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ALVE的筛查整合及其对坝上长尾鸡生产性能的影响
1
作者 高启萌 董娇娇 +4 位作者 王涛 郭艳丽 冯凯迪 王茂森 李兰会 《饲料研究》 CAS 北大核心 2024年第12期71-76,共6页
试验旨在研究禽内源性白血病毒(ALVE)在坝上长尾鸡中的分布及其对坝上长尾鸡生产性能的影响。利用分子进化遗传分析(MEGA)的邻位相连法构建禽白血病病毒(ALV)的系统进化树,最大似然法计算序列遗传距离。利用聚合酶链式反应(PCR)检测坝... 试验旨在研究禽内源性白血病毒(ALVE)在坝上长尾鸡中的分布及其对坝上长尾鸡生产性能的影响。利用分子进化遗传分析(MEGA)的邻位相连法构建禽白血病病毒(ALV)的系统进化树,最大似然法计算序列遗传距离。利用聚合酶链式反应(PCR)检测坝上长尾鸡中ALVE的整合,对ALVE-6和ALVE-B5整合与坝上长尾鸡产蛋、体重的关系进行双因素方差分析。配对卡方检验分析ALVE-6整合与ALV-p27抗原阳性的关联。结果发现:24条白血病病毒基因组分化为ALVE、禽外源性白血病病毒K亚群(ALVK)和ALVE与ALVK重组(ALVK+E/K)、禽外源性白血病病毒A亚群(ALVA)和ALVE与ALVA重组(ALVA+E/A)三大分支。病毒基因组的env区分化系数最高为0.641,3′UTR区分化系数最低为0.050,相对保守。4种ALVE在坝上长尾鸡基因组中有整合,ALVE-6的整合率最高,为87.63%。与ALVE-6阴性相比,ALVE-6阳性坝上长尾鸡的体重显著提高(P<0.05)。ALVE-6整合的PCR检测结果与ALV-p27抗原ELISA检测结果相互独立。研究表明,坝上长尾鸡具有较高的ALVE-6整合率,ALVE-6整合对坝上长尾鸡的生产性能有提升作用,且ALVE-6的整合不影响ALV-p27抗原检测结果,该研究结果为ALVE在选育生产性能优良的坝上长尾鸡中的应用提供了支持。 展开更多
关键词 禽内源性白血病病毒 坝上长尾鸡 alvE-6 生产性能
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信阳地区散养土鸡禽白血病病毒和马立克病病毒混合感染的分子生物学诊断
2
作者 李迎晓 尹磊 +4 位作者 赵瑜 董建国 何书海 曲哲会 焦凤超 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第2期844-854,共11页
[目的]了解信阳地区散养土鸡群中禽白血病病毒(Avian leukosis virus, ALV)与马立克病病毒(Marek’s disease virus, MDV)混合感染及其遗传进化情况。[方法]对送检的疑似ALV与MDV混合感染的病鸡进行病理解剖,使用特异性引物进行PCR扩增... [目的]了解信阳地区散养土鸡群中禽白血病病毒(Avian leukosis virus, ALV)与马立克病病毒(Marek’s disease virus, MDV)混合感染及其遗传进化情况。[方法]对送检的疑似ALV与MDV混合感染的病鸡进行病理解剖,使用特异性引物进行PCR扩增,并对J亚群ALV(ALV-J)gp85基因与MDV meq基因进行扩增测序,使用MegAlign软件进行核苷酸、氨基酸序列相似性比对以及氨基酸变异位点分析。利用Mega 11.0软件构建gp85、meq氨基酸序列系统进化树。[结果]送检发病鸡腺胃、脾脏肿大,肝脏出现弥漫性肿大并伴有灰白色结节。ALV-J gp85与MDV 132-bpr基因PCR扩增结果均为阳性,分别获得545、317 bp目的条带。测序比对结果显示,扩增序列分别与ALV-J分离株GX12NN04 gp85基因(登录号:KT598488)和MDV-1型分离株YLO40920 meq基因(登录号:DQ174459)高度相似,相似性分别为94.6%和99.9%,初步确定分离株为ALV-J和MDV,并分别命名为HN23XY01-ALV、HN23XY01-MDV。核苷酸序列分析结果显示,HN23XY01-ALV gp85基因与13株ALV-J参考毒株核苷酸序列相似性为92.1%~94.6%;HN23XY01-MDV meq基因与14株MDV参考毒株的核苷酸序列相似性为99.3%~99.9%。氨基酸序列分析结果显示,HN23XY01-ALV gp85与13株ALV-J参考毒株氨基酸序列相似性为87.4%~91.4%,HN23XY01-MDV与14株MDV参考毒株的氨基酸序列相似性为97.9%~99.7%。系统进化树结果显示,HN23XY01-ALV与ALV-J亲缘关系较近,处于同一进化分支;HN23XY01-MDV与广西分离株GXY2、YLO40920、GX20NN2和河南分离株HNSC105处于同一个分支,与疫苗株CVI988、814和CU-2亲缘关系较远。氨基酸变异位点分析结果显示,HN23XY01-ALV存在D(E)65Y、Q(K/R)75L、A(T)76S、R(T)119K、T(M/A)219K氨基酸位点突变;HN23XY01-MDV存在K77E、D80Y、T139A、P176R和P217A氨基酸位点突变,且含有疫苗株所缺失的第193位脯氨酸,与MDV-1型强毒株的特征相符合。[结论]本研究从信阳地区散养土鸡群中检测到ALV-J与MDV混合感染,结果为当地土鸡ALV-J与MDV协同致病机制研究以及混合感染的疫情防控提供重要参考。 展开更多
关键词 禽白血病病毒(alv) 马立克病病毒(MDV) GP85基因 MEQ基因 混合感染
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禽白血病病毒抗体间接ELISA检测方法的建立与应用
3
作者 苏晓月 吕转平 +2 位作者 沈亚安 赵明明 唐思静 《家畜生态学报》 北大核心 2025年第1期64-69,共6页
为了建立一种禽白血病病毒(ALV)抗体检测方法,利用原核表达禽白血病病毒的p27蛋白建立一种检测ALV抗体的间接ELISA方法。结果显示,p27蛋白以包涵体形式表达,Western blot检测显示p27蛋白具有良好的反应活性,以p27蛋白为包被抗原建立的间... 为了建立一种禽白血病病毒(ALV)抗体检测方法,利用原核表达禽白血病病毒的p27蛋白建立一种检测ALV抗体的间接ELISA方法。结果显示,p27蛋白以包涵体形式表达,Western blot检测显示p27蛋白具有良好的反应活性,以p27蛋白为包被抗原建立的间接ELISA方法检测NDV、IBDV、IBV、AIV-H9、ILTV阳性血清均为阴性,最低抗体检出效价为1︰12800,与进口试剂盒的符合率为94.87%,检测临床血清样品的阳性率为14.02%。结果说明该研究建立的间接ELISA方法特异性强、敏感性高、符合性好,可为ALV的检测和净化等提供一种简单快速的方法。 展开更多
关键词 禽白血病病毒 间接ELISA方法 抗体检测 净化
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用ALV-Jgp85单克隆抗体证明蛋鸡存在J亚群禽白血病 被引量：53
4
作者 徐镔蕊 董卫星 +4 位作者 余春明 冯小宇 李宁 Lucy F.Lee Maoxiang Li 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期269-271,共3页
采用免疫组化法,对病理学初步诊断为蛋用型鸡 J亚群白血病的自然发病鸡的肿瘤、骨髓、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、心脏、胰脏、输卵管、卵巢、腺胃、骨骼肌、大脑、坐骨神经,用特异性抗 J亚群禽白血病病毒(ALV J)囊膜糖蛋白gp85的单克隆... 采用免疫组化法,对病理学初步诊断为蛋用型鸡 J亚群白血病的自然发病鸡的肿瘤、骨髓、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、心脏、胰脏、输卵管、卵巢、腺胃、骨骼肌、大脑、坐骨神经,用特异性抗 J亚群禽白血病病毒(ALV J)囊膜糖蛋白gp85的单克隆抗体进行检测,待检的组织切片中均检出阳性抗原,免疫组化的研究结果与病理学诊断结果相一致。在国内外首次发现并报道蛋用型鸡 J亚群禽白血病的自然病例。 展开更多
关键词 单克隆抗体 诊断 肿瘤 首次发现 膜糖蛋白 检出 免疫组化法 J亚群禽白血病 alv-J 蛋用型
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我国部分地区蛋鸡群ALV-J及与REV、MDV、CAV混合感染检测 被引量：58
5
作者 秦立廷 高玉龙 +7 位作者 潘伟 邓小芸 孙芬芬 李凯 祁小乐 高宏雷 刘超男 王笑梅 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期90-93,共4页
为了解J亚群禽白血病病毒(ALV-J)及其与禽网状内皮细胞增生症病毒(REV)、马立克氏病病毒(MDV)和鸡传染性贫血病病毒(CAV)的混合感染现象,本研究从宁夏、湖北、广东、山东、辽宁、吉林、黑龙江7个省的39个蛋鸡群收集临床表现和剖检病理... 为了解J亚群禽白血病病毒(ALV-J)及其与禽网状内皮细胞增生症病毒(REV)、马立克氏病病毒(MDV)和鸡传染性贫血病病毒(CAV)的混合感染现象,本研究从宁夏、湖北、广东、山东、辽宁、吉林、黑龙江7个省的39个蛋鸡群收集临床表现和剖检病理变化疑似禽白血病的病料样品184份,采用PCR、病毒分离和IFA检测样品中ALV-J、REV、MDV和CAV。结果表明,7个省蛋鸡场均存在ALV-J感染,病料样品阳性率为60.9%,检测鸡群阳性率为82.1%,与REV、MDV、CAV的混合感染率分别为13.6%、24.5%、22.8%,其中存在较为严重的双重感染(29.0%)和3重感染(18.8%),甚至4重感染(1.7%)。研究结果表明,我国蛋鸡群中普遍存在ALV-J感染,而且与REV、MDV、CAV混合感染严重;提示ALV-J已经可以引起蛋鸡群发病,在临床诊断和致病性研究中,应考虑到多重感染的影响。 展开更多
关键词 J亚群禽白血病病毒 网状内皮细胞增生病病毒 马立克氏病病毒 鸡传染性贫血病病毒 混合感染
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禽白血病病毒J亚群(ALV-J)免疫抑制特性研究 被引量：10
6
作者 张利 刘青 +3 位作者 王晓伟 王峰 陈洪博 成子强 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1198-1202,共5页
本研究人工接种1日龄及7日龄SPF雏鸡禽白血病病毒J亚群(ALV-J),模拟先天感染及早期感染,检测ALV-J不同感染时间对机体的影响。对感染鸡体质量、免疫器官质量、组织病理学、血细胞、CD4+及CD8+T淋巴细胞进行了检测。结果发现,ALV-J对免... 本研究人工接种1日龄及7日龄SPF雏鸡禽白血病病毒J亚群(ALV-J),模拟先天感染及早期感染,检测ALV-J不同感染时间对机体的影响。对感染鸡体质量、免疫器官质量、组织病理学、血细胞、CD4+及CD8+T淋巴细胞进行了检测。结果发现,ALV-J对免疫器官抑制显著,尤其是中枢免疫器官,1日龄感染组的抑制程度显著高于7日龄感染组。免疫器官的抑制是产生体质量抑制的根源。病理学观察发现,1日龄感染组中枢免疫器官淋巴细胞流失严重,间质结缔组织明显增生;而7日龄感染组在3周前表现为免疫细胞增殖,在3周以后淋巴细胞逐渐坏死流失,其他器官主要表现炎性浸润及出血,未见肿瘤增生灶。血细胞检测发现,ALV-J感染组粒细胞、淋巴细胞和红细胞均有下降,但对粒细胞的影响更加明显,1日龄感染鸡更为严重。对胸腺和脾脏CD4+及CD8+T淋巴细胞检测发现,CD4+细胞数量明显下降,而CD8+细胞数量明显升高,说明机体的免疫抑制和这两种细胞的变化高度相关。无论是1日龄还7日龄感染,均在4周龄时达到免疫抑制最低值,因此可以确定ALV-J感染在体内潜伏期约为3～4周的时间。ALV-J造成机体免疫力极其低下,为肿瘤的形成及混合感染创造了条件。 展开更多
关键词 禽白血病病毒J亚群 免疫抑制 免疫细胞
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应用组织芯片免疫组化法检测ALV-J 被引量：8
7
作者 张玲娟 刘杰 +3 位作者 成子强 王桂花 刁秀国 朱国 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期427-430,共4页
禽白血病J亚群(ALV-J)是英国的Payne和他的同事们在20世纪90年代初从肉鸡中分离出来的新亚群,主要引起肉鸡的骨髓瘤白血病。自1999年,我国一些肉用型种鸡场陆续发生了禽白血病J亚群。并且近几年来,ALV-J已从最初只引起肉种鸡发病开始向... 禽白血病J亚群(ALV-J)是英国的Payne和他的同事们在20世纪90年代初从肉鸡中分离出来的新亚群,主要引起肉鸡的骨髓瘤白血病。自1999年,我国一些肉用型种鸡场陆续发生了禽白血病J亚群。并且近几年来,ALV-J已从最初只引起肉种鸡发病开始向蛋鸡及中国地方种鸡蔓延。组织芯片技术是一种新型特殊的生物芯片技术,它能明显提高工作效率,减少实验误差。本研究将组织芯片技术和免疫组化染色结合起来,用特异性抗ALV-J囊膜蛋白gp85的单克隆抗体来检测发病鸡只的各组织器官的组织切片。在肝脏、脾脏、肾脏、卵巢、腺胃、骨髓、髓细胞瘤组织均检出病毒阳性抗原。结果表明组织芯片技术和免疫组化染色相结合为临床诊断ALV-J提供了一个高通量、敏感的检测方法。 展开更多
关键词 组织芯片 免疫组化 禽白血病J亚群(alv-J)
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禽白血病病毒J亚群(ALV-J)基因表达与抗原定位的研究 被引量：2
8
作者 成子强 刘思当 +1 位作者 张利 赵振华 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期324-328,共5页
本研究通过原位杂交(ISH)和免疫组织化学(IHC)技术检测了组织中ALV-J病毒RNA的表达及定位。原位杂交结果显示:在攻毒后3周时,所检测到的组织大部分已感染病毒;病毒对肝脏、心脏、肾脏的实质细胞、骨髓髓系细胞和卵巢基质中的间质细胞、... 本研究通过原位杂交(ISH)和免疫组织化学(IHC)技术检测了组织中ALV-J病毒RNA的表达及定位。原位杂交结果显示:在攻毒后3周时,所检测到的组织大部分已感染病毒;病毒对肝脏、心脏、肾脏的实质细胞、骨髓髓系细胞和卵巢基质中的间质细胞、脾脏红髓内的单核-巨噬细胞有较高的嗜性,在核膜及胞浆内显示出蓝紫色颗粒状的特异性信号,而在法氏囊、胸腺、脑和坐骨神经中检测不到病毒RNA及病毒基因的表达。免疫组化结果与原位杂交相似,在核膜及胞浆内可见蓝紫色阳性信号,瘤组织的信号较强,显示了较强的抗原性。由骨髓和其他组织的结果可推测ALV-J诱导肿瘤可能和病毒基因的插入位点有直接关系,而和病毒在组织内的数量没有直接关系。 展开更多
关键词 禽白血病病毒 J亚群 基因表达 抗原定位 肿瘤 发病机理
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EGCG通过NF-κB信号通路抑制感染ALV-J病毒的DF-1细胞凋亡 被引量：2
9
作者 张莹 尹华东 +5 位作者 邬秀宏 杨海滨 钟应富 袁林颖 李中林 徐泽 《四川农业大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期261-266,共6页
【目的】评价表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是否具有抗J亚型禽白血病毒(ALV-J)效应,为AVL-J防治药物的研发提供理论依据。【方法】在感染ALV-J病毒的DF-1细胞中分别添加浓度为0,5,10,20和40μg/mL的EGCG溶液后培养的0,24,48,72和96 h... 【目的】评价表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是否具有抗J亚型禽白血病毒(ALV-J)效应,为AVL-J防治药物的研发提供理论依据。【方法】在感染ALV-J病毒的DF-1细胞中分别添加浓度为0,5,10,20和40μg/mL的EGCG溶液后培养的0,24,48,72和96 h,对其细胞活性、细胞中env基因表达量,禽白血病p27抗原水平,NF-κB活性以及NF-κB p50和p65蛋白表达进行了测定。【结果】EGCG对感染ALV-J病毒后DF-1的保护作用具有剂量效应,10μg/mL效果最好。在ALV-J侵染的DF-1细胞中添加10μg/mL的EGCG溶液96 h后,可显著抑制由于ALV-J病毒导致的NF-κB亚基p50和p65跨膜转移,降低由于ALV-J病毒造成的细胞凋亡。【结论】EGCG通过抑制NF-κB信号的激活来提高DF-1细胞对ALV-J病毒的抵御能力,且具有显著的剂量效应,10μg/mL为最佳添加浓度。 展开更多
关键词 表没食子儿茶素没食子酸酯 J 亚型禽白血病 NF-ΚB 信号途径 DF-1细胞
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6种不同J亚群禽白血病病毒检测试剂盒的比较
10
作者 赵方钰 崔慧珍 +4 位作者 王一新 常爽 任志浩 崔文平 赵鹏 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第4期62-69,共8页
为了比较6种不同J亚群禽白血病病毒(ALV-J)检测试剂盒的检测结果,以更好地实施禽白血病净化和鸡苗洁净度评估。本试验首先将ALV-J参考株以卵黄囊接种感染无特定病原体(SPF)鸡胚构建雏鸡携带ALV-J模型,对出壳雏鸡逐一采集胎粪和抗凝血,... 为了比较6种不同J亚群禽白血病病毒(ALV-J)检测试剂盒的检测结果,以更好地实施禽白血病净化和鸡苗洁净度评估。本试验首先将ALV-J参考株以卵黄囊接种感染无特定病原体(SPF)鸡胚构建雏鸡携带ALV-J模型,对出壳雏鸡逐一采集胎粪和抗凝血,随后分别将胎粪滤液和血浆接种鸡胚成纤维传代(DF-1)细胞进行病毒培养,维持7 d时收取细胞上清,以A、B、C三家公司的ALV p27抗原酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒以及商品化的磁微粒化学发光检测试剂盒、胶体金试纸条和实时荧光定量PCR检测试剂盒分别对胎粪、不同稀释度胎粪样品、胎粪病毒分离细胞上清和血浆病毒分离细胞上清进行检测。结果显示,6种不同试剂盒对胎粪、胎粪病毒分离细胞上清和血浆病毒分离细胞上清的检测结果判定总体一致,其中以磁微粒化学发光检测试剂盒读数判定最为直观,其阳性样品与阴性样品的读值区分明显、易于判断。对不同稀释度胎粪样品的检测结果显示,以A公司ALV p27抗原ELISA试剂盒、磁微粒化学发光检测试剂盒和实时荧光定量PCR检测试剂盒相对灵敏,可检出低滴度病原。结果表明,不同检测方法对ALV-J检测的整体判定差异不显著,但针对低滴度样品检测时不同方法的检出率有差异,需要根据情况选择方法。 展开更多
关键词 J亚群禽白血病病毒(alv-J) P27抗原 酶联免疫吸附测定(ELISA) 磁微粒化学发光检测试剂盒 胶体金试纸条 实时荧光定量PCR
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鸡胚和雏鸡接种ALV-J相关急性纤维肉瘤浸出液的致病性比较 被引量：1
11
作者 李德庆 赵鹏 +2 位作者 王鑫 汪晓飞 崔治中 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期250-255,共6页
为了比较鸡胚接种ALV-J相关急性纤维肉瘤浸出液对胚体及雏鸡的致病性,将含ALV-J相关病毒的肉瘤浸出液分别经5日龄胚卵黄囊、11日龄胚绒毛尿囊膜、1日龄雏鸡腹腔接种,比较不同接种方式对SPF鸡胚及雏鸡的致病性。结果表明,5日龄卵黄囊接... 为了比较鸡胚接种ALV-J相关急性纤维肉瘤浸出液对胚体及雏鸡的致病性,将含ALV-J相关病毒的肉瘤浸出液分别经5日龄胚卵黄囊、11日龄胚绒毛尿囊膜、1日龄雏鸡腹腔接种,比较不同接种方式对SPF鸡胚及雏鸡的致病性。结果表明,5日龄卵黄囊接种的鸡胚在18～22日龄死胚率为14/30,肿瘤发生率为8/14;11日龄绒毛尿囊膜接种的鸡胚在18～22日龄引起鸡胚死亡率为17/30,肿瘤发生率为6/17。对雏鸡的致病性比较表明,绒毛尿囊膜接种的13只出壳雏鸡全部死亡,有11只出现肿瘤。结果提示,绒毛尿囊膜接种的致病性不仅高于卵黄囊接种,也高于1日龄雏鸡接种。绒毛尿囊膜接种不仅肿瘤发生率高,且发生得更早、更快,可作为这种急性纤维肉瘤进一步作人工造病的实验模型。 展开更多
关键词 鸡胚接种 雏鸡 alv-J(J亚群禽白血病病毒) 急性纤维肉瘤
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禽白血病病毒p27蛋白单克隆抗体制备及抗原表位的鉴定
12
作者 陈桂娥 容芳 +3 位作者 苟鑫 孙荣航 李作生 陈瑞爱 《动物医学进展》 北大核心 2025年第1期23-28,共6页
为制备禽白血病病毒(ALV)p27蛋白特异性单克隆抗体,利用原核表达系统表达并纯化ALV p27蛋白,将其作为免疫原免疫注射Balb/c小鼠,用杂交瘤细胞融合和ELISA等筛选出阳性单克隆抗体细胞,对制备的单克隆抗体的抗体亚型、效价及特异性进行鉴... 为制备禽白血病病毒(ALV)p27蛋白特异性单克隆抗体,利用原核表达系统表达并纯化ALV p27蛋白,将其作为免疫原免疫注射Balb/c小鼠,用杂交瘤细胞融合和ELISA等筛选出阳性单克隆抗体细胞,对制备的单克隆抗体的抗体亚型、效价及特异性进行鉴定,将目的蛋白截短成4段,初步鉴定单克隆抗体识别的抗原表位区域。结果表明,共筛选出4株单克隆细胞,其抗体亚类皆为IgG1型,其中3A1抗体效价为1∶64000,3B2为1∶256000,5F1为1∶128000,5G2为1∶8000;4株单克隆抗体识别的抗原表位在1-60 aa之间。研究结果为进一步建立ALV相关免疫学检测方法提供了重要的材料。 展开更多
关键词 禽白血病病毒 P27蛋白 单克隆抗体 抗原表位
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不同接种途径和不同接种日龄对ALV-J感染模式的影响 被引量：1
13
作者 黄小容 刘广芹 +6 位作者 汪子豪 冯敏 秦建如 郝建勇 李育豪 曹伟胜 廖明 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第6期14-16,共3页
为了探讨不同接种途径和日龄对SPF鸡感染J亚群禽白血病病毒(ALV-J)后感染模式的影响,本研究分别经11日龄鸡胚尿囊腔、1日龄口服、点眼滴鼻、腿部肌肉注射、颈部皮下注射、腹腔注射和7日龄腹腔注射途径接种了ALV-J CHN06株,于不同时间点(... 为了探讨不同接种途径和日龄对SPF鸡感染J亚群禽白血病病毒(ALV-J)后感染模式的影响,本研究分别经11日龄鸡胚尿囊腔、1日龄口服、点眼滴鼻、腿部肌肉注射、颈部皮下注射、腹腔注射和7日龄腹腔注射途径接种了ALV-J CHN06株,于不同时间点(第1、2、4、6周),分别对各试验组的病毒血症、抗体及排毒进行了动态检测。结果显示,11日龄鸡胚尿囊腔组100%(15/15)感染模式为V+S+。1日龄口服组和点眼滴鼻组感染模式以V-S-为主。1日龄颈部皮下注射组、腿部肌肉注射组和腹腔注射组在第4、6周的感染模式均以V+S+为主。7日龄腹腔注射组在试验期内仅呈现一过性病毒血症,而且7日龄感染组在第6周的抗体阳性率比1日龄感染组高,差异显著(P<0.05)。本研究结果表明,胚胎感染易导致持续性病毒血症,注射途径比非注射途径更易诱导病毒血症和排毒。随着感染日龄的增加,病毒血症持续时间缩短,排毒时间推后,抗体生成水平升高;防止ALV-J早期感染有利于ALV-J的防控和净化。 展开更多
关键词 J亚群禽白血病病毒 接种途径 接种日龄 感染模式
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黄芪提取液对ALV-J在DF-1细胞内转录的影响 被引量：1
14
作者 林汉卿 温贵兰 +3 位作者 张喜懿 汪德生 龚新勇 程振涛 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第9期22-26,共5页
J亚群禽白血病病毒(ALV-J)是一种严重危害养禽业的肿瘤疾病之一,因目前尚无可供广泛使用的有效疫苗和特效药,防控主要依靠种群净化。本试验以ALV-J原型毒株的gp37基因序列为参照,设计荧光引物,成功建立了特异性较强的ALV-J荧光定量PCR... J亚群禽白血病病毒(ALV-J)是一种严重危害养禽业的肿瘤疾病之一,因目前尚无可供广泛使用的有效疫苗和特效药,防控主要依靠种群净化。本试验以ALV-J原型毒株的gp37基因序列为参照,设计荧光引物,成功建立了特异性较强的ALV-J荧光定量PCR检测方法。随后,将ALV-J病毒液与黄芪提取液先后或同时作用于DF-1细胞,培养72 h后,提取细胞总RNA,用建立的荧光定量PCR方法检测病毒对照组与直接灭活组、预防组、治疗组之间gp37基因表达量的差异,以此探索黄芪对gp37基因转录的影响。结果显示,病毒对照组与直接灭活组、预防组、治疗组的gp37基因表达量均有显著差异(P<0.05),其中预防组的gp37基因表达量与病毒对照组差异最大,表明黄芪能明显下调gp37基因的表达。因此,黄芪可能对J亚型禽白血病的防治有一定作用。 展开更多
关键词 J亚群禽白血病病毒 黄芪提取液 荧光定量PCR DF-1细胞
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不同地方品种鸡ALV感染情况调查及其净化 被引量：4
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作者 蔡丙严 田其真 +2 位作者 戴建华 穆晓惠 白佑博 《畜禽业》 2021年第12期1-3,6,共4页
目的了解不同地方品种鸡中ALV的自然感染状态。方法采集扬州某种鸡场3个地方品种鸡(芦花鸡、苏禽绿壳鸡、新杨黑鸡)、2个时期(15周龄、25周龄)的泄殖腔棉拭子3600份和血清样品600份,分别采用p27抗原检测试纸条和ELISA检测试剂盒进行检测... 目的了解不同地方品种鸡中ALV的自然感染状态。方法采集扬州某种鸡场3个地方品种鸡(芦花鸡、苏禽绿壳鸡、新杨黑鸡)、2个时期(15周龄、25周龄)的泄殖腔棉拭子3600份和血清样品600份,分别采用p27抗原检测试纸条和ELISA检测试剂盒进行检测,同时,采集部分p27抗原检测阳性鸡的抗凝血,提取基因组,利用J亚群特异性引物进行PCR检测。结果15周龄时p27抗原检测试纸条与ELISA检测总阳性率分别为30.67%和31.38%;25周龄时总阳性率分别为11.20%和12.50%。ALV-J亚群PCR检测结果显示,阳性样品可扩增出特异性符合目的545 bp条带。结论我国地方品种鸡存在ALV的感染,且主要以ALV-J亚群为主。 展开更多
关键词 鸡 禽白血病(alv) P27抗原 alv-J亚群 感染
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基于磁微粒化学发光免疫分析方法的禽白血病病毒检测
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作者 季晶晶 纪方轩 +5 位作者 沈艳 汪最 朱燕锋 朱思锋 罗青平 陈利苹 《养殖与饲料》 2025年第9期56-62,共7页
[目的]建立1种检测禽白血病病毒的磁微粒化学发光免疫分析方法,为禽白血病的净化提供更高效的检测工具。[方法]采用双抗体夹心法原理,选用2株针对P27蛋白的单克隆抗体分别作为包被抗体和标记抗体,配套全自动化学发光分析仪,检测禽白血... [目的]建立1种检测禽白血病病毒的磁微粒化学发光免疫分析方法,为禽白血病的净化提供更高效的检测工具。[方法]采用双抗体夹心法原理,选用2株针对P27蛋白的单克隆抗体分别作为包被抗体和标记抗体,配套全自动化学发光分析仪,检测禽白血病病毒P27抗原参考阳性和参考阴性样本,系统优化包被抗体和标记抗体的工作浓度、反应时间、吸样量参数,并验证建立方法的特异性、最低检测限、重复性、加速稳定性、符合率。[结果]包被抗体和标记抗体的最佳工作浓度均为0.25μg/mL,最佳反应时间为20 min,最佳吸样量为10μL;建立的CLIA检测方法与其他禽类病原无交叉反应;用阴性细胞培养上清稀释样本时,最低检测限为1 pg/mL P27蛋白,用阴性蛋清稀释样本时,最低检测限为10 pg/mL P27蛋白;重复性试验中样本测值变异系数≤5%;试剂组分在2~8℃预估可保存12个月以上,与国产商品化ELISA试剂盒的总符合率达99.8%。[结论]本研究建立的禽白血病病毒磁微粒化学发光群特异抗原检测方法特异性高、灵敏度好,重复性、稳定性和准确度达到商品化试剂盒的标准,兼具自动化、操作简便的优势。 展开更多
关键词 禽白血病病毒 P27蛋白 磁微粒化学发光免疫分析 ELISA
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病毒REV与ALV-J经鸡胚垂直传播共感染对雏鸡的协同致病性 被引量：1
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作者 马凌遥 王一新 +2 位作者 赵鹏 常爽 蔡曼珊 《广东农业科学》 CAS 2023年第10期141-148,共8页
【目的】J亚群禽白血病病毒(Avian leukosis virus subgroup J,ALV-J)和禽网状内皮组织增殖病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)均可通过鸡胚垂直传播,且两者在鸡胚中的自然共感染已有报道,但两者经鸡胚共感染的致病性未有研究。建立... 【目的】J亚群禽白血病病毒(Avian leukosis virus subgroup J,ALV-J)和禽网状内皮组织增殖病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)均可通过鸡胚垂直传播,且两者在鸡胚中的自然共感染已有报道,但两者经鸡胚共感染的致病性未有研究。建立ALV-J与REV垂直传播共感染的实验动物模型,研究ALV-J与REV垂直传播共感染的致病作用及其对禽白血病净化检测的影响,以期为推动多病原协同净化提供参考。【方法】通过鸡胚接种方式构建分别携带ALV-J、REV及两者共感染的雏鸡感染模型,通过孵化率、死亡率、体重、胎粪ALV-p27抗原检出率、病毒血症阳性率等指标分析REV与ALV-J在垂直传播中共感染的致病性。【结果】ALV-J+REV共感染组鸡胚孵化率为65.71%,低于单感染组和空白组(CK);共感染组死亡率高于单感染组和CK。7日龄时CK、ALV-J组、REV组、ALV-J+REV组雏鸡平均体重分别为59.25、50.83、49.67、43.78 g,共感染加重了对雏鸡生长的抑制。ALV血浆病毒分离结果显示,ALV-J组、ALV-J+REV组阳性率在各日龄均为100%,CK均为0%。采集肛拭子检测ALV-p27抗原结果显示,ALV-J+REV组雏鸡阳性率在1、3、7、14日龄分别为91.30%、94.12%、90.90%和100%,肛拭子的ALV-J p27阳性检出率低于血浆病毒分离。比较免疫器官发育指数结果显示,ALV-J和REV单感染均导致雏鸡免疫器官萎缩,共感染加重免疫器官萎缩程度。免疫器官病毒载量显示,REV与ALV-J共感染促进了ALV-J在免疫器官中的增殖,同时ALV-J也促进了REV在免疫器官中的增殖。【结论】相对于ALV-J和REV单感染,两者共感染降低了鸡胚孵化率、增加了雏鸡死亡率、增强了对雏鸡生长的抑制作用,对诱导胸腺、脾脏和法氏囊等免疫器官萎缩的影响更加显著,且两者在共感染过程中对彼此复制均有促进作用。 展开更多
关键词 禽白血病病毒(alv) 禽网状内皮组织增殖病毒(REV) 垂直传播 共感染 致病性 净化
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晋北散养边鸡群ALV-p27携带率及ALV-A/B与ALV-J亚群的ELISA检测 被引量：2
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作者 马馨 刘一飞 +3 位作者 王志宇 魏清宇 叶红心 李培峰 《山西农业科学》 2020年第9期1523-1525,共3页
为了解晋北地区农户散养边鸡群ALV感染情况,从鸡群中采集蛋清和血清样品共92份,应用ELISA方法检测ALV-p27抗原及蛋清和血清样品中ALV-A/B与ALV-J抗体阳性率。ELISA结果显示,92份蛋清和血清样品的ALV-p27抗原检出率为9.78%,ALV-A/B与ALV-... 为了解晋北地区农户散养边鸡群ALV感染情况,从鸡群中采集蛋清和血清样品共92份,应用ELISA方法检测ALV-p27抗原及蛋清和血清样品中ALV-A/B与ALV-J抗体阳性率。ELISA结果显示,92份蛋清和血清样品的ALV-p27抗原检出率为9.78%,ALV-A/B与ALV-J抗体阳性率分别为20.00%和6.25%。检测结果表明,晋北散养蛋鸡群同时感染外源性ALV-A/B与ALV-J亚群,且主要以A/B亚群为主,不存在ALV-A/B与ALV-J 2种或3种亚群的共感染。 展开更多
关键词 边鸡 ELISA 禽白血病病毒 alv-p27抗原 亚群 晋北
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鸡c-myc原癌基因反义RNA的鉴定及其抗ALV-J能力的分析 被引量：1
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作者 骆欢 张瑾麒 +6 位作者 朱姝桐 柴文娴 陈绪靖 陈世豪 耿拓宇 崔恒宓 胡序明 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期59-65,共7页
原癌基因c-myc被鉴定为J亚群禽白血病病毒(ALV-J)诱导髓样细胞瘤的常见整合位点,其异常激活可能是ALV-J最重要的分子致病机制。为了鉴定c-myc反义RNA对c-myc基因表达的影响及其在ALV-J增殖中的作用,本研究通过cDNA末端快速扩增(RACE)技... 原癌基因c-myc被鉴定为J亚群禽白血病病毒(ALV-J)诱导髓样细胞瘤的常见整合位点,其异常激活可能是ALV-J最重要的分子致病机制。为了鉴定c-myc反义RNA对c-myc基因表达的影响及其在ALV-J增殖中的作用,本研究通过cDNA末端快速扩增(RACE)技术、PCR扩增5’-race和3’-race后对其编码属性的分析鉴定结果显示,鸡c-myc原癌基因反义RNA全长621 bp,且不编码蛋白;该反义RNA序列定位于鸡2号染色体,且源自c-myc外显子3反向序列,因此将其命名为ch-MYC-AS1。将ch-MYC-AS1连接载体pcDNA3.1,构建真核表达质粒pcDNA3.1-ch-MYC-AS1,将其转染至鸡巨噬细胞细胞系HD11,培养48 h后利用荧光定量PCR和western blot检测ch-MYC-AS1过表达对c-myc表达的影响,结果显示,过表达ch-MYC-AS1可以显著抑制c-myc原癌基因在HD11中的表达。以MOI 5的ALV-J(JS09GY3株)感染HD11细胞4 h后,将pcDNA3.1-ch-MYC-AS1质粒转染该细胞,48 h后采用IDEXX禽白血病抗原检测试剂盒检测细胞上清中ALV-J p27蛋白的表达水平,结果显示过表达ch-MYC-S1显著减少细胞上清中ALV-J p27蛋白的表达;进一步通过荧光定量PCR、western blot检测过表达ch-MYC-AS1对ALV-J复制的影响,结果显示,ALV-J env基因mRNA转录水平和蛋白表达水平在ch-MYC-AS1转染后48 h的HD11细胞中均显著下调(P<0.01);利用间接免疫荧光技术检测DF-1细胞上清中ALV-J的病毒效价,结果显示:与对照组相比,HD11细胞上清中ALV-J的病毒效价在ch-MYC-AS1转染后48 h明显降低。上述结果表明过表达ch-MYC-AS1可以显著抑制ALV-J在HD11细胞中的增殖。本研究首次揭示了原癌基因c-myc反义RNA的抗病毒功能,为进一步探究c-myc基因在ALV-J致病机理中的作用提供了参考依据。 展开更多
关键词 C-MYC原癌基因 反义RNA 禽白血病病毒 巨噬细胞
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1株诱发血管瘤的ALV-J的分离鉴定及其囊膜基因的进化分析 被引量：1
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作者 李佑君 伍澜 +5 位作者 杨雨欣 顾玉芳 方春 刘晶 梁雄燕 杨玉莹 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期4557-4567,共11页
【目的】了解湖北某黑羽蛋鸡场J亚群禽白血病(J-avian leukosis)的来源及其囊膜基因进化趋势,为湖北地区禽白血病流行病学调查提供资料。【方法】运用病理学、ELISA和Multi-PCR方法对疑似血管瘤型J亚群禽白血病病毒(J-Avian leucosis vi... 【目的】了解湖北某黑羽蛋鸡场J亚群禽白血病(J-avian leukosis)的来源及其囊膜基因进化趋势,为湖北地区禽白血病流行病学调查提供资料。【方法】运用病理学、ELISA和Multi-PCR方法对疑似血管瘤型J亚群禽白血病病毒(J-Avian leucosis virus,ALV-J)病例进行实验室诊断,制备病毒液接种DF-1细胞进行病毒分离及间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay,IFA)检测,并通过DNAStar等软件分析该毒株囊膜蛋白编码基因。【结果】病例呈现典型血管瘤病变,p27抗原检测呈阳性,Multi-PCR出现ALV-J特异性条带,IFA结果显示特异性荧光,表明分离到1株ALV-J,命名为HB2021017。分离株HB2021017囊膜蛋白ENV、膜表面糖蛋白SU、跨膜蛋白TM与所引用的ALV-J毒株中的髓细胞瘤型毒株、髓细胞瘤和血管瘤混合型毒株、血管瘤型的ALV-J毒株的氨基酸序列相似性逐步升高。系统进化树分析显示,分离株HB2021017的env基因与中国地方品种鸡群中分离的诱发血管瘤的ALV-J毒株亲缘关系最近,处于同一分支;而与其他鸡群分离诱发血管瘤或髓细胞瘤的ALV-J毒株亲缘关系较远,处于不同的分支。【结论】本研究确诊并分离到1株诱发血管瘤的ALV-J(HB2021017),本土地方品种鸡群中分离的诱导血管瘤的ALV-J毒株囊膜基因已经形成了相对独立的进化分支。 展开更多
关键词 血管瘤型 J亚群禽白血病毒(alv-J) 囊膜基因 克隆 进化
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