSC归巢,减轻哮喘炎症。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞(bmsc) 支气管哮喘 N 6甲基腺嘌呤(m 6A) Notch1信号通路
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微管调控NLRP3转运探讨生骨再造丸对BMSCs焦亡水平的影响 被引量:1
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作者 胡康一 曹林忠 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期636-642,共7页
目的探讨生骨再造丸对激素诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)焦亡的保护作用机制以及对微管调控NLRP3炎性小体组装的影响。方法将BMSCs分为空白组、模型组、模型组+紫杉醇组、模型组+诺考达唑组、模型组+生骨再造丸含药血清组。制备生骨再造... 目的探讨生骨再造丸对激素诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)焦亡的保护作用机制以及对微管调控NLRP3炎性小体组装的影响。方法将BMSCs分为空白组、模型组、模型组+紫杉醇组、模型组+诺考达唑组、模型组+生骨再造丸含药血清组。制备生骨再造丸含药血清干预BMSCs。使用CCK8检测细胞活力;流式细胞术检测凋亡率;WB检测AC-α-tubulin、NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白表达;免疫荧光检测ASC炎性大斑点表达,α-tubulin与NLRP3共定位表达;ELISA检测IL-1β和IL-18含量。结果与空白组相比,模型组细胞活力下降、凋亡水平上升,AC-α-tubulin、NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白的表达上升,ASC炎性斑点的荧光强度上升,α-tubulin与NLRP3共定位的荧光强度上升(P<0.01),IL-1β和IL-18含量明显增加(P<0.01);与模型组相比,紫杉醇组细胞活力下降、凋亡水平上升、AC-α-tubulin、NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白的表达上升(P<0.01),ASC炎性斑点的荧光强度上升(P<0.05),α-tubulin与NLRP3共定位的荧光强度上升(P<0.01),IL-1β和IL-18含量增加(P<0.01,P<0.05);诺考达唑和生骨再造丸含药血清组的细胞活力上升、凋亡水平下降,AC-α-tubulin、NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白的表达下降(P<0.01)、ASC炎性斑点的荧光强度下降(P<0.05),α-tubulin与NLRP3共定位的荧光强度下降(P<0.01,P<0.05),IL-1β和IL-18含量减少(P<0.01,P<0.05)。结论生骨再造丸能抑制α-tubulin乙酰化,破坏微管结构,抑制NLRP3炎性小体的组装,从而减少BMSCs细胞焦亡。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 焦亡 NLRP3 微管 生骨再造丸
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BMSC骨脂分化失衡诱发骨质疏松研究进展
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作者 欧亿林 彭睿 +2 位作者 毛钰蘅 翁锡全 元宇 《中国骨质疏松杂志》 北大核心 2025年第2期289-295,共7页
骨质疏松症(osteoporosis,OP)是一种以骨量流失为主要特征的全身性骨病,其发病率已呈现出高发的态势。骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cell,BMSC)是一种具有高度可塑性的成体干细胞,可分化为成骨细胞、脂肪细... 骨质疏松症(osteoporosis,OP)是一种以骨量流失为主要特征的全身性骨病,其发病率已呈现出高发的态势。骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cell,BMSC)是一种具有高度可塑性的成体干细胞,可分化为成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞等类型,其分化去向影响骨形成与骨吸收之间的平衡。在骨髓微环境中,BMSC的分化命运受Wnt、Notch、Hedgehogs和BMP等信号通路及lncRNAs、circRNA和外泌体等因素的调控,它们共同形成一个复杂而庞大的调控网络,对BMSC的骨脂分化产生正向或负向的调控效应。因此,BMSC成骨和成脂平衡的失调将会加剧骨髓脂肪化的程度,引发机体炎症反应,导致骨代谢紊乱,进而诱发骨质疏松症。多项研究表明,抑制BMSC成脂分化,促进其成骨分化是防治骨质疏松症的重要策略之一。然而,目前国内研究BMSC骨脂分化失衡诱发骨质疏松的相关综述报道较少。鉴于此,笔者在综合国内外相关文献的基础上,概述了调控BMSC骨脂分化的相关信号通路,探讨了BMSC骨脂分化失衡对骨质疏松发生发展的影响,旨在为骨质疏松症的治疗及靶向药物的研制提供理论依据。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 成骨分化 成脂分化 骨代谢 骨质疏松
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BMSCs与PLGA支架构建组织工程化骨软骨复合组织 被引量:7
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作者 梁耀中 查振刚 +7 位作者 郑力恒 谭文成 姚平 林宏生 夏吉生 张嘉晴 黄馨霈 屠美 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期168-173,共6页
目的:探讨同种异体骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)体外分离培养后种植到孔径和孔隙率不同且复合不同胶原和生长因子的PLGA支架上再种植到大鼠肌袋内构建组织工程化骨软骨复合组织的可行性。方法:制作复合BMP-2和... 目的:探讨同种异体骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)体外分离培养后种植到孔径和孔隙率不同且复合不同胶原和生长因子的PLGA支架上再种植到大鼠肌袋内构建组织工程化骨软骨复合组织的可行性。方法:制作复合BMP-2和Ι型胶原PLGA支架与复合bFGF、TGF-β1和Ⅱ型胶原PLGA支架后把两者用生物蛋白胶粘合形成复合支架,把体外培养扩增的BMSCs种植到复合支架上,植入实验组A组、对照组B组、空白组C组SD大鼠肌袋内,于术后4、8、12周取材,分别行大体观察、HE染色、甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组化、ALP染色、扫描电镜、透视电镜观察。结果:实验组大体标本成骨区呈白色类骨样组织,质硬,成软骨区呈乳白色类软骨样组织,质较硬,两区融合;扫描电镜观察可见成骨细胞、破骨细胞及软骨细胞,透视电镜尚可见细胞浆内有大量的线粒体和内质网,并见大量胶原分泌,与对照组、空白组有明显区别,组织学评分表明A组较B、C两组差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:BMSCs体外分离扩增后种植到孔径和孔隙率不同且复合不同胶原和生长因子的PLGA支架上再植入动物肌袋可构建骨软骨复合组织。 展开更多
关键词 异体骨髓间充质干细胞 聚乙醇酸-乳酸共聚体 诱导 骨软骨复合组织
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左归丸含药血清调节Runx2激活ALP、OPN蛋白促进BMSCs增殖和分化的研究 被引量:13
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作者 刘飞祥 樊巧玲 +6 位作者 谭峰 李星 麦聪英 叶素敏 张明玥 柴毅 吴丹 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期653-657,共5页
目的探讨左归丸(Zuoguiwan,ZGW)的补肾填精、益髓壮骨的作用,促进骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的增殖和向成骨细胞方向分化。方法制备ZGW含药血清,设置10%FBS DMEM组、成骨诱导液组、2.5%空白大鼠血清-... 目的探讨左归丸(Zuoguiwan,ZGW)的补肾填精、益髓壮骨的作用,促进骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的增殖和向成骨细胞方向分化。方法制备ZGW含药血清,设置10%FBS DMEM组、成骨诱导液组、2.5%空白大鼠血清-成骨诱导液组、2.5%ZGW含药血清-成骨诱导液组。采用MTT法观察各组对BMSCs的增殖,使用碱性磷酸酶钙钴染色法检测BMSCs向成骨细胞方向的分化能力,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)法检测细胞培养液中AKP的含量,Western blot检测BMSCs中Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙蛋白(osteocalcin,OPN)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)蛋白的表达。结果2.5%ZGW含药血清-成骨诱导液组能够促进BMSCs的快速增殖,较早地进入平台期,促进BMSCs中AKP的分泌,提高ALP含量,上调BMSCs细胞中Runx2、ALP和OPN的蛋白表达水平。结论ZGW抗骨质疏松的分子机制,可能与调节Runx2激活ALP、OPN蛋白表达,促进BMSCs增殖和向成骨细胞方向分化有关。 展开更多
关键词 左归丸 Runt相关转录因子2 骨髓间充质干细胞 骨质疏松
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补肾活血汤石油醚提取物对BMSCs迁移过程中Wnt5a/PKC通路的影响 被引量:10
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作者 罗辉 吴志方 +4 位作者 沈玮 胡流超 王斌 余丽娟 罗毅文 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2462-2468,共7页
目的探讨补肾活血汤(熟地黄、菟丝子、补骨脂,等)石油醚提取物对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的迁移作用及相关机制。方法全骨髓贴壁法培养BMSCs,取第3代细胞用于实验,采用流式细胞仪检测细胞表面抗原,细胞划痕、Transwell实验观察补肾... 目的探讨补肾活血汤(熟地黄、菟丝子、补骨脂,等)石油醚提取物对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的迁移作用及相关机制。方法全骨髓贴壁法培养BMSCs,取第3代细胞用于实验,采用流式细胞仪检测细胞表面抗原,细胞划痕、Transwell实验观察补肾活血汤石油醚提取物0、25、50、100、200μg/m L剂量组的细胞迁移能力,Western blot和RT-PCR检测Wnt5a、蛋白激酶C(PKC)表达情况。结果第3代BMSCs表面抗原CD29、CD90、CD44表达阳性,而CD45表达阴性;细胞划痕6 h及12 h后,药物各剂量组细胞迁移速度明显高于空白组(P<0.05,P<0.01);Transwell实验中100μg/m L补肾活血汤石油醚提取物为促细胞迁移最佳剂量,差异有统计学意义(P<0.01);RT-PCR结果显示与空白对照组比较,药物各剂量组的Wnt5a mRNA水平均升高(P<0.05,P<0.01),而与空白对照组的PKC mRNA水平比较,药物只有100μg/m L剂量mRNA表达水平升高(P<0.01);Western blot结果表明药物组各剂量的Wnt5a、PKC蛋白表达较空白对照组都明显升高(P<0.01),均且以100μg/m L剂量最高(P<0.01)。结论补肾活血汤石油醚提取物可以促进BMSCs体外迁移,其作用机制可能与Wnt5a/PKC信号通路有关。 展开更多
关键词 补肾活血汤 信号通路 体外迁移 骨髓间充质干细胞 WNT5A PKC
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CCK-8与MTT法检测左归丸含药血清干预BMSCs增殖条件的比较 被引量:9
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作者 刘飞祥 谭峰 +6 位作者 樊巧玲 李星 叶素敏 张明玥 柴毅 麦聪英 吴丹 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期6-10,共5页
目的探讨CCK-8与MTT法在检测左归丸含药血清干预大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖时所需的最佳实验条件,并比较两种方法的优缺点。方法用左归丸含药血清进行干预P3 BMSCs,孵育结束后,分别加入CCK-8... 目的探讨CCK-8与MTT法在检测左归丸含药血清干预大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖时所需的最佳实验条件,并比较两种方法的优缺点。方法用左归丸含药血清进行干预P3 BMSCs,孵育结束后,分别加入CCK-8与MTT试剂,检测两种方法的最佳波长、培养时间、灵敏度和增殖时间。结果CCK-8法与MTT法检测BMSCs的最佳波长分别为450 nm和550 nm,孵育时间分别为3 h和4 h,细胞接种密度分别为0.1×10^(4)/孔和0.25×10^(4)/孔。CCK-8法与MTT法在BMSCs接种密度分别高于0.25×10^(4)/孔和0.5×10^(4)/孔时,两种方法检测所得OD值均提早进入平台期,易出现假S型增长曲线。而当密度分别低于0.05×10^(4)/孔和0.1×10^(4)/孔时,细胞增加缓慢,难以形成S型增长曲线,不能反映出BMSCs的增殖特性。与CCK-8法相比较,在细胞密度低于0.1×10^(4)/孔或高于2×10^(4)/孔时,MTT法对BMSCs在翻倍时OD值增加的响应量无明显变化,差异无统计学意义。而细胞密度为0.25×10^(4)/孔至1×10^(4)/孔时,MTT法对BMSCs在翻倍时OD值增加的响应量明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论MTT法更适用于左归丸含药血清干预BMSCs增殖和分化的研究。 展开更多
关键词 CCK-8法 MTT法 骨髓间充质干细胞 左归丸
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TGF-β_1、IGF-I和地塞米松诱导BMSCs体外构建组织工程化软骨 被引量:12
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作者 刘天一 周广东 +7 位作者 苗春雷 陈付国 魏娴 殷德明 曹颖 崔磊 刘伟 曹谊林 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2004年第4期262-266,共5页
目的 探讨体外联合应用TGF-β1、IGF-Ⅰ及地塞米松诱导骨髓基质干细胞(BMSCs)体外构建组织工程化软骨的可行性。方法 抽取8周龄猪股骨骨髓,应用贴壁法分选单个核细胞,体外培养扩增后获得BMSCs,收集第2代细胞,以5×107/cm3的密度接... 目的 探讨体外联合应用TGF-β1、IGF-Ⅰ及地塞米松诱导骨髓基质干细胞(BMSCs)体外构建组织工程化软骨的可行性。方法 抽取8周龄猪股骨骨髓,应用贴壁法分选单个核细胞,体外培养扩增后获得BMSCs,收集第2代细胞,以5×107/cm3的密度接种到聚羟基乙酸(PGA)制成的圆柱形三维支架材料上,7 d后联合应用TGF-β1、IGF-Ⅰ及地塞米松进行诱导和体外培养,未诱导组作为平行对照。4周和8周分别取材进行大体观察、组织学、组织化学及免疫组织化学检测。结果 体外诱导培养4周后,形成的细胞材料复合物表面光滑,质地柔韧,保持原大小形状;组织学显示有较为明显软骨陷窝,并分布有Ⅱ型胶原及聚合蛋白多糖(GAG);8周时外观灰白色,较坚硬,软骨陷窝更为明显,并连接成片,Ⅱ型胶原染色呈强阳性,有更多甲苯胺蓝异染的软骨特异性基质成分。对照组细胞材料复合物逐渐收缩,8周时直径仅约2 mm大小,组织学检测无软骨陷窝结构,Ⅱ型胶原免疫组化结果阴性。结论TGF-β1、IGF-Ⅰ及地塞米松可以体外诱导BMSCs在三维支架上形成组织工程化软骨。 展开更多
关键词 骨髓基质干细胞 组织工程 软骨 地塞米松 聚合蛋白多糖 胶原
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实时定量PCR检测GDNF基因转染大鼠BMSCs后的转录水平 被引量:6
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作者 杨朝鲜 马芳 +3 位作者 袁琼兰 周玲 高小青 邓莉 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期961-964,共4页
目的了解外源性胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因在大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)中的转录水平。方法体外分离培养大鼠BMSCs,将其随机分为GDNF基因转染组、空质粒转染组和未转染组3组;GDNF基因转染组和空质粒转染组分别用GDNF基因和... 目的了解外源性胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因在大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)中的转录水平。方法体外分离培养大鼠BMSCs,将其随机分为GDNF基因转染组、空质粒转染组和未转染组3组;GDNF基因转染组和空质粒转染组分别用GDNF基因和空质粒重组腺病毒感染BMSCs,并按感染后培养时间的不同(3、6、9和12天)又分为4个亚组。采用实时定量PCR技术检测GDNF基因在BMSCs中的转录水平。结果空质粒转染组和未转染组无GDNFmRNA的表达,GDNF基因转染组在转染后3~12天的GDNFmRNA相对表达量为0.00751±0.00067。结论腺病毒介导的基因转染技术将GDNF基因转染至骨髓间充质干细胞中,有外源性基因GDNFmRNA的表达,这为进一步研究以GDNF基因转染的BMSCs治疗中枢神经系统疾病奠定了基础。 展开更多
关键词 胶质细胞源性神经营养因子 大鼠 骨髓间充质干细胞 基因转染 实时定量PCR
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bFGF通过上调Ras/ERK信号通路诱导BMSCs表达Ⅰ型胶原 被引量:7
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作者 买霞 陈莉 +2 位作者 扎拉嘎胡 陈小义 王英慧 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期360-363,共4页
目的研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblastgrowth factor,bFGF)诱导体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cell,BMSCs)成骨性分化及其作用机制。方法从SD大鼠骨髓中获得BMSCs,纯化培养传代后用... 目的研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblastgrowth factor,bFGF)诱导体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cell,BMSCs)成骨性分化及其作用机制。方法从SD大鼠骨髓中获得BMSCs,纯化培养传代后用不同浓度bFGF(5、10、20μg.L-1)在不同时间(d 0、3、5、7、14、21)分别采用透射电镜和光镜观察细胞形态结构变化;用免疫细胞化学和RT-PCR检测Ⅰ型胶原蛋白及mRNA表达;用Western blot和免疫细胞化学方法分析细胞内p-ERK蛋白表达。结果 BMSCs经bFGF作用后在光镜和透射电镜下均为成骨样细胞的形态特征;bFGF促进细胞Ⅰ型胶原蛋白和mRNA表达,同时细胞p-ERK蛋白表达升高。结论 bFGF可活化Ras/ERK信号转导通路,促进BMSCs向成骨细胞分化。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 细胞分化 BFGF Ⅰ型胶原 ERK 细胞培养
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hBMP-2基因修饰自体BMSCs移植促进兔下颌骨牵张成骨新骨形成的X线分析 被引量:5
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作者 黄旋平 周诺 +3 位作者 杨媛媛 江献芳 李华 谢庆条 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期457-460,共4页
目的:探讨hBMP-2基因修饰自体BMSCs移植对兔下颌骨牵张成骨新骨形成的促进作用。方法:取新西兰白兔36只随机分为3组,每组12只。建立牵张成骨动物模型,在固定期第2天,实验组于牵张间隙注射200μl的BMP-2基因修饰的自体BMSCs(2×105... 目的:探讨hBMP-2基因修饰自体BMSCs移植对兔下颌骨牵张成骨新骨形成的促进作用。方法:取新西兰白兔36只随机分为3组,每组12只。建立牵张成骨动物模型,在固定期第2天,实验组于牵张间隙注射200μl的BMP-2基因修饰的自体BMSCs(2×105个细胞)悬液;对照组注射200μl的自体BMSCs(2×105个细胞)悬液;空白组注射200μl生理盐水。分别于固定2、6周摄X线片观察骨质愈合、改建情况。结果:通过X线观察并经过灰度值统计软件分析,在固定期2周及6周实验组牵张区骨密度明显高于对照组和空白组(P<0.01)。结论:BMP-2基因修饰的自体BMSCs移植能有效促进兔下颌骨牵张成骨新骨形成。 展开更多
关键词 人骨形成蛋白-2 基因修饰 骨髓间充质干细胞 牵张成骨 X线
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bMSCs移植对单侧输尿管结扎大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响 被引量:5
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作者 仙淑丽 刘英莉 +2 位作者 沈波 徐影 张薇 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期421-425,共5页
目的探讨骨髓间充质干细胞(bMSCs)移植对单侧输尿管结扎(UUO)模型大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法自Wistar大鼠股骨和胫骨分离bMSCs,经体外传代培养、成脂诱导及鉴定后制备细胞悬液。54只Wistar大鼠随机分为假手术对照组(n=18)、bMS... 目的探讨骨髓间充质干细胞(bMSCs)移植对单侧输尿管结扎(UUO)模型大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法自Wistar大鼠股骨和胫骨分离bMSCs,经体外传代培养、成脂诱导及鉴定后制备细胞悬液。54只Wistar大鼠随机分为假手术对照组(n=18)、bMSC注射组(bMSC组,n=18)和生理盐水注射组(PS组,n=18)。bMSC组和PS组大鼠于UUO模型建立的同时经下腔静脉分别注入bMSCs和等体积生理盐水。于建模后第3、7和14天分批处死大鼠并采集肾脏组织标本,RT-PCR技术检测肾小管细胞FasLmRNA表达,免疫组化染色检测FasL蛋白表达及分布;TUNEL法检测肾小管细胞凋亡,计算凋亡指数。结果与假手术组比较,bMSC组和PS组建模后各时间点FasL mRNA及蛋白表达均明显上调,肾小管细胞凋亡指数显著增加(均P<0.05)。建模后第3、7天时,bMSC组FasL mRNA和蛋白表达的上调幅度及肾小管细胞凋亡指数的增加程度均明显低于PS组(P<0.05);至建模后第14天时,bMSC组与PS组各项检测指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论静脉注入bMSCs对UUO模型大鼠肾小管上皮细胞凋亡有短期抑制作用。 展开更多
关键词 细胞凋亡 FASL基因 单侧输尿管结扎 肾小管上皮细胞 骨髓间充质干细胞
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LASP1下调和ferritin上调在rhBMP-2诱导的比格犬BMSCs成骨分化中起重要作用 被引量:4
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作者 胡稷杰 刘亚伟 +2 位作者 何敏毅 余斌 王钢 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1207-1212,共6页
目的建立稳定的比格犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)诱导成骨分化模型;鉴定参与比格犬BMSCs细胞成骨分化过调控的蛋白质,探讨其可能的调控机制。方法分离培养比格犬BMSCs细胞,rhBMP-2诱导细胞成骨分化7 d,基于蛋白质双向凝胶电泳的蛋白质组... 目的建立稳定的比格犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)诱导成骨分化模型;鉴定参与比格犬BMSCs细胞成骨分化过调控的蛋白质,探讨其可能的调控机制。方法分离培养比格犬BMSCs细胞,rhBMP-2诱导细胞成骨分化7 d,基于蛋白质双向凝胶电泳的蛋白质组学分析成骨分化组与对照组差异表达的蛋白质,对感兴趣的蛋白质LASP1、ferritin轻链和重链表达情况用Q-PCR、Western blot进行验证。结果成功诱导比格犬BMSCs成骨分化;蛋白质组学分析获得rhBMP-2诱导上调的蛋白质9个,下调的蛋白质11个。荧光定量PCR技术和Western blot对LASP1和ferritin表达情况进行了验证,发现rhBMP-2诱导7 d后,LASP1显著下调而ferritin显著上调,与蛋白质组学结果一致。结论 LASP1在调节细胞骨架活性方面发挥重要功能,而ferritin是细胞铁离子稳态维持的重要分子,提示这两种蛋白质在rhBMP-2诱导的比格犬BMSCs成骨分化过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 成骨分化 重组人骨形态发生蛋白-2 LASP1 FERRITIN
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RhoA/ROCK信号通路在骨质疏松大鼠BMSCs成骨分化中的研究 被引量:8
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作者 徐亮 陶树清 +2 位作者 文刚 李超 陶天遵 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1415-1419,共5页
目的探讨RhoA/ROCK信号通路在骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化中的作用。方法实验细胞分为两组,A组为骨质疏松大鼠BMSCs(去卵巢法制备骨质疏松模型),B组为3月龄大鼠BMSCs,通过BMSCs培养观察... 目的探讨RhoA/ROCK信号通路在骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化中的作用。方法实验细胞分为两组,A组为骨质疏松大鼠BMSCs(去卵巢法制备骨质疏松模型),B组为3月龄大鼠BMSCs,通过BMSCs培养观察细胞生长情况、矿化结果,并用Western blot及PCR方法检测RhoA、ROCK1在两组细胞中的表达情况。结果 3月龄组细胞生长较为活跃,矿化能力强,Western blot显示骨质疏松组细胞内RhoA、ROCK1蛋白表达较3月龄组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),PCR结果显示骨质疏松组细胞内RhoA、ROCK1 mRNA含量较骨质疏松组明显降低(P<0.05)。结论 RhoA/ROCK信号通路在骨质疏松BMSCs中表达降低,这可能是骨质疏松发病的重要原因之一。 展开更多
关键词 信号通路 骨质疏松 大鼠 动物实验 骨髓间充质干细胞
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BMSCs/PLGA复合物修复山羊下颌髁突骨软骨缺损的实验研究 被引量:4
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作者 张碧 满城 +2 位作者 陈瞰 胡静 祝颂松 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期365-367,371,共4页
目的:观察利用BMSCs/PLGA复合物修复山羊下颌髁突骨软骨缺损的可行性及效果。方法:选取36只成年健康山羊,一侧关节制备3 mm直径、5 mm深的髁突表面骨软骨缺损,根据植入物不同分为BMSCs/PLGA复合物组、PLGA组及空白组,另一侧关节作为正... 目的:观察利用BMSCs/PLGA复合物修复山羊下颌髁突骨软骨缺损的可行性及效果。方法:选取36只成年健康山羊,一侧关节制备3 mm直径、5 mm深的髁突表面骨软骨缺损,根据植入物不同分为BMSCs/PLGA复合物组、PLGA组及空白组,另一侧关节作为正常对照组。分别在术后6周和24周后处死每组6只动物,标本进行大体及组织学检查比较。结果:术后24周时空白组下颌髁突骨软骨缺损未能自发修复;植入PLGA组的缺损表面虽有软骨形成,但连续性有中断;植入BMSCs/PLGA组的修复效果最佳,表面软骨接近正常纤维软骨。组织学评分结果也显示BMSCs/PLGA组明显优于材料组和空白组。结论:BMSCs/PLGA复合物可以作为一种修复下颌髁突骨软骨缺损的新的有效方法。 展开更多
关键词 颞下颌关节 关节软骨 缺损 组织工程 骨髓间充质干细胞
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淫羊藿苷、补骨脂素、齐墩果酸、二苯乙烯苷正交配伍调控Bmp2、Smad1、4诱导BMSCs成骨分化的影响 被引量:20
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作者 高璐 郑洪新 +2 位作者 陈谊敬 宗志红 林庶茹 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2014年第5期1094-1102,共9页
目的:观察4种补肾中药淫羊藿、补骨脂、女贞子、何首乌有效成分淫羊藿苷、补骨脂素、齐墩果酸、二苯乙烯苷正交配伍,两种非补肾中药川芎、黄芪有效成分川芎嗪、黄芪甲苷,对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的调控作用。方法:65只SD大鼠随机... 目的:观察4种补肾中药淫羊藿、补骨脂、女贞子、何首乌有效成分淫羊藿苷、补骨脂素、齐墩果酸、二苯乙烯苷正交配伍,两种非补肾中药川芎、黄芪有效成分川芎嗪、黄芪甲苷,对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的调控作用。方法:65只SD大鼠随机分为正常对照组、阳性转化液对照组、补肾配伍组(1组、2组、3组、4组、5组、6组、7组、8组、9组)、非补肾药对照组(黄芪甲苷组、川芎嗪组)。补肾配伍组、非补肾药对照组予灌胃给药,每日1次,连续3天。正常对照组、阳性转化液对照组予等剂量生理盐水灌胃。灌胃第3天,大鼠处死后取各组含药血清培养骨髓间充质干细胞6、12、18天;ELISA法分别定量检测6、12、18天骨形态发生蛋白2(Bmp2)活性表达及含量,评价成骨细胞分化程度。用实时定量PCR法检测含药血清培养骨髓间充质干细胞第18天Bmp2、Smad1、Smad4 mRNA表达。结果:补肾配伍药可提高体外培养骨髓间充质干细胞Bmp2的活性表达及含量,在12天达到高峰值。补肾配伍组能上调Bmp2、Smad1、Smad4的mRNA表达。结论:补肾中药有效成分配伍能促进骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞,其机制可能与上调Bmp2、Smad1、Smad4 mRNA表达量及Bmp2的活性及含量有关。 展开更多
关键词 补肾中药 骨髓间充质干细胞 成骨细胞 骨形态发生蛋白2 SMAD1 SMAD4
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