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多聚半乳糖醛酸酶(PG)反义基因转化加工番茄 被引量:13
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作者 寇晓虹 罗云波 +1 位作者 田慧琴 石英 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第3期187-191,共5页
通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)LBA4404介导将多聚半乳糖醛酸酶(PG)反义基因导入新疆加工番茄(代号:99-162混)。卡那霉素抗性筛选,获得移栽成活的10株再生植株,PCR和Southern blot检测表明,其中4株再生植株的染色体中有外源基... 通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)LBA4404介导将多聚半乳糖醛酸酶(PG)反义基因导入新疆加工番茄(代号:99-162混)。卡那霉素抗性筛选,获得移栽成活的10株再生植株,PCR和Southern blot检测表明,其中4株再生植株的染色体中有外源基因的插入。所得4株转基因加工番茄在基因转化处理当代表现不同;果实饱满有光泽;Northern杂交结果表明,转反义PG基因加工番茄果实外果皮PG基因表达水平比对照低。转基因植株的表型观察和分子检测结果相吻合。 展开更多
关键词 多聚半乳糖醛酸酶 番茄 遗传转化 果实硬度
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番茄果实特异性启动子的克隆与遗传转化研究 被引量:6
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作者 姜娜娜 赵传志 +3 位作者 赵光敬 李长生 夏晗 王兴军 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期74-78,共5页
为了实现外源基因在番茄果实中的高效和特异表达,克隆了番茄果实特异基因多聚半乳糖醛酸酶基因(Poly-galacturonase,PG)的启动子。以中蔬四号番茄为材料,建立并优化了以子叶为外植体的番茄高效再生和遗传转化体系;以GUS为报告基因,构建P... 为了实现外源基因在番茄果实中的高效和特异表达,克隆了番茄果实特异基因多聚半乳糖醛酸酶基因(Poly-galacturonase,PG)的启动子。以中蔬四号番茄为材料,建立并优化了以子叶为外植体的番茄高效再生和遗传转化体系;以GUS为报告基因,构建PG GUS植物表达载体,转化番茄。结果表明,在1.0 mg/L ZT的MS分化培养中,番茄子叶的发芽率最高,芽的诱导率高达91%,且发生畸态芽和褐化的外植体最少;通过抗生素浓度对农杆菌的抑制效果试验发现,当头孢霉素的浓度为200 mg/L时,抑制农杆菌的效果最好;成功克隆了番茄PG启动子,将PG启动子驱动的GUS基因转入番茄,对转基因后代果实的GUS染色表明,PG启动子驱动的外源基因在果实中特异表达。 展开更多
关键词 番茄 多聚半乳糖醛酸酶 果实特异启动子 遗传转化体系
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甜蛋白Brazzein基因在番茄果实中的特异表达 被引量:4
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作者 尹涛 卢虹玉 +2 位作者 张上隆 刘敬梅 陈大明 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期663-667,共5页
西瓜(Citrullus vulgaris S.)来源的AGPL1启动子在番茄(Lycopersicon esculentum L.)果实中具有较强的特异性驱动功能。将该启动子与甜味蛋白基因Brazzein融合构建植物表达载体,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法成功地... 西瓜(Citrullus vulgaris S.)来源的AGPL1启动子在番茄(Lycopersicon esculentum L.)果实中具有较强的特异性驱动功能。将该启动子与甜味蛋白基因Brazzein融合构建植物表达载体,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法成功地进行了对番茄的遗传转化,获得转化植株。组织化学法、PCR特异扩增、Southern杂交分析及RT-PCR检测,表明Brazzein基因已整合到转基因番茄植株基因组中并且稳定表达。通过AGPL1果实特异启动子的调控,在不改变果实其他性状的前提下提高了番茄果实甜味品质,并为甜蛋白的生产提供经验。 展开更多
关键词 番茄 甜蛋白基因Brazzein 遗传转化 果实特异 AGPL1启动子
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提高番茄品质的番茄去泛素化酶基因AMSH3 被引量:1
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作者 刘艳红 李光伟 刘永胜 《合肥工业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期548-553,共6页
AMSH3酶是去泛素化酶中MPN(+)/JAMM蛋白酶家族的一员,能结合泛素化蛋白上的泛素分子。文章在番茄中发现了一去泛素化酶基因SlAMSH3,与拟南芥去泛素化酶基因AtAMSH3在核酸水平和蛋白水平分别有81%和71%的相似性。拟南芥中去泛素化酶AtAM... AMSH3酶是去泛素化酶中MPN(+)/JAMM蛋白酶家族的一员,能结合泛素化蛋白上的泛素分子。文章在番茄中发现了一去泛素化酶基因SlAMSH3,与拟南芥去泛素化酶基因AtAMSH3在核酸水平和蛋白水平分别有81%和71%的相似性。拟南芥中去泛素化酶AtAMSH3会影响植物液泡的形成和液泡蛋白的运输途径。文章构建了SlAMSH3果实特异表达的过表达载体,并通过根瘤农杆菌介导转化到野生型番茄中,通过筛选获得SlAMSH3在果实中高表达阳性株系,实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)分析显示,转基因番茄果实中SlAMSH3的表达量明显高于野生型果实(p<0.05)。文章测定了阳性番茄株系绿熟期果实叶绿素质量浓度及红熟期果实的单果质量、果实糖度、果实硬度、番茄红素质量浓度和β-胡萝卜素质量浓度。结果表明,转基因番茄果实的叶绿素总质量浓度、番茄红素和β-胡萝卜素比野生型分别提高178.61%、40.53%和74.86%,其他指标无显著差异。因此,SlAMSH3果实特异过表达的方法能够改良番茄果实品质,为基因工程方法改良番茄果实品质做出了新尝试。 展开更多
关键词 AMSH3基因 果实特异过表达 遗传转化 转基因番茄 果实品质改良
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番茄cry1基因果实特异性植物表达载体的构建及其转化番茄的研究
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作者 孙艳 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第3期665-666,668,共3页
隐花色素(cryptochrome)是一类对UV-A/蓝光作出应答的光受体。果实特异性植物表达载体是用在番茄果实中特异表达的Lefsm1基因的启动子(fsp)替换质粒pBI121原有的35S启动子构建而成(称为pBI121fsp)。将番茄隐花色素家族成员之一cryptochr... 隐花色素(cryptochrome)是一类对UV-A/蓝光作出应答的光受体。果实特异性植物表达载体是用在番茄果实中特异表达的Lefsm1基因的启动子(fsp)替换质粒pBI121原有的35S启动子构建而成(称为pBI121fsp)。将番茄隐花色素家族成员之一cryptochrome1中465bp特异片段导入到植物载体pBI121fsp构建成果实特异性表达的RNAi植物表达载体(pBI121fsp-cry1),通过根癌农杆菌介导转入番茄子叶,经组织培养成功获得转基因植株。为后续对CRY1与番茄果实中抗氧化剂番茄红素之间的关系研究提供了材料。 展开更多
关键词 隐花色素 果实特异性启动子 子叶 番茄转化
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