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以酶解渣为碳源制备木聚糖酶的研究 被引量:12
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作者 毛连山 徐勇 +2 位作者 宋向阳 勇强 余世袁 《林产化学与工业》 EI CAS CSCD 2001年第4期33-38,共6页
以里氏木霉 (Trichodermareesei)RutC 30为产酶菌 ,低聚木糖制备过程中酶解渣为碳源可诱导产生含低纤维素酶活 (0 .10 6IU/mL)的木聚糖酶 (15 4 .67IU/mL) ,两种酶活的比值达 145 9,与粗木聚糖为碳源产木聚糖酶相比 ,木聚糖酶活提高了 1... 以里氏木霉 (Trichodermareesei)RutC 30为产酶菌 ,低聚木糖制备过程中酶解渣为碳源可诱导产生含低纤维素酶活 (0 .10 6IU/mL)的木聚糖酶 (15 4 .67IU/mL) ,两种酶活的比值达 145 9,与粗木聚糖为碳源产木聚糖酶相比 ,木聚糖酶活提高了 1.67倍 ,而纤维素酶活没有增加。此酶在 5 0℃条件下酶解粗木聚糖和酶解渣时 ,pH值 5时酶解效率最高 ,酶解产物通过HPLC分析 ,主要是木糖。该酶系的组成主要是外切 β 木糖苷酶。 展开更多
关键词 里氏木霉 酶解渣 木聚糖酶 酶解 碳源 低聚木糖 制备
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内切木聚糖酶的选择性纯化及酶解制备低聚木糖的研究 被引量:11
2
作者 毛连山 勇强 +2 位作者 宋向阳 姚春才 余世袁 《林产化学与工业》 EI CAS CSCD 2006年第1期124-126,共3页
研究了超滤分离除去里氏木霉木聚糖酶中的外切-β-木糖苷酶,以及酶解制备低聚木糖。研究结果表明:用超滤的方法能完全除去外切-β-木糖苷酶,透过液经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定为单带,酶解产物全部是低聚木糖,当... 研究了超滤分离除去里氏木霉木聚糖酶中的外切-β-木糖苷酶,以及酶解制备低聚木糖。研究结果表明:用超滤的方法能完全除去外切-β-木糖苷酶,透过液经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定为单带,酶解产物全部是低聚木糖,当酶解时间从2 h延长到10 h时,低聚木糖的得率从26.83%增加到54.22%;而用粗木聚糖酶酶解制备低聚木糖时,当酶解时间从2 h延长到10 h时,低聚木糖得率从17.97%下降到11.12%。因此,采用该技术可以大幅度增加总糖中低聚木糖所占的比例,显著提高木聚糖原料的有效利用率。 展开更多
关键词 低聚木糖 酶水解 木聚糖酶 里氏木霉
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酶的选择性纯化及酶解制备木低聚糖的研究 被引量:12
3
作者 洪枫 陈牧 余世袁 《林产化学与工业》 EI CAS CSCD 北大核心 1999年第2期49-54,共6页
采用沉淀剂H处理木聚糖酶及纤维素酶以除去大部分β木糖苷酶,以及酶解制备木低聚糖的研究结果。研究表明,当酶液中沉淀剂H的饱和度为50%时,处理效果最佳。通过对一种木聚糖酶、两种纤维素酶经该沉淀剂处理效果的比较,发现木... 采用沉淀剂H处理木聚糖酶及纤维素酶以除去大部分β木糖苷酶,以及酶解制备木低聚糖的研究结果。研究表明,当酶液中沉淀剂H的饱和度为50%时,处理效果最佳。通过对一种木聚糖酶、两种纤维素酶经该沉淀剂处理效果的比较,发现木聚糖酶处理后的效果最好,酶解后木糖得率<1%,而木低聚糖得率几乎不变。因此,采用该项技术可以大幅度增加总糖中木低聚糖所占比例。 展开更多
关键词 木低聚糖 酶水解 纯化 木聚糖酶 里氏木霉
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产木聚糖酶菌株的筛选、鉴定及其酶学性质研究 被引量:7
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作者 马焕 权淑静 +3 位作者 刘德海 陈国参 陶尧堂 解复红 《中国酿造》 CAS 北大核心 2016年第12期123-128,共6页
以木聚糖为唯一碳源,采用平板筛选和摇瓶发酵相结合的方法,从腐朽木头中分离、筛选到一株高产木聚糖酶菌株XE-13-1根据菌株的形态特征,并结合18S rDNA序列分析,初步鉴定菌株X E-13-1为桔绿木霉(Trichoderma citrinoviride)。经测定,菌株... 以木聚糖为唯一碳源,采用平板筛选和摇瓶发酵相结合的方法,从腐朽木头中分离、筛选到一株高产木聚糖酶菌株XE-13-1根据菌株的形态特征,并结合18S rDNA序列分析,初步鉴定菌株X E-13-1为桔绿木霉(Trichoderma citrinoviride)。经测定,菌株X E-13-1所产木聚糖酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH值7,具有较好的pH稳定性。在30℃、pH 5~10的条件下保温2 h,该酶仍具有78%以上的酶活力。Mg^(2+)、Fe^(2+)、K^+、Zn^(2+)对该酶具有明显的促进作用,Cu^(2+)对该酶具有明显的抑制作用。酶学性质研究结果表明,该酶在工业应用上具有较好的前景。 展开更多
关键词 木聚糖酶 桔绿木霉 酶学性质
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里氏木霉木聚糖酶的分离纯化及酶学性质 被引量:5
5
作者 蔡少丽 杨章萍 黄建忠 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期113-118,共6页
摘要采用冻干浓缩,硫酸铵盐析,SephacrylS-200HighResolution凝胶柱层析,HiTrapDesalting凝胶柱脱盐,HiTrap’TM SP(HP)离子柱层析对里氏木霉EIM-30的发酵液进行分离纯化,获得两个纯化的木聚糖酶组分,分别命名为XylanaseA和Xyla... 摘要采用冻干浓缩,硫酸铵盐析,SephacrylS-200HighResolution凝胶柱层析,HiTrapDesalting凝胶柱脱盐,HiTrap’TM SP(HP)离子柱层析对里氏木霉EIM-30的发酵液进行分离纯化,获得两个纯化的木聚糖酶组分,分别命名为XylanaseA和XylanaseB。纯化倍数分别为3.58和3.29,回收率分别为7.02%和28.29%。SDS—PAGE结果均为单一条带,分子质量分别为29.6ku和20.9ku。酶学性质研究结果表明:XylanaseA和XylanaseB的最适反应温度分别为55℃和60℃;温度低于50℃,两种酶的稳定性都很好;最适pH一样,都为5.0;pH稳定范围也一样,都为3.5~7.0;Mn2+、Tris对XylanaseA有激活作用,Fe2+、Cu2+、SDS则对该酶有抑制作用;Mn2+对XylanaseB有激活作用,Zn2+、Ca2+、Fe2+、Cu2+、Ba2+、Mg2+及SDS则对该酶有抑制作用。 展开更多
关键词 里氏木霉 木聚糖酶 分离纯化 酶学性质
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宇佐美曲霉木聚糖酶的纯化及其性质 被引量:7
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作者 符丹丹 李爱江 +1 位作者 谢慧 邬敏辰 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第2期116-120,共5页
宇佐美曲霉E001固态发酵成熟曲经水浸提、硫酸铵盐析、Phenyl-SepharoseCL-4B疏水层析、SephadexG-75凝胶过滤层析、DEAESepharosefastflow阴离子交换层析等提纯步骤,获得了比酶活3047IU/mg蛋白的纯木聚糖酶,其SDS-PAGE呈单一条带。用SD... 宇佐美曲霉E001固态发酵成熟曲经水浸提、硫酸铵盐析、Phenyl-SepharoseCL-4B疏水层析、SephadexG-75凝胶过滤层析、DEAESepharosefastflow阴离子交换层析等提纯步骤,获得了比酶活3047IU/mg蛋白的纯木聚糖酶,其SDS-PAGE呈单一条带。用SDS-PAGE和凝胶过滤测得木聚糖酶的相对分子质量分别为23.2kD和23.0kD,表明该酶蛋白为单亚基。纯木聚糖酶的最适作用温度和pH值分别为50℃和4.6;以燕麦木聚糖为底物的酶动力学常数Km和Vmax值分别为5.27mg/ml和6494μmol/(min·mg);Ca2+、EDTA对酶有激活作用,而Sn2+、Pb2+、Fe3+有强烈的抑制作用。 展开更多
关键词 宁佐美曲霉 木聚糖酶 分离纯化 酶学性质
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M-26碱性木聚糖酶的分离纯化及酶学性质研究 被引量:10
7
作者 慕娟 问清江 +1 位作者 李叶昕 党永 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2011年第3期25-30,共6页
从Bacillus pumilus M-26发酵液中分离纯化碱性木聚糖酶,进行酶学性质研究,同时制备工业用碱性木聚糖酶制剂。首先将M-26发酵液进行硫酸铵盐析,制备工业用碱性木聚糖酶干品;然后进行sephadexG-25层析脱盐和cellulose DE-52层析得以纯化... 从Bacillus pumilus M-26发酵液中分离纯化碱性木聚糖酶,进行酶学性质研究,同时制备工业用碱性木聚糖酶制剂。首先将M-26发酵液进行硫酸铵盐析,制备工业用碱性木聚糖酶干品;然后进行sephadexG-25层析脱盐和cellulose DE-52层析得以纯化。硫酸铵的饱和度50%,酶制剂的酶活可达9 000 IU/g,收率为85%;分离纯化使酶的比活为126.32 IU/mg蛋白,纯化倍数为19.89,酶的回收率12.83%;分子量约为20 ku;M-26碱性木聚糖酶的最适温度和pH分别是55℃和pH 8.0,具有一定的耐碱性;该酶无纤维素酶活性,Fe2+对其有激活作用;Mn2+、Zn2+、Fe3+、Cu2+对其具有抑制作用。短小芽胞杆菌M-26碱性木聚糖酶具有纸浆生物漂白应用前景。 展开更多
关键词 碱性木聚糖酶 分离纯化 酶学性质
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金针菇菌糠中木聚糖酶的分离纯化及其酶学性质研究 被引量:7
8
作者 杨云龙 黄彩梅 +1 位作者 白植成 胡开辉 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1094-1099,共6页
废弃食用菌栽培料(SMC)中含有一定活性的木聚糖酶,作者以金针菇菌糠为材料,采用盐析、Sephadex G-100凝胶层析和DEAE C-52离子交换层析等技术,对SMC中的木聚糖酶进行分离和纯化,并进行酶学性质研究。结果表明,该酶经SDS-PAGE电泳鉴定为... 废弃食用菌栽培料(SMC)中含有一定活性的木聚糖酶,作者以金针菇菌糠为材料,采用盐析、Sephadex G-100凝胶层析和DEAE C-52离子交换层析等技术,对SMC中的木聚糖酶进行分离和纯化,并进行酶学性质研究。结果表明,该酶经SDS-PAGE电泳鉴定为电泳纯,分子量为37.8 KDa,酶比活力达到946.67 U/mg,纯化倍数为12.74;酶的最适温度和pH分别为50℃和pH 6.0,Fe^(2+)、Zn^(2+)对木聚糖酶有激活作用,Ca^(2+)、Mn^(2+)、K^+有促进作用,Mg^(2+)、Cu^(2+)、Fe^(3+)有抑制作用,反应动力学参数V_(max)和K_m分别为15.43μg/mL/min、9.61 mg/mL。 展开更多
关键词 木聚糖酶 分离纯化 酶学性质
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里氏木霉和黑曲霉产酸性木聚糖酶及酶学特性比较 被引量:4
9
作者 吴仁智 黄俊 +5 位作者 芦志龙 陈英 陆琦 陈小玲 陈东 黄日波 《广西科学》 CAS 2017年第1期112-119,共8页
【目的】对黑曲霉和里氏木霉产酸性木聚糖酶的性能及所产粗酶的酶学特性进行分析比较,尤其是考察pH值为4时木聚糖酶酶活力及稳定性,从而确定潜在的较为理想的酸性木聚糖酶。【方法】将里氏木霉和黑曲霉接种至培养基进行产酶培养,比较分... 【目的】对黑曲霉和里氏木霉产酸性木聚糖酶的性能及所产粗酶的酶学特性进行分析比较,尤其是考察pH值为4时木聚糖酶酶活力及稳定性,从而确定潜在的较为理想的酸性木聚糖酶。【方法】将里氏木霉和黑曲霉接种至培养基进行产酶培养,比较分析两者的酸性木聚糖酶、酸性木糖苷酶的酶活力及酶学特性。【结果】黑曲霉酸性木聚糖酶和酸性木糖苷酶的酶活力最高分别达(52.36±2.61)U/mL和(0.57±0.01)U/mL,酸性木聚糖酶最适温度和pH值分别为55℃、5.0,酸性木糖苷酶最适温度和pH值分别为75℃、5.0;里氏木霉酸性木聚糖酶和酸性木糖苷酶的酶活力最高分别达(10.12±0.95)U/mL和(0.32±0.05)U/mL,酸性木聚糖酶最适温度和pH值分别为65℃、6.5,酸性木糖苷酶最适温度和pH值分别为65℃、4.5。黑曲霉和里氏木霉的酸性木聚糖酶兼有酸性CMCase酶活力,分别为(5.26±0.21)U/mL、(1.72±0.21)U/mL。【结论】黑曲霉所产酸性木聚糖酶明显比里氏木霉的更优良,是潜在的较为理想的酸性木聚糖酶。 展开更多
关键词 黑曲霉 里氏木霉 酸性木聚糖酶 酶学特性
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选择性控制酶水解玉米芯木聚糖制备低聚木糖 被引量:2
10
作者 洪枫 余世袁 《林产化学与工业》 EI CAS CSCD 2005年第B10期77-81,共5页
对采用选择性控制木聚糖酶水解条件制备低聚木糖进行了研究,并同时探讨了以 两种木聚糖形式——干粉和湿浆为原料造成的酶解结果差异及其原因。结果表明,目前较适 宜的低聚木糖制备工艺为:以木聚糖湿浆为底物,底物质量浓度20-40 g/L,... 对采用选择性控制木聚糖酶水解条件制备低聚木糖进行了研究,并同时探讨了以 两种木聚糖形式——干粉和湿浆为原料造成的酶解结果差异及其原因。结果表明,目前较适 宜的低聚木糖制备工艺为:以木聚糖湿浆为底物,底物质量浓度20-40 g/L,酶用量1%(体积 分数,下同),pH值4.8,温度50℃.酶解时间4 h。造成千粉与湿浆酶解制备低聚糖结果差异的原因,可能是 由于这两种底物自身结构特性的差异导致了底物可及度,以及酶与底物吸附作用的不同。结果显示当以干粉 为底物,酶用量10%,酶解时间12 h,低聚木糖得率最高可达40%(质量分数)左右,而以湿浆为底物,达到 同样低聚糖得率的酶用量和酶解时间分别仅需1%和4 h。 展开更多
关键词 低聚木糖 酶水解 玉米芯木聚糖 木聚糖酶 里氏木霉
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深绿木霉嗜酸性阿魏酸酯酶酶学性质及生物质转化分析 被引量:5
11
作者 高兆建 许祥 +5 位作者 王先凤 芦宁 王旭东 张铁柱 张抗震 焦巍 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第10期121-128,共8页
为实现生物质的高效降解,制备具有重要生理功能的阿魏酸,本实验从深绿木霉XS6发酵液中分离纯化深绿木霉阿魏酸酯酶(Trichoderma atroatroviride feruloyl esterase,TaFAE),并研究酶学特性。发酵液经(NH_4)_2SO_4沉淀、DEAE-Cellulose D... 为实现生物质的高效降解,制备具有重要生理功能的阿魏酸,本实验从深绿木霉XS6发酵液中分离纯化深绿木霉阿魏酸酯酶(Trichoderma atroatroviride feruloyl esterase,TaFAE),并研究酶学特性。发酵液经(NH_4)_2SO_4沉淀、DEAE-Cellulose DE52阴离子交换层析和Sephadex G-200凝胶过滤层析后,得到电泳纯的TaFAE,比活力134.3 U/mg,回收率28.9%,纯化倍数31.52。经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳测得酶分子质量约为66.4 kDa。TaFAE对阿魏酸甲酯亲和力最高,以其为底物,酶K_m值和V_(max)值分别为0.53 mmol/L和16.74 μmol/(min·mg)。以芥子酸甲酯为底物,酶促反应速率最大,达到32.21 μmol/(min·mg),是阿魏酸甲酯的2倍,对咖啡酸甲酯无活性,说明该酶具有严格的底物特异性。TaFAE最适pH值和温度分别为pH 4.0和40℃。在pH 2.0~9.0的范围内,30~40℃温度下都表现出良好的稳定性。金属离子Ca^(2+)和Mg^(2+)对TaFAE活性有显著激活作用,重金属离子Hg^(2+)和Pb^(2+)几乎完全抑制酶活性;β-巯基乙醇、二硫苏糖醇、十二烷基硫酸钠、Trition X-100增强酶活性,苯甲基磺酰氟有较强的抑制作用。木聚糖酶降解生物质的体系中加入TaFAE可显著增加阿魏酸和还原糖产量,表明TaFAE和木聚糖酶有良好协同作用。综上所述,TaFAE优良的耐酸性及其他酶学性质说明其在食品和饲料行业有较好的应用潜力。 展开更多
关键词 阿魏酸酯酶 深绿木霉(trichoderma atroatroviride)XS6 分离纯化 酶学性质 生物质转化
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绿色木霉耐高温葡萄糖氧化酶的特性分析 被引量:1
12
作者 高兆建 王先凤 +4 位作者 尚业成 许祥 李宝林 张抗震 焦魏 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第14期153-159,共7页
从绿色木霉(Trichoderma viride)WX24菌株发酵中分离、纯化葡萄糖氧化酶(T. viride glucose oxidase,TvGOD),研究其酶学特性,为葡萄糖氧化酶的应用提供理论基础。将绿色木霉胞外产酶发酵液经硫酸铵沉淀、透析、DEAE-Sepharose Fast Flo... 从绿色木霉(Trichoderma viride)WX24菌株发酵中分离、纯化葡萄糖氧化酶(T. viride glucose oxidase,TvGOD),研究其酶学特性,为葡萄糖氧化酶的应用提供理论基础。将绿色木霉胞外产酶发酵液经硫酸铵沉淀、透析、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析、Phenyl Sepharose 6 Fast Flow疏水层析和Sephadex G-75分子筛凝胶过滤层析纯化,并研究酶学性质。由十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测得TvGOD表观分子质量93 kDa,达到电泳纯。经纯化,TvGOD比活力为426.67 U/mg,纯化倍数为14.36,活力回收率19.15%。TvGOD最适pH 6.0,最适反应温度60℃。70℃以下、pH 4~7之间,TvGOD稳定性好。所测金属离子中,Na+和K+对酶活力无影响,Fe2+、Cu2+和Zn2+有轻微抑制作用,Mg2+和Ca2+对TvGOD有显著激活作用,而重金属离子Hg2+和Pb2+几乎完全抑制酶活力;丝氨酸蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟和金属螯合剂乙二胺四乙酸二钠对TvGOD抑制作用较为强烈;TvGOD对表面活性剂十二烷基硫酸钠、十六烷基三甲基溴化铵、Triton X-100和吐温80表现出强稳定性。以葡萄糖为底物,酶Km和Vmax分别为11.62μmol/L和8.244 mmol/(L·min)。基于TvGOD在高温、酸性下的高活性与高稳定性以及对表面活性剂的高耐受性、对底物葡萄糖高亲和性等优良特性,TvGOD很有希望在面粉加工、食品饮料、饲料及生物传感器领域以及需要在高温、高酸环境下使用的生物技术工业中应用。 展开更多
关键词 葡萄糖氧化酶 绿色木霉 纯化 性质
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木聚糖酶的研究进展 被引量:23
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作者 陈洪洋 蔡俊 +2 位作者 林建国 王常高 杜馨 《中国酿造》 CAS 北大核心 2016年第11期1-6,共6页
木聚糖是仅次于纤维素的第二丰富的可再生资源,通过筛选出产木聚糖酶的菌株,利用基因工程技术,将木聚糖酶基因进行异源表达,提高木聚糖酶产量。该文综述了菌株产生的木聚糖酶酶学性质,并对酶学性质进行改善使木聚糖酶更符合应用的条件,... 木聚糖是仅次于纤维素的第二丰富的可再生资源,通过筛选出产木聚糖酶的菌株,利用基因工程技术,将木聚糖酶基因进行异源表达,提高木聚糖酶产量。该文综述了菌株产生的木聚糖酶酶学性质,并对酶学性质进行改善使木聚糖酶更符合应用的条件,同时研究木聚糖酶分离纯化的步骤,来提高木聚糖酶的酶活。文章重点介绍了木聚糖酶的产生菌和木聚糖酶在基因工程技术等方面研究进展,并对木聚糖酶的分离纯化方法做了简要地介绍。 展开更多
关键词 木聚糖酶 基因工程 酶学性质 分离纯化
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棘孢木霉GH11家族木聚糖酶的异源表达及酶学性质 被引量:6
14
作者 余静 刘学强 +4 位作者 马俊文 李雪 江正强 闫巧娟 杨绍青 《食品科学技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期29-38,共10页
从棘孢木霉(Trichoderma asperellum)中克隆得到一个糖苷水解酶(glycoside hydrolase,GH)11家族木聚糖酶基因TaXyn11A,并在大肠杆菌中进行了异源表达。该基因含有一个672 bp的开放阅读框,编码223个氨基酸,编码的蛋白与来自哈茨木霉C4(Tr... 从棘孢木霉(Trichoderma asperellum)中克隆得到一个糖苷水解酶(glycoside hydrolase,GH)11家族木聚糖酶基因TaXyn11A,并在大肠杆菌中进行了异源表达。该基因含有一个672 bp的开放阅读框,编码223个氨基酸,编码的蛋白与来自哈茨木霉C4(Trichoderma harzianum)的GH11家族木聚糖酶xynⅡ(NCBI accession No.B5A7N4.1)的同源性为85.2%。粗酶液经Ni-NTA亲和层析一步纯化得到电泳级纯酶(TaXyn11A),该酶分子质量为24.2 kDa。研究了纯酶的酶学性质,结果表明:TaXyn11A为酸性中温木聚糖酶,最适pH值和最适温度分别是5.0和50℃,在pH值为4.0~10.0时和45℃及以下保持稳定,45℃时半衰期为14.3 h。EDTA、Mn2+和Cr3+对该酶有激活作用,而SDS和CTAB对该酶有抑制作用。底物特异性及水解特性分析表明:TaXyn11A可特异性水解燕麦木聚糖、小麦阿拉伯木聚糖、榉木木聚糖和桦木木聚糖等木聚糖底物,比酶活力分别为989.6、727.6、706.0、484.5 U·mg^-1,水解12 h后,产物以聚合度为2~6的低聚木糖为主。这些优良的酶学特性使TaXyn11A在低聚木糖生产中具有潜在应用价值。 展开更多
关键词 木聚糖酶 GH11家族 棘孢木霉 异源表达 酶学性质
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高产β-葡聚糖酶里氏木霉的诱变选育、酶学性质及体外模拟消化研究 被引量:2
15
作者 王娜 林青 +5 位作者 赵余 张敏琴 娄恺 李莉 袁华伟 霍向东 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期153-159,共7页
β-葡聚糖酶可水解大麦等谷物中的葡聚糖,降低葡聚糖在单胃动物消化道内产生的抗营养作用。为获得高产β-葡聚糖酶菌株,采用常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)诱变里氏木霉(Trichoderma reesei),经初筛... β-葡聚糖酶可水解大麦等谷物中的葡聚糖,降低葡聚糖在单胃动物消化道内产生的抗营养作用。为获得高产β-葡聚糖酶菌株,采用常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)诱变里氏木霉(Trichoderma reesei),经初筛、复筛、遗传稳定性及酶学特性表征,突变株ARTP-9较出发菌株β-葡聚糖酶活力提高54.38%,为43.75 U/mL,产酶能力稳定遗传,酶的最适反应温度及pH分别为50℃和6.0,耐受温度为40~80℃,pH 2.5~6.5时酶活力稳定,Fe^(2+)、Mg^(2+)对酶活力有促进作用,Fe^(3+)、Mn^(2+)、Zn^(2+)、Ca^(2+)、Cu^(2+)对酶活力有抑制作用。以β-葡聚糖为底物,该粗酶的K m值和V max值分别为1.59 mg/mL和6.99μmol/(mg·min)。体外模拟消化实验表明,ARTP-9固态发酵酶制剂在胃期4 h黏度最低,为2.23 mPa·s;肠期21 h还原糖为0.70 mg/mL,是空白的3.2倍,差异显著(P<0.05),其大麦粉体外消化率为48.17%,较空白提升9.02%,差异极显著(P<0.01)。研究结果表明ARTP诱变技术能够显著提高里氏木霉β-葡聚糖酶活力,为其工业化生产奠定基础。 展开更多
关键词 里氏木霉 Β-葡聚糖酶 常压室温等离子体诱变 酶学性质 体外模拟消化
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坎皮纳斯类芽孢杆菌木聚糖酶的纯化以及酶学性质
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作者 陈磊 赵祥颖 刘建军 《中国酿造》 CAS 北大核心 2016年第7期64-68,共5页
采用硫酸铵盐析、Sephadex G-50凝胶过滤、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析对坎皮纳斯类芽孢杆菌(Paenibacillus campinasensis)xy-7发酵液进行分离纯化,获得纯化的木聚糖酶,纯化倍数为26.36,酶活回收率为5.13%。十二烷基硫酸钠... 采用硫酸铵盐析、Sephadex G-50凝胶过滤、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析对坎皮纳斯类芽孢杆菌(Paenibacillus campinasensis)xy-7发酵液进行分离纯化,获得纯化的木聚糖酶,纯化倍数为26.36,酶活回收率为5.13%。十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果为单一条带,分子质量为24.5 ku。酶学性质研究结果表明,该酶的最适反应温度为60℃,最适p H值为8.0。K+、Fe2+对酶有激活作用,Zn2+、Cu2+对酶有强烈的抑制作用。以榉木木聚糖为底物时,米氏常数Km=4.733 mg/m L,最大酶反应速率Vm=315.85μmol/(min·mg)。 展开更多
关键词 坎皮纳斯类芽孢杆菌 木聚糖酶 分离纯化 酶学性质
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