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鸡蛋中氟苯尼考残留的AlphaLISA检测方法的建立
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作者 孙志文 王忠 +5 位作者 于莹 赵营 张晶晶 魏紫嫣 方芳 马立才 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第4期11-19,共9页
本试验旨在建立可检测鸡蛋中氟苯尼考(FF)残留的均相光激化学发光免疫分析方法(AlphaLISA)。通过化学方法合成FF生物素半抗原,利用O-羧甲基羟胺法偶联FF抗体与受体微球,通过筛选确定鸡蛋样品稀释倍数,采用棋盘法确定FF抗体标记受体微球... 本试验旨在建立可检测鸡蛋中氟苯尼考(FF)残留的均相光激化学发光免疫分析方法(AlphaLISA)。通过化学方法合成FF生物素半抗原,利用O-羧甲基羟胺法偶联FF抗体与受体微球,通过筛选确定鸡蛋样品稀释倍数,采用棋盘法确定FF抗体标记受体微球和FF生物素半抗原的浓度,最后基于FF抗体标记受体微球、FF生物素半抗原和链霉亲和素修饰供体微球,优化建立了检测鸡蛋中FF残留的AlphaLISA检测方法,并评价其灵敏度、特异性、准确性和重复性,及与国家标准方法GB 31658.20—2022《动物性食品中酰胺醇类药物及其代谢物残留量的测定液相色谱-串联质谱法》的一致性。质谱分析结果显示,FF生物素半抗原与目标分子的分子量一致(636 Da)。经评估,鸡蛋样品离心上清液采用25倍稀释方案。建立的AlphaLISA方法对鸡蛋中FF的检测限为0.57μg/kg,定量限为0.92μg/kg;添标回收率介于87.00%~99.50%,日内和日间变异系数均低于5%;与氟苯尼考胺的交叉反应率较高(93.27%),与12种常见兽药的交叉反应率极低(<0.1%);与国家标准方法比较,2种方法在5个添加浓度点的检测结果高度一致(R2=0.997)。结果表明,本试验建立的AlphaLISA具有高灵敏度、准确性、重复性和操作简便等优点,适用于鸡蛋中FF残留的快速检测,为鸡蛋安全监测提供了高效且可行的方案。 展开更多
关键词 鸡蛋 氟苯尼考 均相光激化学发光免疫分析方法(alphalisa) 半抗原
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