6种不同J亚群禽白血病病毒检测试剂盒的比较

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作者 赵方钰 崔慧珍 +4 位作者 王一新 常爽 任志浩 崔文平 赵鹏 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第4期62-69,共8页

为了比较6种不同J亚群禽白血病病毒(ALV-J)检测试剂盒的检测结果,以更好地实施禽白血病净化和鸡苗洁净度评估。本试验首先将ALV-J参考株以卵黄囊接种感染无特定病原体(SPF)鸡胚构建雏鸡携带ALV-J模型,对出壳雏鸡逐一采集胎粪和抗凝血,... 为了比较6种不同J亚群禽白血病病毒(ALV-J)检测试剂盒的检测结果,以更好地实施禽白血病净化和鸡苗洁净度评估。本试验首先将ALV-J参考株以卵黄囊接种感染无特定病原体(SPF)鸡胚构建雏鸡携带ALV-J模型,对出壳雏鸡逐一采集胎粪和抗凝血,随后分别将胎粪滤液和血浆接种鸡胚成纤维传代(DF-1)细胞进行病毒培养,维持7 d时收取细胞上清,以A、B、C三家公司的ALV p27抗原酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒以及商品化的磁微粒化学发光检测试剂盒、胶体金试纸条和实时荧光定量PCR检测试剂盒分别对胎粪、不同稀释度胎粪样品、胎粪病毒分离细胞上清和血浆病毒分离细胞上清进行检测。结果显示,6种不同试剂盒对胎粪、胎粪病毒分离细胞上清和血浆病毒分离细胞上清的检测结果判定总体一致,其中以磁微粒化学发光检测试剂盒读数判定最为直观,其阳性样品与阴性样品的读值区分明显、易于判断。对不同稀释度胎粪样品的检测结果显示,以A公司ALV p27抗原ELISA试剂盒、磁微粒化学发光检测试剂盒和实时荧光定量PCR检测试剂盒相对灵敏,可检出低滴度病原。结果表明,不同检测方法对ALV-J检测的整体判定差异不显著,但针对低滴度样品检测时不同方法的检出率有差异,需要根据情况选择方法。 展开更多

关键词 j亚群禽白血病病毒(ALV-j) P27抗原 酶联免疫吸附测定(ELISA) 磁微粒化学发光检测试剂盒 胶体金试纸条 实时荧光定量pcr

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J亚群白血病的病理学观察及PCR诊断 被引量：7

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作者 成子强 赵振华 +2 位作者 张利 高娃 张二芹 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期490-493,共4页

从某肉种鸡场取疑似J亚群白血病的自然发病鸡 ,剖检 ,观察病理学特征 (光镜、电镜 )。随后对该场进行ALV_J抗体ELISA检测 ,发现感染率达 2 8% ,从中选取部分抗体阳性鸡及阴性鸡剖检 ,取肝进行ALV_J特异性PCR检测。结果 :自然发病鸡病变... 从某肉种鸡场取疑似J亚群白血病的自然发病鸡 ,剖检 ,观察病理学特征 (光镜、电镜 )。随后对该场进行ALV_J抗体ELISA检测 ,发现感染率达 2 8% ,从中选取部分抗体阳性鸡及阴性鸡剖检 ,取肝进行ALV_J特异性PCR检测。结果 :自然发病鸡病变明显 ,在肝、脾、肾、睾丸 (卵巢 )肺等多种组织肿大 ,并有大小不等的灰白色结节。镜检 :病灶内及肿瘤主要由密集的髓细胞组成 ,在大脑、小脑坐骨神经中未见。电镜 ,肿块中的髓细胞样瘤细胞呈圆形、核圆形或椭圆形 ,体积大小不一、染色质边集 ,胞浆中溶酶体增多 ,有些电子密度较高 ,有些趋于溶解 ,肝细胞体积增大 ,核浓缩或淡染 ,胞浆中线粒体增多 ,肿胀 ,嵴减少或消失 ,在胞浆膜下有病毒粒子存在。PCR结果 :6例抗体阳性鸡和部分自然病例PCR阳性而 2只对照鸡PCR阴性。通过以上证据可知 ,病变明显的和抗体阳性的鸡PCR结果全部为阳性 ,证明鸡体内病毒与抗体共存 ,而抗体阴性 ,病毒阳性的结果未出现 ,说明此肉种鸡场感染的ALV_J大部分是由于水平传播造成的。 展开更多

关键词 禽白血病病毒j亚群(ALV-j) 病理学特征 ELISA检测 pcr检测

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J亚群禽白血病SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立 被引量：4

3

作者 王莉 黄安宁 +2 位作者 李槿年 张丹俊 刘雪兰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期733-737,共5页

为建立一种能够快速、灵敏和特异地检测J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,本研究以ALV-J原型病毒株HPRS-103的pol基因3'端与gp85编码基因之间的保守区域(5 258 bp～5 802 bp)为检测目的片段,构建重组质粒并... 为建立一种能够快速、灵敏和特异地检测J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,本研究以ALV-J原型病毒株HPRS-103的pol基因3'端与gp85编码基因之间的保守区域(5 258 bp～5 802 bp)为检测目的片段,构建重组质粒并作为靶基因,通过对其浓度、引物浓度和退火温度的优化,建立了ALV-J SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法。结果显示该方法的最低检测限度为2.36×102拷贝/μL,比普通PCR高100倍;与其他禽源病毒无交叉反应;批内和批间变异系数均小于5%。表明本研究建立的方法具有良好的特异性、稳定性和灵敏性。采用该方法对100只临床病鸡进行检测,ALV的检出率为44%。随机选择10只感染阳性鸡,检测病毒基因在心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏中的分布与表达水平,结果表明ALV-J在各主要脏器中均有分布,但以肾脏中的病毒表达量最高。 展开更多

关键词 j亚群禽白血病病毒 SYBR Green Ⅰ 荧光定量pcr 病毒基因表达水平

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禽白血病J亚群病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量：7

4

作者 董征英 张伟华 +1 位作者 李冰 常维山 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1096-1102,共7页

本研究旨在通过荧光定量PCR方法研究禽白血病J亚群病毒(ALV-J)在家禽体内各个器官的分布。根据ALV-J NX0101毒株基因5 258—5 510bp的碱基序列,设计了1对特异性引物,进行RT-PCR反应,扩增产物为253bp,将该产物连接T载体作为Real-time PC... 本研究旨在通过荧光定量PCR方法研究禽白血病J亚群病毒(ALV-J)在家禽体内各个器官的分布。根据ALV-J NX0101毒株基因5 258—5 510bp的碱基序列,设计了1对特异性引物,进行RT-PCR反应,扩增产物为253bp,将该产物连接T载体作为Real-time PCR反应的标准品,利用SYBR Green I染料进行Real-time PCR反应,建立了标准曲线,并进行反应灵敏性,特异性和重复性试验。然后用已建立的方法对人工感染ALV-J的SPF鸡心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胸腺、法氏囊、腺胃进行3次重复检测,将Ct值带入标准曲线公式得出各个组织的病毒拷贝数。试验结果表明:标准曲线线性关系R值均为0.991 4,检测极限约为81拷贝质粒DNA,比RT-PCR灵敏100倍以上;特异性分析表明只有ALV-J能检测到特异性的熔解度峰值;批内和批间重复性试验的变异系数均小于5%。通过比较数值以得出胸腺ALV-J基因含量是最高的,肺脏、脾脏、法氏囊含量也比较高,心脏拷贝数最低。自然感染发病鸡各器官ALV-J基因均高于人工感染ALV-J的基因含量。本研究所建立的ALV-J基因实时荧光定量RT-PCR方法灵敏度高、特异性强、检测周期短,初步探讨了禽白血病J亚群病毒在畜禽体内各个器官的病毒分布。这为以后禽白血病的诊断以及治疗提供了重要的技术支持。 展开更多

关键词 禽白血病病毒j亚群 荧光定量pcr 病毒分布

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J亚群禽白血病病毒PCR检测方法的构建与应用 被引量：3

5

作者 王璇 文正常 +1 位作者 杨粤黔 潘淑惠 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2014年第9期158-160,共3页

为建立简单、快速、准确、直接对疑似感染J亚群禽白血病病毒(Subgroup J of avian leukosis virus,ALV-J)鸡进行检测的PCR方法,根据GenBank中禽白血病病毒env基因序列设计1对特异性引物,构建了检测J亚群禽白血病病毒的PCR方法,并进行了... 为建立简单、快速、准确、直接对疑似感染J亚群禽白血病病毒(Subgroup J of avian leukosis virus,ALV-J)鸡进行检测的PCR方法,根据GenBank中禽白血病病毒env基因序列设计1对特异性引物,构建了检测J亚群禽白血病病毒的PCR方法,并进行了特异性、敏感性试验和临床应用。结果表明:应用所构建的PCR方法对J亚群禽白血病病毒进行检测,其扩增结果与预期片段相符,对禽网状内皮细胞增生病病毒、鸡新城疫病毒和马立克氏病病毒的扩增结果均为阴性。说明,所构建的PCR检测方法具有较好的特异性和敏感性,可用于J亚群禽白血病病毒感染的检测、分子流行病学调查和分离毒株的快速鉴定。 展开更多

关键词 j亚群禽白血病病毒 检测 聚合酶链式反应

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J亚群禽白血病多发性肿瘤的病理改变与PCR检测 被引量：1

6

作者 张维谊 齐新永 +2 位作者 鞠厚斌 刘健 周锦萍 《中国动物检疫》 CAS 2011年第3期46-48,共3页

两个规模化商品蛋鸡场发病鸡群临床解剖显示:脚部和翅膀有血管瘤、肌肉组织内出现纤维肉瘤,肿大的肝、脾出现髓细胞瘤;经组织病理学观察符合J亚群禽白血病(ALV-J)的病理学特征。针对ALV-J保守序列P27基因设计特异引物,建立PCR方法,从出... 两个规模化商品蛋鸡场发病鸡群临床解剖显示:脚部和翅膀有血管瘤、肌肉组织内出现纤维肉瘤,肿大的肝、脾出现髓细胞瘤;经组织病理学观察符合J亚群禽白血病(ALV-J)的病理学特征。针对ALV-J保守序列P27基因设计特异引物,建立PCR方法,从出现病理改变的各组织脏器、各多发性肿瘤中以及血液中均检测到ALV-J,证实该病为以髓细胞瘤、血管瘤和纤维肉瘤为主的多发性肿瘤传染病。对扩增产物序列进行测定后,与原型株序列进行比较,核苷酸同源性为98.27%,从分子水平上证明为J亚群禽白血病,用PCR检测进一步验证J亚群禽白血病毒的感染机制和引起鸡群的病理改变。 展开更多

关键词 j亚群禽白血病 肿瘤 病理 pcr

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用ALV-Jgp85单克隆抗体证明蛋鸡存在J亚群禽白血病 被引量：53

7

作者 徐镔蕊 董卫星 +4 位作者 余春明 冯小宇 李宁 Lucy F.Lee Maoxiang Li 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期269-271,共3页

采用免疫组化法,对病理学初步诊断为蛋用型鸡 J亚群白血病的自然发病鸡的肿瘤、骨髓、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、心脏、胰脏、输卵管、卵巢、腺胃、骨骼肌、大脑、坐骨神经,用特异性抗 J亚群禽白血病病毒(ALV J)囊膜糖蛋白gp85的单克隆... 采用免疫组化法,对病理学初步诊断为蛋用型鸡 J亚群白血病的自然发病鸡的肿瘤、骨髓、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、心脏、胰脏、输卵管、卵巢、腺胃、骨骼肌、大脑、坐骨神经,用特异性抗 J亚群禽白血病病毒(ALV J)囊膜糖蛋白gp85的单克隆抗体进行检测,待检的组织切片中均检出阳性抗原,免疫组化的研究结果与病理学诊断结果相一致。在国内外首次发现并报道蛋用型鸡 J亚群禽白血病的自然病例。 展开更多

关键词 单克隆抗体 诊断 肿瘤 首次发现 膜糖蛋白 检出 免疫组化法 j亚群禽白血病 ALV-j 蛋用型

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地方柴鸡中J亚群禽白血病与马立克氏病的混合感染 被引量：55

8

作者 张洪海 刘青 +2 位作者 邱波 刘功振 成子强 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1215-1221,共7页

2008年9月,山东省菏泽市某柴鸡养殖专业户6 000只鸡80日龄时开始发病,至120日龄时死亡率高达15%。病鸡颜面苍白,机体进行性消瘦,瘫痪,最后衰竭死亡。部分鸡只可见单侧肢体麻痹症状和皮肤型肿瘤。对66份采自发病鸡群的血清及新生羽毛囊... 2008年9月,山东省菏泽市某柴鸡养殖专业户6 000只鸡80日龄时开始发病,至120日龄时死亡率高达15%。病鸡颜面苍白,机体进行性消瘦,瘫痪,最后衰竭死亡。部分鸡只可见单侧肢体麻痹症状和皮肤型肿瘤。对66份采自发病鸡群的血清及新生羽毛囊进行血清学检测。琼脂扩散试验结果显示所采的66份待检羽髓抗原MDV阳性率为59.09%,血清中MDV抗体阳性率为65.16%,抗原、抗体双阳性率为37.88%。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测鸡血清中ALV-J、REV抗体,结果显示ALV-J抗体阳性率为7.58%,REV抗体检测全部呈阴性。剖检病鸡可见内脏器官普遍肿大,肝、脾、肾表面及切面有大小不等的灰白色肿瘤样结节。病理组织学观察肿大的器官和组织内都有不同程度的淋巴细胞增生,并可在肝、脾、肾、腺胃等组织内同时观察到淋巴细胞样瘤细胞和髓样瘤细胞2种典型的肿瘤灶。免疫组织化学检测结果表明,发病鸡组织内同时存在MDV和ALV-J抗原的阳性信号。PCR检测结果显示6只来检病鸡MDV和ALV-J均呈阳性,都扩增出相应的条带,REV未扩增出任何条带,PCR呈阴性。以上结果表明地方柴鸡鸡群中存在MDV和ALV-J的共感染,提醒我们应当注意地方柴鸡肿瘤性疾病的预防和净化工作。 展开更多

关键词 地方柴鸡 j亚群白血病 马立克氏病 血清学 免疫组织化学 pcr

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采用SP法检测商品蛋鸡感染J亚群禽白血病病毒对产蛋性能的影响 被引量：9

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作者 徐镔蕊 董卫星 +6 位作者 冯小宇 余春明 吕艳丽 孙艳争 李宁 L.F.Lee Maoxiang Li 《中国家禽》 北大核心 2003年第6期10-12,共3页

本研究属世界上首次报道J亚群禽白血病病毒感染对蛋鸡产蛋性能的影响。尸体剖检观察到产蛋鸡的生殖系统发育不良,表现为卵巢、输卵管幼稚型,输卵管粗细不均。组织病理学观察,发现卵巢组织中有大量的胞浆内充满球形嗜酸性颗粒的骨髓瘤细... 本研究属世界上首次报道J亚群禽白血病病毒感染对蛋鸡产蛋性能的影响。尸体剖检观察到产蛋鸡的生殖系统发育不良,表现为卵巢、输卵管幼稚型,输卵管粗细不均。组织病理学观察,发现卵巢组织中有大量的胞浆内充满球形嗜酸性颗粒的骨髓瘤细胞。用特异性抗J亚群禽白血病病毒(ALV-J)囊膜糖蛋白gp85的单克隆抗体检测不产蛋鸡的卵巢、输卵管等待检的组织切片,均检出病毒阳性抗原。结果表明ALV-J的感染造成产蛋鸡卵巢、输卵管发育不良,是蛋鸡不产蛋的直接原因。 展开更多

关键词 SP法检 商品蛋鸡 感染 j亚群禽白血病病毒 产蛋性能 单克隆抗体 免疫组化

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ALV-J诱发鸡成红细胞白血病的临床病例分析 被引量：2

10

作者 姜艳萍 王玥 +5 位作者 于琳琳 蔡黎明 王真真 徐晴晴 王桂花 成子强 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1317-1323,共7页

2010—2011年检测3批病例,分别来自泰安新泰的110日龄麻鸡、济宁泗水的90日龄麻鸡和济南20日龄蛋雏鸡。病鸡均表现消瘦、精神萎靡、嗜睡、鸡冠稍苍白或发绀等,死亡率分别为20%、12%和18%。剖检,3批病鸡均可见肝脏、脾脏及肾脏严重肿大,... 2010—2011年检测3批病例,分别来自泰安新泰的110日龄麻鸡、济宁泗水的90日龄麻鸡和济南20日龄蛋雏鸡。病鸡均表现消瘦、精神萎靡、嗜睡、鸡冠稍苍白或发绀等,死亡率分别为20%、12%和18%。剖检,3批病鸡均可见肝脏、脾脏及肾脏严重肿大,胸腺、肌肉、腺胃等组织器官出血。新泰病鸡肝脏和肺脏表面有明显的白色肿瘤结节。血液涂片与骨髓涂片观察发现大量红细胞转变为体积较大,胞质丰富蓝染,胞核大呈圆形、核内有很纤细的染色质、核周围有空泡的成红细胞,以晚幼成红细胞为主;组织学检查发现,在所有组织脏器血管及间质内均可观察到大量聚集的与血涂片中形态相一致的成红细胞,并且可观察到核分裂相,但未见淋巴细胞聚集。通过血液学和组织学观察不仅排除马立克氏病和网状内皮组织增生症,而且排除中毒及代谢性疾病的可能。以肝脏组织DNA为模板,在3批病鸡中利用PCR检测均扩增出J亚群禽白血病病毒(ALV-J)gp85基因924bp的特异性片段,而A亚群禽白血病病毒(ALV-A)、B亚群禽白血病病毒(ALV-B)阴性。免疫组织化学检测结果表明,发病鸡肺脏和脾脏等含血量丰富的组织内发现组织细胞及成红细胞胞质呈ALV-J抗原阳性。根据以上检测结果确定此3批患有成红细胞白血病病鸡均由ALV-J感染引起。ALV-J引起单纯鸡成红细胞白血病在国内为首次发现。ALV-J在我国鸡群中的多潜能致瘤机制需要进一步的研究。 展开更多

关键词 j亚群禽白血病病毒(ALV-j) 成红细胞白血病(EB) pcr 免疫组化

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肉鸡骨髓细胞瘤病的PCR诊断和病理学研究 被引量：3

11

作者 王金玲 赵振华 +1 位作者 杨玉莹 张二芹 《中国家禽》 北大核心 2004年第19期10-11,14,共3页

对曾感染ALV-J的某肉种鸡场的5只肉鸡进行了PCR检测和病理学研究。结果:5只鸡中有3例PCR呈阳性,5只鸡的骨髓、肝、脾、肾、肺、十二指肠固有膜等组织中均有不同数量的局灶性或单个散在的髓细胞样瘤细胞,瘤细胞胞浆内含有大量圆球形嗜酸... 对曾感染ALV-J的某肉种鸡场的5只肉鸡进行了PCR检测和病理学研究。结果:5只鸡中有3例PCR呈阳性,5只鸡的骨髓、肝、脾、肾、肺、十二指肠固有膜等组织中均有不同数量的局灶性或单个散在的髓细胞样瘤细胞,瘤细胞胞浆内含有大量圆球形嗜酸性颗粒,表明该鸡场仍有骨髓细胞瘤病的存在。其中2只鸡还同时有增生性肉芽肿,提示有大肠杆菌的混合感染。 展开更多

关键词 病理学研究 瘤细胞 pcr诊断 胞浆 局灶性 增生性 骨髓细胞瘤病 肉鸡 鸡场 ALV-j

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J亚群白血病病理学观察及抗原定位 被引量：4

12

作者 成子强 赵振华 +2 位作者 张利 张二芹 高娃 《动物医学进展》 CSCD 2005年第2期83-86,共4页

通过病理组织学和免疫组织化学技 术对1日龄感染鸡定期进行病理组织学观察 及gp85病毒糖蛋白检测,确定病理变化和J 亚群白血病的组织学嗜性及二者的关系。结 果在3周龄时出现第1只发病鸡,以后所有 鸡发病且病变随着日龄的增加而加重,主... 通过病理组织学和免疫组织化学技 术对1日龄感染鸡定期进行病理组织学观察 及gp85病毒糖蛋白检测,确定病理变化和J 亚群白血病的组织学嗜性及二者的关系。结 果在3周龄时出现第1只发病鸡,以后所有 鸡发病且病变随着日龄的增加而加重,主要 在骨髓、肝脏、脾脏、肾脏、卵巢、心肌等组织 中出现瘤细胞增生,并有炎性反应;免疫组在 3周龄时,肝脏、心脏、肺脏、小肠、肾脏、卵巢、 骨骼肌开始出现阳性反应,抗原主要在胞浆 中出现,呈深蓝色颗粒。在10周龄～14周龄 时,骨髓呈中度的阳性反应,而其它组织的阳 性信号出现的程度未见大的变化;在23周龄 时,肝内肿瘤呈较强阳性反应,信号主要集中 在细胞核;整个实验过程中,法氏囊、脑始终 呈阴性反应。研究发现,骨髓及肿瘤的抗原 性较强,并且肿瘤的抗原性要强于骨髓;另外 还发现,在阳性反应强的组织中,病变较明 显,肿瘤细胞增生明显,即阳性反应的组织器 官易形成肿瘤转移灶。 展开更多

关键词 禽白血病病毒j亚群 病理学观察 免疫组化 抗原定位

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鸡J亚群禽白血病病毒与七种常见病毒混合感染的调查 被引量：3

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作者 王林山 尹燕博 +4 位作者 徐守振 郭妍妍 吴珊珊 胡永新 张本清 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第11期111-116,共6页

应用PCR方法对2009年6月到2009年9月来自不同地区、不同品种、不同日龄的45个疑似感染J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的病鸡病料进行检测,同时对ALV-J与新城疫病毒(NDV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、传染性法氏囊病病毒(IBDV)、H9N2亚型禽流... 应用PCR方法对2009年6月到2009年9月来自不同地区、不同品种、不同日龄的45个疑似感染J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的病鸡病料进行检测,同时对ALV-J与新城疫病毒(NDV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、传染性法氏囊病病毒(IBDV)、H9N2亚型禽流感病毒(H9N2 AIV)、包涵体肝炎病毒(IB-HV)、鸡传染性贫血病毒(CIAV)和呼肠病毒(REOV)等病毒的混合感染情况进行了调查。结果表明,采用ALV-J的特异性引物H5/H7,在45份送检病料中,有3份检出ALV-J,阳性率为6.67%。绝大多数病例检测出内源性禽白血病病毒,部分病例检测有其他7种病毒中的一种或几种。混合感染病例中以IBHV和IBV混合感染的比率较高,其中ALV-J与H9N2亚型AIV混合感染多见。 展开更多

关键词 j亚群禽白血病病毒 pcr 混合感染 调查

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黄芪提取液对ALV-J在DF-1细胞内转录的影响 被引量：1

14

作者 林汉卿 温贵兰 +3 位作者 张喜懿 汪德生 龚新勇 程振涛 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第9期22-26,共5页

J亚群禽白血病病毒(ALV-J)是一种严重危害养禽业的肿瘤疾病之一,因目前尚无可供广泛使用的有效疫苗和特效药,防控主要依靠种群净化。本试验以ALV-J原型毒株的gp37基因序列为参照,设计荧光引物,成功建立了特异性较强的ALV-J荧光定量PCR... J亚群禽白血病病毒(ALV-J)是一种严重危害养禽业的肿瘤疾病之一,因目前尚无可供广泛使用的有效疫苗和特效药,防控主要依靠种群净化。本试验以ALV-J原型毒株的gp37基因序列为参照,设计荧光引物,成功建立了特异性较强的ALV-J荧光定量PCR检测方法。随后,将ALV-J病毒液与黄芪提取液先后或同时作用于DF-1细胞,培养72 h后,提取细胞总RNA,用建立的荧光定量PCR方法检测病毒对照组与直接灭活组、预防组、治疗组之间gp37基因表达量的差异,以此探索黄芪对gp37基因转录的影响。结果显示,病毒对照组与直接灭活组、预防组、治疗组的gp37基因表达量均有显著差异(P<0.05),其中预防组的gp37基因表达量与病毒对照组差异最大,表明黄芪能明显下调gp37基因的表达。因此,黄芪可能对J亚型禽白血病的防治有一定作用。 展开更多

关键词 j亚群禽白血病病毒 黄芪提取液 荧光定量pcr DF-1细胞

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安徽省禽白血病感染的血清学调查及gp85基因的扩增 被引量：13

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作者 刘迪 赵圆圆 +7 位作者 丁亮 辛伟 李郁 魏建忠 孙裴 秦爱建 刘光清 王桂军 《中国动物传染病学报》 CAS 2010年第3期32-37,共6页

随机抽取安徽省3个肉种鸡场种鸡及3个地市农贸市场商品鸡的血清样本和泄殖腔拭子,采用ELISA进行鸡白血病检测,并对J亚群鸡白血病病毒抗体阳性鸡群中病鸡的肝组织、全血及上毒细胞提取DNA进行PCR扩增和基因测序。检测结果表明,3个肉种鸡... 随机抽取安徽省3个肉种鸡场种鸡及3个地市农贸市场商品鸡的血清样本和泄殖腔拭子,采用ELISA进行鸡白血病检测,并对J亚群鸡白血病病毒抗体阳性鸡群中病鸡的肝组织、全血及上毒细胞提取DNA进行PCR扩增和基因测序。检测结果表明,3个肉种鸡场中J亚群鸡白血病抗体阳性检出率分别为:0、73.50%和15.22%;3个农贸市场商品鸡抗体阳性检出率分别为:12.00%、2.22%和9.10%。3个肉种鸡场A、B亚群鸡白血病的抗体阳性率分别为0、17.93%和1.08%,ALV抗原阳性率分别为2.17%、17.93%和15.22%。PCR检测结果表明,从可疑发病鸡的肝组织和全血中均能扩增出ALV-J gp85特异性片段。结果证实安徽省鸡群中有ALV-J感染,并呈不同程度的流行,应引起高度重视。 展开更多

关键词 禽白血病j亚群 血清学调查 ELISA pcr

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