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m6A识别蛋白Ythdf3在精子发生中的作用研究
被引量：
5
1
作者
宋小玲
刘媛媛
+1 位作者
王仿竹
沈彬
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第6期846-850,共5页
目的:通过基因敲除模型研究N6-甲基腺嘌呤(m6A)识别蛋白Ythdf3在小鼠精子发生过程的调控作用。方法:利用CRISPR/Cas9技术构建Ythdf3基因敲除小鼠,通过免疫荧光和HE染色对敲除小鼠进行表型分析,研究Ythdf3在调控小鼠精子发生过程中的作...
目的:通过基因敲除模型研究N6-甲基腺嘌呤(m6A)识别蛋白Ythdf3在小鼠精子发生过程的调控作用。方法:利用CRISPR/Cas9技术构建Ythdf3基因敲除小鼠,通过免疫荧光和HE染色对敲除小鼠进行表型分析,研究Ythdf3在调控小鼠精子发生过程中的作用。结果:免疫组化染色显示Ythdf3在精原及各级生精细胞核中均有表达;成功构建Ythdf3基因敲除小鼠模型;HE染色显示Ythdf3敲除小鼠睾丸各级生精时相及附睾尾精子与对照相比无明显异常。结论:在正常生理条件下,敲除Ythdf3不影响雄性小鼠精子发生。
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关键词
CRISPR/Cas9
ythdf3
精子发生
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职称材料
circ_EPHB4协同YTHDF3通过N6-甲基腺苷依赖性稳定Wnt3促进胶质瘤进展
2
作者
金晨
刘景平
+2 位作者
刘博
费喜云
廖宇翔
《南方医科大学学报》
2025年第11期2320-2329,共10页
目的 探讨环状RNA circ_EPHB4在胶质瘤中的促癌作用及其与N6-甲基腺苷(m6A)阅读蛋白YTHDF3协同调控Wnt3信号通路的分子机制。方法 通过芯片分析筛选胶质瘤组织中差异表达的circRNA,利用划痕愈合实验、Transwell侵袭实验及皮下成瘤模型,...
目的 探讨环状RNA circ_EPHB4在胶质瘤中的促癌作用及其与N6-甲基腺苷(m6A)阅读蛋白YTHDF3协同调控Wnt3信号通路的分子机制。方法 通过芯片分析筛选胶质瘤组织中差异表达的circRNA,利用划痕愈合实验、Transwell侵袭实验及皮下成瘤模型,检测circ_EPHB4对胶质瘤细胞迁移、侵袭、上皮-间质转化(EMT)及体内成瘤能力的影响。采用RNA免疫沉淀、RNA稳定性实验及基因过表达/敲低技术,验证circ_EPHB4与YTHDF3对Wnt3表达的协同调控作用。结果 circ_EPHB4在胶质瘤组织中较癌旁组织高表达2.3倍(|log2FC|=1.2,P<0.01),在胶质瘤细胞株U373中表达量达正常细胞的2.5倍(P<0.001)。过表达circ_EPHB4可使胶质瘤细胞划痕愈合率提升至(75.2±6.3)%,较对照组增加78.6%(P<0.01);侵袭细胞数增至215±23个/视野,为对照组2.4倍(P<0.001),并促进EMT标志物N-cadherin和Vimentin的表达(P<0.001)。体内实验显示,过表达组肿瘤体积21 d达1200±150 mm^(3),较对照组增加140%(P<0.001);肺转移灶数6.3±1.2个,为对照组4.2倍(P<0.01)。circ_EPHB4通过上调Wnt3表达(P<0.01)发挥促癌作用,而YTHDF3以m6A依赖性方式延长Wnt3 mRNA半衰期至11.5±1.2 h,较对照组增加40%(P<0.01)。二者协同调控时,同时敲低可使Wnt3 mRNA表达降至单独敲低组的47%(P<0.001)。结论 circ_EPHB4与YTHDF3通过共同靶向Wnt3信号通路促进胶质瘤进展,靶向该协同轴可能为治疗提供新策略。
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关键词
circ_EPHB4
N6-甲基腺苷
ythdf3
Wnt3
胶质瘤
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职称材料
题名
m6A识别蛋白Ythdf3在精子发生中的作用研究
被引量：
5
1
作者
宋小玲
刘媛媛
王仿竹
沈彬
机构
南京医科大学生殖医学国家重点实验室
出处
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第6期846-850,共5页
基金
国家自然科学基金(31622039)
江苏省自然科学基金(BK20160045)
文摘
目的:通过基因敲除模型研究N6-甲基腺嘌呤(m6A)识别蛋白Ythdf3在小鼠精子发生过程的调控作用。方法:利用CRISPR/Cas9技术构建Ythdf3基因敲除小鼠,通过免疫荧光和HE染色对敲除小鼠进行表型分析,研究Ythdf3在调控小鼠精子发生过程中的作用。结果:免疫组化染色显示Ythdf3在精原及各级生精细胞核中均有表达;成功构建Ythdf3基因敲除小鼠模型;HE染色显示Ythdf3敲除小鼠睾丸各级生精时相及附睾尾精子与对照相比无明显异常。结论:在正常生理条件下,敲除Ythdf3不影响雄性小鼠精子发生。
关键词
CRISPR/Cas9
ythdf3
精子发生
Keywords
CRISPR/Cas9
ythdf3
spermatogenesis
分类号
Q492 [生物学—生理学]
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职称材料
题名
circ_EPHB4协同YTHDF3通过N6-甲基腺苷依赖性稳定Wnt3促进胶质瘤进展
2
作者
金晨
刘景平
刘博
费喜云
廖宇翔
机构
中南大学湘雅医院神经外科
出处
《南方医科大学学报》
2025年第11期2320-2329,共10页
基金
湖南省青年自然科学基金(202140998):湖南省自然科学基金(2025JJ50742)。
文摘
目的 探讨环状RNA circ_EPHB4在胶质瘤中的促癌作用及其与N6-甲基腺苷(m6A)阅读蛋白YTHDF3协同调控Wnt3信号通路的分子机制。方法 通过芯片分析筛选胶质瘤组织中差异表达的circRNA,利用划痕愈合实验、Transwell侵袭实验及皮下成瘤模型,检测circ_EPHB4对胶质瘤细胞迁移、侵袭、上皮-间质转化(EMT)及体内成瘤能力的影响。采用RNA免疫沉淀、RNA稳定性实验及基因过表达/敲低技术,验证circ_EPHB4与YTHDF3对Wnt3表达的协同调控作用。结果 circ_EPHB4在胶质瘤组织中较癌旁组织高表达2.3倍(|log2FC|=1.2,P<0.01),在胶质瘤细胞株U373中表达量达正常细胞的2.5倍(P<0.001)。过表达circ_EPHB4可使胶质瘤细胞划痕愈合率提升至(75.2±6.3)%,较对照组增加78.6%(P<0.01);侵袭细胞数增至215±23个/视野,为对照组2.4倍(P<0.001),并促进EMT标志物N-cadherin和Vimentin的表达(P<0.001)。体内实验显示,过表达组肿瘤体积21 d达1200±150 mm^(3),较对照组增加140%(P<0.001);肺转移灶数6.3±1.2个,为对照组4.2倍(P<0.01)。circ_EPHB4通过上调Wnt3表达(P<0.01)发挥促癌作用,而YTHDF3以m6A依赖性方式延长Wnt3 mRNA半衰期至11.5±1.2 h,较对照组增加40%(P<0.01)。二者协同调控时,同时敲低可使Wnt3 mRNA表达降至单独敲低组的47%(P<0.001)。结论 circ_EPHB4与YTHDF3通过共同靶向Wnt3信号通路促进胶质瘤进展,靶向该协同轴可能为治疗提供新策略。
关键词
circ_EPHB4
N6-甲基腺苷
ythdf3
Wnt3
胶质瘤
Keywords
circ_EPHB4
mA
ythdf3
Wnt3
glioma
分类号
R739.41 [医药卫生]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
m6A识别蛋白Ythdf3在精子发生中的作用研究
宋小玲
刘媛媛
王仿竹
沈彬
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2019
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
circ_EPHB4协同YTHDF3通过N6-甲基腺苷依赖性稳定Wnt3促进胶质瘤进展
金晨
刘景平
刘博
费喜云
廖宇翔
《南方医科大学学报》
2025
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