伊氏锥虫ISG 65基因表达、生物信息学分析及多克隆抗体制备

1

作者 金敏 王美玲 +7 位作者 刘燕 周娜 赵雪晴 党文盈 古丽博斯坦 阿布都卡迪尔 巴依娜 巴音查汗·盖力克 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第11期5359-5370,共12页

【目的】表达伊氏锥虫(Trypanosoma evansi)不变表面糖蛋白65(invariant surface glycoprotein 65,ISG 65),分析其生物学特性及反应原性,并制备伊氏锥虫ISG 65蛋白多克隆抗体,为该类病原体检测方法的建立奠定基础。【方法】PCR扩增伊氏... 【目的】表达伊氏锥虫(Trypanosoma evansi)不变表面糖蛋白65(invariant surface glycoprotein 65,ISG 65),分析其生物学特性及反应原性,并制备伊氏锥虫ISG 65蛋白多克隆抗体,为该类病原体检测方法的建立奠定基础。【方法】PCR扩增伊氏锥虫新疆株ISG 65基因,对测序列进行相似性比对及系统进化树构建,运用生物信息学工具对ISG 65基因编码蛋白的理化特性、亲/疏水性、跨膜区、信号肽、磷酸化位点及亚细胞定位进行预测分析。通过同源重组方法将ISG 65基因片段转染大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达重组ISG 65蛋白(rISG 65),镍柱亲和层析法纯化rISG 65蛋白;利用SDS-PAGE和Western blotting验证ISG 65蛋白纯化效果。将纯化后的rISG 65蛋白免疫昆明小鼠制备多克隆抗体,采用间接ELISA方法测定多克隆抗体效价及重组蛋白反应原性。【结果】伊氏锥虫新疆株ISG 65基因PCR扩增产物大小为657 bp,与冈比亚布氏锥虫(登录号:XM_011773430.1、XM_011773437.1)相似性最高,为99.06%,与冈比亚布氏锥虫(登录号:XM_011773430.1)亲缘关系最近并聚为一支。生物信息学分析显示,ISG 65蛋白属于亲水性蛋白,含有436个氨基酸,理论等电点为8.02。预测ISG 65蛋白存在35个磷酸化位点;二级结构中α-螺旋、无规则卷曲、β-转角、延伸链占比分别为53.21%、33.03%、2.98%和10.78%;ISG 65蛋白有14个B细胞抗原表位,具有较好的免疫原性。本试验成功构建pET-28a-ISG 65重组质粒;SDS-PAGE结果显示,重组菌pET-28a-ISG 65-BL21在37℃8 h、1.0 mmol/L IPTG中高效表达,纯化后得到的蛋白大小约24 ku。SDS-PAGE和Western blotting结果显示,均获得与预期大小一致的24 ku条带。间接ELISA检测结果显示,获得的ISG 65鼠源多克隆抗体效价为1∶1638400。【结论】经原核表达的重组ISG 65蛋白具有良好的免疫原性,能与伊氏锥虫阳性血清发生特异性结合反应,并具有良好的生物学特性。本研究可为后续伊氏锥虫ISG 65蛋白的生物学特性研究,以及ELISA诊断方法的建立提供重要参考数据和理论支撑。 展开更多

关键词 伊氏锥虫 ISG 65蛋白 原核表达 多克隆抗体

在线阅读 下载PDF 职称材料

北疆部分马场虻传伊氏锥虫的DNA检测及遗传进化分析

2

作者 金敏 巴依娜 +4 位作者 党文盈 高胜红 周娜 赵雪晴 巴音查汗·盖力克 《动物医学进展》 北大核心 2025年第11期68-73,共6页

为了解北疆部分马场马虻的优势分布种及伊氏锥虫病的流行情况,为虻害及伊氏锥虫病的防治提供参考数据,采集北疆地区和静县某马场马体表吸血虻(n=650)和马血液样本(n=276);通过ISG 65基因检测伊氏锥虫感染情况,通过扩增COI基因确定虻的... 为了解北疆部分马场马虻的优势分布种及伊氏锥虫病的流行情况,为虻害及伊氏锥虫病的防治提供参考数据,采集北疆地区和静县某马场马体表吸血虻(n=650)和马血液样本(n=276);通过ISG 65基因检测伊氏锥虫感染情况,通过扩增COI基因确定虻的具体种类。PCR结果显示,马虻伊氏锥虫的携带率为24.2%(157/650);阳性产物测序结果显示与冈比亚布氏锥虫(登录号:XM_011773429.1)同源性为98.63%;经COI鉴定,采集的马虻为突额瘤虻;进化树结果显示,突额瘤虻与已发表的芬兰株(MZ626174.1)同源性为98.56%。血源性伊氏锥虫的感染率分别为塔城市11.3%(6/53)、阿勒泰清河县3.6%(4/111)、伊犁44.4%(16/36)、乌市周边8%(6/76)。试验结果表明媒介虻的伊氏锥虫携带率较高,以上地区马匹存在感染锥虫的风险,应加强对该病的综合防控措施。 展开更多

关键词 马 突额瘤虻 COI/ISG基因 伊氏锥虫

在线阅读 下载PDF 职称材料

水牛伊氏锥虫病免疫胶体金试纸条的研制及初步应用 被引量：6

3

作者 孟盟 曹池 +4 位作者 陈汉忠 刘明如 王华俊 奉彬 陈国宝 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期988-993,共6页

为建立一种快速、简便、适应现场应用的水牛伊氏锥虫病诊断方法,采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记纯化的抗伊氏锥虫VSG抗原的OB6单克隆抗体,在硝酸纤维素膜上包被纯化的抗伊氏锥虫VSG抗原的TB7单克隆抗体和兔抗小鼠IgG,作为检... 为建立一种快速、简便、适应现场应用的水牛伊氏锥虫病诊断方法,采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记纯化的抗伊氏锥虫VSG抗原的OB6单克隆抗体,在硝酸纤维素膜上包被纯化的抗伊氏锥虫VSG抗原的TB7单克隆抗体和兔抗小鼠IgG,作为检测带和质控带,然后优化条件,研制成检测伊氏锥虫病的免疫胶体金试纸条。通过交叉试验表明该试纸条与衣原体、弓形虫、旋毛虫、巴贝斯焦虫和大片吸虫无交叉反应。该试纸条最低可以检出1∶3 200倍稀释的伊氏锥虫VSG抗原(浓度为3.11mg.mL-1)。应用该试纸条对230份水牛血清样本进行初步检测,同时用ELISA做平行试验,阳性符合率为88.2%。结果证明该试纸条是一种快速、灵敏、特异的水牛伊氏锥虫病的检测方法,为水牛伊氏锥虫病的现场检测诊断和预控提供了有效的方法。 展开更多

关键词 伊氏锥虫病 单克隆抗体 胶体金 试纸条

在线阅读 下载PDF 职称材料

体外培养伊氏锥虫变异抗原型的鉴定 被引量：6

4

作者 李国清 汪志楷 沈永林 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期86-90,共5页

用云南株伊氏锥虫克隆后体外培养，培养后于第１８～６０ｄ之间，每间隔一周通过免疫抑制鼠（ＣＹ鼠）克隆，建立了７个克隆群体（代号为０１８，０２５，０３２，０３９，０４６，０５３，０６０），并将其分别与７种克隆特异性抗血清... 用云南株伊氏锥虫克隆后体外培养，培养后于第１８～６０ｄ之间，每间隔一周通过免疫抑制鼠（ＣＹ鼠）克隆，建立了７个克隆群体（代号为０１８，０２５，０３２，０３９，０４６，０５３，０６０），并将其分别与７种克隆特异性抗血清（ＡＳ０１８～０６０）进行免疫溶解和中和试验。结果如下：①０１８和０２５能被ＡＳ０１８和ＡＳ０２５所溶解或中和；②０３２，０３９，０４６，０５３能被ＡＳ０３２，ＡＳ０３９，ＡＳ０４６，ＡＳ０５３所溶解或中和；③０６０只能被ＡＳ０６０所溶解或中和。根据上述结果，将７个克隆群体鉴定为３种变异抗原型（ＶＡＴ），按国际ＶＡＴ命名法，分别命名为ＹｕＴａｔ１·１，ＹｕＴａｔ１·２和ＹｕＴａｔ１·３。又以针对３个ＶＡＴ的抗血清ＡＳ０２５，ＡＳ０３９和ＡＳ０６０与超低温保存的、培养不同天数的克隆前群体进行免疫溶解试验，结果表明；体外培养的伊氏锥虫由混合的ＶＡＴ所组成，随着培养时间的不同，不同ＶＡＴ的比例发生改变。 展开更多

关键词 伊氏锥虫 变异抗原型 体外培养 克隆 鉴定

在线阅读 下载PDF 职称材料

伊氏锥虫同工酶、蛋白质和抗原组分的比较研究 被引量：5

5

作者 王云飞 沈杰 郑韧坚 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第5期463-468,共6页

本文采用生化技术对八个中国伊氏锥虫株及一个布氏锥虫株的同工酶、蛋白质和抗原组分进行比较研究。根据同工酶电泳结果,可将伊氏锥虫和与其形态上不能区分的布氏锥虫区别开来,亦可将伊氏锥虫分为两个酶株群(Z1、Z2)。根据SDS-聚丙烯酰... 本文采用生化技术对八个中国伊氏锥虫株及一个布氏锥虫株的同工酶、蛋白质和抗原组分进行比较研究。根据同工酶电泳结果,可将伊氏锥虫和与其形态上不能区分的布氏锥虫区别开来,亦可将伊氏锥虫分为两个酶株群(Z1、Z2)。根据SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦电泳和免疫印迹试验的结果,可将酶株群Z1分成五个不同多肽群(株)。本研究结果表明,中国伊氏锥虫遗传变异程度较低,是一个相对稳定的种群。 展开更多

关键词 同功酶 伊氏锥虫 蛋白 抗原

在线阅读 下载PDF 职称材料

牛羊四种寄生虫病联合诊治技术的研究与应用 被引量：5

6

作者 张雪娟 孙仁寅 +6 位作者 刘恩勇 毛光琼 冯尚连 朱家新 阳爱国 宋灿明 彭又新 《浙江农业学报》 CSCD 2000年第4期183-186,共4页

首次建立的酶标SPADot ELISA联检牛羊血矛线虫、血吸虫、伊氏锥虫和肝片吸虫病技术(简称四联 ) ,已在浙江、湖北、四川、安徽等省 6 2个县市试用 56万余头 ,据 50个县市对其中 194 90头份与酶标SPADot ELISA检测牛羊血吸虫、伊氏锥虫和... 首次建立的酶标SPADot ELISA联检牛羊血矛线虫、血吸虫、伊氏锥虫和肝片吸虫病技术(简称四联 ) ,已在浙江、湖北、四川、安徽等省 6 2个县市试用 56万余头 ,据 50个县市对其中 194 90头份与酶标SPADot ELISA检测牛羊血吸虫、伊氏锥虫和肝片吸虫病技术 (简称三联 )进行比较结果表明 ,四联与三联法 ,其血吸虫病、伊氏锥虫病和肝片吸虫病阳性符合率依次达 99.13% ,99.0 5%和 99.2 1%。同时 ,对四联法血清学阳性的 4 6 6 0头份与查病原体法进行比较结果 ,血矛线虫病、血吸虫病、伊氏锥虫病和肝片吸虫病阳性符合率分别为 97.59% ,99.2 8% ,95.17%和 98.10 %。对查出血清学阳性的牛羊用研配的广谱、高效、系列抗虫剂进行防治。据不完全统计 ,牛羊经防治 ,其血矛线虫病、血吸虫病、伊氏锥虫病和肝片吸虫病阳性率分别由 1998年的 13.5%～ 37.9% ,0 .3%～ 34.0 % ,9.4 %～ 55.2 %和 17.2 %～ 6 9.6 % ,依次降至 1999年的 0 .9%～ 6 .7% ,0 %～ 6 .1% ,3 0 %～ 10 .7%和 4 .3%～ 13.1% ,分别下降 12 .6～ 31.2个 ,0 .3～ 2 7.9个 ,6 .4～ 4 4 .5个和 13.0～ 56 .5个百分点 ; 展开更多

关键词 寄生虫病 血吸虫病 联合诊断 联合防治 牛 羊

在线阅读 下载PDF 职称材料

二重PCR快速检测牛伊氏锥虫和牛巴贝斯虫的研究 被引量：5

7

作者 石云良 黄维义 +4 位作者 张为宇 韦家周 张诗新 韦志坚 张宇 《广西农业科学》 CAS CSCD 2010年第2期163-166,共4页

根据伊氏锥虫ITS序列(FJ416612)和GenBank报道的牛巴贝斯虫棒状结合蛋白1序列(FJ588013),设计合成2对特异性诊断引物,建立了牛伊氏锥虫和牛巴贝斯虫的二重PCR诊断方法。结果表明,建立的二重PCR诊断方法可扩增出牛伊氏锥虫和牛巴贝斯虫... 根据伊氏锥虫ITS序列(FJ416612)和GenBank报道的牛巴贝斯虫棒状结合蛋白1序列(FJ588013),设计合成2对特异性诊断引物,建立了牛伊氏锥虫和牛巴贝斯虫的二重PCR诊断方法。结果表明,建立的二重PCR诊断方法可扩增出牛伊氏锥虫和牛巴贝斯虫的特异性条带,大小分别为213bp和360bp,最低检出量分别为4.00pg和0.38pg。但对牛双芽巴贝斯虫、分歧巴贝斯虫、环形泰勒虫、附红细胞体、巴氏杆菌不敏感。用该二重PCR方法对95份水牛样品和134份奶牛样品进行检测,结果发现,水牛伊氏锥虫的感染率为13.7%(13/95)、牛巴贝斯虫的感染率为7.4%(7/95),无混合感染;奶牛伊氏锥虫的感染率为3.7%(5/134)、牛巴贝斯虫的感染率为0(0/134)。说明该二重PCR方法具有敏感、快速、特异的特点,适用于牛伊氏锥虫和牛巴贝斯虫的流行病学调查。 展开更多

关键词 二重PCR 牛伊氏锥虫 牛巴贝斯虫 快速检测

在线阅读 下载PDF 职称材料

伊氏锥虫和布氏锥虫动基体DNA酶切电泳比较 被引量：3

8

作者 郑韧坚 王云飞 +2 位作者 沈杰 周勇志 钟淑梅 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1995年第7期9-10,共2页

限制性内切酶ＭｂｏＩ、ＤｄｅＩ、ＨｉｎｆＩ和ＴａｑＩ对市氏锥虫ＫＤＮＡ进行酶切后，电泳中均显示出多条ＤＮＡ区带，其总Ｋｂ数约等于２０ｋｂ，内各限制酶对伊氏锥虫ＫＤＮＡ消化后均显示出１至２条区带，总和约１ｋｂ，明显区别... 限制性内切酶ＭｂｏＩ、ＤｄｅＩ、ＨｉｎｆＩ和ＴａｑＩ对市氏锥虫ＫＤＮＡ进行酶切后，电泳中均显示出多条ＤＮＡ区带，其总Ｋｂ数约等于２０ｋｂ，内各限制酶对伊氏锥虫ＫＤＮＡ消化后均显示出１至２条区带，总和约１ｋｂ，明显区别于布氏锥虫。 展开更多

关键词 伊氏锥虫 布氏锥虫 限制性内切酶 动基体

在线阅读 下载PDF 职称材料

水牛伊氏锥虫人工感染抗体规律及其广西地区自然感染状况的初步调查 被引量：2

9

作者 何木荣 施开创 +3 位作者 陈汉忠 杨兴胜 白波 王柏生 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期33-36,共4页

通过实验感染,研究伊氏锥虫在水牛体内抗体及虫体消长的规律。ELISA检测结果表明,水牛感染伊氏锥虫后第6d检出抗体,而且在2个多月的监测时间里,抗体都维持在较高水平(OD450nm>0.3),因此可利用ELISA方法对水牛感染伊氏锥虫进行早期诊... 通过实验感染,研究伊氏锥虫在水牛体内抗体及虫体消长的规律。ELISA检测结果表明,水牛感染伊氏锥虫后第6d检出抗体,而且在2个多月的监测时间里,抗体都维持在较高水平(OD450nm>0.3),因此可利用ELISA方法对水牛感染伊氏锥虫进行早期诊断和监测;水牛感染伊氏锥虫后,即出现一个2～3周左右的虫血症峰期,然后虫血症峰期迅速下降,在虫血症峰期下降后1个多月的监测时间里,虫血症维持在一个很低的水平(≤1条虫体/视野),水牛感染伊氏锥虫后这种峰期短无明显症状、虫血症水平低的现象,给临床诊断和血液镜检虫体造成了一定的困难。对广西部分地区79份血清样品水牛检测的结果表明,伊氏锥虫抗体阳性率达到29.1%,说明广西各地水牛感染伊氏锥虫的现象普遍存在,而且感染率比较高,为了保证本地区水牛产业的健康发展,有必要对水牛伊氏锥虫感染进行有效的监测。 展开更多

关键词 伊氏锥虫 抗体 水牛 感染

在线阅读 下载PDF 职称材料

伊氏锥虫同工酶和蛋白质鉴定研究 被引量：2

10

作者 王云飞 沈杰 +4 位作者 郑韧坚 王爱华 周勇志 邱巧平 钟淑梅 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1993年第6期30-32,F003,共4页

本文用簿层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦同工酶及蛋白质电泳分析技术比较了5株从我国不同地区,不同宿主分离的伊氏锥虫及两株国外伊氏锥虫的遗传多样性。5株中国伊氏锥虫同属于一个酶株群Z1,根据蛋白质等电聚焦分析可将五株中国伊氏锥虫进一... 本文用簿层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦同工酶及蛋白质电泳分析技术比较了5株从我国不同地区,不同宿主分离的伊氏锥虫及两株国外伊氏锥虫的遗传多样性。5株中国伊氏锥虫同属于一个酶株群Z1,根据蛋白质等电聚焦分析可将五株中国伊氏锥虫进一步分为三个多肽群(株)。我国伊氏锥虫同世界各地伊氏锥虫同工酶主群相似,与伊氏锥虫同工酶次群有区别。本研究结果表明,我国伊氏锥虫变异程度较低,与世界其它各地典型伊氏锥虫同源。 展开更多

关键词 伊氏锥虫 同功酶 酶株群 多太群

在线阅读 下载PDF 职称材料

伊氏锥虫TR酶的初步研究 被引量：5

11

作者 钟淑梅 郑韧坚 +2 位作者 沈杰 周勇志 王云飞 《中国兽医寄生虫病》 CAS 1997年第2期9-11,共3页

国外研究者已报道在布氏锥虫、枯氏锥虫、刚果锥虫中发现了存在TR酶，此酶是锥虫代谢的重要酶之一。伊氏锥虫TR酶研究尚属空白。本研究目的是为了确定伊氏锥虫中是否存在TR酶。我们利用分光光度法测出了伊氏锥虫中有TR酶活性，但无GR酶... 国外研究者已报道在布氏锥虫、枯氏锥虫、刚果锥虫中发现了存在TR酶，此酶是锥虫代谢的重要酶之一。伊氏锥虫TR酶研究尚属空白。本研究目的是为了确定伊氏锥虫中是否存在TR酶。我们利用分光光度法测出了伊氏锥虫中有TR酶活性，但无GR酶活性；测出了TR酶的Km值和Vm值；发现了治疗锥虫药物安锥赛和盐酸锥双净对TR酶有抑制作用，抑制率分别达28％和31％；比较了七林中国伊氏锥虫和布氏锥虫每毫克蛋白中TR酶活力，其中安徽株活力最强。所以中国伊氏锥虫中存在着TR酶。 展开更多

关键词 伊氏锥虫 TR酶 家畜 防治

在线阅读 下载PDF 职称材料

新疆边境地区马、驼锥虫病流行病学调查 被引量：6

12

作者 刘志强 郭会玲 +4 位作者 金映红 薛晶 阿布都 吉恩斯 努尔.库尔玛那里 《草食家畜》 2019年第1期60-64,共5页

为了解中哈边境地区马、骆驼感染伊氏锥虫病流行情况,本试验用哈萨克斯坦国立农业大学研发的伊氏锥虫病检测试剂盒(补体结合试验CF)与现场全血接种小白鼠试验相结合,对中哈边境地区伊犁州昭苏县、阿勒泰地区吉木乃县和塔城地区裕民县10... 为了解中哈边境地区马、骆驼感染伊氏锥虫病流行情况,本试验用哈萨克斯坦国立农业大学研发的伊氏锥虫病检测试剂盒(补体结合试验CF)与现场全血接种小白鼠试验相结合,对中哈边境地区伊犁州昭苏县、阿勒泰地区吉木乃县和塔城地区裕民县10个乡的马、骆驼采集血样(n=512),疑似病症的骆驼全血接种试验动物小白鼠。伊氏锥虫病检测试剂盒(补体结合试验CF)检测结果显示,马匹的阳性率3.96%(16/404),驼的阳性率4.62%(5/108)。接种小白鼠9 d后发病,尾尖采血镜检可看大量虫体;本试验为新疆与哈萨克斯坦边境地区伊氏锥虫病流行病学基础资料提供参考。 展开更多

关键词 伊氏锥虫病 检测试剂盒(补体结合试验CF) 流行病学调查

在线阅读 下载PDF 职称材料

抗水牛伊氏锥虫变异表面糖蛋白抗原单克隆抗体的研制 被引量：2

13

作者 曾晓飞 陈汉忠 +2 位作者 韦英益 何木荣 李晓栩 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第10期72-74,共3页

用纯化的伊氏锥虫变异表面糖蛋白(variant surface glucoprotein,VSG)免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经过3次克隆和间接ELISA方法筛选,获得3D7、5B9 2株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,用间接ELISA方法... 用纯化的伊氏锥虫变异表面糖蛋白(variant surface glucoprotein,VSG)免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经过3次克隆和间接ELISA方法筛选,获得3D7、5B9 2株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,用间接ELISA方法检测杂交瘤细胞培养液上清效价和小鼠腹水效价,其中细胞培养上清效价分别为1∶6400和1∶12800,腹水效价分别为1∶105和1∶106。单抗的亚型鉴定结果表明,3D7、5B9分泌的抗体都为IgG1亚类κ链。 展开更多

关键词 变异表面糖蛋白 伊氏锥虫 单克隆抗体

在线阅读 下载PDF 职称材料

不同地理株伊氏锥虫灭活苗交叉免疫保护及免疫方法研究 被引量：1

14

作者 王祥生 王德昭 +3 位作者 刘全 陈林 王黎煜 何畅 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第S1期157-160,共4页

用伊氏锥虫湖北株和广西株制备纯虫灭活苗和含血灭活苗，经小鼠１次、２次免疫，再经强毒伊氏锥虫湖北株、广西株和江苏株交叉攻击。结果湖北株纯虫灭活苗２次免疫鼠，对同株（湖北株）获得３０／３０保护，对异株即广西株和江苏株分别... 用伊氏锥虫湖北株和广西株制备纯虫灭活苗和含血灭活苗，经小鼠１次、２次免疫，再经强毒伊氏锥虫湖北株、广西株和江苏株交叉攻击。结果湖北株纯虫灭活苗２次免疫鼠，对同株（湖北株）获得３０／３０保护，对异株即广西株和江苏株分别获０／１０和７／１０保护，该苗一次免疫鼠对同株仅获得５／１０保护。广西株纯虫灭活苗２次免疫鼠对同株（广西株）获２０／２０保护，对异株即湖北株和江苏株分别获得０／１０和４／１０保护。含血湖北株伊氏锥虫灭活苗对同株无保护作用，１３只免疫小鼠全部死亡，对江苏株（异株）为９／１０死亡。对照小鼠全部发病死亡。交叉免疫保护试验结果说明，纯虫灭活苗经两次免疫后对伺株虫体产生坚强的免疫保护作用，免疫保护率达１００％，不同地理株伊氏锥虫因抗原变异现象出现不同的免疫保护作用。两次免疫接种小鼠其免疫保护效果比一次免疫的效果好。疫苗中如含有大量非特异物质，虫苗的免疫保护作用将完全丧失。稳定试验表明，灭活苗在室温下保存１个月，在４℃、－２０℃下保存６个月，免疫效果不变。 展开更多

关键词 伊氏锥虫 灭活苗 交叉免疫保护 小鼠

在线阅读 下载PDF 职称材料

12株中国伊氏锥虫对小鼠的毒力试验 被引量：1

15

作者 周勇志 沈杰 +1 位作者 何国声 周金林 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期432-434,共3页

为了确定中国伊氏锥虫各株的毒力强弱,对中国伊氏锥虫:安徽水牛株(AHB)、广东阳江水牛株(GDB_1)、广东水牛株(GDB_2)、广东马株(GDH)、广西骡株(GXM)、湖北骡株(HBM)、湖南水牛株(HNB)、江苏高邮水牛株(JSB_1)、江苏盱眙水牛株(JSB_2)... 为了确定中国伊氏锥虫各株的毒力强弱,对中国伊氏锥虫:安徽水牛株(AHB)、广东阳江水牛株(GDB_1)、广东水牛株(GDB_2)、广东马株(GDH)、广西骡株(GXM)、湖北骡株(HBM)、湖南水牛株(HNB)、江苏高邮水牛株(JSB_1)、江苏盱眙水牛株(JSB_2)、新疆骆驼株(XJCA)、云南水牛株(YNB)、浙江水牛株(ZJB)进行小鼠的毒力试验。以各组鼠死亡率和平均存活天数作为毒力强弱的主要依据。结果表明最强致死率为100%,最弱30%;致死所需时间平均为7.5 d～25 d。对小鼠的致病力强弱依次是:AHB>YNB>GDB_2>XJCA>HBM>HNC>JSB_1>GXM>GDB_1>GDH>JSB_2>ZJB。提示不同株的毒力差异显著,测定结果可为伊氏锥虫相关科学研究选株提供依据。 展开更多

关键词 伊氏锥虫 感染 毒力

在线阅读 下载PDF 职称材料

水牛伊氏锥虫间接ELISA检测方法的建立 被引量：1

16

作者 何木荣 曾小飞 +4 位作者 陈汉忠 李晓栩 唐大运 白波 吴桂贤 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第3期22-27,共6页

利用伊氏锥虫的优势变异型虫体作为可溶性抗原,通过试验研究和条件优化,建立了一种水牛伊氏锥虫间接ELISA方法。测试结果表明,该法灵敏度高,特异性强,对实验感染样本的检测获得了较好的效果,为一种有效的ELIAS方法,为广西水牛伊氏锥虫... 利用伊氏锥虫的优势变异型虫体作为可溶性抗原,通过试验研究和条件优化,建立了一种水牛伊氏锥虫间接ELISA方法。测试结果表明,该法灵敏度高,特异性强,对实验感染样本的检测获得了较好的效果,为一种有效的ELIAS方法,为广西水牛伊氏锥虫病的诊断奠定了技术基础。 展开更多

关键词 伊氏锥虫 水牛 酶联免疫吸附试验

在线阅读 下载PDF 职称材料

锥虫长期超低温保藏方法的研究 被引量：1

17

作者 白启 刘光远 周俊英 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第5期457-462,共6页

作者观测了不同保护剂、稀释液、pH值、降温方法、复苏温度、冻融次数、液相气相交替以及解冻后在普通冰瓶中存放时间对伊氏锥虫浙江虫株的感染性及致病力的影响。在此试验基础上,又对伊氏锥虫的6个不同虫株、媾疫锥虫、刚果锥虫、布氏... 作者观测了不同保护剂、稀释液、pH值、降温方法、复苏温度、冻融次数、液相气相交替以及解冻后在普通冰瓶中存放时间对伊氏锥虫浙江虫株的感染性及致病力的影响。在此试验基础上,又对伊氏锥虫的6个不同虫株、媾疫锥虫、刚果锥虫、布氏锥虫等4个种的9个虫株,进行了超低温保藏试验和长期保藏效果观察。已测定的有效保藏期伊氏锥虫达574～3200天、媾疫锥虫达2866天、刚果锥虫达763天、布氏锥虫达783天。通过反复试验,提出了锥虫的常规保藏方法。 展开更多

关键词 伊氏锥虫 保藏 低温

在线阅读 下载PDF 职称材料

几种冷冻保存伊氏锥虫方法的比较试验研究 被引量：1

18

作者 钟淑梅 周勇志 +1 位作者 王云飞 郑韧坚 《中国兽医寄生虫病》 CAS 1996年第4期1-3,共3页

本文用液氮冷冻法比较了不同保护剂和不同冻存途径对伊氏锥虫云南株进行保存后，虫株在存活率、活力、感染力、致病力和药敏性方面的变化。我们发现在以二甲基亚砜为主要保存剂时，二甲基亚砜浓度低对保存效果不利，而浓度为５％时，保... 本文用液氮冷冻法比较了不同保护剂和不同冻存途径对伊氏锥虫云南株进行保存后，虫株在存活率、活力、感染力、致病力和药敏性方面的变化。我们发现在以二甲基亚砜为主要保存剂时，二甲基亚砜浓度低对保存效果不利，而浓度为５％时，保存７１２天后，虫体成活率仍达９６％；当以甘油为保存剂时，若其浓度低虫体成活率低，当浓度为２０％时，保存３６５天后虫体存活率有９１．４％。在不同冻存途径试验中发现，先在液氮气相中距液氮面４ｃｍ以上处放置１ｈ，再降到距液氮面４ｃｍ处放置１ｈ，然后进入液氮效果最好。用此种保存方法和冻存途径后，虫体活力强，其感染力、致病性和药敏性都没有发生明显变化。 展开更多

关键词 伊氏锥虫 液氮冷冻 二甲基亚砜 甘油

在线阅读 下载PDF 职称材料

同一克隆两个不同变异体的伊氏锥虫在兔体内抗原变异研究 被引量：4

19

作者 王权 沈杰 +1 位作者 周勇志 周金林 《中国兽医寄生虫病》 2000年第1期4-7,共4页

为了解伊氏锥虫在兔体内感染后期抗原变异的情况及比较同一克隆不同变异体锥虫在兔体内抗原变异情况,用伊氏锥虫安徽株单虫克隆ShTat1.2感染兔,在兔体30天中每隔3天及感染后51、54、57天(兔58天死亡)分离兔血中锥虫并克隆,获得13个克隆... 为了解伊氏锥虫在兔体内感染后期抗原变异的情况及比较同一克隆不同变异体锥虫在兔体内抗原变异情况,用伊氏锥虫安徽株单虫克隆ShTat1.2感染兔,在兔体30天中每隔3天及感染后51、54、57天(兔58天死亡)分离兔血中锥虫并克隆,获得13个克隆锥虫群体,经间接免疫荧光试验和ABC酶标记试验鉴定为10个抗原性互不相同的抗原变异体(VariableAntigenType,VAT),其中早期(感染锥虫30天内)9个,后期1个;早期锥虫一般3天发生1次抗原变异,后期7天内无变异。用同样的血清学方法检测,得知ShTat1.2锥虫感染早期的VATS中的6个与ShTat1.1锥虫在同种动物体内同期获得的VATS相同,但VATS出现次序不同。结果表明伊氏锥虫感染早期比感染后期抗原变异频繁,同一克隆锥虫不同变异体在兔体内变异次序不相同。 展开更多

关键词 伊氏锥虫 克隆 抗原变异 抗原变异体 兔

在线阅读 下载PDF 职称材料

二氟甲基鸟氨酸与贝尼尔配用治疗实验伊氏锥虫病 被引量：2

20

作者 伦照荣 张光朴 CyrusJ.Bacchi 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1990年第4期145-149,共5页

三组体重20～23克的雌性NIH小鼠,每只经腹腔接种10~5伊氏锥虫(Trypanosomaevansi)后24小时,分别用不同剂量的贝尼尔治疗一次,同时让小鼠喝不同浓度的二氟甲基鸟氨酸(DFMO)水溶液,连续3天。结果表明,1％DFMO+1.25mg/kg贝尼尔、1％DFMO+0.... 三组体重20～23克的雌性NIH小鼠,每只经腹腔接种10~5伊氏锥虫(Trypanosomaevansi)后24小时,分别用不同剂量的贝尼尔治疗一次,同时让小鼠喝不同浓度的二氟甲基鸟氨酸(DFMO)水溶液,连续3天。结果表明,1％DFMO+1.25mg/kg贝尼尔、1％DFMO+0.625mg/kg贝尼尔和0.5％DFMO+2.5mg/kg贝尼尔的配伍组,其治愈率均达100％,比各自单独使用的对照组均有明显的增效作用。另4组NIH小鼠,每只经腹腔接种10~5伊氏锥虫后65小时(虫血症达1.5～2.5×10~8),先用1.5mg/kg贝尼尔治疗一次,7天后再让小鼠分别喝0.5％、0.75％、1％和2％的DFMO水溶液,连续3天。结果显示,1.5mg/kg贝尼尔+0.5％DFMO、1.5mg/kg贝尼尔+0.75％DFMO、1.5mg/kg贝尼尔+1％DFMO和1.5mg/kg贝尼尔+2％DFMO对后期危重的实验伊氏锥虫病的治愈率分别为20％、40％、80％和100％。 展开更多

关键词 伊氏锥虫病 DFMO 贝尼乐 药物配用

在线阅读 下载PDF 职称材料