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豆荚特异性启动子Pmsg的克隆及抗大豆食心虫植物表达载体的构建 被引量:6
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作者 吴书音 郭玉双 +4 位作者 柏锡 李杰 才华 李勇 朱延明 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2008年第3期58-63,共6页
植物基因工程载体构建时,一般采用组成型启动子,因涉及转基因食品安全性问题,在社会上引起争议。采用组织特异性启动子代替组成型启动子,既可调控下游基因的表达又能解决转基因食品安全性问题。采用同源克隆方法从栽培大豆绥农14中克隆... 植物基因工程载体构建时,一般采用组成型启动子,因涉及转基因食品安全性问题,在社会上引起争议。采用组织特异性启动子代替组成型启动子,既可调控下游基因的表达又能解决转基因食品安全性问题。采用同源克隆方法从栽培大豆绥农14中克隆了2 278 bp的豆荚特异性启动子Pmsg,与GenBank上的大豆msg基因启动子序列相似性为99%。构建了由启动子Pmsg调控经人工改造、具有抗大豆食心虫功能的基因(Cry1Iem)的表达载体pBMBt,以及由种子特异性启动子PGy2调控Cry1Iem基因的表达载体pBGBt,为抗大豆食心虫基因工程研究奠定了重要基础。 展开更多
关键词 抗大豆食心虫 豆荚特异性启动子克隆 种子特异性启动子 Cryllem基因 组织特异性植物表达栽体
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β乳球蛋白基因(βlg)的表达调控及其应用 被引量:2
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作者 刘建喜 林爱星 +1 位作者 周云 陈永福 《生物技术通报》 CAS CSCD 2001年第3期23-27,共5页
β乳球蛋白 (BLG)是反刍动物乳汁中的主要乳清蛋白 ,BLG表达受到 βlg核心启动子、LCR、MAR等顺式作用元件和激素、转录因子等反式作用因子的调控。利用 βlg启动子已在乳腺成功表达外源基因 ,但乳腺组织特异性表达外源基因时尚存在异... β乳球蛋白 (BLG)是反刍动物乳汁中的主要乳清蛋白 ,BLG表达受到 βlg核心启动子、LCR、MAR等顺式作用元件和激素、转录因子等反式作用因子的调控。利用 βlg启动子已在乳腺成功表达外源基因 ,但乳腺组织特异性表达外源基因时尚存在异位表达、差异表达、表达水平低和表达受位置效应影响等问题。构建表达载体时充分考虑 βlg启动子和远端调控元件 ,有可能使外源基因获得稳定、高效、特异的表达。 展开更多
关键词 β乳球蛋白基因 表达调控 乳腺组织 特异性表达 表达载体
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花药特异表达基因TaRAFTIN1a启动子的克隆及表达载体构建 被引量:1
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作者 赵纯钦 徐登安 +1 位作者 陈静 余懋群 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第1期1-5,共5页
组织特异性启动子是植物基因工程改良的重要工具。RAFTIN是禾本科植物花药绒毡层中特异积累与花药发育相关的蛋白,其调控序列可能提供一个很好来源的花药特异性表达启动子。为了解小麦TaRAFTIN1a基因启动子的花药表达特异性,本研究分离... 组织特异性启动子是植物基因工程改良的重要工具。RAFTIN是禾本科植物花药绒毡层中特异积累与花药发育相关的蛋白,其调控序列可能提供一个很好来源的花药特异性表达启动子。为了解小麦TaRAFTIN1a基因启动子的花药表达特异性,本研究分离了TaRAFTIN1a基因的启动子,生物信息学分析表明,该启动子含有3种花药特异表达元件(总计10个),1个ABRE脱落酸响应元件,TGACG-motif与CGTCA-motif茉莉酸甲酯响应元件各1个,8个ARR1AT细胞分裂素响应元件,以及2个DRE和1个MBS干旱响应元件。采用5'端缺失的方法,分别克隆1429、898和351 bp的启动子片段,经连接、转化与鉴定,构建了3个含TaRAFTIN1a启动子不同区段融合GUS报告基因的植物表达载体,p WAER1,p WAER2,p WAER3,为通过转基因了解启动子的表达特征及其核心作用元件奠定了基础。 展开更多
关键词 普通小麦 花药特异表达启动子 启动子分析 载体构建
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小鼠adiponectin的甲基化敏感性检测及其启动子克隆 被引量:1
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作者 许登高 张敏 +1 位作者 曲贞晓 潘庆杰 《青岛农业大学学报(自然科学版)》 2013年第1期6-10,共5页
本试验通过对脂肪组织特异表达的脂肪因子adiponectin调控区域4个CpG位点在心、肝、脾、肺、肾、骨骼肌、腹脂、内脏脂肪中的甲基化程度以及adiponectin mRNA表达水平的检测,表明adiponectin在mRNA水平的表达与其调控位点的甲基化程度... 本试验通过对脂肪组织特异表达的脂肪因子adiponectin调控区域4个CpG位点在心、肝、脾、肺、肾、骨骼肌、腹脂、内脏脂肪中的甲基化程度以及adiponectin mRNA表达水平的检测,表明adiponectin在mRNA水平的表达与其调控位点的甲基化程度显著相关;同时采用PCR技术克隆了小鼠脂肪组织特异表达的脂联素的启动子,通过DNA重组技术将该基因的启动子重组于pEGFP-N1真核表达载体上,构建pEGFP-N1-P(adi)重组质粒,通过分子克隆测序方法对重组质粒进行鉴定,并转染小鼠前脂肪细胞,通过荧光素酶活性检测表明P(adi)具备驱动报告基因表达的活性,为今后制备转基因动物的研究奠定基础。 展开更多
关键词 脂肪组织特异表达载体 转基因动物 甲基化敏感型
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水稻低Cd累积相关基因RNA干扰载体及根特异性表达载体的构建 被引量:2
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作者 陈煜娴 冯珊珊 +1 位作者 柴兴苹 柴团耀 《中国科学院大学学报(中英文)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期185-191,共7页
Cd极易被水稻等作物吸收并伴随食物链在人体内累积,严重威胁人类健康.基于水稻Cd累积机制的现有研究,克隆与水稻Cd累积相关的基因Os LCD和Os HMA3,并克隆一个维管组织特异性表达的启动子Os MTP11P,利用Gateway技术及传统酶切、连接方法... Cd极易被水稻等作物吸收并伴随食物链在人体内累积,严重威胁人类健康.基于水稻Cd累积机制的现有研究,克隆与水稻Cd累积相关的基因Os LCD和Os HMA3,并克隆一个维管组织特异性表达的启动子Os MTP11P,利用Gateway技术及传统酶切、连接方法,成功构建适用于水稻等单子叶植物农杆菌转化的RNA干扰载体pRI-M-LCD和根特异性表达载体p CB2022-H.期望通过这2个载体共转化水稻,使大量的Cd扣留在根细胞的液泡中,限制Cd向地上部分及籽粒中的转运,从而实现Cd在水稻籽粒中的低累积. 展开更多
关键词 水稻 RNA干扰 组织特异性表达 低镉累积 多基因转化 载体构建
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脂肪组织特异性表达载体的构建
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作者 华晓敏 许登高 潘庆杰 《青岛农业大学学报(自然科学版)》 2012年第2期84-88,共5页
采用PCR技术克隆了小鼠脂肪组织特异表达的脂肪酸结合蛋白ap2基因增强子和启动子,通过DNA重组技术将该基因增强子和启动子重组于pEGFP-N1真核表达载体上,构建pEGFP-N1-ap2重组质粒,通过PCR扩增、酶切电泳分析和测序的方法对重组质粒进... 采用PCR技术克隆了小鼠脂肪组织特异表达的脂肪酸结合蛋白ap2基因增强子和启动子,通过DNA重组技术将该基因增强子和启动子重组于pEGFP-N1真核表达载体上,构建pEGFP-N1-ap2重组质粒,通过PCR扩增、酶切电泳分析和测序的方法对重组质粒进行鉴定,并转染小鼠前脂肪细胞,通过荧光素酶活性检测特异性表达强度。结果表明,本实验克隆的ap2基因增强子和启动子的碱基组成与GenBank中的ap2基因序列完全一致,通过DNA重组技术将该基因增强子和启动子重组于pEGFP-N1真核表达载体上,成功构建了脂肪组织特异表达的重组质粒。为以后的转基因动物的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 脂肪组织特异表达载体 增强子 启动子 ap2
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pACTE3质粒的构建及其在转基因烟草中的表达
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作者 尹岚 李学宝 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期498-502,共5页
将1个从棉花中分离的新的启动子ACTE3插入质粒pBI101,ACTE3与GUS基因融合,构建成pACTE3表达载体.通过农杆菌介导转化法将ACTE3/GUS融合基因导入烟草.GUS组织化学染色分析表明,在ACTE3启动子控制下,GUS基因仅在叶片及茎等组织中特异表达.
关键词 pACTE3质粒 转基因烟草 ACTE3启动子 载体构建 组织特异性表达 植物基因工程 基因表达
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