三氧化二砷诱导人肝癌细胞株HepG2凋亡的机制研究 被引量：8

1

作者 李航宇 鞠培新 +1 位作者 钟鑫平 刘金钢 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期210-213,共4页

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)诱导人肝癌细胞株HepG2凋亡的作用机制。方法:采用MTT法观察不同浓度的As2O3对人类肝癌细胞株HepG2生长的抑制作用;以流式细胞术观察细胞的凋亡率;以Westernblot法检测JNK、p-JNK、Caspase-3及PARP蛋白在As2O... 目的:探讨三氧化二砷(As2O3)诱导人肝癌细胞株HepG2凋亡的作用机制。方法:采用MTT法观察不同浓度的As2O3对人类肝癌细胞株HepG2生长的抑制作用;以流式细胞术观察细胞的凋亡率;以Westernblot法检测JNK、p-JNK、Caspase-3及PARP蛋白在As2O3作用下及SP600125阻断JNK信号转导通路情况下的表达。结果:As2O3对体外生长的肝癌细胞HepG2具有明显抑制作用,并可诱导细胞凋亡。Westernblot结果显示,As2O3诱导肝癌细胞HepG2凋亡伴随着Caspase-3和PARP的活化;AS2O3作用于HepG2细胞10min后p-JNK蛋白表达开始增加,20min达到高峰,30min开始减少,总JNK蛋白的含量无明显改变,JNK的激活早于细胞凋亡;用SP600125预处理HepG2细胞株后,可以明显减少Caspase-3和PARP的活化。结论:As2O3通过诱导细胞凋亡抑制肝癌细胞株HepG2的增殖,细胞凋亡通过Caspase-3途径实现。JNK信号转导通路参与了As2O3诱导的HepG2凋亡反应,并位于Cas-pase-3的上游。 展开更多

关键词 三氧化二砷 肝癌 MTT法 WESTERN blot法

在线阅读 下载PDF 职称材料

叉头框M1在结直肠癌中的表达及临床意义 被引量：5

2

作者 陆明 胡孔旺 +2 位作者 王宜文 李昊 曹立宇 《临床与实验病理学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第8期847-852,共6页

目的探讨叉头框M1(FOXM1)在结直肠癌中的表达及与临床病理特征、预后的关系。方法采用免疫组化SP法检测297例结直肠癌组织和80例对应癌旁正常组织中FOXM1的表达;Western blot法检测20例新鲜结直肠癌组织及对应癌旁组织中FOXM1的表达。结... 目的探讨叉头框M1(FOXM1)在结直肠癌中的表达及与临床病理特征、预后的关系。方法采用免疫组化SP法检测297例结直肠癌组织和80例对应癌旁正常组织中FOXM1的表达;Western blot法检测20例新鲜结直肠癌组织及对应癌旁组织中FOXM1的表达。结果 FOXM1在结直肠癌组织中的阳性率(70.97%)显著高于癌旁组织(17.50%,P<0.01);FOXM1表达与结直肠癌浸润深度、淋巴结转移、脉管内癌栓转移、远处转移和TNM分期有关(P<0.05);与患者年龄、性别、肿瘤部位、大小、分化程度、CEA、CA199等无关(P>0.05)。结直肠癌组织中FOXM1蛋白相对表达量(0.855±0.063)明显高于相应癌旁组织(0.150±0.041,P<0.01)。FOXM1阳性患者的3年生存率明显低于阴性患者(P<0.01),且FOXM1为结直肠癌预后的独立性危险因素。结论 FOXM1蛋白在结直肠癌组织中过表达,且与患者临床病理特征、预后等因素有关,可能在结直肠癌的发生、转移等过程中起重要作用,有望成为结直肠癌新的肿瘤标志物和潜在的治疗靶点。 展开更多

关键词 结直肠肿瘤 叉头框M1 免疫组织化学 WESTERN blot法 预后

在线阅读 下载PDF 职称材料

胃癌组织中TRAP1的表达及意义 被引量：5

3

作者 李莉娜 史锐敏 王翠莲 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期323-325,共3页

目的探讨TRAP1蛋白在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法运用免疫组化PV法检测60例胃癌和20例癌旁组织中TRAP1的表达,采用Western blot法检测10例新鲜胃癌及癌旁组织中TRAP1的表达。结果免疫组化PV法及Western blot法检测... 目的探讨TRAP1蛋白在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法运用免疫组化PV法检测60例胃癌和20例癌旁组织中TRAP1的表达,采用Western blot法检测10例新鲜胃癌及癌旁组织中TRAP1的表达。结果免疫组化PV法及Western blot法检测结果均显示TRAP1在癌旁组织中极少表达,在胃癌组织中表达增高,差异有显著性(P<0.01),TRAP1表达与患者性别、年龄、分化程度、浸润深度等无关,与肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期密切相关(P<0.01)。结论 TRAP1在胃癌中高表达,可能参与胃癌的发生、发展。 展开更多

关键词 胃肿瘤 TRAP1 免疫组织化学 WESTERN blot法

在线阅读 下载PDF 职称材料

肾小球上皮细胞分泌肾上腺髓质素抑制系膜细胞增殖 被引量：2

4

作者 刘学光 陈广平 +1 位作者 张志刚 郭慕依 《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第5期375-377,共3页

目的　探讨肾上腺髓质素 (AM)及其受体CRLR在培养的大鼠肾小球上皮细胞 (GEC)和系膜细胞(MsC)的表达 ,以及AM对MsC生长的影响。方法　采用RT PCR法分别制备AM及CRLR探针 ,Northernblot法检测其在GEC和MsC的表达 ,[3H]胸腺嘧啶掺入法测定... 目的　探讨肾上腺髓质素 (AM)及其受体CRLR在培养的大鼠肾小球上皮细胞 (GEC)和系膜细胞(MsC)的表达 ,以及AM对MsC生长的影响。方法　采用RT PCR法分别制备AM及CRLR探针 ,Northernblot法检测其在GEC和MsC的表达 ,[3H]胸腺嘧啶掺入法测定MsC增殖情况。结果　AM仅表达于GEC ,不表达于MsC ,而其受体CRLR的表达则相反。含有AM的GEC培养上清可抑制MsC生长 ,而CRLR阻断剂CGRP8-37可部分消除此抑制作用。结论　GEC可通过合成和分泌AM抑制MsC增殖 ,提示AM作为一种重要的旁分泌因子 ,以保持肾小球微环境稳定 。 展开更多

关键词 肾小球上皮细胞 肾小球系膜细胞 肾上腺髓质素 聚合酶链反应 Northern blot法 肾小球肾炎 炎症 细胞增殖

在线阅读 下载PDF 职称材料

血清EB病毒特异性DNA酶抗体与鼻咽癌分期的关系 被引量：2

5

作者 李泽卿 周玫 +3 位作者 田勇泉 肖健云 赵素萍 陶正德 《医学研究生学报》 CAS 2000年第4期221-223,共3页

目的 :探讨血清非洲淋巴细胞瘤病毒特异性 DNA酶 ( Epstein-Barr virus-specific deoxynuclease,EBV-DNase)抗体与鼻咽癌 ( nasopharyngeal carcinoma,NPC)分期的关系。方法 :用 Western Blot法检测 2 64例 NPC血清 ,按“92分期法”对... 目的 :探讨血清非洲淋巴细胞瘤病毒特异性 DNA酶 ( Epstein-Barr virus-specific deoxynuclease,EBV-DNase)抗体与鼻咽癌 ( nasopharyngeal carcinoma,NPC)分期的关系。方法 :用 Western Blot法检测 2 64例 NPC血清 ,按“92分期法”对所有血清进行分期 ,分别计算各 T、N、M期及临床病期的 EBV-DNase抗体阳性率并进行统计学处理。　结果 :NPC各 T、N、M组及临床分期组血清 EBV-DNase抗体阳性率均无显著差异 ( P>0 .0 5 )。　结论 :早期 ( 期 ) NPC血清 EBV-DNase抗体阳性率与 ～ 期血清无明显差异 ,EBV-DNase抗体有可能成为 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 癌 EB病毒特异性DNA酶抗体 WESTERN blot法 诊断

在线阅读 下载PDF 职称材料

使用组织微阵列对浸润性膀胱癌癌基因的研究 被引量：2

6

作者 郑敏 Moch Holger 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期6-9,共4页

目的:比较基因杂交(CGH)研究发现染色体5p扩增与膀胱癌的发展有关;TRIO基因位于扩增区,其编码的蛋白在细胞周期调节中起主导作用。本研究在于了解TRIO的扩增和表达是否与膀胱癌的发展有关。方法:荧光原位杂交(FISH)、RNA原位杂交、North... 目的:比较基因杂交(CGH)研究发现染色体5p扩增与膀胱癌的发展有关;TRIO基因位于扩增区,其编码的蛋白在细胞周期调节中起主导作用。本研究在于了解TRIO的扩增和表达是否与膀胱癌的发展有关。方法:荧光原位杂交(FISH)、RNA原位杂交、NorthernBlot分析。结果:微小组织微阵列(TMA)FISH显示:12/14例膀胱癌组织显示TRIO扩增;含有1636例膀胱癌的组织微阵列FISH研究发现TRIO扩增与肿瘤浸润表现型、低分化密切相关。TRIO扩增仅见于1.5%早期膀胱肿瘤(pTaG1/G2)(7/456例),而在膀胱癌(pT1～4)高达12.8%(62/485例)。RNA原位杂交和NorthernBlot法证实TRIO在膀胱癌组织高表达。结论:TRIO扩增和高表达常发生在浸润性生长膀胱癌(pT1～4),可能在膀胱癌的发展过程中发挥重要作用。 展开更多

关键词 膀胱肿瘤 FISH RNA原位杂交 NORTHERN blot法 组织微阵列

在线阅读 下载PDF 职称材料

TGF-β1对大鼠肾小球系膜细胞ⅩⅧ型胶原表达的影响

7

作者 杨静 蒋涛 +3 位作者 李慧 赵仲华 张秀荣 张农 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期571-574,F006,共5页

目的　探讨转化生长因子 β1(TGF β1)对ⅩⅧ型胶原在大鼠肾小球系膜细胞中表达的影响 ,以及两者在大鼠抗Thy 1肾小球肾炎中的相互关系。方法　采用RT PCR、Westernblot法观察外源性TGF β1对大鼠肾小球系膜细胞中ⅩⅧ型胶原表达的影响 ... 目的　探讨转化生长因子 β1(TGF β1)对ⅩⅧ型胶原在大鼠肾小球系膜细胞中表达的影响 ,以及两者在大鼠抗Thy 1肾小球肾炎中的相互关系。方法　采用RT PCR、Westernblot法观察外源性TGF β1对大鼠肾小球系膜细胞中ⅩⅧ型胶原表达的影响 ;制备大鼠抗Thy 1肾小球肾炎模型 ,应用免疫组织化学ABC方法分别观察TGF β1和ⅩⅧ型胶原在大鼠肾组织中的表达 ,并对其染色强度作图像定量分析。结果　外源性TGF β1作用后 ,大鼠肾小球系膜细胞中ⅩⅧ型胶原的表达升高 ,并显示出一定的时间与浓度依赖性。大鼠抗Thy 1肾小球肾炎中TGF β1的表达在 1、3和 5d仅有微量表达 ,第 7天开始其表达明显且随时间增强 ;ⅩⅧ型胶原和Ⅳ型胶原的表达趋势都与TGF β1吻合 ,ⅩⅧ型胶原的表达与TGF β1的表达间具有显著的相关性。结论　ⅩⅧ型胶原的表达与TGF β1的作用相关 ,可能参与了肾小球肾炎的发生发展过程 。 展开更多

关键词 外源性TGF-Β1 大鼠 胶原表达 肾小球系膜细胞 胶原 肾小球肾炎 观察 RT-PCR blot法 转化生长因子-β1

在线阅读 下载PDF 职称材料

丹皮酚对小鼠酒精性脂肪肝中Adip/CaMKKβ/AMPK通路的影响 被引量：14

8

作者 司远青 颜贵明 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期80-86,共7页

目的研究Adip/CaMKKβ/AMPK通路是否参与丹皮酚(paeonol,Pae)治疗小鼠酒精性脂肪肝的过程。方法在小鼠酒精性脂肪肝模型的基础上给予丹皮酚治疗后,通过ELISA法检测小鼠血清中各炎症因子和TG、TC,同时用ELISA法检测小鼠血清中Adip和ACC... 目的研究Adip/CaMKKβ/AMPK通路是否参与丹皮酚(paeonol,Pae)治疗小鼠酒精性脂肪肝的过程。方法在小鼠酒精性脂肪肝模型的基础上给予丹皮酚治疗后,通过ELISA法检测小鼠血清中各炎症因子和TG、TC,同时用ELISA法检测小鼠血清中Adip和ACC表达水平,用qPCR法及Westren blot法检测小鼠肝组织Adip、CaMKKβ、AMPKα和SREBP1c核酸和蛋白水平。 结果 Adip表达水平在各处理组无显著变化;酒精诱导增加炎症因子和TG、TC表达,降低了CaMKKβ和AMPKα在核酸和蛋白磷酸化水平上的表达,水飞蓟宾与丹皮酚降低了炎症因子和TG、TC表达,提高了CaMKKβ和AMPKα在核酸和蛋白磷酸化水平上的表达;酒精诱导增加了SREBP1c在核酸和蛋白水平上的表达,水飞蓟宾与丹皮酚降低了SREBP1c的表达。 结论 从Adip/CaMKKβ/AMPK信号传导的变化验证了丹皮酚可通过此信号转导来减轻酒精性脂肪肝的脂肪变性损伤和炎症水平。 展开更多

关键词 酒精性脂肪肝 丹皮酚 蛋白磷酸化 水飞蓟宾 blot法 炎症因子 小鼠血清 AMPK

在线阅读 下载PDF 职称材料

乳腺癌中CREPT的表达及临床意义 被引量：2

9

作者 张美智子 陈永良 +2 位作者 郭佳雯 吴梓萱 薛晶 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1299-1303,共5页

目的探讨乳腺癌组织中CREPT的表达及与乳腺癌临床病理特征的相关性及临床意义。方法采用免疫组化EnVision两步法检测132例乳腺癌及52例癌旁乳腺组织中CREPT蛋白的表达,并分析其高表达与乳腺癌临床病理特征的关系。采用Western blot及qRT... 目的探讨乳腺癌组织中CREPT的表达及与乳腺癌临床病理特征的相关性及临床意义。方法采用免疫组化EnVision两步法检测132例乳腺癌及52例癌旁乳腺组织中CREPT蛋白的表达,并分析其高表达与乳腺癌临床病理特征的关系。采用Western blot及qRT-PCR法检测12对新鲜乳腺癌组织及配对癌旁乳腺组织中CREPT蛋白及mRNA的表达。结果Western blot及qRT-PCR结果显示:乳腺癌组织中CREPT蛋白及mRNA高表达(P<0.01)。免疫组化结果显示:乳腺癌组织中CREPT的高表达为58%(76/132),显著高于癌旁乳腺组织(0,0/52),差异有统计学意义(P<0.01)。CREPT高表达与乳腺癌分型及有无淋巴结转移均有关(P<0.01),与患者性别、年龄、原发灶最大径均无关(P>0.05)。随访105例CREPT高表达者,其总生存期明显低于低表达者(P<0.05)。结论CREPT在乳腺癌组织中高表达,其与临床TNM分期、有无淋巴结转移相关;其有望成为乳腺癌分型的潜在生物学标志物及治疗的新靶点。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 CREPT 总生存期 Western blot法

在线阅读 下载PDF 职称材料

乙酰肝素酶和整合素α5β1蛋白在葡萄胎组织中的表达及其临床意义 被引量：3

10

作者 王闯 于淑莉 +2 位作者 李桃 呂蓉蓉 齐洁敏 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1361-1366,I0020,共7页

目的:观察乙酰肝素酶(HPA)蛋白和整合素α5β1蛋白在人良、恶性葡萄胎组织中的表达情况,阐明其在良、恶性葡萄胎发生发展中的作用。方法:选择人正常胎盘绒毛组织50例(正常胎盘绒毛组)、良性葡萄胎组织40例(良性葡萄胎组)和恶性葡萄胎组... 目的:观察乙酰肝素酶(HPA)蛋白和整合素α5β1蛋白在人良、恶性葡萄胎组织中的表达情况,阐明其在良、恶性葡萄胎发生发展中的作用。方法:选择人正常胎盘绒毛组织50例(正常胎盘绒毛组)、良性葡萄胎组织40例(良性葡萄胎组)和恶性葡萄胎组织17例(恶性葡萄胎组)。采用免疫组织化学SP法检测各组组织中HPA和整合素α5β1蛋白的阳性表达率和阳性表达强度,Western blotting法分别检测各组组织中HPA和整合素α5β1蛋白表达水平,Spearman等级相关分析法分析良、恶性葡萄胎组织中HPA蛋白和整合素α5β1蛋白表达的相关性。结果:良性葡萄胎组和恶性葡萄胎组组织中HPA和整合素α5β1蛋白阳性表达率、阳性表达强度和表达水平高于正常胎盘绒毛组(P<0.05);恶性葡萄胎组组织中HPA和整合素α5β1蛋白阳性表达率、阳性表达强度和表达水平高于良性葡萄胎组(P<0.05)。在良、恶性葡萄胎组织中HPA蛋白与整合素α5β1蛋白的表达均呈正相关关系(r=0.506,P<0.05;r=0.555,P<0.05)。结论:联合检测HPA和整合素α5β1蛋白的表达可成为良性葡萄胎和恶性葡萄胎鉴别诊断的预测指标。 展开更多

关键词 葡萄胎 免疫组织化学 Western blotting法 乙酰肝素酶 整合素Α5Β1

在线阅读 下载PDF 职称材料

豚鼠早期实验性近视眼巩膜成纤维细胞前部及后极部MMP-2 mRNA及蛋白表达变化的研究 被引量：3

11

作者 陈博宇 王超英 +5 位作者 安慧琴 马景学 陈维毅 郝岚 刘迎庆 仝春梅 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2011年第9期807-811,共5页

目的研究豚鼠早期实验性近视眼巩膜成纤维细胞(guineapig scleral fibroblast,GSF)前部及后极部基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)的改变,探索近视的发病机制。方法 2周龄豚鼠30只作为实验组,另外再随机选取5只(10眼)... 目的研究豚鼠早期实验性近视眼巩膜成纤维细胞(guineapig scleral fibroblast,GSF)前部及后极部基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)的改变,探索近视的发病机制。方法 2周龄豚鼠30只作为实验组,另外再随机选取5只(10眼)正常2周龄豚鼠不作任何干预,作为正常对照眼。选取任意眼戴-10.00DS凹透镜,分别饲养6d、15d、30d后除去镜片,验光及测眼轴长度确定近视形成后,采用组织块培养法培养豚鼠的前部及后极部GSF,利用免疫细胞化学、实时荧光定量PCR、Western blot蛋白印迹法检测前部及后极部GSF中MMP-2表达变化。结果 MMP-2的表达定位于细胞浆和细胞核。实验组中前部GSF饲养15d阳性表达率较高,30d阳性表达率最高;后极部GSF饲养6d表达率开始较高,至15d阳性表达率最高,以后保持较高的阳性表达率,各诱导时间点之间两两比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05);自身对照组各组自身前部及后极部比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论体外培养的豚鼠GSF稳定表达MMP-2 mRNA及其蛋白,且前部GSF于诱导15d开始阳性表达率较高,后极部GSF于诱导6d开始阳性表达率较高,后极部GSF较前部表达明显增多。 展开更多

关键词 豚鼠 巩膜成纤维细胞 基质金属蛋白酶 2 免疫细胞化学 实时荧光定量PCR Western blot蛋白印迹法

在线阅读 下载PDF 职称材料

白消安对仔猪睾丸曲精小管内增殖分化相关蛋白表达与定位的影响

12

作者 任高雅 范小瑞 +2 位作者 张警文 张欣荣 贺俊平 《山西农业科学》 2023年第9期1107-1114,共8页

为了研究白消安对仔猪睾丸曲精小管内增殖分化相关蛋白PCNA、PLZF和GATA4表达与定位的影响,试验选取体外培养仔猪曲精小管为研究对象,分为对照组和试验组,其中试验组各添加5 mg/kg白消安,分别培养1、2、3 d,离心获取曲精小管,采用HE染... 为了研究白消安对仔猪睾丸曲精小管内增殖分化相关蛋白PCNA、PLZF和GATA4表达与定位的影响,试验选取体外培养仔猪曲精小管为研究对象,分为对照组和试验组,其中试验组各添加5 mg/kg白消安,分别培养1、2、3 d,离心获取曲精小管,采用HE染色检测形态变化,采用免疫组化、qRT-PCR和Western blot法分别检测PCNA、PLZF和GATA4表达和定位的变化。HE染色结果显示,各试验组曲精小管内均含有支持细胞和生殖细胞;免疫组织化学结果显示,各试验组的PCNA蛋白定位于生殖细胞和支持细胞的细胞核,白消安作用可导致PCNA染色变深,表达量升高。各试验组GATA4蛋白定位于支持细胞的细胞核,且与对照组相比无明显差异;各试验组的PLZF蛋白定位于生殖细胞的细胞核,与对照组相比,白消安作用2 d时PLZF染色无显著差异,白消安作用1、3 d时PLZF染色变深,表达量升高。qRT-PCR和Western Blot结果显示,与对照组相比,试验组PCNA和GATA4 mRNA及其蛋白表达量均显著升高;白消安作用2 d的PLZF mRNA和蛋白表达量差异不显著,白消安作用1、3 d的PLZF mRN以及蛋白表达量均显著升高。综上所述,PCNA、PLZF和GATA4均表达于体外培养仔猪曲精小管,白消安作用可导致PCNA、PLZF和GATA4在曲精小管内表达水平改变,提示白消安通过影响增殖分化相关蛋白的表达导致猪睾丸精子发生受损。 展开更多

关键词 白消安 仔猪睾丸曲精小管 Western blot法 PCNA GATA4 PLZF

在线阅读 下载PDF 职称材料

HIF-1α纳米抗体的制备及其抑制黑素瘤生长的作用

13

作者 李佳敏 贾琼 +3 位作者 秦蓉芬 迟志端 王富明 范瑞文 《山西农业科学》 2023年第12期1435-1441,共7页

缺氧诱导因子1α(Hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)参与低氧微环境相关疾病的发生等过程,具有控制肿瘤生长和发展的功能。黑色素瘤是一种发生于人和动物恶性程度较高的肿瘤。为探明HIF-1α纳米抗体对黑色素瘤的影响,研究利用前期... 缺氧诱导因子1α(Hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)参与低氧微环境相关疾病的发生等过程,具有控制肿瘤生长和发展的功能。黑色素瘤是一种发生于人和动物恶性程度较高的肿瘤。为探明HIF-1α纳米抗体对黑色素瘤的影响,研究利用前期保存的羊驼源黑色素瘤细胞噬菌体文库筛选HIF-1α纳米抗体,经原核表达与纯化后,通过Western Blot和免疫组织化学验证HIF-1α纳米抗体与抗原的结合性;分别通过CCK-8法、划痕试验以及Western Blot法检测其对B16黑素瘤细胞的增殖和迁移能力及其相关分子表达的影响。结果表明,经表达和纯化获得的HIF-1α纳米抗体分子质量约为16 ku,没有跨膜结构,具有亲水性。通过Western Blot和免疫组织化学验证了其具有良好的抗原结合性。在增殖试验和划痕试验中,与对照组相比,HIF-1α纳米抗体抑制了B16细胞的增殖和迁移,下调了靶基因VEGF的表达,并使细胞增殖和迁移相关蛋白Ras、ERK、RAC和RAF的表达量下调。预测HIF-1α纳米抗体进入B16细胞内,与抗原结合,通过下游靶基因VEGF下调RAs、ERK、RAC、RAF的表达,从而对细胞增殖和迁移起抑制作用,可作为黑色素瘤治疗的新靶点。 展开更多

关键词 HIF-1Α 纳米抗体 B16细胞 Western blot法 CCK-8法 细胞增殖 细胞迁移

在线阅读 下载PDF 职称材料

绵羊肺腺瘤病毒内蒙株衣壳蛋白在真核细胞中的表达

14

作者 斯日古楞 么宏强 +1 位作者 马学恩 周建华 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2013年第8期3-5,共3页

为构建绵羊肺腺瘤病毒(Jaagsiekte Sheep Retrovirus,JSRV)内蒙株衣壳蛋白(CA)基因真核表达载体,采用含HA标签的引物,通过PCR方法从重组原核表达质粒上扩增CA-HA融合基因片段,将其克隆至真核表达载体上。构建的真核表达质粒通过脂质体... 为构建绵羊肺腺瘤病毒(Jaagsiekte Sheep Retrovirus,JSRV)内蒙株衣壳蛋白(CA)基因真核表达载体,采用含HA标签的引物,通过PCR方法从重组原核表达质粒上扩增CA-HA融合基因片段,将其克隆至真核表达载体上。构建的真核表达质粒通过脂质体法转染293细胞和Hela细胞,用间接免疫荧光和Westhern blotting法检测目的蛋白的表达。结果表明,成功地构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-CA-HA,并转染的293细胞和Hela细胞内观察到特异性荧光和检测到目的基因的表达产物,说明CA基因在真核细胞内获得表达。本试验为建立特异性的诊断试剂盒奠定了基础。 展开更多

关键词 绵羊肺腺瘤病病毒 CA基因 真核表达 间接免疫荧光法 Western blotting法

在线阅读 下载PDF 职称材料