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题名原代大鼠主动脉血管干细胞的体外培养扩增及鉴定
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作者
马华根
黄燕
杨盈欣
刘海琴
唐元瑜
丛伟红
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机构
中国中医科学院西苑医院
北京中医药大学中医学院
海军军医大学上海长征医院
福建中医药大学中医学院
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出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第10期1881-1886,共6页
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基金
国家自然科学基金(81973594)。
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文摘
目的采用“切段外膜贴壁培养法”体外培养扩增出原代大鼠主动脉血管干细胞,为开展血管重构及相关疾病研究提供实用的工具细胞。方法无菌分离2~3周龄Sprague-Dawley大鼠胸腹主动脉,切成长约2.0 mm的血管节段,均匀种瓶,经外膜贴壁固化后进行原代培养,待细胞生长融合度达80%~90%时传代。镜下观察细胞形态及其生长特性,采用流式细胞仪分析目的细胞表面标志物CD分子表达情况,成脂、成骨诱导分化实验检测其多向分化潜能。结果接种3 d后,少量梭形、星形或多角形的细胞从血管节段周围爬出;5~6 d后形成岛屿状细胞集落,细胞增殖迅速,呈放射状向外扩大,并出现细胞克隆现象;7~8 d后细胞融合成片,呈涡旋状分布;传至第3代后,细胞匀质性较高,表现为典型的“成纤维样”排列生长。流式细胞仪分析细胞主要表达CD44、CD73、CD90,阳性率分别为80.3%、62.2%、46.8%;低表达CD34、CD45、CD11b/c,阳性率分别为1.1%、0.2%、0.2%。体外诱导分化实验表明目的细胞具有成脂、成骨分化潜能。结论“切段外膜贴壁培养法”可成功分离培养出具有间充质干细胞特性的大鼠主动脉血管干细胞。
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关键词
血管干细胞
主动脉
切段外膜贴壁培养法
原代培养
免疫表型
分化潜能
血管重构
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Keywords
vascular stem cells
aorta
adherent culture of the segmented outer membrane
primary culture
immunophenotype
differentiation potential
vascular remodeling
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分类号
R318
[医药卫生—生物医学工程]
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