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题名Zic3基因在小梅山猪骨髓间充质干细胞中的表达
被引量：1
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作者
樊懿萱
王强
王锋
张艳丽
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机构
南京农业大学江苏省家畜胚胎工程实验室
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出处
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第5期111-116,共6页
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基金
国家自然科学基金青年基金项目(31201802)
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文摘
构建含有Zic3基因的真核表达载体pEGFP-Zic3,并转染小梅山猪骨髓间充质干细胞(BMSC),观察BMSC中Zic3的表达情况。用RT-PCR技术获得Zic3基因,并将其连接到真核表达载体pEGFP-C1中,获得真核表达载体质粒pEGFP-Zic3,采用双酶切法和DNA测序鉴定构建的载体是否正确。体外培养小梅山猪BMSC,通过免疫细胞化学法检测小梅山猪BMSC表面标志。采用脂质体法将pEGFP-Zic3转染BMSC,通过荧光显微镜观察确定重组质粒在小梅山猪BMSC内的表达和定位,用RT-PCR法检测Zic3的表达情况,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡情况。双酶切和测序证实已成功构建含目的基因Zic3的真核表达载体pEGFP-Zic3;小梅山猪BMSC体外培养状态良好,且表达CD29,不表达CD34和CD45;pEGFP-Zic3转染BMSC后可见大量绿色荧光,与对照组相比,转Zic3基因BMSC增殖能力提高,但细胞凋亡率未发生明显变化。结论:成功构建了含目的基因Zic3的真核表达载体pEGFP-Zic3,并高效转染BMSC,Zic3表达增加,且Zic3可提高细胞增殖能力。
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关键词
zic3基因
小梅山猪
真核表达
骨髓间充质干细胞
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Keywords
zic3 gene
Xiaomeishan swines
eukaryotic expression
bone marrow mesenchymal stem cells （BMSC）
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分类号
S827
[农业科学—畜牧学]
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