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香蕉茎尖遗传转化法研究
被引量：
21
1
作者
李华平
胡晋生
+1 位作者
王敏
范怀忠
《热带作物学报》
CSCD
2000年第4期33-38,共6页
通过对多茎尖繁殖方法和转基因研究，建立了香蕉茎尖外源基因的遗传转化方法。明确了卡那霉素或Ｇ－４１８在转化植株中所使用的合适浓度，即当使用卡那霉素时，其产梢的浓度为 １００ ｍｇ／Ｌ，导根的浓度为 １５０ ｍｇ／Ｌ；但当使...
通过对多茎尖繁殖方法和转基因研究，建立了香蕉茎尖外源基因的遗传转化方法。明确了卡那霉素或Ｇ－４１８在转化植株中所使用的合适浓度，即当使用卡那霉素时，其产梢的浓度为 １００ ｍｇ／Ｌ，导根的浓度为 １５０ ｍｇ／Ｌ；但当使用 Ｇ－４１８时，其产梢浓度则为 ２５ ｍｇ／Ｌ，其导根浓度则为 ３０ ｍｇ／Ｌ或３５ ｍｇ／Ｌ。通过基因枪和农杆菌共培养法尝试将黄瓜花叶病毒的衣壳蛋白基因转化香蕉组织，其结果表明：经过卡那霉素或Ｇ－４１８的筛选，仅有 ５％－７％的芽能够存活下来。通过选择性继代培养，最后获得了７３株转化植株；对其中的２４株进行ＰＣＲ检测，结果表明阳性率达 ８３．３％；进一步的 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ检测表明：ＰＣＲ检测阳性的８１．８％植株含有外源衣壳蛋白基因。
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关键词
香蕉
茎尖
遗传转化
衣壳蛋白基因
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职称材料
葡萄病毒B CP基因植物表达载体构建及烟草遗传转化
被引量：
3
2
作者
任芳
张尊平
+3 位作者
范旭东
胡国君
李正男
董雅凤
《植物保护》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第3期11-16,30,共7页
葡萄病毒B Grapevine virus B(GVB)是葡萄皱木复合病中栓皮病的病原,为开展抗GVB转基因研究,本研究利用RT-PCR技术克隆GVB外壳蛋白(coat protein,CP)基因,与植物表达载体pRI 101-AN连接构建植物表达载体pRI-GVB CP。采用电击转化法将植...
葡萄病毒B Grapevine virus B(GVB)是葡萄皱木复合病中栓皮病的病原,为开展抗GVB转基因研究,本研究利用RT-PCR技术克隆GVB外壳蛋白(coat protein,CP)基因,与植物表达载体pRI 101-AN连接构建植物表达载体pRI-GVB CP。采用电击转化法将植物表达载体pRI-GVB CP导入农杆菌LBA4404,并利用农杆菌介导的叶盘转化法将外源基因导入西方烟‘37B’。共获得16个烟草再生株系,PCR检测其中3个株系为阳性,阳性株系播种获得的64株T_1代植株中有30株扩增到目的条带,阳性率为46.9%,表明目的基因GVB cp成功导入烟草并可成功遗传到子代。28株T_1代转基因植株接种病毒进行抗病性鉴定,其中有6株对接种病毒GVB具有抗性。
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关键词
葡萄病毒B
外壳蛋白基因
植物表达载体
烟草
遗传转化
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职称材料
烤烟栽培品种G－28、K326抗病毒遗传转化的研究
被引量：
2
3
作者
吕华飞
何云昆
+4 位作者
赵淑珍
王苏燕
叶寅
张仲凯
田波
《西南农业学报》
CSCD
1994年第1期66-69,共4页
用携带植物抗病毒基因表达载体ｐＥＣ２３和ｐＲＣＰⅠ的农杆菌转化云南烤烟栽培品种Ｇ－２８和Ｋ３２６，获得了大量转基因植株，载体质粒ｐＥＣ２３上有卡那霉素抗性标记基因（ＮＰＴⅡ）和ＣａＭＶ３５ｓ启动子控制的烟草花叶病毒（...
用携带植物抗病毒基因表达载体ｐＥＣ２３和ｐＲＣＰⅠ的农杆菌转化云南烤烟栽培品种Ｇ－２８和Ｋ３２６，获得了大量转基因植株，载体质粒ｐＥＣ２３上有卡那霉素抗性标记基因（ＮＰＴⅡ）和ＣａＭＶ３５ｓ启动子控制的烟草花叶病毒（ＴＭＶ）５４ＫＤ蛋白基因，ｐＲＣＰⅠ上则有卡那霉素抗性标记基因（ＮＰＴⅡ）、黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）外壳蛋白基因、ＣＭＶ卫星ＲＮＡ基因，品种Ｇ－２８、Ｋ３２６的叶片与携带载体质粒的农杆菌共培养后，将其按品种分别转移到含６０μｇ／ｍｌ、２０μｇ／ｍｌＫｍ的ＭＳ＋０．２ｍｇ／ｌＮＡＡ＋２．０ｍｇｌ６－ＢＡ＋０．１ｍｇ／ｌＫＴ培养基上培养筛选，２～３周后分化出芽，切下小芽分别转移到含６０μｇ／ｍｌ、２０μｇ／ｍｌＫｍ的ＭＳ＋０．２ｍｇ／ｌＮＡＡ的培养基上进一步筛选并使转化体生根，再对生根植株叶片进行抗性鉴定，结果表明，至少Ｋｍ抗性标记基因（ＮＰＴⅡ）已转入烤烟植株。
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关键词
烟草
烤烟
品种
抗病性
遗传
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职称材料
题名
香蕉茎尖遗传转化法研究
被引量：
21
1
作者
李华平
胡晋生
王敏
范怀忠
机构
华南农业大学植物病毒研究室
美国夏威夷大学植病系
出处
《热带作物学报》
CSCD
2000年第4期33-38,共6页
基金
教育部优秀年轻教师基金
广东省自然科学基金!(990714)资助项目
文摘
通过对多茎尖繁殖方法和转基因研究，建立了香蕉茎尖外源基因的遗传转化方法。明确了卡那霉素或Ｇ－４１８在转化植株中所使用的合适浓度，即当使用卡那霉素时，其产梢的浓度为 １００ ｍｇ／Ｌ，导根的浓度为 １５０ ｍｇ／Ｌ；但当使用 Ｇ－４１８时，其产梢浓度则为 ２５ ｍｇ／Ｌ，其导根浓度则为 ３０ ｍｇ／Ｌ或３５ ｍｇ／Ｌ。通过基因枪和农杆菌共培养法尝试将黄瓜花叶病毒的衣壳蛋白基因转化香蕉组织，其结果表明：经过卡那霉素或Ｇ－４１８的筛选，仅有 ５％－７％的芽能够存活下来。通过选择性继代培养，最后获得了７３株转化植株；对其中的２４株进行ＰＣＲ检测，结果表明阳性率达 ８３．３％；进一步的 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ检测表明：ＰＣＲ检测阳性的８１．８％植株含有外源衣壳蛋白基因。
关键词
香蕉
茎尖
遗传转化
衣壳蛋白基因
Keywords
banana meristem. genetic transformation coat protein gene
分类号
S668.103 [农业科学—果树学]
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职称材料
题名
葡萄病毒B CP基因植物表达载体构建及烟草遗传转化
被引量：
3
2
作者
任芳
张尊平
范旭东
胡国君
李正男
董雅凤
机构
中国农业科学院果树研究所
出处
《植物保护》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第3期11-16,30,共7页
基金
国家现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-29-bc-1)
文摘
葡萄病毒B Grapevine virus B(GVB)是葡萄皱木复合病中栓皮病的病原,为开展抗GVB转基因研究,本研究利用RT-PCR技术克隆GVB外壳蛋白(coat protein,CP)基因,与植物表达载体pRI 101-AN连接构建植物表达载体pRI-GVB CP。采用电击转化法将植物表达载体pRI-GVB CP导入农杆菌LBA4404,并利用农杆菌介导的叶盘转化法将外源基因导入西方烟‘37B’。共获得16个烟草再生株系,PCR检测其中3个株系为阳性,阳性株系播种获得的64株T_1代植株中有30株扩增到目的条带,阳性率为46.9%,表明目的基因GVB cp成功导入烟草并可成功遗传到子代。28株T_1代转基因植株接种病毒进行抗病性鉴定,其中有6株对接种病毒GVB具有抗性。
关键词
葡萄病毒B
外壳蛋白基因
植物表达载体
烟草
遗传转化
Keywords
Grapevine virus B
coat
protein
gene
plant expression vector
tobacco
genetic
transformation
分类号
S432.1 [农业科学—植物病理学]
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职称材料
题名
烤烟栽培品种G－28、K326抗病毒遗传转化的研究
被引量：
2
3
作者
吕华飞
何云昆
赵淑珍
王苏燕
叶寅
张仲凯
田波
机构
云南省农业科学院生物技术研究所
出处
《西南农业学报》
CSCD
1994年第1期66-69,共4页
基金
云南省烟草公司
文摘
用携带植物抗病毒基因表达载体ｐＥＣ２３和ｐＲＣＰⅠ的农杆菌转化云南烤烟栽培品种Ｇ－２８和Ｋ３２６，获得了大量转基因植株，载体质粒ｐＥＣ２３上有卡那霉素抗性标记基因（ＮＰＴⅡ）和ＣａＭＶ３５ｓ启动子控制的烟草花叶病毒（ＴＭＶ）５４ＫＤ蛋白基因，ｐＲＣＰⅠ上则有卡那霉素抗性标记基因（ＮＰＴⅡ）、黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）外壳蛋白基因、ＣＭＶ卫星ＲＮＡ基因，品种Ｇ－２８、Ｋ３２６的叶片与携带载体质粒的农杆菌共培养后，将其按品种分别转移到含６０μｇ／ｍｌ、２０μｇ／ｍｌＫｍ的ＭＳ＋０．２ｍｇ／ｌＮＡＡ＋２．０ｍｇｌ６－ＢＡ＋０．１ｍｇ／ｌＫＴ培养基上培养筛选，２～３周后分化出芽，切下小芽分别转移到含６０μｇ／ｍｌ、２０μｇ／ｍｌＫｍ的ＭＳ＋０．２ｍｇ／ｌＮＡＡ的培养基上进一步筛选并使转化体生根，再对生根植株叶片进行抗性鉴定，结果表明，至少Ｋｍ抗性标记基因（ＮＰＴⅡ）已转入烤烟植株。
关键词
烟草
烤烟
品种
抗病性
遗传
Keywords
Tobacco
Antivirus
genetic
transformation
Km resistant marker
gene
TMV54KD
protein
gene
CMV
coat
protein
gene
CMV satellite RNA
gene
Yunnan.
分类号
S572.03 [农业科学—烟草工业]
在线阅读
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
香蕉茎尖遗传转化法研究
李华平
胡晋生
王敏
范怀忠
《热带作物学报》
CSCD
2000
21
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
葡萄病毒B CP基因植物表达载体构建及烟草遗传转化
任芳
张尊平
范旭东
胡国君
李正男
董雅凤
《植物保护》
CAS
CSCD
北大核心
2018
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
烤烟栽培品种G－28、K326抗病毒遗传转化的研究
吕华飞
何云昆
赵淑珍
王苏燕
叶寅
张仲凯
田波
《西南农业学报》
CSCD
1994
2
在线阅读
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职称材料
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