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实时荧光LAMP技术快速检测变形杆菌
被引量：
4
1
作者
马桂芬
张蕴哲
+4 位作者
付博宇
袁耀武
苑宁
王鑫
张伟
《食品研究与开发》
CAS
北大核心
2016年第11期127-132,共6页
建立一种快速检测变形杆菌的方法。采用实时荧光LAMP(Real Amp)技术检测变形杆菌,分析Gen Bank中公布的变形杆菌atp D基因序列,针对其6个区域设计4条引物,利用实时荧光监测仪等温(62℃)扩增模板DNA,通过与电脑相连进行实时监测,对该方...
建立一种快速检测变形杆菌的方法。采用实时荧光LAMP(Real Amp)技术检测变形杆菌,分析Gen Bank中公布的变形杆菌atp D基因序列,针对其6个区域设计4条引物,利用实时荧光监测仪等温(62℃)扩增模板DNA,通过与电脑相连进行实时监测,对该方法检测变形杆菌的特异性、灵敏度、人工污染猪肉检出限等方面进行研究,并将该检测法的灵敏度与普通环介导等温扩增(LAMP)检测法进行比较。结果表明,Real Amp检测方法比普通LAMP检测方法更加方便快捷,20 min内即可判定结果;用于特异性试验的19株试验菌株中,6株变形杆菌呈阳性结果,其他13株非变形杆菌均呈阴性结果;检测纯菌的灵敏度为8.1CFU/m L,是普通LAMP检测方法的10倍;人工污染猪肉的检出限为81CFU/m L。本研究建立的Real Amp检测方法操作简单,耗时短,特异性强、灵敏度高,能够实现对变形杆菌的快速检测。
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关键词
实时荧光LAMP
LAMP
变形杆菌
检测
atpd基因
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职称材料
实时荧光定量PCR法鉴定婴幼儿配方乳粉中动物双歧杆菌乳亚种
被引量：
1
2
作者
王青龙
貌达
+9 位作者
周燕霞
李爽
王雨婷
杨霞
冉令辉
李庆尧
王凯毅
汤娱涵
丁珊珊
蔡雪凤
《中国酿造》
CAS
北大核心
2022年第6期224-230,共7页
该研究通过系统发育树分析确定目标基因,并设计引物和探针,建立一种婴幼儿配方乳粉中动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacterium animalis subsp.lactis)的实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-fqPCR)鉴定方法。通过特异性、灵敏性和抗干扰实验对...
该研究通过系统发育树分析确定目标基因,并设计引物和探针,建立一种婴幼儿配方乳粉中动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacterium animalis subsp.lactis)的实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-fqPCR)鉴定方法。通过特异性、灵敏性和抗干扰实验对该方法进行验证,并对市售的64份标识含有动物双歧杆菌乳亚种的婴幼儿配方乳粉样品进行检测。结果表明,atpD基因在动物双歧杆菌乳亚种间具有较高的种间特异性,种间差异率>10%,确定其为目标基因。基于该基因建立的RT-fqPCR方法能够特异性的检测动物双歧杆菌乳亚种,检测绝对灵敏度可以达到1 pg/μL,相对灵敏度可以达到10^(3) CFU/mL;基因水平和培养物水平抗干扰能力良好。采用该方法从64份标识含有动物双歧杆菌乳亚种的乳粉样品中均能检测出动物双歧杆菌乳亚种,表明基于atpD基因建立的RT-fqPCR方法能够快速准确的对动物双歧杆菌乳亚种进行检测。
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关键词
实时荧光定量PCR
动物双歧杆菌乳亚种
atpd基因
鉴定
婴幼儿配方乳粉
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职称材料
题名
实时荧光LAMP技术快速检测变形杆菌
被引量：
4
1
作者
马桂芬
张蕴哲
付博宇
袁耀武
苑宁
王鑫
张伟
机构
河北农业大学食品科技学院
河北农业大学理工学院
出处
《食品研究与开发》
CAS
北大核心
2016年第11期127-132,共6页
基金
河北省自然科学基金项目(C2008000216)
文摘
建立一种快速检测变形杆菌的方法。采用实时荧光LAMP(Real Amp)技术检测变形杆菌,分析Gen Bank中公布的变形杆菌atp D基因序列,针对其6个区域设计4条引物,利用实时荧光监测仪等温(62℃)扩增模板DNA,通过与电脑相连进行实时监测,对该方法检测变形杆菌的特异性、灵敏度、人工污染猪肉检出限等方面进行研究,并将该检测法的灵敏度与普通环介导等温扩增(LAMP)检测法进行比较。结果表明,Real Amp检测方法比普通LAMP检测方法更加方便快捷,20 min内即可判定结果;用于特异性试验的19株试验菌株中,6株变形杆菌呈阳性结果,其他13株非变形杆菌均呈阴性结果;检测纯菌的灵敏度为8.1CFU/m L,是普通LAMP检测方法的10倍;人工污染猪肉的检出限为81CFU/m L。本研究建立的Real Amp检测方法操作简单,耗时短,特异性强、灵敏度高,能够实现对变形杆菌的快速检测。
关键词
实时荧光LAMP
LAMP
变形杆菌
检测
atpd基因
Keywords
RealAmp
LAMP
proteus
detection
atpd
分类号
TS207.4 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
实时荧光定量PCR法鉴定婴幼儿配方乳粉中动物双歧杆菌乳亚种
被引量：
1
2
作者
王青龙
貌达
周燕霞
李爽
王雨婷
杨霞
冉令辉
李庆尧
王凯毅
汤娱涵
丁珊珊
蔡雪凤
机构
北京食品安全监控和风险评估中心(北京市食品检验所)
中国计量科学研究院化学计量与分析科学研究所
出处
《中国酿造》
CAS
北大核心
2022年第6期224-230,共7页
基金
国家市场监督管理总局科技计划项目(2019MK004)。
文摘
该研究通过系统发育树分析确定目标基因,并设计引物和探针,建立一种婴幼儿配方乳粉中动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacterium animalis subsp.lactis)的实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-fqPCR)鉴定方法。通过特异性、灵敏性和抗干扰实验对该方法进行验证,并对市售的64份标识含有动物双歧杆菌乳亚种的婴幼儿配方乳粉样品进行检测。结果表明,atpD基因在动物双歧杆菌乳亚种间具有较高的种间特异性,种间差异率>10%,确定其为目标基因。基于该基因建立的RT-fqPCR方法能够特异性的检测动物双歧杆菌乳亚种,检测绝对灵敏度可以达到1 pg/μL,相对灵敏度可以达到10^(3) CFU/mL;基因水平和培养物水平抗干扰能力良好。采用该方法从64份标识含有动物双歧杆菌乳亚种的乳粉样品中均能检测出动物双歧杆菌乳亚种,表明基于atpD基因建立的RT-fqPCR方法能够快速准确的对动物双歧杆菌乳亚种进行检测。
关键词
实时荧光定量PCR
动物双歧杆菌乳亚种
atpd基因
鉴定
婴幼儿配方乳粉
Keywords
real-time fluorescence quantitative PCR
Bifidobacterium animalis subsp.lactis
atpd
gene
infant formula milk powder
identification
分类号
Q93-331 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
实时荧光LAMP技术快速检测变形杆菌
马桂芬
张蕴哲
付博宇
袁耀武
苑宁
王鑫
张伟
《食品研究与开发》
CAS
北大核心
2016
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
实时荧光定量PCR法鉴定婴幼儿配方乳粉中动物双歧杆菌乳亚种
王青龙
貌达
周燕霞
李爽
王雨婷
杨霞
冉令辉
李庆尧
王凯毅
汤娱涵
丁珊珊
蔡雪凤
《中国酿造》
CAS
北大核心
2022
1
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职称材料
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