鸡传染性支气管炎病毒M41株全基因组序列测定及致病性分析

1

作者 赵靖玉 李丹 +4 位作者 张兵 张乾义 张锦华 宋亚芬 杨承槐 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第8期3967-3975,共9页

为系统评价传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)M41株传代过后是否生物特性会发生改变,我们将国家兽医微生物菌(毒)种保藏中心1979年从法国引进的IBV M41株(保藏编号CVCC AV1511,简写AV1511-1979)在SPF鸡上连续传代5次... 为系统评价传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)M41株传代过后是否生物特性会发生改变,我们将国家兽医微生物菌(毒)种保藏中心1979年从法国引进的IBV M41株(保藏编号CVCC AV1511,简写AV1511-1979)在SPF鸡上连续传代5次,评估其在基因组变异、排毒规律、组织嗜性等方面的差异。采用Illumina高通量测序方法测序传代前后基因组序列,并建立了IBV攻毒模型,使用RT-PCR、RT-qPCR、气管环纤毛摆动试验等方法从病毒含量、临床症状观察、组织嗜性等方面评价其传代前后差异情况。结果表明AV1511-1979株在SPF鸡上连续传代5代后全基因组未发生变异,但是与其他来源的Mass株在1a、5a、N蛋白区域差异较大;攻毒模型中试验鸡出现精神沉郁、张口呼吸和呼吸啰音等明显临床症状,剖检发现气管环纤毛摆动状况不佳或停止摆动;RT-qPCR结果显示病毒在感染鸡的气管、肺脏、肾脏、腺胃、十二指肠、盲肠扁桃体内均可复制,尤其在气管、肾脏、腺胃中病毒载量较高,传代前后的病毒载量在统计学上无显著差异。研究表明:IBV M41株AV1511-1979株在SPF鸡上传代5代内生物特性稳定,不发生改变,作为IBV灭活疫苗生产用种毒、IBV疫苗检验用标准强毒株,我们的工作为生产种毒代次控制、疫苗评价提供了参考。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 m41株 SPF鸡 传代 生物特性

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鸡传染性支气管炎病毒D_(41) 株S1基因部分序列的测定 被引量：4

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作者 廖明 辛朝安 王林川 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期55-59,共5页

通过反转录及变退火温度ＰＣＲ方法扩增出含先导序列的ＩＢＶ广东地方分离株Ｄ４１的Ｓ１基因ｃＤＮＡ，长度约１．７ｋｂ．利用双脱氧链终止法对其５′端测序，准确读到３４２个碱基，并确定了翻译起始密码子ＡＴＧ的位置．

关键词 鸡病 传染性支气管炎 病毒 基因 测序

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鸡肾型IBV分离株M基因的克隆与特性分析 被引量：3

3

作者 王晶钰 罗艳 +2 位作者 邓小敏 郭抗抗 张彦明 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期591-595,共5页

依据NCBI所登录的鸡传染性支气管炎病毒的M基因序列设计了一对引物,应用TRIzol试剂盒对8个肾型鸡传染性支气管炎病毒陕西地方分离株进行总RNA的提取,以所得到的RNA为模板,用RT-PCR对M基因进行扩增;其目的条带回收提纯后,与PMD18-T克隆... 依据NCBI所登录的鸡传染性支气管炎病毒的M基因序列设计了一对引物,应用TRIzol试剂盒对8个肾型鸡传染性支气管炎病毒陕西地方分离株进行总RNA的提取,以所得到的RNA为模板,用RT-PCR对M基因进行扩增;其目的条带回收提纯后,与PMD18-T克隆载体进行连接,转化到DH5α宿主菌,并经药物抗性筛选、PCR及酶切鉴定,将所筛选鉴定出的阳性质粒进行测序,最后对测序结果进行分析。结果表明:陕西地方8个毒株(BJ2、FF2、YL2、B01、G5、YX、WH、WG)M基因长约为650 bp,其中YX、WH株本身无BamH 1酶切位点。WH与其它分离株的核苷酸同源性为91.8%～92.6%,而其它的分离株间的同源性为98.8%～99.8%。8个毒株与参考株的核苷酸同源性为74.9%～99.8%。其N端90 aa肽段与对照株相比,不同之处表现为高亲水性氨基酸取代低亲水性氨基酸,这会使其具有更好的抗原性。 展开更多

关键词 鸡肾型IBV m基因 克隆与分析

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鸡传染性支气管炎病毒S1,M和N基因遗传变异相关性 被引量：2

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作者 亓丽红 艾武 +3 位作者 黄兵 王莉莉 秦卓明 宋敏训 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第2期150-155,共6页

对山东省1992—2005年分离的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)毒株的纤突蛋白(S1)、膜蛋白(M)和核衣壳蛋白(N)分别进行克隆测序,结合在GenBank中发表的其他具有S1,N和M基因的IBV参考序列,利用DNAStar软件和统计学软件SPSS8.0,对不同毒株的S1,N... 对山东省1992—2005年分离的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)毒株的纤突蛋白(S1)、膜蛋白(M)和核衣壳蛋白(N)分别进行克隆测序,结合在GenBank中发表的其他具有S1,N和M基因的IBV参考序列,利用DNAStar软件和统计学软件SPSS8.0,对不同毒株的S1,N和M基因分别进行遗传变异和同源性相关分析。结果表明:不同毒株间S1基因与M基因核苷酸遗传变异的相关系数为0.483,S1基因与N基因核苷酸遗传变异的相关系数为0.570,M基因与N基因核苷酸遗传变异的相关系数为0.620,说明S1,M和N基因三者之间的遗传变异既有同步性又有独立性。通过S1,N基因推导的氨基酸系统进化树表明,9株山东野毒株具有较近的亲缘关系,变异方向一致,且与疫苗株的亲缘关系较远,但从M基因推导的氨基酸系统进化树分析,只有3株山东野毒株与部分疫苗株有一定的亲缘关系。由此表明,IBV存在基因重组现象。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 S1基因 N基因 m基因 同源性 遗传变异 相关性

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鸡传染性支气管炎病毒广西株N、M基因的克隆与序列分析 被引量：1

5

作者 屈素洁 施开创 +5 位作者 粟艳琼 胡杰 莫胜兰 张步娴 李军 邹联斌 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第12期3119-3125,共7页

为研究鸡传染性支气管炎病毒（IBV）广西流行株的遗传变异情况,本研究从广西发病鸡中分离鉴定了1株IBV。参照GenBank中IBV的核苷酸序列设计2对引物,利用RT-PCR技术对分离毒株的N、M基因进行了克隆、序列测定,并与GenBank中发表的国内外... 为研究鸡传染性支气管炎病毒（IBV）广西流行株的遗传变异情况,本研究从广西发病鸡中分离鉴定了1株IBV。参照GenBank中IBV的核苷酸序列设计2对引物,利用RT-PCR技术对分离毒株的N、M基因进行了克隆、序列测定,并与GenBank中发表的国内外参考毒株进行比对分析。结果显示,N基因序列全长为1 230bp,编码409个氨基酸,M基因序列全长为678bp,编码225个氨基酸。与参考毒株相比,分离株的N基因核苷酸序列同源性为87.2%~93.3%,推导的氨基酸序列同源性为90.0%~94.4%;M基因的核苷酸序列同源性为83.6%~91.0%,推导的氨基酸序列同源性为82.7%~92.9%。在遗传进化树中,本试验分离株Guangxi156株与BJ株和LX4株两个参考株位于同一个分支上,亲缘关系较近,而与其他参考株属于不同的分支,亲缘关系较远。结果表明,本试验分离株是一株新的IBV变异株。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 N基因 m基因 基因克隆 序列分析

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禽传染性支气管炎病毒四川分离株M基因的克隆及真核表达载体构建

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作者 杨帆 王红宁 +2 位作者 李春 吴琦 周生 《四川畜牧兽医》 2003年第B09期19-19,共1页

膜蛋白是禽传染性支气管炎病毒的主要结构蛋白,可能存在着具有重要免疫作用的抗原决定簇,能诱导细胞介导的免疫反应,但其免疫生物学功能尚不清楚。本研究选择禽传染性支气管炎病毒中国分离株SAIBWJ,通过RT-PCR扩增获得其膜蛋白基因M基... 膜蛋白是禽传染性支气管炎病毒的主要结构蛋白,可能存在着具有重要免疫作用的抗原决定簇,能诱导细胞介导的免疫反应,但其免疫生物学功能尚不清楚。本研究选择禽传染性支气管炎病毒中国分离株SAIBWJ,通过RT-PCR扩增获得其膜蛋白基因M基因并插入到PGEM-T载体中,获得重组质粒PGEM-M,将重组质粒中的克隆片段进行序列测定及分析。对PGEM-M进行双酶切获得M基因片段,克隆到真核表达载体pcDNA3.1+中,通过菌落PCR、双酶切证明获得了M基因的真核表达质粒。利用DNAstar软件将IBVSAIBwj株的膜蛋白基因的核苷酸序列与GenBank中的国内外参考毒株进行比较,其核苷酸序列的同源率为91.6%～98.8%,氨基酸序列的同源率为91.6%～99.6%。糖基化位点的增加和减少对M蛋白的抗原性产生很大的影响。在M蛋白近N端含有两个糖基化位点,第一个跨膜疏水区距离亲水区大约20个氨基酸。SAIBwjM基因核苷酸、氨基酸进化关系可以看出,SAIBwjM与国内外参考株的同源性均较高,因此可能具有交叉保护性抗原,可望用于制备诊断试剂及制备基因工程疫苗。由于IBV变异较大,常规疫苗不能产生完全保护力。在IBV的免疫保护机制中,细胞免疫起着关键的作用,近年来一些研究者已经进行了IBVDNA疫苗的研究,并取得了一定的进展。IBV的S1基因真核表达质粒可同时诱? 展开更多

关键词 禽类 传染性支气管炎病毒 四川分离株 m基因 基因克隆

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2株鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定与S1、M和N基因序列分析 被引量：4

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作者 何家辉 封柯宇 +3 位作者 李鸿鑫 宋才良 张钰坤 谢青梅 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第1期10-14,共5页

为跟踪了解广东地区鸡传染性支气管炎病流行情况,2019年从广东省清远、惠州两地疑似鸡传染性支气管炎发病鸡群中采集分离到2株传染性支气管炎病毒,并对其进行了鉴定和分析。结果显示,在鸡胚上盲传3代后均出现鸡胚的典型病变,死亡鸡胚全... 为跟踪了解广东地区鸡传染性支气管炎病流行情况,2019年从广东省清远、惠州两地疑似鸡传染性支气管炎发病鸡群中采集分离到2株传染性支气管炎病毒,并对其进行了鉴定和分析。结果显示,在鸡胚上盲传3代后均出现鸡胚的典型病变,死亡鸡胚全身出血明显,未死亡鸡胚发育受阻,呈明显的侏儒胚、蜷缩。将2个分离株分别命名为CK/CH/GD/QY1119和CK/CH/GD/HZ1225,分别测定其半数感染量(EID 50),扩增其S 1、M和N基因核苷酸序列,获得相应的推导氨基酸序列并对其分析。分离株CK/CH/GD/QY1119和CK/CH/GD/HZ1225的EID 50分别为10-7.5/0.1 mL和10-6.75/0.1 mL,2个分离株S 1基因与Mass型等疫苗株同源性为76.2%~82.1%,同源性均较低。与H120疫苗株相比,2个分离株的S 1、M和N基因存在若干氨基酸的差异,2个分离株S 1基因均存在氨基酸的插入,分离株CK/CH/GD/QY1119的M基因存在氨基酸的缺失,分离株CK/CH/GD/HZ1225的M基因存在氨基酸的插入。进化树分析显示,2个分离株分别属于LDT3型分支和QX型分支,均在S 1、M和N基因进化树上的分属上存在差异。结果表明本次分离得到的2个分离株的S 1、M和N基因均存在不同程度变异,在临床防控中应引起重视。本试验为鸡传染性支气管炎的有效防控提供了参考依据。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 LDT3型 QX型 S 1基因 m基因 N基因 序列分析

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鸡传染性支气管炎病毒广西株M基因的克隆与序列分析 被引量：1

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作者 屈素洁 施开创 +6 位作者 邹联斌 胡杰 莫胜兰 尹彦文 张步娴 李军 梁媛 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第2期377-382,共6页

参照GenBank中鸡传染性支气管炎病毒（IBV）的核苷酸序列设计1对引物,利用PCR扩增IBV广西株的M基因片段,将其克隆到pMD18-T载体中。序列分析结果表明,M基因全长为678bp,编码225个氨基酸,近N端含有2个潜在的N-糖基化位点,3个跨膜区位于23... 参照GenBank中鸡传染性支气管炎病毒（IBV）的核苷酸序列设计1对引物,利用PCR扩增IBV广西株的M基因片段,将其克隆到pMD18-T载体中。序列分析结果表明,M基因全长为678bp,编码225个氨基酸,近N端含有2个潜在的N-糖基化位点,3个跨膜区位于23—98肽段区,亲水区较疏水区更易变异。IBV广西株与国内外IBV参考毒株相比,核苷酸序列同源性为83.6%-92.5%,氨基酸序列同源性为82.7%-95.1%。系统进化分析结果显示IBV广西株与SAIB20和LX4两参考株位于同一个分支上,它们的亲缘关系较近,而与其他参考株属于不同的分支,亲缘关系较远。结果表明IBV广西株是1株新的IBV变异株。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 m基因 基因克隆 序列分析

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鸡传染性支气管炎疫苗株与广西流行野毒株鉴别方法的建立 被引量：7

9

作者 范文胜 王海勇 +4 位作者 唐宁 董志华 韦天超 磨美兰 韦平 《动物医学进展》 北大核心 2018年第5期26-30,共5页

根据鸡传染性支气管炎病毒(IBV)3′端非编码区和S1基因保守区域设计两对特异性引物,对H120、Ma5和4/91、M41等常用疫苗株以及26株广西田间分离株进行二重RT-PCR扩增,并进行该方法的特异性和敏感性试验,同时进行了初步应用。结果表明,经R... 根据鸡传染性支气管炎病毒(IBV)3′端非编码区和S1基因保守区域设计两对特异性引物,对H120、Ma5和4/91、M41等常用疫苗株以及26株广西田间分离株进行二重RT-PCR扩增,并进行该方法的特异性和敏感性试验,同时进行了初步应用。结果表明,经RT-PCR扩增后,M41毒株得到约160bp的目的片段,Mass型毒株得到约370bp的目的片段,4/91型IBV毒株得到约480bp和345bp 2条目的片段,其他24株广西分离株得到1条大小在260bp^345bp的目的片段。特异性试验表明此二重RT-PCR方法不能扩增NDV、AIV、MDV、IBDV、ALV等,敏感性试验表明最低检测量达到100pg。该方法的临床应用表明,攻毒鸡病料阳性率达90%。研究结果表明了所建立的二重RT-PCR方法可以鉴别IBV疫苗株与广西流行野毒株,且特异性强,敏感度高。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 疫苗株 野毒株 敏感性 特异性

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鸡肾型IBV地方分离株N基因的克隆及分子遗传变异分析 被引量：5

10

作者 王晶钰 邓小敏 +3 位作者 张彦明 罗艳 李鹏 郭抗抗 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2006年第5期50-54,58,共6页

用RT-PCR方法对分离于陕西省不同地区的8个鸡肾型IBV毒株的Ⅳ基因分别进行了扩增,将各扩增产物与T载体连接后,转化感受态细胞筛选阳性克隆质粒并进行基因测序,用DNAstar软件将这8个毒株与GenBank收录的7个IBV代表毒株的Ⅳ基因进行了比... 用RT-PCR方法对分离于陕西省不同地区的8个鸡肾型IBV毒株的Ⅳ基因分别进行了扩增,将各扩增产物与T载体连接后,转化感受态细胞筛选阳性克隆质粒并进行基因测序,用DNAstar软件将这8个毒株与GenBank收录的7个IBV代表毒株的Ⅳ基因进行了比较分析,研究了其变异情况。结果表明,B01,YL,WH和 YX株与7株代表毒株的同源性较高,而G,BJ,WG,FF株与7个代表毒株的同源性相对较低。氨基酸推导序列比对结果表明,N蛋白突变以散在的点突变形式为主,其中46,48,50,75,78,189,232,236,237,299,301,350,366等位点容易发生突变,突变位点无明显规律性。 展开更多

关键词 肾型传染性支气管炎病毒 地方分离株 N基因 序列分析 鸡

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国产IBV疫苗株膜蛋白基因的亲缘关系研究 被引量：3

11

作者 廖明 曹伟胜 +2 位作者 任涛 罗开健 辛朝安 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期185-189,共5页

利用自行设计的引物Wx和Ws,通过RT_PCR方法分别扩增出IBVD4 1株、H12 0GD株、H12 0SH株、H5 2GD株 4个国产疫苗株和标准强素M4 1_E4株完整的M基因cDNA ,然后将其分别克隆到pGEMT_Easy或pMD 18_T载体中。测序结果发现 ;这 5个IBV毒株的M... 利用自行设计的引物Wx和Ws,通过RT_PCR方法分别扩增出IBVD4 1株、H12 0GD株、H12 0SH株、H5 2GD株 4个国产疫苗株和标准强素M4 1_E4株完整的M基因cDNA ,然后将其分别克隆到pGEMT_Easy或pMD 18_T载体中。测序结果发现 ;这 5个IBV毒株的M基因均为 6 78bp ,分别编码由 2 2 5个氨基酸残基组成的多肽。序列分析表明 :D4 1株、H12 0GD株和H12 0SH株M基因之间的核苷酸序列及推导氨基酸序列同源性均为 10 0 % ,它们在系统发生进化树中处同一分支 ;而H5 2GD株和国内的M4 1_E4株和国外的M4 1株M基因之间的核苷酸序列及推导氨基酸序列同源性分别为 99 9%和 99 6 % ,它们之间的亲缘关系最近 。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎 序列分析 IBV疫苗株 膜蛋白基因 亲缘关系 毒株 RNA病毒

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腺胃病变型鸡传染性支气管炎病毒(IBV-D971株)致弱的研究 被引量：3

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作者 荣骏弓 谷守林 +3 位作者 胡守萍 王成梅 付德霞 曲亚美 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期466-469,共4页

将IBV_D971株病毒在SPF鸡胚上连续传至 12 0代 ,培育出了一株毒力明显减弱 ,并且具有良好免疫原性的腺胃病变型鸡传染性支气管炎病毒弱毒株 (IBV_D971株 )。IBV_D971F10 5代毒力明显下降 ,以 10 9.2 5EID50 接种 1日龄SPF鸡 5 / 5无不... 将IBV_D971株病毒在SPF鸡胚上连续传至 12 0代 ,培育出了一株毒力明显减弱 ,并且具有良好免疫原性的腺胃病变型鸡传染性支气管炎病毒弱毒株 (IBV_D971株 )。IBV_D971F10 5代毒力明显下降 ,以 10 9.2 5EID50 接种 1日龄SPF鸡 5 / 5无不良反应。IBV_D971F10 5代毒连续通过 1日龄SPF鸡体 5代 ,未见毒力返强。以 10 3EID50 免疫 1日龄SPF鸡 ,攻毒后 5 / 5保护 ,对照 5 / 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 腺胃病变型 弱毒株 致弱

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IBV肾型毒株与呼吸型疫苗株鉴别方法的建立与应用 被引量：3

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作者 徐雪 高冬生 +9 位作者 王川庆 陈陆 杨霞 皇甫和平 刘慧敏 郑鹿平 杨猛 张金来 李昆明 张九洲 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2011年第1期8-14,共7页

【目的】建立基于鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S1基因的反转录-复合PCR方法,为IBV流行毒株和呼吸型疫苗株的分型鉴定提供技术支持。【方法】根据IBVN基因序列设计合成1对特异性通用引物,建立IBV的分子生物学检测方法,用以对IBV进行检测。... 【目的】建立基于鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S1基因的反转录-复合PCR方法,为IBV流行毒株和呼吸型疫苗株的分型鉴定提供技术支持。【方法】根据IBVN基因序列设计合成1对特异性通用引物,建立IBV的分子生物学检测方法,用以对IBV进行检测。通过对GenBank上公布的IBVS1基因全序列的分析比对,找出呼吸型疫苗株和地方肾型流行毒株相对保守的差异序列,设计合成2对引物,建立可以对这2类IBV毒株进行鉴别的反转录-复合PCR方法,同时对该方法的敏感性和重复性进行检测,并对该方法进行了实际应用。【结果】建立了区别IBV肾型毒株和呼吸型毒株的分型方法,该方法敏感性好,能检出经106稀释后的基因组RNA,且具有可重复性;临床应用显示,该方法对呼吸型毒株和近年来的地方肾型分离株具有较好的分型效果,而对较早时期的肾型分离株(YI株和澳大利亚T株)的扩增结果为阴性;经鉴定,近年来感染鸡群并引起高死亡率的分离毒株主要为肾型IBV。【结论】建立了区别IBV肾型毒株和呼吸型毒株的分型方法,该方法特异性强、敏感性高、重复性好,能将我国地方流行的肾型IBV毒株与呼吸型疫苗株完全区分开来。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 反转录-复合PCR 毒株鉴别 N基因 S1基因 呼吸型疫苗株 肾型毒株

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鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白抗原表位多肽的预测、鉴定及免疫效果的初步研究 被引量：5

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作者 范文胜 朱丹 +5 位作者 张愉 廖健淇 王露 雍璐 韦平 磨美兰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期2257-2264,共8页

旨在对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H120株S1蛋白的B细胞及T细胞可能的表位进行预测并合成相应的多肽,然后免疫小鼠,并分析其免疫效果,以验证候选表位多肽的免疫原性。利用表位预测软件筛选并化学合成针对IBV H120株S1蛋白的5条表位多肽,... 旨在对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H120株S1蛋白的B细胞及T细胞可能的表位进行预测并合成相应的多肽,然后免疫小鼠,并分析其免疫效果,以验证候选表位多肽的免疫原性。利用表位预测软件筛选并化学合成针对IBV H120株S1蛋白的5条表位多肽,然后免疫小鼠,通过间接ELISA、中和试验和流式细胞技术检测各表位多肽诱导的特异性抗体、中和抗体和外周血T细胞亚群。ELISA检测结果显示,5条表位多肽均具有良好的反应原性,免疫小鼠的血清效价高低顺序依次为Pep76-106>Pep240-257>Pep511-537>Pep403-421>Pep135-172;中和试验结果表明,5条多肽免疫小鼠的血清中和滴度均高于空白对照组,其高低顺序依次为Pep240-257=Pep403-421=Pep511-537>Pep76-106=Pep135-172;流式检测结果表明,5条多肽免疫小鼠在CD3^+、CD4^+CD8-、CD8^+CD4-T淋巴细胞水平上均极显著高于空白对照组(P<0.01),CD3^+T及CD4^+CD8-T淋巴细胞数大小顺序依次为Pep403-421>Pep240-257>Pep76-106>Pep511-537>Pep135-172,CD8^+CD4-T淋巴细胞数大小顺序依次为Pep403-421>Pep76-106>Pep511-537>Pep240-257>Pep135-172。合成的5条表位多肽中,Pep240-257、Pep76-106和Pep403-421可以诱导体液免疫,Pep403-421可以诱导细胞免疫,其中,Pep403-421可以同时诱导细胞免疫及体液免疫。本研究结果为深入了解S1蛋白的免疫学特性以及研发诊断试剂和有效表位疫苗奠定了基础。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 H120株 S1蛋白 表位多肽 特异性抗体 中和抗体 T淋巴细胞亚群

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鸡新城疫-传染性支气管炎-禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗对H9亚型禽流感流行毒株的保护效果 被引量：3

15

作者 章振华 李林 +5 位作者 沈佳 景小冬 张建伟 郑小兰 史爱华 姜北宇 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第9期11-14,共4页

为了检验鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗对H9亚型禽流感病毒流行毒株的免疫保护效果,将鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗免疫接种21日龄SPF鸡,免疫接种后3周采血测定AI(H9)HI抗体,并用200... 为了检验鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗对H9亚型禽流感病毒流行毒株的免疫保护效果,将鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗免疫接种21日龄SPF鸡,免疫接种后3周采血测定AI(H9)HI抗体,并用2004年—2012年分离的8株H9亚型禽流感病毒对免疫接种鸡进行攻毒试验。结果显示,试验鸡免疫接种三联灭活苗后21d,其H9 HI抗体效价可达11.88log2,可抵抗8个不同H9亚型禽流感流行毒株的攻击,总攻毒保护率达92.50%(37/40)。鸡新城疫-传染性支气管炎-禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗中H9亚型禽流感毒株具有良好的免疫原性,能抵抗不同年代不同地区分离的H9亚型禽流感流行毒株的攻击。 展开更多

关键词 鸡新城疫 传染性支气管炎 H9亚型禽流感 三联灭活苗 流行毒株 免疫效力

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携带IBV DNA疫苗重组减毒沙门氏菌的构建及免疫原性研究 被引量：3

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作者 李玉玲 王红宁 +2 位作者 曾瑜虹 阳泰 郭自成 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期703-707,共5页

为研究携带IBV DNA疫苗重组减毒沙门氏菌免疫原性,本研究将携带有禽传染性支气管炎病毒(IBV)S1、M、N基因的pVAX1-S1、pVAX1-M和pVAX1-N重组质粒转入减毒沙门氏菌X4550株,构建IBV S1、M、N基因DNA质粒重组减毒沙门氏菌X4550疫苗株(X4550... 为研究携带IBV DNA疫苗重组减毒沙门氏菌免疫原性,本研究将携带有禽传染性支气管炎病毒(IBV)S1、M、N基因的pVAX1-S1、pVAX1-M和pVAX1-N重组质粒转入减毒沙门氏菌X4550株,构建IBV S1、M、N基因DNA质粒重组减毒沙门氏菌X4550疫苗株(X4550/pVAX1-S1,X4550/pVAX1-M,X4550/pVAX1-N),用间接免疫荧光法(IFA)检测重组质粒体外表达,SPF鸡经口服免疫,测定体内组织分布及稳定性、特异性IgG、IgA、CD4+和CD8+T细胞含量并进行攻毒实验。结果表明,重组质粒可在体外细胞中表达目的蛋白;重组减毒沙门氏菌X4550疫苗株可在肠、脾、肝、心、肾、肺6个组织中分布并稳定存在;特异性IgG,IgA、CD4+和CD8+T细胞显著升高(p<0.01),用104EID50IBV M41株攻毒,保护率达到73%(11/15)。本研究为研制IBV基因减毒沙门氏菌疫苗提供了依据。 展开更多

关键词 禽传染性支气管炎病毒 S1、m、N基因 减毒沙门氏菌 重组减毒沙门氏菌X4550疫苗株

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鸡传染性支气管炎耐热活疫苗的研究 被引量：2

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作者 秦玉明 王利永 +1 位作者 朱良全 王栋 《中国家禽》 北大核心 2009年第22期11-14,共4页

应用鸡传染性支气管炎病毒(H52株)与不同耐热保护剂配方和冻干曲线进行筛选。结果表明:采用冻干曲线2和耐热保护剂WXS冻干鸡传染性支气管炎病毒H52弱毒疫苗效果最佳。试制耐热活疫苗3批,其各项检验均符合要求。耐老化试验表明:经过37℃... 应用鸡传染性支气管炎病毒(H52株)与不同耐热保护剂配方和冻干曲线进行筛选。结果表明:采用冻干曲线2和耐热保护剂WXS冻干鸡传染性支气管炎病毒H52弱毒疫苗效果最佳。试制耐热活疫苗3批,其各项检验均符合要求。耐老化试验表明:经过37℃放置10d的每羽份病毒含量下降0.6～0.8个滴度,每羽份病毒含量达104.7～105.1EID50。保存期试验表明:2～8℃保存24个月疫苗每羽份病毒含量下降0.4～0.6个滴度,每羽份病毒达104.1～104.3EID50。疫苗2～8℃保存24个月后效检抗体水平达到1∶16～1∶32。免疫持续期试验表明:免疫21日龄SPF鸡,6个月后血清中和抗体效价达到1∶32～1∶64。田间试验表明临床观察无不良反应,安全有效。特异性试验表明耐热活疫苗抗原性不变。耐热保护剂生物学和理化特性表明保护剂安全、稳定,室温保存期达3个月。 展开更多

关键词 耐热保护剂 鸡传染性支气管炎病毒(H52株) 活疫苗

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胰酶分散抗原间接荧光抗体法检测鸡肾型传染性支气管炎病毒及抗体的研究 被引量：1

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作者 刘兴友 甘孟侯 +2 位作者 杨汉春 李文刚 张晓根 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1997年第5期3-5,共3页

本文采用胰酶分散法制备抗原，建立了间接荧光抗体法。用此法对人工感染鸡、人工感染鸡胚及自然发病鸡的抗原进行了测定，结果，人工感染鸡肾脏于７２～１６８ｈ１００％检测到特异性荧光，其余时间部分鸡检出特异性荧光；人工感染后病... 本文采用胰酶分散法制备抗原，建立了间接荧光抗体法。用此法对人工感染鸡、人工感染鸡胚及自然发病鸡的抗原进行了测定，结果，人工感染鸡肾脏于７２～１６８ｈ１００％检测到特异性荧光，其余时间部分鸡检出特异性荧光；人工感染后病死鸡肾脏均１００％检测到特异性荧光；人工感染鸡胚于４８～１２０ｈ１００％检测到特异性荧光，其余时间部分检出特异性荧光；１７８例自然发病病例中检出抗原阳性病例１５３例。对抗原检测的结果与冰冻切片制备抗原建立的间接荧光抗体法完全一致。用胰酶分散法制备抗原，对已知阳性血清和待检血清进行检测，检测结果与用冰冻切片法制备抗原检测结果一致。该法将检测程序简化，检测时间明显缩短。 展开更多

关键词 鸡病 肾型 传染性支气管炎 病毒 胰酶分散抗原

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鸡肾型传染性支气管炎病毒(IBV)的分离和某些生物学特性研究 被引量：1

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作者 崔玉东 赵殿军 +5 位作者 王玲 张守红 朱战波 赵淑兰 侯喜林 朴范泽 《黑龙江八一农垦大学学报》 1998年第1期61-64,共4页

用鸡胚传代方法从肾脏肿大的病死雏鸡分离到了两株鸡肾型传染性支气管炎病毒，命名为ＭＫ和ＭＧ，并对其某些生物学特性进行了研究。结果分离的两株病毒在电镜下表现为典型的冠状病毒形态；接种易感雏鸡能引起明显的肾脏病变；含病毒的... 用鸡胚传代方法从肾脏肿大的病死雏鸡分离到了两株鸡肾型传染性支气管炎病毒，命名为ＭＫ和ＭＧ，并对其某些生物学特性进行了研究。结果分离的两株病毒在电镜下表现为典型的冠状病毒形态；接种易感雏鸡能引起明显的肾脏病变；含病毒的鸡胚尿囊液经１％胰酶处理后能凝集鸡红细胞，且于接种后７２～９６ｈ的活胚尿囊液血凝价较高；能干扰新城疫在鸡胚中的增殖；鸡胚半数感染量ＭＫ－６为１０７７５／ｍｌ、ＭＧ－６为１０７５／ｍｌ。 展开更多

关键词 鸡病 肾型传染性 支气管炎病毒 分离 生物学特性

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分泌抗鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

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作者 张春红 廖明 +4 位作者 杜伟贤 辛朝安 黄忠 宋长绪 杨傲冰 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1998年第12期5-7,共3页

利用超速离心纯化的鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）广东地方分离株Ｄ４１免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。取脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞进行融合，经筛选及克隆，成功地建立了６株可分泌抗ＩＢＶＤ４１株的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细... 利用超速离心纯化的鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）广东地方分离株Ｄ４１免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。取脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞进行融合，经筛选及克隆，成功地建立了６株可分泌抗ＩＢＶＤ４１株的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞：Ｂ５、Ｂ８、Ｃ７、Ｄ８、Ｄ９、Ｇ１１。其中Ｂ８、Ｃ７、Ｇ１１的稳定性最好，腹水ＭｃＡｂ效价高达１０１０，无血清培养上清ＭｃＡｂ（浓缩３０倍）效价达４×１０４以上。６株杂交瘤细胞的特异性均很好。 展开更多

关键词 鸡 传染性支气管炎 病毒 单克隆抗体 杂交瘤细胞

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