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毕赤酵母Ku70基因缺失对(-)-α-红没药醇合成的影响
1
作者
蒋雨红
邱世骥
+4 位作者
胡蝶
周培鹏
廖清
刘文宗
胡晓清
《食品与发酵工业》
北大核心
2025年第15期9-14,共6页
(-)-α-红没药醇[(-)-α-bisabolol,BO]具有抗炎、抗菌和改善皮肤的作用,在制药和化妆品等领域应用广泛,因此BO的微生物合成具有重要前景。目前在大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、解脂耶氏酵母和酿酒酵母均有BO合成报道,其代谢工程改造策略包括...
(-)-α-红没药醇[(-)-α-bisabolol,BO]具有抗炎、抗菌和改善皮肤的作用,在制药和化妆品等领域应用广泛,因此BO的微生物合成具有重要前景。目前在大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、解脂耶氏酵母和酿酒酵母均有BO合成报道,其代谢工程改造策略包括:强化甲羟戊酸途径和β-氧化途径、提高乙酰辅酶A供给、弱化竞争途径等。基于此,该研究首次在毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中合成BO,并评价了敲除Ku70(编码非同源末端连接的DNA修复)这一新策略对BO合成的影响。首先将MrBBs(编码BO合成酶)转化GS115,构建GS115/pPICZ A-MrBBs,添加正十二烷进行两相培养,132 h后BO合成量达到3.11 mg/L;然后利用pPpT4质粒敲除GS115的Ku70基因,获得GS115ΔKu70,并构建GS115ΔKu70/pPICZ A-MrBBs,培养132 h后,BO的产量相较GS115/pPICZ A-MrBBs增加了15.95倍,达到83.22 mg/L,显示Ku70基因缺失可显著提高BO合成。该研究显示P.pastoris具有合成BO的潜力,Ku70缺失可大幅提升BO合成水平,为进一步代谢工程改造奠定了坚实基础。
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关键词
毕赤酵母
(-)-α-
红
没药
醇
敲除
KU70
MrBBs
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职称材料
Alpha-bisabolol逆转ABCB1介导的肿瘤多药耐药及机制
被引量：
1
2
作者
侯鑫妤
于涛
+6 位作者
刘保杰
邵旭龙
尚子临
林瑞惠
陆永正
王国辉
冯卫国
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第11期968-975,共8页
目的研究alpha-红没药醇(alpha-bisabolol)是否能有效逆转ATP结合盒转运体B1(ABCB1)介导的肿瘤多药耐药(MDR)并探讨其机制。方法应用网络药理学技术分析仙鹤草(Agrimonia Eupatoria)的活性成分,预测其靶基因,并进行基因本体论(GO)与京...
目的研究alpha-红没药醇(alpha-bisabolol)是否能有效逆转ATP结合盒转运体B1(ABCB1)介导的肿瘤多药耐药(MDR)并探讨其机制。方法应用网络药理学技术分析仙鹤草(Agrimonia Eupatoria)的活性成分,预测其靶基因,并进行基因本体论(GO)与京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析。进一步通过分子对接及热稳定性实验分析alpha-bisabolol和ABCB1的互作。通过MTT法检测alpha-bisabolol能否有效逆转ABCB1介导的肿瘤MDR。通过Western blot法、免疫荧光与流式细胞术研究alpha-bisabolol逆转ABCB1介导肿瘤MDR的机制。结果网络药理学实验结果表明,Agrimonia Eupatoria的活性成分alpha-bisabolol与肿瘤的发生密切相关。分子对接及热稳定性实验结果显示,alpha-bisabolol能够与ABCB1形成稳定的结合。逆转实验结果表明,alpha-bisabolol能够有效逆转ABCB1介导的肿瘤MDR。此外,机制实验结果显示,alpha-bisabolol对肿瘤细胞内ABCB1蛋白的表达及定位并不产生影响。alpha-bisabolol通过抑制ABCB1蛋白的外排功能,提高了细胞内药物的蓄积水平,从而有效逆转肿瘤MDR。结论alpha-bisabolol能够有效逆转ABCB1介导的肿瘤MDR,为化疗耐药的肿瘤患者提供了一种新的治疗策略。
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关键词
alpha-红没药醇
ATP结合盒转运体B1(ABCB1)
多药耐药(MDR)
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职称材料
题名
毕赤酵母Ku70基因缺失对(-)-α-红没药醇合成的影响
1
作者
蒋雨红
邱世骥
胡蝶
周培鹏
廖清
刘文宗
胡晓清
机构
江南大学生物工程学院
广州华酵生物科技有限公司
出处
《食品与发酵工业》
北大核心
2025年第15期9-14,共6页
基金
国家重点研发计划政府间国际科技创新合作项目(2023YFE0104400)。
文摘
(-)-α-红没药醇[(-)-α-bisabolol,BO]具有抗炎、抗菌和改善皮肤的作用,在制药和化妆品等领域应用广泛,因此BO的微生物合成具有重要前景。目前在大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、解脂耶氏酵母和酿酒酵母均有BO合成报道,其代谢工程改造策略包括:强化甲羟戊酸途径和β-氧化途径、提高乙酰辅酶A供给、弱化竞争途径等。基于此,该研究首次在毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中合成BO,并评价了敲除Ku70(编码非同源末端连接的DNA修复)这一新策略对BO合成的影响。首先将MrBBs(编码BO合成酶)转化GS115,构建GS115/pPICZ A-MrBBs,添加正十二烷进行两相培养,132 h后BO合成量达到3.11 mg/L;然后利用pPpT4质粒敲除GS115的Ku70基因,获得GS115ΔKu70,并构建GS115ΔKu70/pPICZ A-MrBBs,培养132 h后,BO的产量相较GS115/pPICZ A-MrBBs增加了15.95倍,达到83.22 mg/L,显示Ku70基因缺失可显著提高BO合成。该研究显示P.pastoris具有合成BO的潜力,Ku70缺失可大幅提升BO合成水平,为进一步代谢工程改造奠定了坚实基础。
关键词
毕赤酵母
(-)-α-
红
没药
醇
敲除
KU70
MrBBs
Keywords
Pichia pastoris
(-)-α-bisabolol
knockout
Ku70
MrBBs
分类号
TQ920.1 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
Alpha-bisabolol逆转ABCB1介导的肿瘤多药耐药及机制
被引量：
1
2
作者
侯鑫妤
于涛
刘保杰
邵旭龙
尚子临
林瑞惠
陆永正
王国辉
冯卫国
机构
山东第二医科大学生命科学与技术学院细胞生物学教研室
柳州市中医医院检验科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第11期968-975,共8页
基金
国家自然科学基金(81802905)
山东省自然科学基金(ZR2020MH263)。
文摘
目的研究alpha-红没药醇(alpha-bisabolol)是否能有效逆转ATP结合盒转运体B1(ABCB1)介导的肿瘤多药耐药(MDR)并探讨其机制。方法应用网络药理学技术分析仙鹤草(Agrimonia Eupatoria)的活性成分,预测其靶基因,并进行基因本体论(GO)与京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析。进一步通过分子对接及热稳定性实验分析alpha-bisabolol和ABCB1的互作。通过MTT法检测alpha-bisabolol能否有效逆转ABCB1介导的肿瘤MDR。通过Western blot法、免疫荧光与流式细胞术研究alpha-bisabolol逆转ABCB1介导肿瘤MDR的机制。结果网络药理学实验结果表明,Agrimonia Eupatoria的活性成分alpha-bisabolol与肿瘤的发生密切相关。分子对接及热稳定性实验结果显示,alpha-bisabolol能够与ABCB1形成稳定的结合。逆转实验结果表明,alpha-bisabolol能够有效逆转ABCB1介导的肿瘤MDR。此外,机制实验结果显示,alpha-bisabolol对肿瘤细胞内ABCB1蛋白的表达及定位并不产生影响。alpha-bisabolol通过抑制ABCB1蛋白的外排功能,提高了细胞内药物的蓄积水平,从而有效逆转肿瘤MDR。结论alpha-bisabolol能够有效逆转ABCB1介导的肿瘤MDR,为化疗耐药的肿瘤患者提供了一种新的治疗策略。
关键词
alpha-红没药醇
ATP结合盒转运体B1(ABCB1)
多药耐药(MDR)
Keywords
alpha-
bisabolol
ATP binding cassette subfamily B member 1(ABCB1)
multidrug resistance(MDR)
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
R932 [医药卫生—生药学]
R730.52 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
毕赤酵母Ku70基因缺失对(-)-α-红没药醇合成的影响
蒋雨红
邱世骥
胡蝶
周培鹏
廖清
刘文宗
胡晓清
《食品与发酵工业》
北大核心
2025
0
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职称材料
2
Alpha-bisabolol逆转ABCB1介导的肿瘤多药耐药及机制
侯鑫妤
于涛
刘保杰
邵旭龙
尚子临
林瑞惠
陆永正
王国辉
冯卫国
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024
1
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职称材料
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