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miR-130b-3p靶向USP47去泛素化NLRP3在哮喘气道重塑中的作用机制
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作者 全昶霖 王知广 +3 位作者 白巧云 丁宁坡 宋艺兰 延光海 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第8期1500-1508,共9页
目的研究miR-130b-3p通过调控泛素特异性肽酶47(USP47)/NLRP3炎症小体在哮喘气道重塑中的作用机制,探索其在哮喘治疗中的潜在应用价值。方法使用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)诱导的哮喘小鼠模型,通过miR-130b-3p agomir干预,结合组织学染色... 目的研究miR-130b-3p通过调控泛素特异性肽酶47(USP47)/NLRP3炎症小体在哮喘气道重塑中的作用机制,探索其在哮喘治疗中的潜在应用价值。方法使用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)诱导的哮喘小鼠模型,通过miR-130b-3p agomir干预,结合组织学染色、实时荧光PCR、Western blot、免疫荧光和流式细胞术等技术,分析miR-130b-3p对USP47、NLRP3及相关炎症因子的表达和炎症小体活性的影响。结果miR-130b-3p在哮喘小鼠中明显下调,其干预能够明显抑制气道上皮损伤、炎症细胞浸润和胶原沉积。此外,miR-130b-3p靶向调控USP47并间接抑制NLRP3的表达,从而降低炎症小体活性,减轻哮喘相关的炎症反应。结论miR-130b-3p通过下调USP47的表达,间接抑制了NLRP3炎症小体的活性,从而减轻了哮喘相关的炎症反应。 展开更多
关键词 哮喘 miR-130b-3p usp47 NLRP3炎症小体 气道重塑
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USP47通过促进抗凋亡蛋白表达介导头颈鳞癌细胞顺铂耐药
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作者 童桐 秦星 +3 位作者 谢非 蒋英英 石剑波 张建军 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期434-441,共8页
目的·探讨去泛素化酶47(ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase 47,USP47)对头颈鳞癌细胞顺铂耐药的影响及潜在机制。方法·通过梯度增加顺铂浓度,构建头颈鳞癌顺铂耐药细胞株;通过实时定量PCR和蛋白免疫印迹实验检测耐药株中... 目的·探讨去泛素化酶47(ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase 47,USP47)对头颈鳞癌细胞顺铂耐药的影响及潜在机制。方法·通过梯度增加顺铂浓度,构建头颈鳞癌顺铂耐药细胞株;通过实时定量PCR和蛋白免疫印迹实验检测耐药株中USP47的表达情况;利用慢病毒载体构建USP47基因过表达或敲除的稳转细胞株,MTT法检测USP47表达升高或降低对头颈鳞癌细胞顺铂耐药性的影响;并检测USP47对癌细胞增殖、克隆形成和凋亡等生物学行为的影响;通过免疫印迹实验检测USP47对抗凋亡蛋白X-连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)和重组人B细胞淋巴瘤因子2 xL(recombinant human B-cell leukemia/lymphoma 2 xL,Bcl-xL)的表达及泛素化水平的影响。结果·USP47在头颈鳞癌顺铂耐药细胞株中显著高表达;过表达USP47后,顺铂对头颈鳞癌细胞的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)明显升高,而敲除USP47可以降低头颈鳞癌顺铂耐药细胞株的IC50;过表达USP47的头颈鳞癌细胞,其增殖和克隆形成能力均被抑制,而抗凋亡能力明显增强。USP47基因过表达显著提高了抗凋亡蛋白XIAP和Bcl-xL的表达量。泛素化测定证实了USP47通过降低XIAP和Bcl-xL蛋白的泛素化水平从而导致其表达量升高,而敲低XIAP和Bcl-xL基因表达水平可以阻断USP47基因过表达诱导的顺铂耐药性。结论·USP47通过降低XIAP和Bcl-xL蛋白的泛素化修饰水平,提高两者的蛋白表达水平,从而介导头颈鳞癌细胞顺铂耐药;抑制USP47的表达对降低头颈鳞癌细胞顺铂耐药具有潜在应用价值。 展开更多
关键词 去泛素化酶47 顺铂耐药 头颈鳞癌 X-连锁凋亡抑制蛋白 重组人B细胞淋巴瘤因子2 xL
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