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Isolation and the Full-length Genome Sequencing of Subgroup J Avian Leukosis Virus ZH-08 Isolate Associated with Hemangioma 被引量:1
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作者 ZHANG Xiao-tao SHI Wei-wei LIU Hong-bo ZHANG He-nan LIAO Ming XIN Chao-an CAO Wei-sheng 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第B12期51-56,共6页
A subgroup J avian leukosis virus (AVL-J), designated as ZH-08, was isolated from a breeder flock in Guangdong province with a novel hemangioma case. The identification results of ELISA test, PCR and immunofluoresecen... A subgroup J avian leukosis virus (AVL-J), designated as ZH-08, was isolated from a breeder flock in Guangdong province with a novel hemangioma case. The identification results of ELISA test, PCR and immunofluoresecence assay (IFA) specific for ALV-J were all positive. Based on the public full-length proviral genome sequence of ALV-J prototype strain HPRS-103, three pairs of primers were synthesized. The full-length proviral genome sequence of ZH-08 isolate is 7597 bp, which has a little difference with that of published full-length genome sequences, but its organization corresponds with typical retroviral genome structure; and known oncogenes were not included in its genome. According to the gp85 sequence comparison of ZH-08 isolate with those of the other reference strains in China and abroad, the highest similarity (93.7%) was with the YZ9901 isolate. Phylogenetic analysis, based on the gp85 gene, showed that the ZH-08 isolated here had the closest linkage to the SD07LK1 isolate. This study provides the basis for the biological characterization and pathogenesis research of the ZH-08 isolate. 展开更多
关键词 J亚群禽白血病病毒 全基因组测序 血管 全基因组序列 酶联免疫吸附试验 alv-J 聚合酶链反应 GP85基因
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三黄鸡MDV、ALV和CIAV多重感染的临床发病观察与分析
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作者 陈鑫 刘林敏 +2 位作者 高鑫 韦天超 黄腾 《家禽科学》 2025年第3期27-34,I0007,共9页
现场解剖来自广西某养殖场一批110日龄疑似患肿瘤病的三黄鸡,选取肝脏、心脏、脾脏、小肠、腺胃等剖检病变明显的内脏组织用于病理学观察,并通过PCR检测病鸡样品所含的MDV、ALV、REV和CIAV等当地流行的免疫抑制性病毒特异基因片段。病... 现场解剖来自广西某养殖场一批110日龄疑似患肿瘤病的三黄鸡,选取肝脏、心脏、脾脏、小肠、腺胃等剖检病变明显的内脏组织用于病理学观察,并通过PCR检测病鸡样品所含的MDV、ALV、REV和CIAV等当地流行的免疫抑制性病毒特异基因片段。病鸡肝脏、腺胃和小肠存在大量肿瘤细胞增殖、浸润;肝脏血管周围有多种炎细胞浸润,肝细胞索受压萎缩;脾脏淤血,弥漫性实质细胞凋亡,呈空泡状,并可见大量异嗜性细胞浸润和含铁血黄素沉着;心脏发生心肌炎,心肌纤维坏死,细胞溶解并伴大量炎细胞浸润。个别病鸡检出MDV或CIAV单一感染,而MDV、ALV和CIAV三种病毒共感染的检出率最高,达63.88%,所有样品均未检测出REV。以上结果表明,这批临近上市的三黄鸡群发生临床肿瘤病主要是由MDV、ALV和CIAV共感染所致,尤其是ALV-K亚群感染占比突出。 展开更多
关键词 三黄鸡 马立克病病毒 禽白血病病毒 鸡传染性贫血病病毒 共感染 病理变化
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长非编码RNA lnc-ALVE1-AS1抑制ALV-J在鸡巨噬细胞中增殖 被引量:1
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作者 柴文娴 骆欢 +6 位作者 金松 王姣 罗坚强 洪雅琴 耿拓宇 崔恒宓 胡序明 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第1期18-25,共8页
研究表明,源自内源性反转录病毒的长非编码RNA可能是巨噬细胞抗病毒免疫反应的重要组成部分。鸡内源性反转录病毒衍生的长非编码RNA lnc-ALVE1-AS1与宿主遗传抗性有关,能够激活非免疫细胞抗病毒天然免疫反应。为进一步探讨lnc-ALVE1-AS... 研究表明,源自内源性反转录病毒的长非编码RNA可能是巨噬细胞抗病毒免疫反应的重要组成部分。鸡内源性反转录病毒衍生的长非编码RNA lnc-ALVE1-AS1与宿主遗传抗性有关,能够激活非免疫细胞抗病毒天然免疫反应。为进一步探讨lnc-ALVE1-AS1在鸡巨噬细胞中的抗病毒作用及其机制,本研究通过荧光定量PCR发现lnc-ALVE1-AS1在ALV-J感染鸡巨噬细胞系HD11后24 h显著下调。进一步通过lnc-ALVE1-AS1过表达实验证实,lnc-ALVE1-AS1可以显著抑制ALV-J在HD11细胞中增殖。机制上,lnc-ALVE1-AS1显著上调HD11细胞dsRNA识别受体(TLR3)、Ⅰ型干扰素(IFN-α和IFN-β)和其他抗病毒天然免疫基因(IRF7、MX1、OASL和IFITM3)表达。然而,干扰TLR3或者抑制TLR3信号后lnc-ALVE1-AS1诱导Ⅰ型干扰素(IFN-α和IFN-β)的能力显著减弱。共聚焦定位分析显示在HD11细胞中lnc-ALVE1-AS1可以与TLR3蛋白直接结合。这说明激活TLR3信号可能是lnc-ALVE1-AS1抑制ALV-J在巨噬细胞中增殖的一个重要机制。本研究揭示了lnc-ALVE1-AS1在巨噬细胞中抗病毒功能及其作用机制,为抗病育种研究提供了新的遗传基础。 展开更多
关键词 内源性反转录病毒 lnc-alvE1-AS1 禽白血病病毒 鸡巨噬细胞
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贵州地方品种鸡ALV流行病学调查 被引量:2
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作者 张小波 陈广 +4 位作者 温贵兰 张喜懿 胡璇 刘蔓蔓 孙芸 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第4期132-138,共7页
为了解2019—2021年贵州地方品种鸡AL病毒(Avian leukosis virus,ALV)流行情况。采用DF-1细胞对贵州9个地方品种鸡331份血浆进行ALV的分离;利用ALV p27抗原ELISA检测法对贵州地方品种鸡708份血样、180份蛋清、61份泄殖腔棉拭子进行检测... 为了解2019—2021年贵州地方品种鸡AL病毒(Avian leukosis virus,ALV)流行情况。采用DF-1细胞对贵州9个地方品种鸡331份血浆进行ALV的分离;利用ALV p27抗原ELISA检测法对贵州地方品种鸡708份血样、180份蛋清、61份泄殖腔棉拭子进行检测。结果表明:贵州地方品种鸡331份血浆样品分离出6株ALV,总阳性率1.81%(6/331);2019—2021年采集贵州省不同品种鸡血样708份进行ALV p27抗原ELISA检测,共检测出289份阳性,总阳性率40.81%(289/708);180份蛋清中检测出39份阳性,总阳性率21.7%(39/180)。61份泄殖腔棉拭子中检测出16份阳性,总阳性率26.20%(16/61);说明贵州地方不同品种鸡存在不同程度的ALV感染,本研究为丰富贵州地区品种鸡感染ALV情况资料和贵州地方品种鸡AL的防控奠定基础。 展开更多
关键词 贵州 地方品种鸡 禽白血病病毒 流行病学调查
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利用三代全长转录组测序对禽内源性白血病病毒ALVE3不同插入类型鸡进行血液转录组分析 被引量:2
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作者 王沁园 袁一铭 +5 位作者 郑钢 吴俊锋 陈佳华 杨玉琴 杜玉双 连玲 《中国家禽》 北大核心 2024年第10期21-31,共11页
为进一步探索不同内源性禽白血病病毒3(Avian leukosis virus subgroup E,ALVE3)插入个体间的转录本差异,研究利用PacBio三代测序平台对ALVE3无插入、杂合插入和纯合插入的白来航公鸡血液样本进行全长转录组测序,分别获得27 784、38 460... 为进一步探索不同内源性禽白血病病毒3(Avian leukosis virus subgroup E,ALVE3)插入个体间的转录本差异,研究利用PacBio三代测序平台对ALVE3无插入、杂合插入和纯合插入的白来航公鸡血液样本进行全长转录组测序,分别获得27 784、38 460、44 487条转录本,平均长度分别为2 850 bp、3 078 bp和3 166 bp,辅助二代测序数据对其进行校正和定量,并将所得数据与GRCg6a参考基因组比对,将比对到基因组上的转录本进行差异表达分析及lncRNA预测。结果显示,在有ALVE3插入个体中特异存在的转录本有3 657条,将这些转录本利用BLAST与ALVE3全长序列比对,发现转录本Novelgene1474_novel01与ALVE3互补链对应序列高度同源,长度为5 575 bp,说明ALVE3互补链能够产生转录本,对其翻译潜能进行预测后,推测该转录本为lncRNA。此外对不同ALVE3插入情况个体间的差异表达基因进行富集分析,在GO/KEGG中富集到多条免疫相关通路,说明ALVE3的插入可能对机体内免疫相关基因的表达有影响。研究表明,检测到ALVE3反义链可转录产生一段长为5 575 bp的lncRNA,该转录本在介导先天免疫通路中可能发挥作用。 展开更多
关键词 内源性禽白血病病毒 全长转录组测序
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ALVE的筛查整合及其对坝上长尾鸡生产性能的影响
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作者 高启萌 董娇娇 +4 位作者 王涛 郭艳丽 冯凯迪 王茂森 李兰会 《饲料研究》 CAS 北大核心 2024年第12期71-76,共6页
试验旨在研究禽内源性白血病毒(ALVE)在坝上长尾鸡中的分布及其对坝上长尾鸡生产性能的影响。利用分子进化遗传分析(MEGA)的邻位相连法构建禽白血病病毒(ALV)的系统进化树,最大似然法计算序列遗传距离。利用聚合酶链式反应(PCR)检测坝... 试验旨在研究禽内源性白血病毒(ALVE)在坝上长尾鸡中的分布及其对坝上长尾鸡生产性能的影响。利用分子进化遗传分析(MEGA)的邻位相连法构建禽白血病病毒(ALV)的系统进化树,最大似然法计算序列遗传距离。利用聚合酶链式反应(PCR)检测坝上长尾鸡中ALVE的整合,对ALVE-6和ALVE-B5整合与坝上长尾鸡产蛋、体重的关系进行双因素方差分析。配对卡方检验分析ALVE-6整合与ALV-p27抗原阳性的关联。结果发现:24条白血病病毒基因组分化为ALVE、禽外源性白血病病毒K亚群(ALVK)和ALVE与ALVK重组(ALVK+E/K)、禽外源性白血病病毒A亚群(ALVA)和ALVE与ALVA重组(ALVA+E/A)三大分支。病毒基因组的env区分化系数最高为0.641,3′UTR区分化系数最低为0.050,相对保守。4种ALVE在坝上长尾鸡基因组中有整合,ALVE-6的整合率最高,为87.63%。与ALVE-6阴性相比,ALVE-6阳性坝上长尾鸡的体重显著提高(P<0.05)。ALVE-6整合的PCR检测结果与ALV-p27抗原ELISA检测结果相互独立。研究表明,坝上长尾鸡具有较高的ALVE-6整合率,ALVE-6整合对坝上长尾鸡的生产性能有提升作用,且ALVE-6的整合不影响ALV-p27抗原检测结果,该研究结果为ALVE在选育生产性能优良的坝上长尾鸡中的应用提供了支持。 展开更多
关键词 禽内源性白血病病毒 坝上长尾鸡 alvE-6 生产性能
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信阳地区散养土鸡禽白血病病毒和马立克病病毒混合感染的分子生物学诊断
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作者 李迎晓 尹磊 +4 位作者 赵瑜 董建国 何书海 曲哲会 焦凤超 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第2期844-854,共11页
[目的]了解信阳地区散养土鸡群中禽白血病病毒(Avian leukosis virus, ALV)与马立克病病毒(Marek’s disease virus, MDV)混合感染及其遗传进化情况。[方法]对送检的疑似ALV与MDV混合感染的病鸡进行病理解剖,使用特异性引物进行PCR扩增... [目的]了解信阳地区散养土鸡群中禽白血病病毒(Avian leukosis virus, ALV)与马立克病病毒(Marek’s disease virus, MDV)混合感染及其遗传进化情况。[方法]对送检的疑似ALV与MDV混合感染的病鸡进行病理解剖,使用特异性引物进行PCR扩增,并对J亚群ALV(ALV-J)gp85基因与MDV meq基因进行扩增测序,使用MegAlign软件进行核苷酸、氨基酸序列相似性比对以及氨基酸变异位点分析。利用Mega 11.0软件构建gp85、meq氨基酸序列系统进化树。[结果]送检发病鸡腺胃、脾脏肿大,肝脏出现弥漫性肿大并伴有灰白色结节。ALV-J gp85与MDV 132-bpr基因PCR扩增结果均为阳性,分别获得545、317 bp目的条带。测序比对结果显示,扩增序列分别与ALV-J分离株GX12NN04 gp85基因(登录号:KT598488)和MDV-1型分离株YLO40920 meq基因(登录号:DQ174459)高度相似,相似性分别为94.6%和99.9%,初步确定分离株为ALV-J和MDV,并分别命名为HN23XY01-ALV、HN23XY01-MDV。核苷酸序列分析结果显示,HN23XY01-ALV gp85基因与13株ALV-J参考毒株核苷酸序列相似性为92.1%~94.6%;HN23XY01-MDV meq基因与14株MDV参考毒株的核苷酸序列相似性为99.3%~99.9%。氨基酸序列分析结果显示,HN23XY01-ALV gp85与13株ALV-J参考毒株氨基酸序列相似性为87.4%~91.4%,HN23XY01-MDV与14株MDV参考毒株的氨基酸序列相似性为97.9%~99.7%。系统进化树结果显示,HN23XY01-ALV与ALV-J亲缘关系较近,处于同一进化分支;HN23XY01-MDV与广西分离株GXY2、YLO40920、GX20NN2和河南分离株HNSC105处于同一个分支,与疫苗株CVI988、814和CU-2亲缘关系较远。氨基酸变异位点分析结果显示,HN23XY01-ALV存在D(E)65Y、Q(K/R)75L、A(T)76S、R(T)119K、T(M/A)219K氨基酸位点突变;HN23XY01-MDV存在K77E、D80Y、T139A、P176R和P217A氨基酸位点突变,且含有疫苗株所缺失的第193位脯氨酸,与MDV-1型强毒株的特征相符合。[结论]本研究从信阳地区散养土鸡群中检测到ALV-J与MDV混合感染,结果为当地土鸡ALV-J与MDV协同致病机制研究以及混合感染的疫情防控提供重要参考。 展开更多
关键词 禽白血病病毒(alv) 马立克病病毒(MDV) GP85基因 MEQ基因 混合感染
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用ALV-Jgp85单克隆抗体证明蛋鸡存在J亚群禽白血病 被引量:53
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作者 徐镔蕊 董卫星 +4 位作者 余春明 冯小宇 李宁 Lucy F.Lee Maoxiang Li 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期269-271,共3页
采用免疫组化法,对病理学初步诊断为蛋用型鸡 J亚群白血病的自然发病鸡的肿瘤、骨髓、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、心脏、胰脏、输卵管、卵巢、腺胃、骨骼肌、大脑、坐骨神经,用特异性抗 J亚群禽白血病病毒(ALV J)囊膜糖蛋白gp85的单克隆... 采用免疫组化法,对病理学初步诊断为蛋用型鸡 J亚群白血病的自然发病鸡的肿瘤、骨髓、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、心脏、胰脏、输卵管、卵巢、腺胃、骨骼肌、大脑、坐骨神经,用特异性抗 J亚群禽白血病病毒(ALV J)囊膜糖蛋白gp85的单克隆抗体进行检测,待检的组织切片中均检出阳性抗原,免疫组化的研究结果与病理学诊断结果相一致。在国内外首次发现并报道蛋用型鸡 J亚群禽白血病的自然病例。 展开更多
关键词 单克隆抗体 诊断 肿瘤 首次发现 膜糖蛋白 检出 免疫组化法 J亚群禽白血病 alv-J 蛋用型
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我国部分地区蛋鸡群ALV-J及与REV、MDV、CAV混合感染检测 被引量:58
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作者 秦立廷 高玉龙 +7 位作者 潘伟 邓小芸 孙芬芬 李凯 祁小乐 高宏雷 刘超男 王笑梅 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期90-93,共4页
为了解J亚群禽白血病病毒(ALV-J)及其与禽网状内皮细胞增生症病毒(REV)、马立克氏病病毒(MDV)和鸡传染性贫血病病毒(CAV)的混合感染现象,本研究从宁夏、湖北、广东、山东、辽宁、吉林、黑龙江7个省的39个蛋鸡群收集临床表现和剖检病理... 为了解J亚群禽白血病病毒(ALV-J)及其与禽网状内皮细胞增生症病毒(REV)、马立克氏病病毒(MDV)和鸡传染性贫血病病毒(CAV)的混合感染现象,本研究从宁夏、湖北、广东、山东、辽宁、吉林、黑龙江7个省的39个蛋鸡群收集临床表现和剖检病理变化疑似禽白血病的病料样品184份,采用PCR、病毒分离和IFA检测样品中ALV-J、REV、MDV和CAV。结果表明,7个省蛋鸡场均存在ALV-J感染,病料样品阳性率为60.9%,检测鸡群阳性率为82.1%,与REV、MDV、CAV的混合感染率分别为13.6%、24.5%、22.8%,其中存在较为严重的双重感染(29.0%)和3重感染(18.8%),甚至4重感染(1.7%)。研究结果表明,我国蛋鸡群中普遍存在ALV-J感染,而且与REV、MDV、CAV混合感染严重;提示ALV-J已经可以引起蛋鸡群发病,在临床诊断和致病性研究中,应考虑到多重感染的影响。 展开更多
关键词 J亚群禽白血病病毒 网状内皮细胞增生病病毒 马立克氏病病毒 鸡传染性贫血病病毒 混合感染
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不同品种禽类ALV和REV感染情况调查 被引量:11
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作者 彭昊 吴元俊 +5 位作者 秦丽莉 石梦霞 毕玉彧 言天久 宋丽丽 韦平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1989-1993,共5页
为了解中国地方特有鸡种及其他禽类中ALV、REV的自然感染状态,通过采集6种特有的家养禽类(包括六画山鸡、大麻鸭、小麻鸭、右江鹅、凌云乌鸡、隆林雪花鸡)的血清及肛拭子各593份,利用禽白血病病毒P27抗原检测试剂盒、禽白血病病毒A... 为了解中国地方特有鸡种及其他禽类中ALV、REV的自然感染状态,通过采集6种特有的家养禽类(包括六画山鸡、大麻鸭、小麻鸭、右江鹅、凌云乌鸡、隆林雪花鸡)的血清及肛拭子各593份,利用禽白血病病毒P27抗原检测试剂盒、禽白血病病毒A/B亚群和J亚群抗体检测试剂盒、禽网状内皮组织增生症病毒抗体检测试剂盒分别进行检测。结果发现,不同品种禽类的P27抗原的检出率差异较大,属于水禽的鸭、鹅均未检出,而六画山鸡和两个地方品种鸡呈现15.4%~43.2%的阳性率;与P27抗原检出情况类似,鸭、鹅禽白血病A/B亚型、J亚型的抗体水平均相对较低,而各个地方品种的鸡群则阳性率相对较高(7.7%~71.6%)。调查还显示,一些种群同时存在着AI,V的P27抗原和抗体以及J亚型与A/B的多重感染,一些种群同时存在着ALV与REV共感染的情况,特别是雪花鸡群里甚至存在P27抗原、ALV-A/B抗体和REV抗体同时呈阳性的情况(9.47%)。通过此次流行病学调查,首次较为详尽地报道了中国地方特有品种鸡及家养非鸡禽类的ALV几种亚型、REV自然感染状态特别是混合感染情况,证实中国即使是一些纯地方品系的家禽也存在不同程度的ALV、REV感染。结果将有助于进一步明确禽白血病防控工作的重要性及紧迫性,为下一步的净化工作提供参考。 展开更多
关键词 禽类 禽白血病病毒 禽网状内皮细胞增生症病毒 感染 调查
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禽白血病病毒J亚群(ALV-J)免疫抑制特性研究 被引量:10
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作者 张利 刘青 +3 位作者 王晓伟 王峰 陈洪博 成子强 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1198-1202,共5页
本研究人工接种1日龄及7日龄SPF雏鸡禽白血病病毒J亚群(ALV-J),模拟先天感染及早期感染,检测ALV-J不同感染时间对机体的影响。对感染鸡体质量、免疫器官质量、组织病理学、血细胞、CD4+及CD8+T淋巴细胞进行了检测。结果发现,ALV-J对免... 本研究人工接种1日龄及7日龄SPF雏鸡禽白血病病毒J亚群(ALV-J),模拟先天感染及早期感染,检测ALV-J不同感染时间对机体的影响。对感染鸡体质量、免疫器官质量、组织病理学、血细胞、CD4+及CD8+T淋巴细胞进行了检测。结果发现,ALV-J对免疫器官抑制显著,尤其是中枢免疫器官,1日龄感染组的抑制程度显著高于7日龄感染组。免疫器官的抑制是产生体质量抑制的根源。病理学观察发现,1日龄感染组中枢免疫器官淋巴细胞流失严重,间质结缔组织明显增生;而7日龄感染组在3周前表现为免疫细胞增殖,在3周以后淋巴细胞逐渐坏死流失,其他器官主要表现炎性浸润及出血,未见肿瘤增生灶。血细胞检测发现,ALV-J感染组粒细胞、淋巴细胞和红细胞均有下降,但对粒细胞的影响更加明显,1日龄感染鸡更为严重。对胸腺和脾脏CD4+及CD8+T淋巴细胞检测发现,CD4+细胞数量明显下降,而CD8+细胞数量明显升高,说明机体的免疫抑制和这两种细胞的变化高度相关。无论是1日龄还7日龄感染,均在4周龄时达到免疫抑制最低值,因此可以确定ALV-J感染在体内潜伏期约为3~4周的时间。ALV-J造成机体免疫力极其低下,为肿瘤的形成及混合感染创造了条件。 展开更多
关键词 禽白血病病毒J亚群 免疫抑制 免疫细胞
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应用组织芯片免疫组化法检测ALV-J 被引量:8
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作者 张玲娟 刘杰 +3 位作者 成子强 王桂花 刁秀国 朱国 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期427-430,共4页
禽白血病J亚群(ALV-J)是英国的Payne和他的同事们在20世纪90年代初从肉鸡中分离出来的新亚群,主要引起肉鸡的骨髓瘤白血病。自1999年,我国一些肉用型种鸡场陆续发生了禽白血病J亚群。并且近几年来,ALV-J已从最初只引起肉种鸡发病开始向... 禽白血病J亚群(ALV-J)是英国的Payne和他的同事们在20世纪90年代初从肉鸡中分离出来的新亚群,主要引起肉鸡的骨髓瘤白血病。自1999年,我国一些肉用型种鸡场陆续发生了禽白血病J亚群。并且近几年来,ALV-J已从最初只引起肉种鸡发病开始向蛋鸡及中国地方种鸡蔓延。组织芯片技术是一种新型特殊的生物芯片技术,它能明显提高工作效率,减少实验误差。本研究将组织芯片技术和免疫组化染色结合起来,用特异性抗ALV-J囊膜蛋白gp85的单克隆抗体来检测发病鸡只的各组织器官的组织切片。在肝脏、脾脏、肾脏、卵巢、腺胃、骨髓、髓细胞瘤组织均检出病毒阳性抗原。结果表明组织芯片技术和免疫组化染色相结合为临床诊断ALV-J提供了一个高通量、敏感的检测方法。 展开更多
关键词 组织芯片 免疫组化 禽白血病J亚群(alv-J)
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腺病毒载体介导编辑chNHE1基因对J亚群禽白血病病毒抗性研究
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作者 王震 陈运通 +5 位作者 魏天悦 陈洪岩 王旭光 高玉龙 夏长友 孟庆文 《中国家禽》 北大核心 2025年第2期27-33,共7页
鸡Na^(+)/H^(+)离子交换蛋白-1(chNHE1)是J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的细胞受体,是ALV-J感染的细胞靶点。为了探索鸡抗禽白血病的育种目标,试验构建了定点编辑chNHE1基因的CRISPR/Cas9腺病毒系统,并对编辑后细胞抗ALV-J感染能力进行评价... 鸡Na^(+)/H^(+)离子交换蛋白-1(chNHE1)是J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的细胞受体,是ALV-J感染的细胞靶点。为了探索鸡抗禽白血病的育种目标,试验构建了定点编辑chNHE1基因的CRISPR/Cas9腺病毒系统,并对编辑后细胞抗ALV-J感染能力进行评价。结果显示:使用CRISPR/Cas9腺病毒载体介导的ssODNs同源重组方案可以在chNHE1中引入突变,其中36%单克隆细胞株存在W38缺失;T37缺失的细胞对ALV-J感染具备极显著的抗性;W38缺失的细胞对ALV-J感染具有完全抗性,同时具有E35A替换、P36缺失、T37缺失的细胞对ALV-J感染也具有完全抗性。研究表明,CRISPR/Cas9腺病毒载体可以有效地编辑鸡DF-1细胞,W38缺失或E35A替换P36、T37缺失都可以使DF-1对ALV-J感染具有抗性,该方案为培育抗ALV-J感染的基因编辑鸡提供技术储备。 展开更多
关键词 J亚群禽白血病病毒 鸡Na^(+)/H^(+)交换蛋白-1 腺病毒载体 CRISPR/Cas9
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从芦花鸡分离的J亚群ALV病毒及其gp85基因演化 被引量:7
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作者 秦卓明 徐怀英 +5 位作者 马秀丽 黄兵 李玉峰 李福伟 于可响 崔治中 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第5期1180-1185,共6页
采用RT-PCR方法直接从芦花鸡肿瘤中进行禽白血病病毒(Avian leucosis virus,ALV)的核酸扩增,经测序证实为ALV。将上述病料接种DF1细胞(C/E)进行盲传,并对其感染细胞上清进行ALV P27抗原检测,结果为阳性,证实获得了一株病毒,命名为SD... 采用RT-PCR方法直接从芦花鸡肿瘤中进行禽白血病病毒(Avian leucosis virus,ALV)的核酸扩增,经测序证实为ALV。将上述病料接种DF1细胞(C/E)进行盲传,并对其感染细胞上清进行ALV P27抗原检测,结果为阳性,证实获得了一株病毒,命名为SDJN2012。用PCR方法扩增其囊膜蛋白gp85基因并测序,与GenBank中的ALV参考毒株进行核苷酸或氨基酸同源性比较。结果表明:SDJN2012与山东较早发现的J亚群ALV代表株SD0001的核苷酸(氨基酸)同源性最高,达93.4%(92.6%),与J亚群不同年代的代表株同源性为88.6%~93.3%(88.2%~90.6%),而与A,C,D,E亚群ALV毒株的同源性仅为19.7%~32.2%(10.2%~32.2%),进一步确证分离到的病毒为J亚群ALV。对种蛋的跟踪监测证实:ALV蛋清P27抗原阳性率为37.6%,而血清学监测则呈现多样性的变化:鸡群发病前J亚群ALV抗体检测为阴性,发病后阳性率仅为9.35%,而A/B亚群阳性率则由发病前的9.8%,攀升到发病后的75.4%,彰显出ALV病原学、血清学和分子流行病学的复杂性。 展开更多
关键词 禽白血病病毒 GP85基因 J亚群
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IMC_(10200)株ALV-J实验诱发禽骨髓性白血病的研究 被引量:7
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作者 顾玉芳 杨玉莹 +1 位作者 赵振华 王金铃 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期278-281,共4页
对分离自肉种鸡群亚临床感染的J亚群禽白血病病毒IMC10 2 0 0 株进行了实验感染诱发禽骨髓性白血病的病理学研究。IMC10 2 0 0 株J亚群禽白血病病毒尿囊腔接种 11日龄肉鸡胚和SPF蛋鸡胚 ,孵出后跟踪观察。 9周龄时随机抽检感染鸡 ,感染... 对分离自肉种鸡群亚临床感染的J亚群禽白血病病毒IMC10 2 0 0 株进行了实验感染诱发禽骨髓性白血病的病理学研究。IMC10 2 0 0 株J亚群禽白血病病毒尿囊腔接种 11日龄肉鸡胚和SPF蛋鸡胚 ,孵出后跟踪观察。 9周龄时随机抽检感染鸡 ,感染肉鸡特异引物PCR检测全部为阳性 ;组织病理学观察感染鸡无明显病变。至 2 1周龄时感染肉鸡出现第一例典型骨髓性白血病病例 ;感染SPF蛋鸡未见明显J亚群禽白血病相关病变。 展开更多
关键词 J亚群禽白血病病毒 IMC10200株 实验性 骨髓性白血病
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禽白血病病毒J亚群(ALV-J)基因表达与抗原定位的研究 被引量:2
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作者 成子强 刘思当 +1 位作者 张利 赵振华 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期324-328,共5页
本研究通过原位杂交(ISH)和免疫组织化学(IHC)技术检测了组织中ALV-J病毒RNA的表达及定位。原位杂交结果显示:在攻毒后3周时,所检测到的组织大部分已感染病毒;病毒对肝脏、心脏、肾脏的实质细胞、骨髓髓系细胞和卵巢基质中的间质细胞、... 本研究通过原位杂交(ISH)和免疫组织化学(IHC)技术检测了组织中ALV-J病毒RNA的表达及定位。原位杂交结果显示:在攻毒后3周时,所检测到的组织大部分已感染病毒;病毒对肝脏、心脏、肾脏的实质细胞、骨髓髓系细胞和卵巢基质中的间质细胞、脾脏红髓内的单核-巨噬细胞有较高的嗜性,在核膜及胞浆内显示出蓝紫色颗粒状的特异性信号,而在法氏囊、胸腺、脑和坐骨神经中检测不到病毒RNA及病毒基因的表达。免疫组化结果与原位杂交相似,在核膜及胞浆内可见蓝紫色阳性信号,瘤组织的信号较强,显示了较强的抗原性。由骨髓和其他组织的结果可推测ALV-J诱导肿瘤可能和病毒基因的插入位点有直接关系,而和病毒在组织内的数量没有直接关系。 展开更多
关键词 禽白血病病毒 J亚群 基因表达 抗原定位 肿瘤 发病机理
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6种不同J亚群禽白血病病毒检测试剂盒的比较
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作者 赵方钰 崔慧珍 +4 位作者 王一新 常爽 任志浩 崔文平 赵鹏 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第4期62-69,共8页
为了比较6种不同J亚群禽白血病病毒(ALV-J)检测试剂盒的检测结果,以更好地实施禽白血病净化和鸡苗洁净度评估。本试验首先将ALV-J参考株以卵黄囊接种感染无特定病原体(SPF)鸡胚构建雏鸡携带ALV-J模型,对出壳雏鸡逐一采集胎粪和抗凝血,... 为了比较6种不同J亚群禽白血病病毒(ALV-J)检测试剂盒的检测结果,以更好地实施禽白血病净化和鸡苗洁净度评估。本试验首先将ALV-J参考株以卵黄囊接种感染无特定病原体(SPF)鸡胚构建雏鸡携带ALV-J模型,对出壳雏鸡逐一采集胎粪和抗凝血,随后分别将胎粪滤液和血浆接种鸡胚成纤维传代(DF-1)细胞进行病毒培养,维持7 d时收取细胞上清,以A、B、C三家公司的ALV p27抗原酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒以及商品化的磁微粒化学发光检测试剂盒、胶体金试纸条和实时荧光定量PCR检测试剂盒分别对胎粪、不同稀释度胎粪样品、胎粪病毒分离细胞上清和血浆病毒分离细胞上清进行检测。结果显示,6种不同试剂盒对胎粪、胎粪病毒分离细胞上清和血浆病毒分离细胞上清的检测结果判定总体一致,其中以磁微粒化学发光检测试剂盒读数判定最为直观,其阳性样品与阴性样品的读值区分明显、易于判断。对不同稀释度胎粪样品的检测结果显示,以A公司ALV p27抗原ELISA试剂盒、磁微粒化学发光检测试剂盒和实时荧光定量PCR检测试剂盒相对灵敏,可检出低滴度病原。结果表明,不同检测方法对ALV-J检测的整体判定差异不显著,但针对低滴度样品检测时不同方法的检出率有差异,需要根据情况选择方法。 展开更多
关键词 J亚群禽白血病病毒(alv-J) P27抗原 酶联免疫吸附测定(ELISA) 磁微粒化学发光检测试剂盒 胶体金试纸条 实时荧光定量PCR
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蛋种鸡ALV-J与REV共感染病变新特点 被引量:3
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作者 王玥 姜艳萍 +4 位作者 于琳琳 王峰 陈洪博 王晓伟 成子强 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1643-1648,共6页
2009年8月,山西榆次某鸡场蛋种鸡群产蛋量急剧下降,部分鸡产蛋停止。病理组织学观察发现,病鸡肝脏、肾脏、肺脏、心肌等组织中出现小灶状淋巴细胞瘤,肿瘤细胞为成熟的淋巴细胞;聚合酶链式反应(PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接免疫... 2009年8月,山西榆次某鸡场蛋种鸡群产蛋量急剧下降,部分鸡产蛋停止。病理组织学观察发现,病鸡肝脏、肾脏、肺脏、心肌等组织中出现小灶状淋巴细胞瘤,肿瘤细胞为成熟的淋巴细胞;聚合酶链式反应(PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接免疫荧光(IFA)检测显示,被检鸡ALV-J感染率为8/8,而且7/8为病毒血症,与REV共感染率为2/8,未出现REV单感染;从发病情况看,淋巴细胞瘤均出现于共感染病例,特别是ALV-J病毒血症的共感染鸡病变最为严重,但未见ALV-J的特征性髓细胞瘤。囊膜蛋白氨基酸同源性分析显示,ALV-J毒株与英国HPRS-103原型株同源性最高(96.9%以上),共感染的REV毒株与suv-env株同源性最高(93.8%)。本病例揭示,先天传播的ALV-J引起的病毒血症状态可能为REV的致瘤创造了环境,使临床罕见的REV淋巴瘤早于髓细胞瘤出现,因此,严格种鸡群的ALV-J净化是防控此病的重中之重。对于ALV-J与REV协同的机制还需进一步研究。 展开更多
关键词 J亚群禽白血病病毒 网状内皮组织增生症病病毒 共感染 蛋种鸡 病毒血症
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ALV-J诱发鸡成红细胞白血病的临床病例分析 被引量:2
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作者 姜艳萍 王玥 +5 位作者 于琳琳 蔡黎明 王真真 徐晴晴 王桂花 成子强 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1317-1323,共7页
2010—2011年检测3批病例,分别来自泰安新泰的110日龄麻鸡、济宁泗水的90日龄麻鸡和济南20日龄蛋雏鸡。病鸡均表现消瘦、精神萎靡、嗜睡、鸡冠稍苍白或发绀等,死亡率分别为20%、12%和18%。剖检,3批病鸡均可见肝脏、脾脏及肾脏严重肿大,... 2010—2011年检测3批病例,分别来自泰安新泰的110日龄麻鸡、济宁泗水的90日龄麻鸡和济南20日龄蛋雏鸡。病鸡均表现消瘦、精神萎靡、嗜睡、鸡冠稍苍白或发绀等,死亡率分别为20%、12%和18%。剖检,3批病鸡均可见肝脏、脾脏及肾脏严重肿大,胸腺、肌肉、腺胃等组织器官出血。新泰病鸡肝脏和肺脏表面有明显的白色肿瘤结节。血液涂片与骨髓涂片观察发现大量红细胞转变为体积较大,胞质丰富蓝染,胞核大呈圆形、核内有很纤细的染色质、核周围有空泡的成红细胞,以晚幼成红细胞为主;组织学检查发现,在所有组织脏器血管及间质内均可观察到大量聚集的与血涂片中形态相一致的成红细胞,并且可观察到核分裂相,但未见淋巴细胞聚集。通过血液学和组织学观察不仅排除马立克氏病和网状内皮组织增生症,而且排除中毒及代谢性疾病的可能。以肝脏组织DNA为模板,在3批病鸡中利用PCR检测均扩增出J亚群禽白血病病毒(ALV-J)gp85基因924bp的特异性片段,而A亚群禽白血病病毒(ALV-A)、B亚群禽白血病病毒(ALV-B)阴性。免疫组织化学检测结果表明,发病鸡肺脏和脾脏等含血量丰富的组织内发现组织细胞及成红细胞胞质呈ALV-J抗原阳性。根据以上检测结果确定此3批患有成红细胞白血病病鸡均由ALV-J感染引起。ALV-J引起单纯鸡成红细胞白血病在国内为首次发现。ALV-J在我国鸡群中的多潜能致瘤机制需要进一步的研究。 展开更多
关键词 J亚群禽白血病病毒(alv-J) 成红细胞白血病(EB) PCR 免疫组化
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安徽两个鸡场ALV-J分离株gp85基因的克隆及序列分析 被引量:3
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作者 戴银 赵瑞宏 +4 位作者 胡晓苗 侯宏艳 潘孝成 周学利 张丹俊 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第12期38-41,共4页
为研究J-亚群禽白血病病毒(ALV-J)在安徽省鸡群中的遗传变异趋势,对分离到的2株安徽省ALV-J毒株,克隆了其gp85基因序列,并与国内外分离毒株的相应基因序列进行了比较。结果显示,ALVJ gp85基因序列具有高度的易变性,可变氨基酸残基占全... 为研究J-亚群禽白血病病毒(ALV-J)在安徽省鸡群中的遗传变异趋势,对分离到的2株安徽省ALV-J毒株,克隆了其gp85基因序列,并与国内外分离毒株的相应基因序列进行了比较。结果显示,ALVJ gp85基因序列具有高度的易变性,可变氨基酸残基占全长序列的22.8%。其中高变区hr1和hr2具有较多的可变位点,而可变区vr2和vr3相对较为保守。二级结构预测显示ALV-J gp85蛋白含有大量的无规则卷曲结构,尤其是hr2区域。同源性分析表明,毒株AH1103和AH1104的gp85氨基酸序列同源性为95.8%;毒株AH1103与毒株BJ090201J,ev/J的gp85序列同源性最高,毒株AH1104的gp85序列则与国内毒株HuB09JY04的同源性最高。进化分析显示,毒株AH1103和AH1104均与国内毒株NX0101和SD07LK1及美国分离株4817的遗传距离较远。 展开更多
关键词 J-亚群禽白血病病毒 GP85基因 序列分析
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