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WalK(S221P)突变影响万古霉素中等耐药金黄色葡萄球菌毒力的作用
被引量:
7
1
作者
饶一凡
毛旭虎
+2 位作者
彭华刚
尚伟龙
饶贤才
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第3期219-228,共10页
目的探讨WalK(S221P)突变对万古霉素中等耐药金黄色葡萄球菌(vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus, VISA)毒力的影响及其机制。方法采用转录组测序比较VISA菌株XN108及其WalK(S221P)回复菌株K65的毒力基因表达差异,利用RT-q...
目的探讨WalK(S221P)突变对万古霉素中等耐药金黄色葡萄球菌(vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus, VISA)毒力的影响及其机制。方法采用转录组测序比较VISA菌株XN108及其WalK(S221P)回复菌株K65的毒力基因表达差异,利用RT-qPCR检测菌株毒力基因的表达变化,溶血实验比较菌株的溶血能力。采用同源重组技术在金葡菌中引入WalK(S221P)突变,E-test检测菌株的耐药性。凝胶阻滞实验(EMSA)检测WalKR对靶基因调控区的结合能力。结果转录组测序结果显示,K65中多种重要毒力因子基因的表达上调(P<0.01),调控系统Agr的活性增强,溶血能力恢复。将WalK(S221P)突变引入USA300菌株后,其耐药性升高,毒力因子表达水平及溶血活性降低;EMSA证实WalKR对金葡菌Agr有直接调控作用;敲除agrA基因后,引入WalK(S221P)突变仍可使USA300agrA对万古霉素的耐药性升高,但毒力基因的表达水平及溶血活性改变不显著。结论 WalK(S221P)突变影响VISA毒力是通过Agr实现的,该突变导致WalKR的活性降低,激活Agr的能力下降,最终影响VISA菌株的毒力。
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关键词
万古霉素中等耐药金黄色葡萄球菌
二元调控系统
walk
R
walk
(
s221p
)突变
毒力
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职称材料
WalK(S221P)突变促进金黄色葡萄球菌荚膜产生的作用研究
2
作者
郭祖文
饶一凡
+1 位作者
彭华刚
饶贤才
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第23期2460-2466,共7页
目的探究WalK(S221P)突变促进金葡菌荚膜产生的作用及可能机制。方法采用转录组测序(RNA-seq)分析WalK(S221P)突变对金葡菌基因表达的影响,采用RT-qPCR检测荚膜合成基因的表达变化。利用荚膜染色和透射电镜观察确认WalK(S221P)突变促进...
目的探究WalK(S221P)突变促进金葡菌荚膜产生的作用及可能机制。方法采用转录组测序(RNA-seq)分析WalK(S221P)突变对金葡菌基因表达的影响,采用RT-qPCR检测荚膜合成基因的表达变化。利用荚膜染色和透射电镜观察确认WalK(S221P)突变促进金葡菌荚膜产生的作用,再用RT-qPCR筛选参与介导WalK(S221P)促进荚膜合成的调控分子,通过结合位点分析和凝胶迁移阻滞实验(EMSA)证实WalKR对目标分子的调控作用。结果RNA-seq分析显示WalK(S221P)突变对196个金葡菌基因的表达水平影响显著,其中16个荚膜合成操纵子基因在XN108中的表达均显著上调。RT-qPCR检测显示荚膜合成相关capA,capH和capK在含有WalK(S221P)突变的XN108及K-Newman菌株中分别较回复株XN108-R和野生型Newman菌株显著上调。荚膜染色和透射电镜观察显示XN108的荚膜合成相比于回复株XN108-R明显增多,增厚。RT-qPCR筛选提示WalK(S221P)促进金葡菌荚膜合成可能是通过上调MgrA表达水平实现的,结合位点检索分析及EMSA实验证实WalK激活的WalR具有直接结合mgrA基因调控区的功能。结论金葡菌WalK(S221P)突变具有促进金葡菌荚膜产生的作用,该作用的发挥可能通过上调MgrA的表达而实现。
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关键词
金黄色葡萄球菌
荚膜
二元调控系统
walk
R
walk
(
s221p
)
MgrA
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职称材料
六广河特大桥边跨顶推施工技术
被引量:
16
3
作者
李钊
《世界桥梁》
北大核心
2017年第5期11-16,共6页
六广河特大桥主桥为(243+580+243)m双塔双索面叠合梁斜拉桥,黔西侧边跨采用步履式顶推施工。由于顶推跨度大、重量重、顶推单元多,采用超声波传感器作为千斤顶顶推系统的动作传感元件,在泵站上设置压力传感器,通过数据线实时传输到总控...
六广河特大桥主桥为(243+580+243)m双塔双索面叠合梁斜拉桥,黔西侧边跨采用步履式顶推施工。由于顶推跨度大、重量重、顶推单元多,采用超声波传感器作为千斤顶顶推系统的动作传感元件,在泵站上设置压力传感器,通过数据线实时传输到总控中心,总控中心采取位移控制为主、压力控制为辅的方式,控制多个顶推单元的千斤顶完成竖向升降、纵向水平顶推和横向纠偏同步工作。在顶升千斤顶球形板上设置了梳齿板,可避开螺栓,顺利通过拼接板。施工前对顶推施工过程进行有限元分析,结果表明结构受力安全、稳定。实际顶推操作表明该顶推技术简单可靠、水平力小、同步性好、轴线偏位小,可为类似工程提供借鉴。
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关键词
斜拉桥
叠合梁
临时墩
导梁
多点同步步履式顶推系统
顶推施工
有限元法
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职称材料
题名
WalK(S221P)突变影响万古霉素中等耐药金黄色葡萄球菌毒力的作用
被引量:
7
1
作者
饶一凡
毛旭虎
彭华刚
尚伟龙
饶贤才
机构
西南大学生命科学学院现代生物医药研究所
陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院临床微生物学与免疫学教研室
陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院微生物学教研室
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第3期219-228,共10页
基金
军队生物安全专项(17SAZ08)
国家自然科学基金面上项目(81672071)~~
文摘
目的探讨WalK(S221P)突变对万古霉素中等耐药金黄色葡萄球菌(vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus, VISA)毒力的影响及其机制。方法采用转录组测序比较VISA菌株XN108及其WalK(S221P)回复菌株K65的毒力基因表达差异,利用RT-qPCR检测菌株毒力基因的表达变化,溶血实验比较菌株的溶血能力。采用同源重组技术在金葡菌中引入WalK(S221P)突变,E-test检测菌株的耐药性。凝胶阻滞实验(EMSA)检测WalKR对靶基因调控区的结合能力。结果转录组测序结果显示,K65中多种重要毒力因子基因的表达上调(P<0.01),调控系统Agr的活性增强,溶血能力恢复。将WalK(S221P)突变引入USA300菌株后,其耐药性升高,毒力因子表达水平及溶血活性降低;EMSA证实WalKR对金葡菌Agr有直接调控作用;敲除agrA基因后,引入WalK(S221P)突变仍可使USA300agrA对万古霉素的耐药性升高,但毒力基因的表达水平及溶血活性改变不显著。结论 WalK(S221P)突变影响VISA毒力是通过Agr实现的,该突变导致WalKR的活性降低,激活Agr的能力下降,最终影响VISA菌株的毒力。
关键词
万古霉素中等耐药金黄色葡萄球菌
二元调控系统
walk
R
walk
(
s221p
)突变
毒力
Keywords
vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus
two-component system
walk
R
walk
(
s221p
) mutation
virulence
分类号
R372 [医药卫生—病原生物学]
R378.11 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
WalK(S221P)突变促进金黄色葡萄球菌荚膜产生的作用研究
2
作者
郭祖文
饶一凡
彭华刚
饶贤才
机构
陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院微生物学教研室
重庆大学生物工程学院
出处
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第23期2460-2466,共7页
基金
国家自然科学基金面上项目(82272341)。
文摘
目的探究WalK(S221P)突变促进金葡菌荚膜产生的作用及可能机制。方法采用转录组测序(RNA-seq)分析WalK(S221P)突变对金葡菌基因表达的影响,采用RT-qPCR检测荚膜合成基因的表达变化。利用荚膜染色和透射电镜观察确认WalK(S221P)突变促进金葡菌荚膜产生的作用,再用RT-qPCR筛选参与介导WalK(S221P)促进荚膜合成的调控分子,通过结合位点分析和凝胶迁移阻滞实验(EMSA)证实WalKR对目标分子的调控作用。结果RNA-seq分析显示WalK(S221P)突变对196个金葡菌基因的表达水平影响显著,其中16个荚膜合成操纵子基因在XN108中的表达均显著上调。RT-qPCR检测显示荚膜合成相关capA,capH和capK在含有WalK(S221P)突变的XN108及K-Newman菌株中分别较回复株XN108-R和野生型Newman菌株显著上调。荚膜染色和透射电镜观察显示XN108的荚膜合成相比于回复株XN108-R明显增多,增厚。RT-qPCR筛选提示WalK(S221P)促进金葡菌荚膜合成可能是通过上调MgrA表达水平实现的,结合位点检索分析及EMSA实验证实WalK激活的WalR具有直接结合mgrA基因调控区的功能。结论金葡菌WalK(S221P)突变具有促进金葡菌荚膜产生的作用,该作用的发挥可能通过上调MgrA的表达而实现。
关键词
金黄色葡萄球菌
荚膜
二元调控系统
walk
R
walk
(
s221p
)
MgrA
Keywords
Staphylococcus aureus
capsule
two-component system
walk
R
walk
(
s221p
)
MgrA
分类号
R372 [医药卫生—病原生物学]
R378.11 [医药卫生—病原生物学]
R394.3 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
六广河特大桥边跨顶推施工技术
被引量:
16
3
作者
李钊
机构
贵州路桥集团有限公司
出处
《世界桥梁》
北大核心
2017年第5期11-16,共6页
文摘
六广河特大桥主桥为(243+580+243)m双塔双索面叠合梁斜拉桥,黔西侧边跨采用步履式顶推施工。由于顶推跨度大、重量重、顶推单元多,采用超声波传感器作为千斤顶顶推系统的动作传感元件,在泵站上设置压力传感器,通过数据线实时传输到总控中心,总控中心采取位移控制为主、压力控制为辅的方式,控制多个顶推单元的千斤顶完成竖向升降、纵向水平顶推和横向纠偏同步工作。在顶升千斤顶球形板上设置了梳齿板,可避开螺栓,顺利通过拼接板。施工前对顶推施工过程进行有限元分析,结果表明结构受力安全、稳定。实际顶推操作表明该顶推技术简单可靠、水平力小、同步性好、轴线偏位小,可为类似工程提供借鉴。
关键词
斜拉桥
叠合梁
临时墩
导梁
多点同步步履式顶推系统
顶推施工
有限元法
Keywords
c ab le -s tay ed b r id g e
comp o s i te g i r d e r
tem p o ra ry p ie r
lau nchin g n o s e
walk
in g incremental launching system of mul t i-point paral lel operation
in c rem en ta l lau nchin g c o n s tru c -tion
f inite element method
分类号
U445.462 [建筑科学—桥梁与隧道工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
WalK(S221P)突变影响万古霉素中等耐药金黄色葡萄球菌毒力的作用
饶一凡
毛旭虎
彭华刚
尚伟龙
饶贤才
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
7
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职称材料
2
WalK(S221P)突变促进金黄色葡萄球菌荚膜产生的作用研究
郭祖文
饶一凡
彭华刚
饶贤才
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
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职称材料
3
六广河特大桥边跨顶推施工技术
李钊
《世界桥梁》
北大核心
2017
16
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职称材料
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