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9种中药提取物细胞毒性及其与人结肠腺癌细胞系单层细胞旁通透性的相关性研究 被引量:4
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作者 蔡润兰 代勇 +3 位作者 王敏 高源 徐世军 齐云 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1418-1421,共4页
目的了解9种中药提取物对Caco-2细胞毒性与对其细胞单层细胞-细胞间通透性的相关性。方法用MTT法测定9种中药提取物24 h及48 h的细胞毒,并计算IC50值。采用TranswellTM培养板构建Caco-2细胞单层,细胞电阻仪测定受试物对其TEER值的影响,... 目的了解9种中药提取物对Caco-2细胞毒性与对其细胞单层细胞-细胞间通透性的相关性。方法用MTT法测定9种中药提取物24 h及48 h的细胞毒,并计算IC50值。采用TranswellTM培养板构建Caco-2细胞单层,细胞电阻仪测定受试物对其TEER值的影响,找到影响细胞单层紧密连接的临界剂量,以此剂量与细胞毒参数行相关分析。结果 24、48 h细胞毒参数(IC50)与临界剂量(最大无毒剂量、最小有毒剂量)相关系数均>0.84,相关性检验P值均<0.01。最大无毒剂量与IC50的比值列阵显示,《小品方》甘草饮最小,三七醇提物最大。结论 9种中药提取物对Caco-2细胞毒与该细胞单层细胞旁通透性高度相关,采用细胞毒参数来预估中药提取物在Caco-2单层细胞模型供侧起始最大浓度具可行性。 展开更多
关键词 体外细胞毒 细胞旁通透性 CACO-2细胞 MTT活性测定 跨上皮电阻 相关性
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Caco-2细胞体外吸收模型的建立及验证 被引量:19
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作者 吕晓君 曹易丹 何开勇 《医药导报》 CAS 北大核心 2018年第11期1311-1315,共5页
目的建立Caco-2细胞体外吸收模型并对其进行验证,以利于药物吸收转运的研究。方法 Caco-2细胞接种于Transwell 24孔微孔滤膜培养板上,培养3,6,9,12,15,18,21 d,通过观察细胞形态、绘制生长曲线、测定跨膜电阻值(TEER),比较低、中、高细... 目的建立Caco-2细胞体外吸收模型并对其进行验证,以利于药物吸收转运的研究。方法 Caco-2细胞接种于Transwell 24孔微孔滤膜培养板上,培养3,6,9,12,15,18,21 d,通过观察细胞形态、绘制生长曲线、测定跨膜电阻值(TEER),比较低、中、高细胞浓度(5×10~4,1×10~5,2×10~5·mL^(-1))对细胞单层完整性的影响,以确定细胞接种密度和培养时间;通过测定荧光黄的跨膜通透性、细胞膜顶侧(AP)、基底侧(BL)及细胞内的碱性磷酸酶活性验证细胞单层通透性和极性分化特征。结果低、中、高浓度细胞接种后分别在15,12,9 d形成单层膜结构,吸光度达高峰,但生长后期高、中浓度组细胞出现成团、死亡,且TEER值小于低浓度组。低浓度细胞接种15 d TEER值达到300Ω·cm^2,15~21 d基本稳定;选择低浓度(5×10~4·mL^(-1))为合适的浓度接种细胞,培养21 d后,荧光黄的表观渗透系数(Papp)为3.57×10^(-7)cm·s^(-1),低于通透实验规定的5.0×10^(-7)cm·s^(-1);细胞内碱性磷酸酶活性增加,膜两侧碱性磷酸酶活性比值(AP/BL)增高5倍多,细胞形成极性分化。结论所建立的Caco-2细胞模型完整性、通透性与极性分化特征通过验证,可作为模拟小肠药物转运过程的体外模型。 展开更多
关键词 CACO-2细胞 吸收 体外 跨膜电阻值 碱性磷酸酶 渗透性
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