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MicroRNA-29a-3p调控转化生长因子β1诱导的人角膜基质细胞的肌成纤维细胞转化 被引量:5
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作者 李凌菡 郝朋 李轩 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第1期44-48,共5页
目的探讨MicroRNA-29a-3p对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人角膜基质细胞肌成纤维细胞转化的影响。方法本实验选用培养至2~4代的人角膜基质细胞,分别设置对照组、TGF-β1组、miR-29a过表达对照+TGF-β1组、miR-29a过表达+TGF-β1组、miR... 目的探讨MicroRNA-29a-3p对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人角膜基质细胞肌成纤维细胞转化的影响。方法本实验选用培养至2~4代的人角膜基质细胞,分别设置对照组、TGF-β1组、miR-29a过表达对照+TGF-β1组、miR-29a过表达+TGF-β1组、miR-29a抑制表达对照+TGF-β1组及miR-29a抑制表达+TGF-β1组。采用TGF-β1体外诱导的人角膜基质细胞向肌成纤维细胞转化,细胞饥饿过夜之后,在无血清的条件下转染miR-29a 24 h;然后以浓度5 ng/mL加入TGF-β1,无血清培养48 h。采用CCK-8法检测细胞活力,采用细胞总RNA提取法提取细胞总RNA,逆转录成cDNA后采用实时荧光定量PCR法检测目的相应指标的表达情况,Western Blot法检测相应蛋白的表达。结果人角膜基质细胞呈多角形,树突状,排列规则。按实验设计处理完细胞之后,各组细胞活性差异无统计学意义(P>0.05),转染效果良好。与对照组比较,TGF-β1组平滑肌肌动蛋白α(αSMA)的mRNA表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.001);与miR-29a过表达对照+TGF-β1组比较,miR-29a过表达+TGF-β1组αSMA mRNA表达有明显下降,差异有统计学意义(P=0.001);与miR-29a抑制表达对照+TGF-β1组比较,miR-29a抑制表达+TGF-β1组αSMAmRNA表达有明显上升,差异有统计学意义(P=0.019)。同时,αSMA在蛋白水平的表达结果可得,对照组与TGF-β1组相比,αSMA的相对表达量显著升高,差异有统计学意义(P<0.001);miR-29a过表达+TGF-β1组与miR-29a过表达对照+TGF-β1组相比αSMA的相对表达量明显降低,差异有统计学意义(P=0.007);而该指标在miR-29a抑制表达+TGF-β1组与miR-29a抑制表达对照+TGF-β1组的比较中增高且差异有统计学意义(P=0.034)。结论MicroRNA-29a对TGF-β1诱导的人角膜基质细胞的肌成纤维细胞转化作用是负性的。 展开更多
关键词 角膜基质细胞 MicroRNa-29a-3p 转化生长因子Β1 肌成纤维细胞转化 平滑肌肌动蛋白α
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种植窗期子宫内膜自然杀伤细胞对内膜血管生成的影响及子宫动脉血流与体外受精胚胎移植结局的相关性 被引量:7
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作者 赵静 罗莉 +6 位作者 王卉芳 闫春芳 李东红 王蕴颖 张平 王丽萍 蔡凤梅 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期385-389,共5页
目的探讨种植窗期子宫内膜自然杀伤细胞(uNK)对血管生成的影响及子宫动脉血流与胚胎种植的相关性。方法选择年龄小于35岁行体外受精-胚胎移植患者30例,检测种植窗期子宫动脉搏动指数,收集种植窗期子宫内膜,免疫组化SP法检测子宫内膜uNK... 目的探讨种植窗期子宫内膜自然杀伤细胞(uNK)对血管生成的影响及子宫动脉血流与胚胎种植的相关性。方法选择年龄小于35岁行体外受精-胚胎移植患者30例,检测种植窗期子宫动脉搏动指数,收集种植窗期子宫内膜,免疫组化SP法检测子宫内膜uNK细胞标记物CD56+、血管内皮细胞标记物F8因子及内膜血管平滑肌细胞标记物α-平滑肌肌动蛋白(αSMA)、重链肌球蛋白(SMM)的表达、定位。随访助孕结局,根据是否临床妊娠及至少有2次或2次以上的体外受精-胚胎移植助孕失败史,分为妊娠组和反复种植失败组。结果①uNK细胞的阳性表达率与F8因子的阳性表达率呈正相关(r=0.581,P<0.01)。②uNK细胞的阳性表达率与αSMA、SMM的阳性表达率呈正相关(r=0.572,r=0.569,P<0.01)。③反复种植失败组和妊娠组子宫动脉搏动指数分别为(0.85±1.51;0.93±0.24),差异无统计学意义(t=-0.98,P>0.05)。结论①人种植窗期子宫内膜uNK细胞与微血管密度、血管成熟度呈正相关,提示uNK细胞在种植窗期子宫内膜血管生成中起重要作用;②子宫动脉搏动指数对胚胎移植结局的影响,妊娠组和反复种植失败组之间无统计学差异,有待进一步探讨。 展开更多
关键词 UNK细胞 种植窗期 F8因子 a-平滑肌肌动蛋白(asma) 重链肌球蛋白(SMM) 体外受精
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肾衰冲剂对大鼠残余肾系膜细胞重塑的影响 被引量:6
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作者 高建东 何立群 郑平东 《辽宁中医杂志》 CAS 2001年第6期344-345,共2页
目的 :研究 5 / 6肾切除大鼠残余肾系膜细胞重塑时α SMA的变化 ,进一步探讨肾衰冲剂治疗“慢肾衰”的作用机制。方法 :应用免疫组化技术检测大鼠残余肾系膜细胞内α SMA的表达情况和细胞外基质 (ECM )的变化。结果 :残余肾未硬化区肾... 目的 :研究 5 / 6肾切除大鼠残余肾系膜细胞重塑时α SMA的变化 ,进一步探讨肾衰冲剂治疗“慢肾衰”的作用机制。方法 :应用免疫组化技术检测大鼠残余肾系膜细胞内α SMA的表达情况和细胞外基质 (ECM )的变化。结果 :残余肾未硬化区肾小球系膜细胞内α SMA表达明显增强 (2 45± 0 36 ) ,硬化区肾小球α SMA表达降低(0 37± 0 0 8) ,经肾衰冲剂治疗后增高的α SMA表达下调 (1 92± 0 31) ,细胞外基质fibronectin、collagen Ⅳ含量减少 ,肾小球硬化指数下降 (2 5 7± 0 35→ 1 6 3± 0 2 4)。结论 :α SMA可作为系膜细胞重塑的标志 。 展开更多
关键词 a-SMA a-平滑肌肌动蛋白 系膜细胞 细胞重塑 肾衰冲剂 中医药治疗 大鼠
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结缔组织生长因子在晶状体上皮细胞转分化和细胞外基质合成中的作用 被引量:3
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作者 马波 裴澄 +3 位作者 康前雁 秦莉 张小玲 崔丽珺 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期773-778,共6页
目的探讨结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在人晶状体上皮细胞(human lens epithelium cells,HLECs)转分化和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)合成中的作用。方法采用不同质量浓度CTGF(0、5、15、30、60μg... 目的探讨结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在人晶状体上皮细胞(human lens epithelium cells,HLECs)转分化和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)合成中的作用。方法采用不同质量浓度CTGF(0、5、15、30、60μg/L)对体外培养的人晶状体上皮细胞诱导24h,倒置显微镜下观察细胞形态的变化,免疫荧光法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在细胞中的表达,Real-time PCR和Western blot方法检测α-SMA、Ⅰ型胶原纤维(COL-I)和纤维连接蛋白(Fn)的表达。结果正常人晶状体上皮细胞为多角形贴壁细胞,不同浓度CTGF诱导24h后,晶状体上皮细胞由单层多角形变为长梭形,细胞间隙变大,呈纤维细胞样改变。CTGF可诱导α-SMA在HLECs胞质表达。CTGF能促进HLECsα-SMA、Fn、COL-I蛋白和mRNA的表达,且这种作用随CTGF浓度的增加而增强(P<0.05)。结论 CTGF能促进人晶状体上皮细胞转分化及CEM的合成。 展开更多
关键词 结缔组织生长因子 晶状体上皮细胞 后囊膜混浊 a-平滑肌肌动蛋白(a-SMA) I型胶原纤维(COL—I) 纤维连接蛋白(Fn)
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