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重组人IL-37通过调控Wnt5a减少细颗粒物诱导的支气管上皮细胞外基质沉积 被引量：1
1
作者 曲芳芳 徐海博 +2 位作者 齐天杰 蔡志刚 阎锡新 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第1期46-53,共8页
目的:探讨重组人白细胞介素37(rhIL-37)干预对细颗粒物(PM_(2.5))暴露诱导的人支气管上皮细胞细胞外基质沉积的治疗作用及机制。方法:通过不同浓度(6.25、12.5、25和50 mg/L)的PM_(2.5)干预正常人支气管上皮细胞16HBE建立气道损伤的细... 目的:探讨重组人白细胞介素37(rhIL-37)干预对细颗粒物(PM_(2.5))暴露诱导的人支气管上皮细胞细胞外基质沉积的治疗作用及机制。方法:通过不同浓度(6.25、12.5、25和50 mg/L)的PM_(2.5)干预正常人支气管上皮细胞16HBE建立气道损伤的细胞模型,用Western blot和细胞免疫荧光检测Wnt家族成员5a(Wnt5a)表达水平,选取Wnt5a表达量最高时的PM_(2.5)浓度为最佳干预浓度。实验分为3组:PM_(2.5)+siRNA组、PM_(2.5)+Wnt5a siRNA组及control+Wnt5a siRNA,观察纤连蛋白(fibronectin)、IL-6和IL-1β的表达水平及活性氧(ROS)的产生。此外,又将实验分为PM_(2.5)+rhIL-37组、PM_(2.5)组和control组,研究rhIL-37是否能够下调Wnt5a、fibronectin、IL-6和IL-1β的表达。结果:(1)给予不同浓度(6.25、12.5、25和50 mg/L)的PM_(2.5)干预16HBE细胞24 h后,Wnt5a的表达除PM_(2.5)(50 mg/L)组,均较control组显著增加(P<0.05);在PM_(2.5)(12.5 mg/L)刺激下,Wnt5a表达最高(P<0.01)。(2)在PM_(2.5)(12.5 mg/L)干预16HBE细胞24 h后,fibronectin表达达到峰值(P<0.01)。(3)敲减Wnt5a后fibronectin和核因子E2相关因子2(Nrf2)的表达,ROS的产生,以及IL-6和IL-1β的分泌均较control组显著减少(P<0.01)。(4)rhIL-37干预后再给予PM_(2.5)刺激,Wnt5a、fibronectin和Nrf2的表达,ROS的产生,以及IL-6和IL-1β的分泌均较PM_(2.5)组显著减少(P<0.05)。结论:在体外细胞模型中,PM_(2.5)可能通过Wnt5a调控炎症反应和氧化应激,从而诱导支气管上皮细胞外基质沉积;rhIL-37通过下调Wnt5a减轻炎症反应和氧化应激,从而减少细胞外基质沉积。 展开更多
关键词 重组人白细胞介素37 空气污染物 细颗粒物 人支气管上皮细胞 wnt5a蛋白
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Wnt5a通过上调miR-141-3p增强前列腺癌细胞血管生成拟态与干细胞特性
2
作者 刘彼得 王书恒 +4 位作者 贾宏亮 李循 张小安 董强 李九智 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第10期1010-1018,共9页
目的:探究Wnt5a通过上调miR-141-3p表达对前列腺癌(PCa)细胞血管生成拟态(VM)形成及肿瘤干细胞(CSC)特性的影响。方法:选用人前列腺上皮细胞RWPE-1及PCa细胞PC-3、LNCaP和DU145,qPCR法检测细胞中miR-141-3p的表达,WB法检测细胞中Wnt5a... 目的:探究Wnt5a通过上调miR-141-3p表达对前列腺癌(PCa)细胞血管生成拟态(VM)形成及肿瘤干细胞(CSC)特性的影响。方法:选用人前列腺上皮细胞RWPE-1及PCa细胞PC-3、LNCaP和DU145,qPCR法检测细胞中miR-141-3p的表达,WB法检测细胞中Wnt5a蛋白的水平。通过质粒转染分别构建稳定敲减Wnt5a或miR-141-3p的LNCaP和DU145细胞株。采用三维培养实验检测细胞形成VM的能力,CCK-8法检测细胞增殖能力及药物敏感性,划痕实验、Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,qPCR和WB法检测VM相关分子及CSC标志物的表达水平,克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞术分选并计算CD133+细胞比例,qPCR和WB法检测CD133+细胞和CD133–细胞中miR-141-3p和Wnt5a的表达水平。通过质粒转染PCa细胞构建稳定过表达Wnt5a的细胞株,qPCR法和双萤光素酶报告基因实验检测Wnt5a及不同Wnt下游信号通路抑制剂对miR-141-3p表达及启动子活性的影响;通过转染si-c-Jun敲减Wnt5a过表达细胞中c-Jun的表达,qPCR法、双萤光素酶报告基因实验及染色质免疫共沉淀实验验证c-Jun与miR-141-3p启动子的靶向结合关系。结果:miR-141-3p和Wnt5a在PCa细胞中的表达显著高于RWPE-1细胞,在DU145细胞中相对表达量最高,在LNCaP细胞中相对表达量最低(P<0.001)。下调Wnt5a或miR-141-3p表达,均能显著抑制PCa细胞的VM形成能力及干细胞特性,显著抑制PCa细胞的增殖、迁移、侵袭能力,并能提高其对比卡鲁胺的敏感性(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。下调Wnt5a的表达能够显著抑制miR-141-3p的表达及启动子转录活性(P<0.01或P<0.05),上调Wnt5a的表达能够显著促进miR-141-3p的表达及启动子转录活性(P<0.01或P<0.001);Wnt5a对miR-141-3p表达及启动子转录活性的促进作用可被JNK/c-Jun通路抑制剂所抑制(P>0.05)。下调c-Jun的表达能够显著抑制Wnt5a对miR-141-3p表达及启动子转录活性的促进作用(P>0.05)。c-Jun能够与miR-141-3p启动子的-348至-295序列结合,该片段缺失后,Wnt5a无法促进miR-141-3p的表达(P>0.05)。结论:Wnt5a/JNK/c-Jun信号通路能够上调miR-141-3p的表达,从而促进PCa细胞的VM形成,其机制可能与CSC特性的激活有关。 展开更多
关键词 前列腺癌 miR-141-3p wnt5a 血管生成拟态 肿瘤干细胞
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角质形成细胞Wnt5a调控MMP9参与CRPS-Ⅰ型外周敏化机制研究
3
作者 朱贺 闻蓓 +1 位作者 许力 黄宇光 《协和医学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第2期335-343,共9页
目的探究皮肤角质形成细胞Wnt5a通过靶向调控基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase⁃9,MMP9)的表达参与复杂区域疼痛综合征(complex regional pain syndrome,CRPS)⁃Ⅰ型外周敏化的机制,寻找该慢性疼痛的潜在治疗策略。方法本研究分... 目的探究皮肤角质形成细胞Wnt5a通过靶向调控基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase⁃9,MMP9)的表达参与复杂区域疼痛综合征(complex regional pain syndrome,CRPS)⁃Ⅰ型外周敏化的机制,寻找该慢性疼痛的潜在治疗策略。方法本研究分为两部分,第一部分为体外实验。体外培养人永生化角质形成细胞HaCaT进行氧糖剥夺/复氧(oxygen⁃glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)处理,初步观察OGD/R早期(24 h内)线粒体损伤及膜电位变化,并探究给予不同浓度Wnt5a抑制剂Box5对MMP9的影响。第二部分为动物实验。将大鼠随机分为慢性缺血后疼痛(chronic postischemia pain,CPIP)组、Box5(20)组、Box5(40)组和对照组,每组8只,CPIP组、Box5(20)组、Box5(40)组先建立大鼠患肢缺血再灌注CPIP模型,模拟CRPS⁃Ⅰ型病理生理过程,Box5(20)组和Box5(40)组在此基础上分别足底注射20μmol/L和40μmol/L Box5溶液100μL,对照组和CPIP组则分别注射生理盐水100μL。通过疼痛行为学测定观察4组大鼠2周内不同时间点(D1,D2,D4,D10,D14)机械痛和热痛阈值变化情况。HE染色观察大鼠皮肤炎症浸润及角化情况,免疫荧光染色观察4组MMP9的表达情况,ELISA检测4组背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)的IL⁃1β及肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor⁃α,TNF⁃α)水平。结果体外实验:HaCaT细胞进行OGD/R处理后,MMP9平均荧光强度显著增加(P<0.001);透射电镜下观察到OGD/R组出现线粒体明显萎缩,线粒体膜电位检测显示,与对照组相比,OGD/R组提示线粒体膜电位下降明显(P=0.027)。动物实验:与OGD/R组相比,仅Box5(40)组线粒体膜电位上升具有统计学差异(P=0.046)。行为学检测发现CPIP组大鼠术后各时间点(D1,D2,D4,D10,D14)机械痛阈值和热痛阈值均显著降低(P均<0.05)。HE染色提示CPIP组大鼠患足真皮层出现大量炎症细胞浸润,表皮出现过度角化,颗粒层及棘层厚度显著增加(P<0.001)。免疫荧光试验显示,CPIP组角质形成细胞MMP9荧光强度显著增加(P<0.001);与CPIP组相比,Box5(20)组(P=0.002)和Box5(40)组(P<0.001)MMP9荧光强度均显著下降。ELISA检测结果显示,CPIP组IL⁃1β(P=0.048)和TNF⁃α浓度(P=0.002)显著升高;与CPIP组相比,Box5(40)组IL⁃1β(P=0.047)和TNF⁃α浓度(P=0.047)显著下降。结论外周局部缺血再灌注损伤可导致角质形成细胞MMP9过度表达,引起CRPS⁃Ⅰ型外周敏化。靶向抑制Wnt5a/MMP9可逆转CPIP大鼠疼痛行为,为临床治疗慢性痛提供了参考依据。 展开更多
关键词 复杂区域疼痛综合征 角质形成细胞 wnt5a MMP9 外周敏化
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新风胶囊通过结合Wnt5a经Wnt/β-catenin信号通路抑制类风湿性关节炎
4
作者 黄玉蓉 彭艳慧 +2 位作者 王冰 缪成贵 王校 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1134-1145,共12页
目的:本研究将探讨Wnt5a是否可以作为类风湿性关节炎(RA)潜在的诊断和治疗靶点,新风胶囊(XFC)如何通过Wnt5a/β-catenin信号通路改善RA。方法:在体内Adjuvant arthritis(AA)大鼠模型中采用ELISA和RT-qPCR检测炎症因子和病理基因研究XFC... 目的:本研究将探讨Wnt5a是否可以作为类风湿性关节炎(RA)潜在的诊断和治疗靶点,新风胶囊(XFC)如何通过Wnt5a/β-catenin信号通路改善RA。方法:在体内Adjuvant arthritis(AA)大鼠模型中采用ELISA和RT-qPCR检测炎症因子和病理基因研究XFC对AA大鼠疗效,RT-qPCR检测验证XFC调控通过网络药理学预测的核心基因和关键通路。在体外原代AA成纤维样滑膜细胞(FLS)中采用RT-qPCR、Western blot和免疫荧光等方法研究XFC对Wnt/β-catenin通路的调节机制。结果:XFC显著下调AA大鼠的关节炎评分和足爪肿胀,抑制AA大鼠关节炎症。XFC降低AA大鼠外周血中炎症因子TNF-α和IL-1水平,抑制AA大鼠关节滑膜和AA FLS中病理基因MMP3和fibronectin水平。网络药理学预测出Wnt通路与XFC治疗RA高度相关。细胞水平上,含XFC血清抑制Wnt通路相关基因β-catenin、CCND1和c-Myc的表达。分子对接结果显示XFC关键成分与Wnt5a的结合能力强,在AA FLS中Wnt5a过表达(Wnt5a-ove)干扰了XFC的作用。结论:Wnt5a在AA FLS和RA FLS中表达明显升高,XFC通过与Wn5a结合,抑制Wnt/β-catenin信号通路活化改善RA,为XFC改善RA提供新的治疗机制。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 成纤维样滑膜细胞 新风胶囊 wnt5a WNT/Β-CATENIN信号通路
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肝细胞肝癌中Wnt5a、β-catenin和E-cadherin蛋白的表达及临床意义 被引量：13
5
作者 刘晓红 周航波 +3 位作者 马恒辉 周志毅 陆珍凤 周晓军 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期400-403,共4页
目的初步探讨Wnt5 a、β-catenin和E-cadherin的表达与肝细胞肝癌(HCC)发生、发展和转移的关系。方法采用免疫组化ABC及EnVision方法,检测30例HCC(包括10例尸检样本)癌旁、癌组织中Wnt5a、β-catenin和E-cadherin的表达,结合Ki-67进行... 目的初步探讨Wnt5 a、β-catenin和E-cadherin的表达与肝细胞肝癌(HCC)发生、发展和转移的关系。方法采用免疫组化ABC及EnVision方法,检测30例HCC(包括10例尸检样本)癌旁、癌组织中Wnt5a、β-catenin和E-cadherin的表达,结合Ki-67进行统计学分析。结果对比于癌旁组织,83%(25/30)的HCC癌组织内Wnt5a蛋白低或缺失表达(P<0.001),其异常表达还相关于高的肿瘤分期(P=0.010)、高的Ki-67指数(P=0.013),以及β-catenin(P=0.025)和E-cadherin(P=0.003)的膜下降表达。癌组织中β-catenin膜下降表达相关于E-cadherin的膜下降表达(P=0.047)。80%(24/30)HCC癌组织中E-cadherin膜下降表达,相关于高的肿瘤分期(P=0.048)、高的K i-67指数(P=0.042)和尸检组肿瘤转移的发生(P=0.033)。结论Wnt5a缺失表达是HCC进展中的频发事件,并相关于β-catenin和E-cadherin的异常表达。Wnt5a在HCC中发挥肿瘤抑制基因样的作用,该蛋白极可能是一个有用的HCC预后不良指标。 展开更多
关键词 肝肿瘤 肝细胞癌 wnt5a Β-CATENIN E-CADHERIN
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Wnt5a基因在血液病及白血病细胞株中的表达 被引量：10
6
作者 李招权 司维柯 +2 位作者 潘静 袁媛 邹全明 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第5期927-930,共4页
本研究观察Wnt5a在部分血液病及白血病细胞株中的表达情况,为进一步研究Wnt5a在血液肿瘤中的作用及其机制打下基础。用人淋巴细胞分离液分离外周血和骨髓单个核细胞,以RT-PCR检测31例病例标本及3种白血病细胞株中Wnt5a的表达。结果表明:... 本研究观察Wnt5a在部分血液病及白血病细胞株中的表达情况,为进一步研究Wnt5a在血液肿瘤中的作用及其机制打下基础。用人淋巴细胞分离液分离外周血和骨髓单个核细胞,以RT-PCR检测31例病例标本及3种白血病细胞株中Wnt5a的表达。结果表明:5例AML中4例均为阴性或弱阳性,仅1例完全缓解的病例表达呈强阳性。K562、HL-60细胞的Wnt5a表达也为阴性,Jurkat细胞的Wnt5a表达阳性。6例CML的Wnt5a表达均为阴性。4例ALL中3例为表达阳性或弱阳性,1例表达为阴性;2例CLL为阴性表达;2例MM中Wnt5a表达1例为弱阳性,1例为阴性;3例淋巴瘤中有1例为弱阳性,2例为阴性;2例AA、2例IDA、3例ITP、1例ET及PVWnt5a表达均为阳性或弱阳性。结论:在31例血液病标本及髓系白血病细胞株中,除ALL外,有明显的Wnt5a表达缺失或降低,而非恶性血液病例中Wnt5a表达普遍呈阳性,提示Wnt5a的表达下调可能与髓系白血病的发生有关。 展开更多
关键词 wnt5a 血液病 白血病细胞株 基因表达
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哮喘大鼠肺组织中Wnt5a/JNK信号通路相关分子表达增强 被引量：7
7
作者 韩亭亭 曹茵茵 +2 位作者 田丽君 冯学斌 王跃嗣 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期325-327,332,共4页
目的研究Wnt5a/JNK信号通路相关分子在哮喘大鼠肺组织中的表达。方法将实验大鼠随机分为正常组和哮喘组,成功复制哮喘模型后,通过HE染色观察气道病理改变,实时荧光定量PCR检测肺组织和血液中Wnt5a mRNA的表达,Western blot法检测肺组织... 目的研究Wnt5a/JNK信号通路相关分子在哮喘大鼠肺组织中的表达。方法将实验大鼠随机分为正常组和哮喘组,成功复制哮喘模型后,通过HE染色观察气道病理改变,实时荧光定量PCR检测肺组织和血液中Wnt5a mRNA的表达,Western blot法检测肺组织中磷酸化的c-Jun(p-c-Jun),磷酸化的c-Jun N端激酶(JNK)蛋白的表达。结果与正常组相比,哮喘组支气管黏膜增厚,褶皱增多,管腔狭窄;气管和血管周围有炎细胞的浸润。气道壁与平滑肌层显著变厚。哮喘组大鼠肺组织和血液中Wnt5a mRNA与对照组比较表达上调,p-c-Jun,p-JNK蛋白表达增加。结论哮喘大鼠的Wnt5a、p-JNK、p-c-Jun表达增强。 展开更多
关键词 wnt5a 哮喘 C-JUN N端激酶
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补肾活血汤石油醚提取物对BMSCs迁移过程中Wnt5a/PKC通路的影响 被引量：10
8
作者 罗辉 吴志方 +4 位作者 沈玮 胡流超 王斌 余丽娟 罗毅文 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2462-2468,共7页
目的探讨补肾活血汤(熟地黄、菟丝子、补骨脂,等)石油醚提取物对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的迁移作用及相关机制。方法全骨髓贴壁法培养BMSCs,取第3代细胞用于实验,采用流式细胞仪检测细胞表面抗原,细胞划痕、Transwell实验观察补肾... 目的探讨补肾活血汤(熟地黄、菟丝子、补骨脂,等)石油醚提取物对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的迁移作用及相关机制。方法全骨髓贴壁法培养BMSCs,取第3代细胞用于实验,采用流式细胞仪检测细胞表面抗原,细胞划痕、Transwell实验观察补肾活血汤石油醚提取物0、25、50、100、200μg/m L剂量组的细胞迁移能力,Western blot和RT-PCR检测Wnt5a、蛋白激酶C(PKC)表达情况。结果第3代BMSCs表面抗原CD29、CD90、CD44表达阳性,而CD45表达阴性;细胞划痕6 h及12 h后,药物各剂量组细胞迁移速度明显高于空白组(P<0.05,P<0.01);Transwell实验中100μg/m L补肾活血汤石油醚提取物为促细胞迁移最佳剂量,差异有统计学意义(P<0.01);RT-PCR结果显示与空白对照组比较,药物各剂量组的Wnt5a mRNA水平均升高(P<0.05,P<0.01),而与空白对照组的PKC mRNA水平比较,药物只有100μg/m L剂量mRNA表达水平升高(P<0.01);Western blot结果表明药物组各剂量的Wnt5a、PKC蛋白表达较空白对照组都明显升高(P<0.01),均且以100μg/m L剂量最高(P<0.01)。结论补肾活血汤石油醚提取物可以促进BMSCs体外迁移,其作用机制可能与Wnt5a/PKC信号通路有关。 展开更多
关键词 补肾活血汤 信号通路 体外迁移 骨髓间充质干细胞 wnt5a PKC
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Wnt5a在肺癌A549细胞球增殖和上皮间质转化中的作用及机制研究 被引量：6
9
作者 胡欣春 徐建军 +2 位作者 喻东亮 彭金华 魏益平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第18期1890-1894,共5页
目的研究Wnt5a在A549细胞球增殖和EMT中的作用及相关机制。方法利用无血清培养出A549细胞球后应用流式细胞术对其进行CD133+CD44+表达检测。实验分为对照组、Wn5a组、p38组和Wnt5a+p38组。应用Western blot观察各组Wnt5a、p-p38、β-cat... 目的研究Wnt5a在A549细胞球增殖和EMT中的作用及相关机制。方法利用无血清培养出A549细胞球后应用流式细胞术对其进行CD133+CD44+表达检测。实验分为对照组、Wn5a组、p38组和Wnt5a+p38组。应用Western blot观察各组Wnt5a、p-p38、β-catenin、Vimentin和E-cadherin蛋白的表达变化,并利用MTT和裸鼠成瘤实验观察Wnt5a shRNA慢病毒感染前后A549细胞球的生长抑制率和成瘤能力。结果流式细胞术检测A549细胞球中CD133+CD44+阳性率为60.5%;Wnt5a蛋白在Wnt5a组和Wnt5a+p38组中的表达较对照组明显下调(P<0.05),p-p38蛋白、β-catenin蛋白、Vimentin蛋白在Wnt5a组、p38组和Wnt5a+p38组的表达明显低于对照组(P<0.05),而E-cadherin蛋白在上述3组中的表达显著高于对照组(P<0.05)。Wnt5a shRNA慢病毒感染A549细胞球12、24 h和48 h时抑制率显著高于对照组(P<0.05),并且该细胞的成瘤能力较对照组显著下调。结论下调Wnt5a表达可抑制A549细胞球的增殖及EMT能力,可望成为治疗非小细胞肺癌的靶点。 展开更多
关键词 wnt5a 肺癌干细胞 增殖 上皮间质转化
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Wnt5a在小鼠牙骨质发育中的表达特点及其对成牙骨质细胞分化的影响 被引量：5
10
作者 包幸福 倪宇昕 +4 位作者 李莹 郭小凯 王玉琢 方蛟 胡敏 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期461-465,693,共6页
目的:探讨Wnt家族5A蛋白(Wnt5a)在小鼠出生后牙骨质中的表达特点以及其对体外培养成牙骨质细胞分化的影响,阐明Wnt非经典通路调控牙根发育的机制。方法:选择出生后0.5、4.5、10.5、16.5、20.5、24.5、26.5和30.5d昆明小鼠并按以上相应... 目的:探讨Wnt家族5A蛋白(Wnt5a)在小鼠出生后牙骨质中的表达特点以及其对体外培养成牙骨质细胞分化的影响,阐明Wnt非经典通路调控牙根发育的机制。方法:选择出生后0.5、4.5、10.5、16.5、20.5、24.5、26.5和30.5d昆明小鼠并按以上相应时间点分组,每组3只;在相应时间点采用脱臼法处死小鼠,分离下颌第一磨牙及牙周组织。免疫组织化学染色法观察小鼠牙体和牙周组织中Wnt5a的表达特点。将小鼠成牙骨质细胞OCCM30分为实验组和对照组。实验组加入200μg·L^(-1)重组Wnt5a蛋白,对照组无添加;提取细胞总RNA。RT-PCR法检测2组OCCM30细胞中Ocn、Opn、Alp、Bsp、Wnt5a和Runx-2基因的相对表达水平。结果:小鼠出生后0.5d,第一磨牙牙胚中无Wnt5a阳性表达;出生后4.5d,成釉细胞和成牙本质细胞中Wnt5a阳性表达较强;出生后16.5d,可见成牙骨质细胞中Wnt5a呈阳性表达;出生后20.5~30.5d,成牙本质细胞和牙周膜细胞中Wnt5a呈阳性表达。与对照组比较,实验组成牙骨质细胞中Ocn和Alp基因相对表达水平降低(P<0.05)。结论:Wnt5a在牙根发育过程中的表达特点为从无到有,呈现规律性表达;Wnt5a下调分化基因的表达,在牙骨质发育中发挥重要作用。 展开更多
关键词 wnt5a 牙发育 牙骨质 成牙骨质细胞 免疫组织化学
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Wnt5a与髓细胞白血病发生关系的研究 被引量：5
11
作者 袁媛 李招权 +2 位作者 司维柯 潘静 赵宸 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第21期2056-2059,共4页
目的观察Wnt5a在髓细胞白血病中的表达以及外源性Wnt5a对K562细胞生长的影响。方法RT-PCR检测5例急性髓细胞白血病、6例慢性髓细胞白血病外周血或骨髓标本及白血病细胞系中Wnt5a的表达。用AdWnt5a和AdG-FP腺病毒转染CHO细胞制备的条件... 目的观察Wnt5a在髓细胞白血病中的表达以及外源性Wnt5a对K562细胞生长的影响。方法RT-PCR检测5例急性髓细胞白血病、6例慢性髓细胞白血病外周血或骨髓标本及白血病细胞系中Wnt5a的表达。用AdWnt5a和AdG-FP腺病毒转染CHO细胞制备的条件培养液分别处理K562细胞1～5d,采用细胞计数、台盼蓝染色、细胞形态等方法观察Wnt5a对K562细胞生长影响。结果6例慢性髓细胞白血病均未表达Wnt5a,5例急性髓细胞白血病中4例不表达或弱表达,仅1例完全缓解的病人高表达Wnt5a。K562、HL-60细胞中Wnt5a也不表达,Jurkat细胞高表达。以GFP条件培养液处理细胞为对照,Wnt5a条件培养液处理K562细胞生长明显受到抑制,但未影响细胞的存活率。与对照相比细胞形态上出现了分化的表型。结论Wnt5a在急慢性髓细胞白血病外周血或骨髓中以及髓系白血病细胞株中均表达缺失或降低,并且外源性的Wnt5a可抑制K562细胞生长并有诱导其分化的现象,提示Wnt5a的表达下调可能与髓细胞白血病的发生有关。 展开更多
关键词 wnt5a 白血病 K562细胞 WNT信号 重组腺病毒
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外源性Wnt5a诱导K562细胞分化表型的实验研究 被引量：6
12
作者 袁媛 司维柯 +2 位作者 李招权 潘静 赵宸 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第5期946-949,共4页
本研究探讨外源性Wnt5a诱导K562细胞定向分化的作用。用重组腺病毒AdWnt5a、AdGFP感染CHO细胞,分别制备Wnt5a和GFP对照条件培养液,并处理K562细胞1-7天,用光学显微镜和电子显微镜观察细胞形态变化;采用过氧化物酶(POX)、糖原(PAS)和非... 本研究探讨外源性Wnt5a诱导K562细胞定向分化的作用。用重组腺病毒AdWnt5a、AdGFP感染CHO细胞,分别制备Wnt5a和GFP对照条件培养液,并处理K562细胞1-7天,用光学显微镜和电子显微镜观察细胞形态变化;采用过氧化物酶(POX)、糖原(PAS)和非特异性酯酶(α-NAE)染色、细胞表面分化抗原CD13、CD14、CD68鉴定K562细胞的分化表型;用流式细胞术检测细胞分化周期的变化。结果表明:与对照GFP条件培养液相比,Wnt5a条件培养液处理的K562细胞形态和超微结构均出现了分化成熟的特征;POX、PAS、α-NAE细胞化学染色均为阳性,并且α-NAE阳性70%可被氟化钠抑制;单核细胞系表面标志抗原CD14、CD68和粒细胞系表面标志抗原CD13经免疫细胞化学染色均呈阳性,但CD13与对照比较无显著性差异;Wnt5a处理K562细胞5天,细胞周期阻滞在G2期。结论:外源性的Wnt5a可诱导K562细胞向成熟方向分化,并且有向单核细胞系分化的现象。 展开更多
关键词 wnt5a K562细胞 诱导分化 WNT信号
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外源性Wnt5a激活K562细胞非经典Wnt5a／Ca^2＋信号途径研究 被引量：4
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作者 李招权 司维柯 +3 位作者 邹全明 袁媛 潘静 赵宸 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期924-927,共4页
目的观察外源性Wat5a对K562细胞非经典Wnt5a/Ca2+途径的影响,进一步研究外源性Wnt5a诱导K562细胞的分化机制。方法激光共聚焦显微镜观察Ca2+内流的变化,以RT-PCR及免疫组化检测β-catenin的表达变化,以Western blot检测cyclinD1的表达... 目的观察外源性Wat5a对K562细胞非经典Wnt5a/Ca2+途径的影响,进一步研究外源性Wnt5a诱导K562细胞的分化机制。方法激光共聚焦显微镜观察Ca2+内流的变化,以RT-PCR及免疫组化检测β-catenin的表达变化,以Western blot检测cyclinD1的表达变化。结果外源性Wnt5a能明显促进K562细胞Ca2+内流,显著下调cyclinD1表达,且能下调K562细胞β-catenin表达,但β-catenin表达下调无统计学意义。结论外源性Wnt5a能激活K562细胞非经典Wnt5a/Ca2+途径,外源性Wnt5a诱导K562细胞分化机制可能与此相关。 展开更多
关键词 wnt5a K562细胞 CA^2+ β-catenin CYCLIN D1
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Wnt5a基因对肝癌细胞增殖及迁移能力的影响 被引量：8
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作者 毕利泉 刘晓红 +3 位作者 陈英剑 曹永成 毛蕊琪 耿明 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期857-861,共5页
目的探讨Wnt5a基因对人肝癌细胞MHCC97L生物学行为的影响。方法脂质体法介导Wnt5a表达及阴性对照质粒转染MHCC97L细胞;RT-PCR及Western blot法检测质粒DNA片段插入和Wnt5a蛋白的表达;借助生长曲线、平板克隆形成、细胞周期和划痕试验对... 目的探讨Wnt5a基因对人肝癌细胞MHCC97L生物学行为的影响。方法脂质体法介导Wnt5a表达及阴性对照质粒转染MHCC97L细胞;RT-PCR及Western blot法检测质粒DNA片段插入和Wnt5a蛋白的表达;借助生长曲线、平板克隆形成、细胞周期和划痕试验对转染细胞的生物学活性进行检测。结果 pcDNA3.1组细胞生长速度明显快于Wnt5a表达组细胞;pcDNA3.1组细胞克隆形成率明显高于Wnt5a表达组(P<0.05);流式细胞仪检测结果显示Wnt5a表达能抑制细胞由G1期→S期的进程;划痕试验显示,Wnt5a表达组较阴性对照组细胞迁移速度明显减慢,当加入Wnt5a抗体阻遏信号通路时,细胞迁移速度加快。结论 Wnt5a可抑制人肝癌细胞MHCC97L的增殖和迁移能力,在肿瘤生长过程中发挥肿瘤抑制基因样作用。 展开更多
关键词 肝肿瘤 肝细胞癌 wnt5a
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慢性根尖周炎中Wnt5a与骨吸收的关系 被引量：6
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作者 徐莉雅 马楠 +3 位作者 仇丽鸿 于雅琼 于静涛 薛明 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期172-176,共5页
目的:检测Wnt5a在慢性根尖周炎病损中的表达以及Wnt5a与病变范围的关系。方法:18例慢性根尖周炎患者,根据病变大小分为A组(d≥6mm)、B组(6mm>d≥3mm),21例因正畸需要而拔除的健康牙作对照组,采用RT-PCR(Real-Time PCR)法,从mRNA水平... 目的:检测Wnt5a在慢性根尖周炎病损中的表达以及Wnt5a与病变范围的关系。方法:18例慢性根尖周炎患者,根据病变大小分为A组(d≥6mm)、B组(6mm>d≥3mm),21例因正畸需要而拔除的健康牙作对照组,采用RT-PCR(Real-Time PCR)法,从mRNA水平检测Wnt5a的表达,分析Wnt5amRNA表达与临床病变范围的关系。A组、B组及对照组各随机抽取5例进行免疫组化。采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析。结果:RT-PCR结果中病例组Wnt5amRNA表达水平显著高于对照组(P<0.05);A组中Wnt5amRNA表达水平显著高于对照组(P<0.01);A组中Wnt5amRNA表达水平与B组相比(P<0.01);B组中Wnt5amRNA表达水平与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组化结果中病例组Wnt5a表达水平显著高于正常对照组(P<0.01),A组Wnt5a的表达水平显著高于正常对照组(P<0.01);B组Wnt5a的表达水平高于正常对照组(P<0.05);A组中Wnt5a表达水平高于B组(P<0.05)。结论:Wnt5a与慢性根尖周炎的骨组织吸收相关,可能促进了骨吸收的发展。 展开更多
关键词 慢性根尖周炎 wnt5a RT—PCR法免疫组化法骨吸收
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Wnt5a在胰腺癌及癌前病变中的表达差异分析 被引量：3
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作者 王伟 满晓华 +3 位作者 郑建明 李兆申 高军 龚燕芳 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期265-269,共5页
目的检测Wnt5a基因在不同胰腺组织中的蛋白表达水平,探讨其在胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocar-cinoma,PDAC)发生中的作用,为胰腺癌的早期诊疗提供新线索。方法免疫组化SP法检测Wnt5a在21灶正常胰腺导管(normal pancreatic duct... 目的检测Wnt5a基因在不同胰腺组织中的蛋白表达水平,探讨其在胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocar-cinoma,PDAC)发生中的作用,为胰腺癌的早期诊疗提供新线索。方法免疫组化SP法检测Wnt5a在21灶正常胰腺导管(normal pancreatic duct,NP)、73灶胰腺上皮内瘤变(pancreatic intraepithelial neoplasia,PanIN)-1、29灶PanIN-2、16灶PanIN-3、20例胰腺导管内乳头状黏液性肿瘤(intraductal papillary mucinous neoplasm,IPMN)腺瘤(IPMN-adenoma,IPMA)、13例IPMN交界瘤(IPMN-borderline,IPMB)、19例IPMN黏液癌(IPMN-carcinoma,IPMC)及50例PDAC组织中的蛋白表达。分析Wnt5a的表达与PDAC患者临床病理特征及患者术后生存期的关系。结果随着组织病变级别升高,Wnt5a表达逐渐增强,各组Wnt5a的免疫组化评分分别为NP(0)、PanIN-1(1.90±1.192)、PanIN-2(3.03±1.322)、PanIN-3(4.88±1.455)、IPMA(1.40±0.940)、IPMB(2.62±1.502)、IPMC(3.00±1.374)、PDAC(3.11±2.635)。Wnt5a的表达与肿瘤的增殖活度、远处转移、TNM分期及患者术后生存期相关(P<0.05),Wnt5a高表达组、低表达组的中位生存期分别为15个月和21个月(P=0.015)。结论 Wnt5a参与了PDAC的发生、发展;Wnt5a表达增强是PDAC的早期事件;Wnt5a的持续表达和过度表达影响了胰腺癌的增殖、侵袭和转移过程,并预示患者预后不良。 展开更多
关键词 胰腺导管腺癌 胰腺上皮内瘤变 导管内乳头状黏液性肿瘤 wnt5a
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高通量组织微阵列研究Wnt5a和LMP1在鼻咽癌癌变中的作用 被引量：3
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作者 徐丽娜 郑军 +2 位作者 李姣 石磊 范松青 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期865-870,共6页
目的:研究Wnt5a和EB病毒潜伏膜蛋白1(Epstein-Barr virus latent membrane protein 1,LMP1)在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)癌变过程中作用的分子机制,评估其是否可作为NPC相关的分子标志物。方法:利用前期制备的NPC组织微阵列... 目的:研究Wnt5a和EB病毒潜伏膜蛋白1(Epstein-Barr virus latent membrane protein 1,LMP1)在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)癌变过程中作用的分子机制,评估其是否可作为NPC相关的分子标志物。方法:利用前期制备的NPC组织微阵列芯片,免疫组织化学检测Wnt5a和LMP1在NPC癌变过程不同组织中的蛋白表达,分析Wnt5a异常激活和LMP1蛋白过表达在NPC发生发展中的作用及其与NPC临床病理特征的关系,评估其是否可作为鉴别鼻咽良恶性病变的分子标志物。结果:Wnt5a和LMP1蛋白在NPC中的阳性表达率显著高于异型增生鼻咽上皮、增生鼻咽上皮和正常鼻咽上皮(P<0.05,P<0.01,P<0.01);异型增生鼻咽上皮中的Wnt5a和LMP1蛋白阳性表达率也显著高于增生鼻咽上皮和正常鼻咽上皮(P<0.05,P<0.01)。Wnt5a蛋白和LMP1蛋白在临床Ⅲ和Ⅳ期NPC组织中的阳性表达率显著高于临床Ⅰ和Ⅱ期(P<0.01,P<0.05),有淋巴结转移的NPC组织中Wnt5a蛋白阳性表达率也显著高于无淋巴结转移NPC组织(P<0.01),非角化性NPC组织LMP1蛋白阳性表达显著高于未分化癌和角化性癌(P<0.05,P<0.05);NPC组织中Wnt5a与LMP1蛋白的阳性表达存在显著正相关性(r=0.354,P<0.001)。LMP1和Wnt5a蛋白联合表达检测有助于鼻咽良恶性病变的鉴别。结论:NPC组织中Wnt5a和LMP1的表达存在显著正相关,两者可能共同或相继促进鼻咽上皮细胞的恶性转化和NPC的发生发展;联合应用LMP1和Wnt5a可作为NPC鉴别诊断的较好分子标志物。 展开更多
关键词 鼻咽癌 wnt5a EB病毒 LMP1 组织微阵列 免疫组织化学
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烧伤脓毒症患者血清Wnt5a水平变化及其临床意义 被引量：3
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作者 尹朝奇 贺全勇 +7 位作者 罗成群 周建大 朱颉 李萍 陈铁夫 彭浩 徐阳成 陈佳 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1165-1167,共3页
目的观察烧伤脓毒症患者血清Wnt5a水平变化。方法采集烧伤脓毒症患者的血清标本,采用Western blotting法检测Wnt5a水平,并比较轻、中、重度脓毒症患者血清Wnt5a水平。同期选取轻度烧伤的非脓毒症患者8例作对照。结果烧伤脓毒症患者血清W... 目的观察烧伤脓毒症患者血清Wnt5a水平变化。方法采集烧伤脓毒症患者的血清标本,采用Western blotting法检测Wnt5a水平,并比较轻、中、重度脓毒症患者血清Wnt5a水平。同期选取轻度烧伤的非脓毒症患者8例作对照。结果烧伤脓毒症患者血清Wnt5a水平高于对照者。动态观察发现,脓毒症痊愈后患者血清Wnt5a水平降低,而随着脓毒症病情恶化血清Wnt5a水平持续升高。结论Wnt5a参与了烧伤患者炎症的发病过程,且检测Wnt5a水平可作为炎症严重程度的诊断指标。 展开更多
关键词 wnt5a 烧伤 脓毒症 炎症因子
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脓毒症患儿不同血糖水平对脏器损伤、氧化应激反应及Wnt5a炎症通路的影响 被引量：5
19
作者 邹莉 方兴 梅文静 《海南医学院学报》 CAS 2017年第5期638-641,共4页
目的:探讨脓毒症患儿不同血糖水平对脏器损伤、氧化应激反应及Wnt5a炎症通路的影响。方法:回顾性收集2014年1月~2015年12月间广东省惠州市中心人民医院收治的脓毒症患儿70例,根据血糖水平分为脓毒症A组(血糖>10mmol/L)29例、脓毒症B... 目的:探讨脓毒症患儿不同血糖水平对脏器损伤、氧化应激反应及Wnt5a炎症通路的影响。方法:回顾性收集2014年1月~2015年12月间广东省惠州市中心人民医院收治的脓毒症患儿70例,根据血糖水平分为脓毒症A组(血糖>10mmol/L)29例、脓毒症B组(血糖≤10mmol/L)41例,另取同期在广东省惠州市中心人民医院接受疫苗接种、血糖水平正常的健康小儿50例作为健康对照组。入院后当日,采用放射免疫法检测肝功能指标;采用全自动生化仪检测氧化应激指标;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测Wnt5a炎症通路指标含量。结果:脓毒症A组患者的肝功能指标TBIL、ALT、AST含量高于脓毒症B组及健康对照组(P<0.05);氧化应激指标AOPPs、LHP、ROS、MDA含量高于脓毒症B组及健康对照组,GSH-Px含量小于脓毒症B组及健康对照组(P<0.05);血清Wnt5a炎症通路指标IL-1β、IL-6、IL-12、MIP-1β含量高于脓毒症B组及健康对照组(P<0.05)。结论:高血糖的脓毒症患儿肝功能损伤较重,氧化应激及炎症反应程度剧烈,是病情严重及预后不佳的重要指标。 展开更多
关键词 脓毒症 血糖水平 肝功能 氧化应激 wnt5a炎症通路 儿童
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子宫颈鳞状细胞癌及其癌前病变中Wnt5a的表达 被引量：3
20
作者 平静 田杰 +3 位作者 陈莹 刘小燕 周东华 邓凯贤 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期796-798,共3页
目的 检测Wnt5a在子宫颈浸润性鳞状细胞癌（squa-mous cell carcinoma,SCC）及子宫颈上皮内瘤变（cervical in-traepithelial neoplasia,CIN）组织中的表达,探讨其在子宫颈SCC中的作用。方法 应用原位杂交技术和免疫组化HRP法分别检测... 目的 检测Wnt5a在子宫颈浸润性鳞状细胞癌（squa-mous cell carcinoma,SCC）及子宫颈上皮内瘤变（cervical in-traepithelial neoplasia,CIN）组织中的表达,探讨其在子宫颈SCC中的作用。方法 应用原位杂交技术和免疫组化HRP法分别检测正常子宫颈、CINⅠ、CINⅡ～Ⅲ和SCC（各30例）组织中Wnt5amRNA及蛋白的表达。结果 Wnt5amR-NA及蛋白在CINⅡ～Ⅲ和SCC中的阳性率分别为56.7%（17/30）、66.7%（20/30）和93.3%（28/30）、96.7%（29/30）,均明显高于CINⅠ及正常子宫颈组织（P〈0.01）;Wnt5amRNA及蛋白在SCC中的阳性率明显高于CINⅡ～Ⅲ（P〈0.01）,Wnt5amRNA及蛋白在CINⅠ和正常子宫颈组织中的阳性率差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 Wnt5amRNA及蛋白的阳性率与子宫颈鳞状上皮细胞病变的严重程度密切相关,可能促进子宫颈SCC的发生、发展。 展开更多
关键词 子宫颈肿瘤 子宫颈上皮内瘤变 wnt5a 原位杂交 免疫组织化学
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