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拟南芥35S:SOS2/WRKY12-OE5转基因株系的构建
1
作者
马倩
樊婷婷
+3 位作者
吴席
贾亚峰
张震
宋慧
《合肥工业大学学报(自然科学版)》
北大核心
2025年第9期1213-1217,共5页
为探究SOS2与WRKY12在拟南芥响应盐胁迫时的遗传关系,文章以野生型拟南芥RNA反转录产生的cDNA为模板扩增出SOS2片段,将质粒pART27和SOS2片段利用KpnⅠ和XhoⅠ进行双酶切,使用T4连接酶将pART27与SOS2片段连接。连接产物转化至制备好的大...
为探究SOS2与WRKY12在拟南芥响应盐胁迫时的遗传关系,文章以野生型拟南芥RNA反转录产生的cDNA为模板扩增出SOS2片段,将质粒pART27和SOS2片段利用KpnⅠ和XhoⅠ进行双酶切,使用T4连接酶将pART27与SOS2片段连接。连接产物转化至制备好的大肠杆菌感受态中,涂布至抗性板上,挑取单菌落进行阳性菌株的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴定与测序。从测序正确的单克隆阳性菌株中提取重组质粒,转化至制备好的农杆菌感受态GV3101中,并涂布至双抗平板上,挑取单克隆菌株进行PCR鉴定与测序,进而获得阳性单克隆菌落。浸花侵染拟南芥野生型,筛选鉴定阳性植株以获得纯合的35S:SOS2/WT,再将获得的35S:SOS2和WRKY12-OE5转基因株系进行杂交,通过筛选鉴定获得35S:SOS2/WRKY12-OE5转基因株系,为进一步研究SOS2基因与WRKY12基因之间的遗传关系奠定基础。
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关键词
拟南芥
wrky12基因
SOS2
基因
重组质粒
转
基因
植株
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题名
拟南芥35S:SOS2/WRKY12-OE5转基因株系的构建
1
作者
马倩
樊婷婷
吴席
贾亚峰
张震
宋慧
机构
合肥工业大学食品与生物工程学院
出处
《合肥工业大学学报(自然科学版)》
北大核心
2025年第9期1213-1217,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(31872803)
中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(JZ2023HGQB0167)。
文摘
为探究SOS2与WRKY12在拟南芥响应盐胁迫时的遗传关系,文章以野生型拟南芥RNA反转录产生的cDNA为模板扩增出SOS2片段,将质粒pART27和SOS2片段利用KpnⅠ和XhoⅠ进行双酶切,使用T4连接酶将pART27与SOS2片段连接。连接产物转化至制备好的大肠杆菌感受态中,涂布至抗性板上,挑取单菌落进行阳性菌株的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴定与测序。从测序正确的单克隆阳性菌株中提取重组质粒,转化至制备好的农杆菌感受态GV3101中,并涂布至双抗平板上,挑取单克隆菌株进行PCR鉴定与测序,进而获得阳性单克隆菌落。浸花侵染拟南芥野生型,筛选鉴定阳性植株以获得纯合的35S:SOS2/WT,再将获得的35S:SOS2和WRKY12-OE5转基因株系进行杂交,通过筛选鉴定获得35S:SOS2/WRKY12-OE5转基因株系,为进一步研究SOS2基因与WRKY12基因之间的遗传关系奠定基础。
关键词
拟南芥
wrky12基因
SOS2
基因
重组质粒
转
基因
植株
Keywords
Arabidopsis thaliana
wrky
12
gene
SOS2 gene
recombinant plasmids
transgenic plants
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
拟南芥35S:SOS2/WRKY12-OE5转基因株系的构建
马倩
樊婷婷
吴席
贾亚峰
张震
宋慧
《合肥工业大学学报(自然科学版)》
北大核心
2025
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