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大白菜抗TuMV-C_3的QTL分析 被引量:11
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作者 屈淑平 张彤 +1 位作者 张俊华 崔崇士 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期33-37,共5页
本研究以大白菜高抗TuMV-C3株系的自交系A52-2和感病自交系P9805杂交的F2代202个单株作为构建遗传图谱的作图群体,采用SRAP标记方法构建包含8个连锁群,由95个SRAP遗传标记组成的大白菜分子遗传图谱,该图谱覆盖长度为1151.1cM,平均图距12... 本研究以大白菜高抗TuMV-C3株系的自交系A52-2和感病自交系P9805杂交的F2代202个单株作为构建遗传图谱的作图群体,采用SRAP标记方法构建包含8个连锁群,由95个SRAP遗传标记组成的大白菜分子遗传图谱,该图谱覆盖长度为1151.1cM,平均图距12.1cM。运用软件Windows QTL Cartographer V2.5和复合区间作图法共检测到4个抗TuMV-C3的QTL位点。这一研究成果为开展大白菜TuMV抗性分子标记辅助育种提供了理论基础。 展开更多
关键词 大白菜 tumv—C3 SRAP 数量性状位点(QTL)
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芜菁花叶病毒(TuMV)侵染对寄主植物光合作用的影响 被引量:15
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作者 洪健 徐颖 +2 位作者 黎军英 臧荣春 蒋德安 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期110-113,共4页
本文以青菜 (Brassicachinensis)和芥菜 (B .juncea)的健康株及接种芜菁花叶病毒 (TuMV)的感病株为材料 ,比较测定了两者的光合作用参数 ,观察了细胞病变和叶绿体超微结构变化。结果表明 :受病毒侵染青菜和芥菜的叶绿素含量、光合速率... 本文以青菜 (Brassicachinensis)和芥菜 (B .juncea)的健康株及接种芜菁花叶病毒 (TuMV)的感病株为材料 ,比较测定了两者的光合作用参数 ,观察了细胞病变和叶绿体超微结构变化。结果表明 :受病毒侵染青菜和芥菜的叶绿素含量、光合速率、气孔导度、蒸腾速率比对照明显降低 ,Hill反应活性分别下降了 6 4 4 9%和 5 9 83%。病变细胞质内分布大量线形病毒粒子和柱状内含体 ,叶绿体片层结构发育差 ,淀粉粒积累减少 ,后期畸形肿胀 。 展开更多
关键词 寄主植物 芜菁花叶病毒 叶绿体 光合作用 超微结构 tumv
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大白菜TuMV抗性的主基因+多基因混合遗传分析 被引量:5
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作者 钱伟 张淑江 +3 位作者 章时蕃 李菲 张慧 孙日飞 《中国蔬菜》 北大核心 2012年第06X期16-21,共6页
以大白菜抗TuMV品种BP8407的高代自交系和感TuMV品种极早春的高代自交系,抗TuMV品种二青的高代自交系和感TuMV品种春大将的高代自交系配制两个F2群体。以F2群体人工摩擦接种TuMV-C4后的ELISA鉴定的P/N值为抗性鉴定指标,应用P1、P2、F1、... 以大白菜抗TuMV品种BP8407的高代自交系和感TuMV品种极早春的高代自交系,抗TuMV品种二青的高代自交系和感TuMV品种春大将的高代自交系配制两个F2群体。以F2群体人工摩擦接种TuMV-C4后的ELISA鉴定的P/N值为抗性鉴定指标,应用P1、P2、F1、F24个世代的数量性状主基因+多基因混合遗传分析方法,分析了大白菜TuMV抗性的遗传规律。结果表明:大白菜TuMV的抗性由2对主效基因控制,遗传模型分别为E-1、E-0,主基因遗传率分别为86.51%、77.64%。因此,大白菜对TuMV-C4抗性符合2对主基因+多基因的遗传模式,抗性遗传以主基因为主。 展开更多
关键词 大白菜 tumv 数量性状 主基因+多基因混合遗传
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大白菜抗TuMV分子标记辅助选择技术研究 被引量:4
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作者 李巧云 张志刚 +7 位作者 赵智中 刘栓桃 王立华 高会超 李溢真 徐文玲 刘贤娴 刘辰 《山东农业科学》 2017年第2期10-14,共5页
分别以大白菜TuMV国家级抗源材料8407和高感TuMV的核心种质材料冠291为亲本构建分离群体,为验证TuMV抗性基因TuRBCS01两侧紧密连锁的分子标记m Br4055和Br ID10723的检测准确率,对上述两个亲本F_2代分离群体的107个单株进行自交构建F_(2... 分别以大白菜TuMV国家级抗源材料8407和高感TuMV的核心种质材料冠291为亲本构建分离群体,为验证TuMV抗性基因TuRBCS01两侧紧密连锁的分子标记m Br4055和Br ID10723的检测准确率,对上述两个亲本F_2代分离群体的107个单株进行自交构建F_(2∶3)家系,并对每个家系的TuMV抗性进行鉴定,以判断原F_2单株的TuMV抗性及基因型,同时利用上述两个标记引物对F_2代107个单株进行检测,根据检测结果及抗病性鉴定结果计算标记检测的准确率。结果表明,两标记均检测为纯合抗病的株系有22株,其中有2株经抗病性验证为杂合抗病,其余均为纯合抗病,检测准确率为90.9%;两标记均检测为杂合抗病的有48株,经抗病性验证,其中5株为纯合抗病,5株为纯合感病,其余均为杂合抗病,检测准确率为79.2%;两标记均检测为纯合感病的有23株,经抗病性验证,其中4株为杂合抗病,1株为纯合抗病,鉴定准确率为78.3%。上述检测结果为更好地利用标记mBr4055和BrID10723进行分子标记辅助选择奠定了基础。 展开更多
关键词 大白菜 tumv 抗性基因 分子标记应用
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不结球白菜抗病育种研究Ⅴ.抗TuMV遗传研究 被引量:8
5
作者 曹光亮 曹寿椿 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第1期106-108,共3页
不结球白菜抗病育种研究Ⅴ.抗TuMV遗传研究曹光亮,曹寿椿(南京农业大学农业与生命科学学院,南京210095)STUDIESONBREEDINGFORDISEASERESISTANCEINNON-HEADINGCHI... 不结球白菜抗病育种研究Ⅴ.抗TuMV遗传研究曹光亮,曹寿椿(南京农业大学农业与生命科学学院,南京210095)STUDIESONBREEDINGFORDISEASERESISTANCEINNON-HEADINGCHINESECABBAGEⅤ.ASTU... 展开更多
关键词 白菜 不结球白菜 抗性育种 tumv 遗传
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对TuMV不同抗性的不结球白菜接种后过氧化物酶的变化 被引量:2
6
作者 曹光亮 曹寿椿 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第2期134-137,共4页
为探讨不结球白菜对TuMV的抗病性与植株体内过氧化物酶变化的关系,对不同抗性品系接种病毒后过氧化物酶活性的变化进行了研究,并观察了高抗和高感品系接种前后过氧化物同工酶谱的变化。
关键词 白菜 不结球 过氧化物酶 tumv
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不结球白菜BcCHC1蛋白参与调控TuMV侵染的初步研究
7
作者 刘芳 吕善武 +3 位作者 袁梦果 杨紫蕊 侯喜林 张昌伟 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1229-1238,共10页
【目的】为增强不结球白菜对芜菁花叶病素养(TuMV)的抗性,研究探讨了不结球白菜中BcCHC1蛋白与TuMV之间的相互作用机制。【方法】首先从不结球白菜中鉴定出重链网格蛋白(CHC)基因家族的成员BcCHCs,随后克隆了1个代表性的CHC1基因,并对... 【目的】为增强不结球白菜对芜菁花叶病素养(TuMV)的抗性,研究探讨了不结球白菜中BcCHC1蛋白与TuMV之间的相互作用机制。【方法】首先从不结球白菜中鉴定出重链网格蛋白(CHC)基因家族的成员BcCHCs,随后克隆了1个代表性的CHC1基因,并对其进行了亚细胞定位分析。通过双分子荧光互补实验(BiFC)筛选出与BcCHC1蛋白相互作用的TuMV蛋白,并利用病毒诱导的基因沉默技术(VIGS)来沉默BcCHC1基因,以评估其功能。【结果】(1)成功克隆了不结球白菜的BcCHC1基因,该基因的编码序列长5124碱基对,编码1708个氨基酸。(2)在TuMV感染不结球白菜30 d后,实时荧光定量PCR分析显示,感染TuMV的不结球白菜中BcCHC1基因的表达量显著降低。(3)亚细胞定位研究表明,BcCHC1蛋白主要定位于烟草表皮细胞的细胞膜和细胞核。(4)BiFC实验进一步证实,BcCHC1蛋白能够与TuMV的CI和6K2蛋白发生相互作用,其中与CI的互作主要发生在细胞核内,而与6K2的互作则主要位于细胞膜。(5)通过对BcCHC1基因沉默株系的观察发现,沉默BcCHC1基因会导致植株死亡。【结论】BcCHC1蛋白通过与TuMV的CI和6K2蛋白相互作用,影响网格蛋白依赖的内吞作用途径及病毒复制,从而调控TuMV对不结球白菜的侵染。然而,BcCHC1基因调控TuMV侵染不结球白菜的具体机制仍需进一步研究。 展开更多
关键词 不结球白菜 BcCHC1 tumv 互作蛋白 VIGS
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合抱类型大白菜抗TuMV材料的选育
8
作者 苏学军 张焕家 +1 位作者 杨衔美 李化银 《中国蔬菜》 北大核心 1998年第1期7-11,共5页
试验选用对TuMV具有不同抗性的8个大白菜高代自交系,配制了“抗×抗”和“抗×感”的4个合抱类型的杂交组合,采用单交法和系谱定向选择,结合苗期人工接种鉴定和田间自然诱发鉴定的抗性筛选技术。
关键词 大白菜 抗病性 tumv 杂交选育
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绿色荧光蛋白基因TuMv病毒表达载体的构建
9
作者 陈书霞 王晓武 程智慧 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期1395-1398,共4页
本研究通过设计引物进行PCR扩增得到绿色荧光蛋白GFP基因,将PCR产物酶切以后与芜菁花叶病毒表达载体相连,得到的阳性克隆通过多对引物组合进行PCR验证及序列测定,说明GFP基因已经连接到该病毒表达载体中,而且没有发生碱基误配及错配。该... 本研究通过设计引物进行PCR扩增得到绿色荧光蛋白GFP基因,将PCR产物酶切以后与芜菁花叶病毒表达载体相连,得到的阳性克隆通过多对引物组合进行PCR验证及序列测定,说明GFP基因已经连接到该病毒表达载体中,而且没有发生碱基误配及错配。该GFP表达载体的构建为进一步利用TuMv的全长cDNA侵染性克隆进行外源基因的转化奠定了基础。 展开更多
关键词 绿色荧光蛋白基因 tumv病毒表达载体 构建
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99植宝控制油菜病毒病(Tumv)试验初报
10
作者 邓先明 贺乙峰 +3 位作者 刘光珍 田凤先 秦森荣 潘启富 《云南农业大学学报》 CAS CSCD 2002年第4期383-385,共3页
选用国家专利产品 99植宝 ,对人工接种的油菜病毒病 (Tumv) ,从发病初期开始用不同浓度叶面喷雾 2~ 3次 ,以 30 0倍 5 0 0倍液最好 ,30 0倍盆栽防制效果 87 5 %~ 89 9% ,大田 85 1%~ 92 3% ;5 0 0倍盆栽 75 %~ 84 8% ,大田 88 5 ... 选用国家专利产品 99植宝 ,对人工接种的油菜病毒病 (Tumv) ,从发病初期开始用不同浓度叶面喷雾 2~ 3次 ,以 30 0倍 5 0 0倍液最好 ,30 0倍盆栽防制效果 87 5 %~ 89 9% ,大田 85 1%~ 92 3% ;5 0 0倍盆栽 75 %~ 84 8% ,大田 88 5 %~ 90 9% ,均与空白对照差异显著 ,效果等于或略好于对照药病毒王 30 0倍、5 0 0倍液。 展开更多
关键词 99植宝 油菜 病毒病 tumv 试验 防治
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白菜抗芜菁花叶病毒(TuMV)鉴定及抗源筛选
11
作者 李国亮 张淑江 +3 位作者 李菲 张慧 章时蕃 孙日飞 《园艺与种苗》 CAS 2018年第4期6-10,共5页
[目的]筛选出抗芜菁花叶病毒(Tu MV)的白菜种质资源。[方法]选取8份白菜高代自交系种质材料,在3叶期人工磨擦接种Tu MV-C4株系,进行抗/感病表型调查、d CAPS功能标记筛选以及ELISA试验鉴定。[结果]1600011-1、1600043-3、1600045-3和160... [目的]筛选出抗芜菁花叶病毒(Tu MV)的白菜种质资源。[方法]选取8份白菜高代自交系种质材料,在3叶期人工磨擦接种Tu MV-C4株系,进行抗/感病表型调查、d CAPS功能标记筛选以及ELISA试验鉴定。[结果]1600011-1、1600043-3、1600045-3和1600331-3为Tu MV感病材料;1600031-2、1600067-2、1600105-1和1600485-2为Tu MV抗病材料。[结论 ]研究鉴定了大白菜抗Tu MV的性状,为大白菜抗Tu MV育种提供了抗源材料。 展开更多
关键词 白菜 tumv dCAPS 种质资源 鉴定 筛选
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病毒1号防治大白菜TuMV试验
12
作者 王万立 杨崇实 陈爱娣 《天津农业科学》 CAS 1993年第3期20-21,共2页
材料与方法本试验包括苗期药效测定,小区药效试验和大田应用示范三个部分。(一)防虫纱室内苗期药效测定1.供试药剂:50%病毒1号乳剂由杨崇实研究员提供,并收集了其它12种药剂,1991—1992年在纱室内用蚜虫接种法测定。
关键词 大白菜 tumv病毒 病毒1号 防治
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一个新的白菜苗期TuMV-C4抗性主效QTL定位及连锁分子标记开发 被引量:3
13
作者 田希辉 于拴仓 +5 位作者 苏同兵 张凤兰 余阳俊 张德双 赵岫云 汪维红 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2014年第6期1-5,共5页
为寻找与TuMV抗性基因紧密连锁的分子标记,选用高抗病毒病大白菜自交系91-112和高感病毒病自交系T12-19以及由二者为双亲构建的包含100个株系的DH群体为材料,通过SSR和InDel标记的遗传分析,在A09上定位了一个新的与大白菜苗期Tu MV-C4... 为寻找与TuMV抗性基因紧密连锁的分子标记,选用高抗病毒病大白菜自交系91-112和高感病毒病自交系T12-19以及由二者为双亲构建的包含100个株系的DH群体为材料,通过SSR和InDel标记的遗传分析,在A09上定位了一个新的与大白菜苗期Tu MV-C4抗性相关的主效QTL位点BrTu A09。在此基础上,针对该QTL位点所在的标记区间,根据作图群体双亲的重测序结果,设计合成27对引物,其中11个In Del在双亲间具有多态性,且条带单一、扩增稳定;连锁分析发现,11个InDel标记均被定位在A09连锁群上BrTu A09的置信区间。利用BC1群体进行标记验证发现,这些标记对高抗单株选择的准确率均达到78%以上,可应用于分子标记辅助选择,为大白菜Tu MV抗病分子育种奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 大白菜 QTL tumv 分子标记
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不结球白菜种质资源对TuMV的抗性鉴定与评价 被引量:4
14
作者 王晓伟 李锡香 +5 位作者 张晓辉 邱杨 董洪霞 宋江萍 王海平 沈镝 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期387-394,共8页
分别利用苗期人工接种鉴定及ELISA检测方法,对127份不结球白菜种质资源进行芜菁花叶病毒(TuMV)的抗性鉴定。结果显示,苗期人工接种鉴定的病情指数(DI)分布在3.55~95.68之间,不同种质间表现出较大的抗性差异。不同抗性级别的次数分... 分别利用苗期人工接种鉴定及ELISA检测方法,对127份不结球白菜种质资源进行芜菁花叶病毒(TuMV)的抗性鉴定。结果显示,苗期人工接种鉴定的病情指数(DI)分布在3.55~95.68之间,不同种质间表现出较大的抗性差异。不同抗性级别的次数分布图基本符合正态分布,略向感病区域偏离。基于病情指数的聚类分析结果与抗病性分级基本一致。通过苗期鉴定共筛选获得高抗TuMV的不结球白菜种质6份,抗病种质13份,其主要农艺性状表现出一定的多样性。其中叶面皱缩和具有刺毛的抗病材料所占比例较高,可能与TuMV抗性存在一定的相关性。ELISA检测结果显示,117份供试种质的P/N值分布在3.10~25.37之间,不同种质间表现出病毒含量的差异,但与DI值未呈现明显相关性,可作为抗病材料筛选的辅助指标。 展开更多
关键词 不结球白菜 tumv抗性 ELISA检测
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生物制剂与化学制剂防治白菜TUMV 被引量:1
15
作者 奚迪 奚启新 赵奎军 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2005年第6期741-744,共4页
采用自制复合生物制剂LD-1-LD-4与筛选的市售抑制植物病毒的生物制剂、化学制剂共7个处理,连同清水对照,对白菜上接种的芜菁花叶病毒(TUMV)进行防治。结果表明,自制生物制剂LD-4在抑制TUMV的增殖和减轻病状、延缓发病速度以及制剂残效... 采用自制复合生物制剂LD-1-LD-4与筛选的市售抑制植物病毒的生物制剂、化学制剂共7个处理,连同清水对照,对白菜上接种的芜菁花叶病毒(TUMV)进行防治。结果表明,自制生物制剂LD-4在抑制TUMV的增殖和减轻病状、延缓发病速度以及制剂残效期等方面明显优于市售生物制剂和化学制剂,在促进白菜植株生长方面则以市售生物制剂为优,自制生物制剂居中,而市售化学制剂居末。 展开更多
关键词 生物制剂 防治 tumv
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植物源提取物对TuMV和PVY的抗病毒作用 被引量:3
16
作者 高倩 孙振琪 +3 位作者 赵凯 赵梓晔 赵星月 赵明敏 《安徽农业科学》 CAS 2023年第7期154-159,共6页
采用芦苇、沙葱、洋葱提取物和蛇床子素对芜菁花叶病毒(tunip mosaic virus, TuMV)和马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)进行预防作用、治疗作用、钝化效果的研究。结果表明,植物源提取物对TuMV有一定的抗病毒作用。在预防试验中,洋葱提... 采用芦苇、沙葱、洋葱提取物和蛇床子素对芜菁花叶病毒(tunip mosaic virus, TuMV)和马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)进行预防作用、治疗作用、钝化效果的研究。结果表明,植物源提取物对TuMV有一定的抗病毒作用。在预防试验中,洋葱提取物的预防效果较好,接种的6株植物中仅有1株发病。蛇床子、沙葱提取物接种的6株植物中有3株发病。在治疗试验中,沙葱、洋葱、芦苇提取物和蛇床子素接种的6株植物,均有3株发病。4种植物源提取物对TuMV均有一定的钝化作用。其中蛇床子素的钝化作用最强,钝化TuMV后的植株发病率仅为16.67%,低于对照宁南霉素。4种植物源提取物对PVY的抑制作用不明显,发病株数均高于对照组宁南霉素处理的发病株数。该研究结果可为进一步研发植物源农药提供数据支持。 展开更多
关键词 植物源提取物 PVY tumv 植物源农药
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利用改良SOE-PCR技术定点突变TuMVC4-VPg基因 被引量:3
17
作者 李国亮 钱伟 +7 位作者 张淑江 李菲 章时蕃 张慧 谢露露 武剑 王晓武 孙日飞 《中国蔬菜》 北大核心 2017年第10期39-44,共6页
芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,Tu MV)是白菜类蔬菜生产上的重要病害,其中Tu MV VPg基因在Tu MV侵染白菜类蔬菜的过程中起着至关重要的作用,且不同Tu MV株系的致病性不同。本试验采用改良的重叠延伸PCR(SOE-PCR)技术,以Tu MV C4-VP... 芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,Tu MV)是白菜类蔬菜生产上的重要病害,其中Tu MV VPg基因在Tu MV侵染白菜类蔬菜的过程中起着至关重要的作用,且不同Tu MV株系的致病性不同。本试验采用改良的重叠延伸PCR(SOE-PCR)技术,以Tu MV C4-VPg基因序列为模板,定点突变Tu MV C4-VPg与Tu MV CDN1-VPg基因间5个差异核苷酸位点(决定5个氨基酸差异)。结果表明:通过SOE-PCR技术获得了5个Tu MV C4-VPg基因的单点突变体,即Tu MV C4-VPg-Ⅰ、Tu MV C4-VPg-Ⅱ、Tu MV C4-VPg-Ⅲ、Tu MV C4-VPg-Ⅳ和Tu MV C4-VPg-Ⅴ。 展开更多
关键词 白菜类蔬菜 芜菁花叶病毒 VPg基因 重叠延伸PCR技术 单点突变
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大白菜抗TuMV-C_4的QTL分析 被引量:3
18
作者 张明 潘春清 +2 位作者 张俊华 屈淑萍 崔崇士 《中国瓜菜》 CAS 2011年第2期1-5,共5页
采用高抗芜菁花叶病毒C4株系(TuMV-C4)的大白菜高代自交系A52-2为父本、感病自交系高IV-5为母本杂交后获得的F2代263个单株作为作图群体,利用SRAP分子标记技术进行遗传分析,构建了1张包含10个连锁群,由152个 SRAP标记组成的大白菜分子... 采用高抗芜菁花叶病毒C4株系(TuMV-C4)的大白菜高代自交系A52-2为父本、感病自交系高IV-5为母本杂交后获得的F2代263个单株作为作图群体,利用SRAP分子标记技术进行遗传分析,构建了1张包含10个连锁群,由152个 SRAP标记组成的大白菜分子遗传图谱。该图谱覆盖长度为1066.3cM,平均图距7.06cM。利用Windows QTL Cartographer V2.0软件和复合区间作图法进行分析,共检测到5个与抗TuMV-C4株系相关的QTLs。 展开更多
关键词 大白菜 芜菁花叶病毒 分子遗传图谱 数量性状位点(QTL)
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大白菜抗TuMV抗源的选育 被引量:1
19
作者 刘志荣 王子欣 《华北农学报》 CSCD 北大核心 1990年第1期85-88,共4页
大白菜抗源“8407”是河北省农林科学院蔬菜研究所选育的高抗芜菁花叶病毒(TuMV)的抗源材料.1985年经国家专家组验收为国家大白菜抗源.1987年鉴定,“8407”对全国十个省市19个TuMV分离物中的17个表现免疫,两个有轻微症状,因此被确认为... 大白菜抗源“8407”是河北省农林科学院蔬菜研究所选育的高抗芜菁花叶病毒(TuMV)的抗源材料.1985年经国家专家组验收为国家大白菜抗源.1987年鉴定,“8407”对全国十个省市19个TuMV分离物中的17个表现免疫,两个有轻微症状,因此被确认为我国大白菜对TuMV垂直抗性最好的抗源材料.该材料是1978至1983年从青麻叶系统内蒙古长炮弹品种,经连续6代自交选育而成.在逐年自交的同时,进行了亲和指数和配合力的测定.1983年用“8407”抗源和另一自交系,育成高抗TuMV兼抗霜霉病和软腐病的多抗型“8361”新品种. 展开更多
关键词 大白菜 抗源 芜菁花叶病毒
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太子参BBWV2和TuMV的巢式RT-PCR检测 被引量:2
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作者 匡云波 侯令 +3 位作者 方晓勤 王佳璐 杨燕君 叶祖云 《福建农业学报》 CAS 北大核心 2018年第3期288-292,共5页
为探求快速、灵敏的太子参脱毒检测技术,建立太子参蚕豆萎蔫病毒2(Broad bean wilt virus 2,BBWV2)和芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)的巢式RT-PCR快速检测方法,根据GenBank数据库中这2种病毒外壳蛋白(coat protein,cp)基因核... 为探求快速、灵敏的太子参脱毒检测技术,建立太子参蚕豆萎蔫病毒2(Broad bean wilt virus 2,BBWV2)和芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)的巢式RT-PCR快速检测方法,根据GenBank数据库中这2种病毒外壳蛋白(coat protein,cp)基因核苷酸序列的保守区域分别设计2对简并引物,建立和优化巢式RT-PCR扩增体系,继而进行常规RT-PCR和巢式RT-PCR灵敏度的比较,并应用巢式RT-PCR对7份田间栽培太子参病样和4份脱毒苗样品进行检测。结果显示:BBWV2、TuMV的巢式引物最佳退火温度分别为60、62℃;采用巢式RT-PCR,这两种病毒样品cDNA原液在稀释10~5倍后仍能扩增出特异性条带,比常规RT-PCR的灵敏度至少高10倍。本研究建立的巢式RT-PCR检测方法可快速、稳定、准确地检测BBWV2和TuMV,且具有更高的灵敏度,更能满足太子参脱毒检测的需要。 展开更多
关键词 太子参 太子参蚕豆萎蔫病毒2(BBWV2) 芜菁花叶病毒(tumv) 巢式RT-PCR
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