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α干扰素对结肠癌细胞株lovo和sw1116中X染色体连锁凋亡抑制相关因子1表达调节作用 被引量:1
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作者 徐迪晖 王继德 +3 位作者 程天明 姜泊 杨洲 张宇生 《医学研究生学报》 CAS 2007年第12期1242-1244,1247,共4页
目的:研究α干扰素(IFN-α)对结肠癌细胞株lovo和sw1116中X染色体连锁凋亡抑制相关因子1(XAF1)表达调节作用。方法:以不同浓度(250、125、62.5和0 U/ml)的IFN-α作用细胞,荧光素酶报道系统检测IFN-α对XAF1启动子活性的影响,运用逆转录... 目的:研究α干扰素(IFN-α)对结肠癌细胞株lovo和sw1116中X染色体连锁凋亡抑制相关因子1(XAF1)表达调节作用。方法:以不同浓度(250、125、62.5和0 U/ml)的IFN-α作用细胞,荧光素酶报道系统检测IFN-α对XAF1启动子活性的影响,运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质免疫印迹等方法观察IFN-α对XAF1的mRNA和蛋白表达水平的影响。结果:IFN-α可提高XAF1启动子活性,在lovo和sw1116中分别达到61.7%和87.1%(P<0.05),同时在mRNA和蛋白水平上调XAF1表达,并呈剂量依赖关系(P<0.05)。结论:IFN-α可上调XAF1表达,提示XAF1可能是干扰素刺激基因(ISG)。 展开更多
关键词 x染色体连锁抑制相关因子1 抑癌基因 Α干扰素 干扰素刺激基因
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X连锁凋亡抑制蛋白相关因子-1抑制肝癌裸鼠移植瘤生长的研究 被引量:1
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作者 朱黎明 涂水平 +3 位作者 戴强 姚玮艳 乔敏敏 江石湖 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1419-1423,共5页
目的研究X连锁凋亡抑制蛋白相关因子-1(XAF1)基因对人肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法建立人肝癌细胞株SMMC7721裸鼠荷瘤模型,每组5只裸鼠分别在瘤内分3点注射相同感染滴度的重组腺病毒Ad5/F35-XAF1、Ad5/F35-Null对照空病毒及等体... 目的研究X连锁凋亡抑制蛋白相关因子-1(XAF1)基因对人肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法建立人肝癌细胞株SMMC7721裸鼠荷瘤模型,每组5只裸鼠分别在瘤内分3点注射相同感染滴度的重组腺病毒Ad5/F35-XAF1、Ad5/F35-Null对照空病毒及等体积的磷酸缓冲液(PBS),隔天注射1次,疗程2周。每3天测量各组裸鼠移植瘤的体积,观察Ad5/F35-XAF1组移植瘤的生长与其他两组的差异。原位末端标记TUNEL法检测移植瘤细胞的凋亡,免疫组织化学法检测移植瘤中XAF1蛋白表达和微血管密度(MVD)。结果与PBS组和Ad5/F35-Null组比较,瘤内注射Ad5/F35-XAF1组裸鼠移植瘤体积、质量和MVD显著减小(P<0.05或P<0.01),而移植瘤细胞的凋亡指数和XAF1蛋白的表达率均明显增高(P<0.01)。结论腺病毒介导XAF1基因可抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长,可能与该基因诱导肝癌细胞凋亡和抑制肿瘤血管形成有关。 展开更多
关键词 x连锁抑制蛋白相关因子-1 肝癌 腺病毒 移植瘤 血管形成
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X连锁凋亡抑制蛋白及其相关因子1在慢性粒细胞白血病中的表达研究 被引量:1
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作者 李治国 张继红 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第30期3367-3369,共3页
目的观察X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)及XIAP相关因子1(XAF1)在慢性粒细胞白血病(CML)中的表达情况,评估其在CML诊断及预后分析中的应用价值。方法选取CML患者42例,其中慢性期24例(CML慢性期组),进展期18例(CML进展期组,其中加速期7例,急变... 目的观察X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)及XIAP相关因子1(XAF1)在慢性粒细胞白血病(CML)中的表达情况,评估其在CML诊断及预后分析中的应用价值。方法选取CML患者42例,其中慢性期24例(CML慢性期组),进展期18例(CML进展期组,其中加速期7例,急变期11例)。应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测患者骨髓细胞XIAP及XAF1 mRNA表达水平。对照组为非恶性血液病患者21例(非恶性血液病组)及急性白血病(AL)患者28例(AL组)。结果 CML进展期组患者骨髓中XIAP mRNA表达水平高于CML慢性期组(P<0.01)和非恶性血液病组(P<0.01);而CML进展期患者骨髓中XAF1 mRNA表达水平低于CML慢性期(P<0.05)和非恶性血液病组(P<0.01);化疗后获得骨髓缓解的CML患者骨髓中XIAP mRNA的表达水平显著低于化疗前,而XAF1 mRNA的表达水平显著高于化疗前;XIAP mRNA及XAF1 mRNA表达水平之间呈负相关。结论 CML患者进展期XIAP及XAF1的联合检测及动态观察可作为CML临床辅助诊断、分期及预后判断的指标之一。 展开更多
关键词 x连锁抑制蛋白 xIAP相关因子1 白血病 髓系 慢性 BCR-ABL阳性 细胞 反转录聚合酶链反应
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Bax抑制因子1过表达对急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡的影响及其机制 被引量:5
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作者 万朝辉 曾良 周辉 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期74-81,共8页
目的:探讨过表达B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)抑制因子1(BI-1)对急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌细胞凋亡的影响,并阐明其作用机制。方法:60只大鼠随机分为假手术组、模型组、空载腺病毒(Ad-NC)组和BI-1腺病毒(Ad-BI-1)组,每组15只。... 目的:探讨过表达B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)抑制因子1(BI-1)对急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌细胞凋亡的影响,并阐明其作用机制。方法:60只大鼠随机分为假手术组、模型组、空载腺病毒(Ad-NC)组和BI-1腺病毒(Ad-BI-1)组,每组15只。除假手术组外,其他各组大鼠均采用冠状动脉左前降支结扎法建立AMI大鼠模型,Ad-NC组和Ad-BI-1组大鼠分别于心肌梗死区域注射腺病毒包装的空载质粒和BI-1过表达质粒。术后72 h,检测各组大鼠心功能参数左室射血分数(LVEF)、左室缩短分数(LVFS)、左室舒张末期内径(LVEDD)和左室收缩末期内径(LVESD),TTC染色法检测各组大鼠心肌梗死面积百分率,TUNEL法检测各组大鼠心肌细胞凋亡率,比色法检测各组大鼠心肌组织中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)活性,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组大鼠心肌组织中BI-1 mRNA表达水平,Westernblotting法检测大鼠心肌组织中BI-1、Bcl-2、Bax和内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、肌醇依赖酶1(IRE1)、磷酸化IRE1(p-IRE1)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)及磷酸化JNK(p-JNK)蛋白表达水平,并计算p-IRE1/IRE1和p-JNK/JNK比值。结果:与假手术组比较,模型组大鼠LVEF和LVFS明显降低(P<0.05),LVEDD、LVESD、心肌梗死面积百分率、心肌组织中Caspase-3活性和心肌细胞凋亡率明显升高(P<0.05),心肌组织中BI-1 mRNA和蛋白表达水平及Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05),心肌组织中Bax、GRP78蛋白表达水平和p-IRE1/IRE1及p-JNK/JNK比值明显升高(P<0.05);与模型组比较,Ad-BI-1组大鼠LVEF和LVFS明显升高(P<0.05),LVEDD和LVESD明显降低(P<0.05),心肌梗死面积百分率、心肌细胞凋亡率和心肌组织中Caspase-3活性明显降低(P<0.05),心肌组织中BI-1 mRNA和蛋白表达水平及Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P<0.05),心肌组织中Bax、GRP78蛋白表达水平和p-IRE1/IRE1及p-JNK/JNK比值明显降低(P<0.05),Ad-NC组大鼠上述各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:过表达BI-1通过抑制内质网应激途径降低心肌细胞凋亡水平,从而改善AMI大鼠心功能。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 细胞 Bax抑制因子1 内质网应激 B细胞淋巴瘤2相关x蛋白
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XAF1基因对胰腺癌细胞SW1990增殖和凋亡的影响 被引量:3
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作者 黄佳 姚玮艳 +2 位作者 朱黎明 曹海霞 章永平 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期378-380,384,共4页
目的探讨Ad5/F35腺病毒介导的X染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1(XAF1)基因对胰腺癌细胞株SW1990增殖和凋亡的影响。方法构建和包装Ad5/F35-XAF1重组腺病毒并感染胰腺癌细胞SW1990(Ad5/F35-XAF1组),设立对照病毒感染组(Ad5/F35-Null组)... 目的探讨Ad5/F35腺病毒介导的X染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1(XAF1)基因对胰腺癌细胞株SW1990增殖和凋亡的影响。方法构建和包装Ad5/F35-XAF1重组腺病毒并感染胰腺癌细胞SW1990(Ad5/F35-XAF1组),设立对照病毒感染组(Ad5/F35-Null组)和空白组。运用RT-PCR技术和Western blotting分析对感染细胞进行鉴定。流式细胞仪检测细胞凋亡并分析细胞周期,TUNEL法测定细胞凋亡率;MTT法检测细胞增殖。结果Ad5/F35-XAF1组SW1990细胞XAF1mRNA和蛋白表达水平均明显上调。与空白对照组和Ad5/F35-Null组比较,Ad5/F35-XAF1组细胞凋亡率明显增加,增殖活性明显降低,G2/M期细胞比例显著增加,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论Ad5F35-XAF1重组腺病毒感染胰腺癌细胞SW1990后,能促进细胞凋亡并抑制细胞增殖。 展开更多
关键词 x染色体连锁抑制蛋白相关因子1 胰腺癌 细胞 细胞周期
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胰腺癌组织中XAF1基因启动子区甲基化状态及XAF1蛋白的表达 被引量:3
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作者 赵永福 杨红星 +1 位作者 唐哲 卢宾宾 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2012年第5期684-688,共5页
目的:探讨胰腺癌组织中X染色体连锁凋亡抑制因子相关因子1(XAF1)基因启动子区甲基化状态及蛋白的表达。方法:采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)及免疫组化SP法检测胰腺癌组织(48例)、胰腺良性疾病组织(26例)和正常胰腺组织(15例)中XAF... 目的:探讨胰腺癌组织中X染色体连锁凋亡抑制因子相关因子1(XAF1)基因启动子区甲基化状态及蛋白的表达。方法:采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)及免疫组化SP法检测胰腺癌组织(48例)、胰腺良性疾病组织(26例)和正常胰腺组织(15例)中XAF1基因启动子区甲基化状态及蛋白的表达。结果:胰腺癌、胰腺良性疾病及正常胰腺组织中,XAF1基因启动子区甲基化率分别为31.3%、7.7%和0%,XAF1蛋白的阳性表达率分别为52.1%、84.6%及88.9%,3组比较差异均有统计学意义(P=0.005;χ2=11.169,P=0.004)。XAF1基因启动子区甲基化状态及蛋白的表达均与胰腺癌的TNM分期、分化程度及淋巴结转移关系密切(P<0.05)。胰腺癌组织中XAF1基因启动子区甲基化状态与蛋白表达呈负关联(rP=-0.463,P<0.001)。结论:XAF1基因启动子区甲基化是该基因失活的重要机制之一,XAF1甲基化修饰水平在胰腺癌的发生、发展中起重要作用。 展开更多
关键词 胰腺癌 x染色体连锁凋亡抑制因子相关因子1 甲基化
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5-Aza-CdR对人肝癌细胞株SMMC7721生长及XAF1基因启动子异常甲基化的影响 被引量:1
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作者 陈琼 林菊生 +4 位作者 常莹 余琴 里进 胡晓文 王晶 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期433-437,共5页
目的探讨去甲基化药物5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人肝癌细胞株SMMC7721生长的影响以及对具有促凋亡作用的X染色体连锁凋亡抑制因子相关因子1(XAF1)的基因表达和甲基化的影响。方法用不同浓度的5-Aza-CdR处理SMMC7721细胞后,RT-PC... 目的探讨去甲基化药物5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人肝癌细胞株SMMC7721生长的影响以及对具有促凋亡作用的X染色体连锁凋亡抑制因子相关因子1(XAF1)的基因表达和甲基化的影响。方法用不同浓度的5-Aza-CdR处理SMMC7721细胞后,RT-PCR法检测XAF1 mRNA的变化,MSP检测XAF1基因甲基化的变化,用MTT法检测5-Aza-CdR对SMMC7721细胞增殖活性的影响,流式细胞仪检测其对SMMC7721细胞的细胞周期分布和细胞凋亡率的影响。结果经过5、10μmol/L 5-Aza-CdR处理后,RT-PCR检测显示,SMMC7721中XAF1mRNA表达比对照组增加,差异有统计学意义(分别是P=0.034,P=0.002)。MSP检测结果XAF1的甲基化得到了逆转。用1、5、10μmol/L的5-Aza-CdR处理SMMC7721细胞24、48、72 h后,MTT检测到细胞的生长受到抑制,且呈时间和剂量依赖性。流式细胞仪分析表明,各药物浓度处理72 h后凋亡率均明显增加,5、10μmol/L组细胞凋亡率分别为(7.23±0.92)%、(12.62±1.30)%,与对照组(3.53±0.40)%相比差异有统计学意义(分别是P=0.013,P=0.001)。其细胞周期阻滞于S期。结论5-Aza-CdR抑制SMMC7721细胞的生长,使XAF1基因异常甲基化状态得到逆转,XAF1基因转录水平上调,为其应用于肝癌治疗提供了实验依据。 展开更多
关键词 x染色体连锁凋亡抑制因子相关因子1 甲基化 5-氮杂-2′-脱氧胞苷 肝细胞
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大鼠XAF1基因启动子荧光素酶报告质粒的构建及IRF-1结合位点的鉴定
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作者 周建博 邱文 +3 位作者 卢燕来 单锴 赵聃 王迎伟 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期295-300,共6页
目的:构建大鼠X染色体连锁的凋亡抑制蛋白相关因子1(X-linked inhibitor of apoptosis associated factor 1,XAF1)基因启动子(全长和截断)荧光素酶报告质粒,并观察在人胚肾细胞HEK293中过表达干扰素调节因子-1(interferon regulatoryfac... 目的:构建大鼠X染色体连锁的凋亡抑制蛋白相关因子1(X-linked inhibitor of apoptosis associated factor 1,XAF1)基因启动子(全长和截断)荧光素酶报告质粒,并观察在人胚肾细胞HEK293中过表达干扰素调节因子-1(interferon regulatoryfactor-1,IRF-1)对XAF1基因启动活性的影响,同时,筛选其可能的IRF-1结合位点。方法:采用PCR技术,扩增出大鼠XAF1基因启动子序列(-1497~+166 nt),将XAF1基因启动子插入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中获得pGL3-XAF1-QC,与大鼠野生型IRF-1表达质粒(pcDNA3.1-IRF-1)共转染HEK293细胞,检测其荧光素酶活性,确定IRF-1对XAF1基因的启动作用。同时,应用生物信息学软件预测XAF1基因启动子上IRF-1潜在的结合位点,并构建截断的XAF1基因启动子荧光素酶报告质粒(pGL3-XAF1-1、pGL3-XAF1-2、pGL3-XAF1-3和pGL3-XAF1-4)。将上述全长和各截断的XAF1基因启动子荧光素酶报告质粒和IRF-1过表达质粒共转染HEK293细胞,再行荧光素酶活性测定,筛选IRF-1的结合位点。结果:菌液PCR及核酸测序证实,上述荧光素酶报告质粒均构建成功。将pGL3-XAF1-QC和pcDNA3.1-IRF-1共转染HEK293细胞发现,XAF1基因启动子活性显著增加。而将pGL3-XAF1-QC、pGL3-XAF1(1~4号)和pcDNA3.1-IRF-1共转染HEK293细胞后证实,pGL3-XAF1-3的启动活性显著低于pGL3-XAF1-1和pGL3-XAF1-2。提示IRF-1可能结合在大鼠XAF1基因启动子的-337~-47 nt区域。结论:本实验成功构建了大鼠全长及截断的XAF1基因启动子荧光素酶报告质粒,并初步筛查出IRF-1在XAF1基因启动子上的结合区域,为后续研究奠定了基础。 展开更多
关键词 x染色体连锁抑制蛋白相关因子1(xAF1) 干扰素调节因子-1(IRF-1) 启动子 生物信息学 荧光素酶报告质粒
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线粒体凋亡在子宫内膜异位症发病机制中的作用
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作者 张丽 石彬 +1 位作者 任秀朋 赵昕 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期531-534,共4页
目的:探讨X染色体连锁的凋亡抑制蛋白(XIAP)、线粒体促凋亡因子线粒体蛋白Smac和肿瘤坏死因子(TNF-α)在子宫内膜异位症(EMT)发病机制中的作用。方法:免疫组化检测XIAP和Smac在55例正常子宫内膜(对照组)和65例卵巢子宫内膜异位囊肿(研究... 目的:探讨X染色体连锁的凋亡抑制蛋白(XIAP)、线粒体促凋亡因子线粒体蛋白Smac和肿瘤坏死因子(TNF-α)在子宫内膜异位症(EMT)发病机制中的作用。方法:免疫组化检测XIAP和Smac在55例正常子宫内膜(对照组)和65例卵巢子宫内膜异位囊肿(研究组)在位及异位内膜组织中的表达和相关性;流式细胞仪测细胞凋亡率;ELISA测两组患者腹水中TNF-a的表达。结果:①凋亡率:对照组分泌期高于增殖期(P<0.05);研究组在位及异位内膜中无周期变化(P>0.05);在位内膜低于正常内膜(P<0.05);异位内膜低于在位及正常内膜(P<0.05)。②XIAP的表达:在对照组和研究组在位内膜中增殖期均高于分泌期(P<0.05);在研究组异位内膜中无周期差异(P>0.05)。③Smac在对照组和研究组在位内膜中分泌期高于增殖期(P<0.05)。在异位内膜中无周期差异(P>0.05);Ⅲ期和Ⅳ期EMT患者异位子宫内膜中,Smac表达在增殖期与分泌期的比较,差异无统计学意义(P>0.05)。④腹水中TNF-α的表达:研究组高于对照组(P<0.05);Ⅲ期和Ⅳ期EMT患者腹水中TNF-α的表达差异无统计学意义(P>0.05)。⑤相关性:XIAP与Smac,Smac与TNF-α表达均成正相关(P<0.05)。结论:在卵巢子宫内膜异位症中,XIAP表达增强利于异位内膜种植生存,而线粒体蛋白Smac和TNF-α表达增强,又抑制其无限生长,表明线粒体凋亡在子宫内膜异位症的发病机制中可能扮演着重要的角色。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 x染色体连锁抑制蛋白 线粒体蛋白Smac 肿瘤坏死因子
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激活素A、Bax和XIAP在特发性胎儿生长受限患者的表达及意义 被引量:8
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作者 崔世红 张婷 +4 位作者 刘萍萍 程国梅 贾国占 管秀娟 韩笑 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期211-214,共4页
目的:探讨特发性胎儿生长受限(IFGR)患者母血和脐血激活素A(ActivinA)及胎盘组织中B细胞淋巴瘤因子相关x蛋白(Bax)和X-连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)的表达及意义。方法:选取剖宫产分娩的IFGR孕妇30例作为实验组,同期因社会因素剖宫产分娩的... 目的:探讨特发性胎儿生长受限(IFGR)患者母血和脐血激活素A(ActivinA)及胎盘组织中B细胞淋巴瘤因子相关x蛋白(Bax)和X-连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)的表达及意义。方法:选取剖宫产分娩的IFGR孕妇30例作为实验组,同期因社会因素剖宫产分娩的正常足月孕妇30例作为对照组。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定两组母血、脐血ActivinA水平;免疫组化法检测两组胎盘组织中Bax与XIAP的表达。结果:实验组母血、脐血ActivinA水平(102.659±16.467,57.752±13.498)ng/ml均明显高于对照组(75.927±10.519,29.870±5.992)ng/ml(P<0.05)。Bax、XIAP在胎盘合体滋养细胞中的表达,实验组Bax平均灰度值(146.513±10.611)明显高于对照组(113.672±9.631),差异有统计学意义(P<0.05);实验组XIAP平均灰度值(114.562±5.167)明显低于对照组(144.430±7.311),差异有统计学意义(P<0.05)。实验组母血、脐血中ActivinA水平与胎盘组织中Bax表达均呈正相关(P<0.05),与胎盘组织中XIAP表达均呈负相关(P<0.05);实验组胎盘组织中Bax表达与XIAP表达呈负相关(P<0.05)。结论:母血、脐血中ActivinA升高及胎盘组织中Bax表达增加、XIAP表达降低可能是IFGR发病的重要环节之一。在IFGR中ActivinA可能通过上调Bax的表达、下调XIAP的表达,促进胎盘滋养细胞过度凋亡,影响胎盘的发育和功能,进而影响胎儿生长发育。 展开更多
关键词 特发性胎儿生长受限 合体滋养细胞 激活素A B细胞淋巴瘤因子相关x蛋白 x-连锁抑制蛋白
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