筛选Toll样受体激动剂用于羊抗人载脂蛋白A1抗体的制备

1

作者 邓碧华 周宇杰 +3 位作者 尹文竹 唐欣薇 梅栋 徐志伟 《安徽农业科学》 2025年第1期98-101,共4页

为了筛选能够提高羊免疫应答的Toll样受体激动剂,设计针对羊TLR1~TLR10基因序列的引物,采用PCR方法检测羊体内Toll样受体的表达情况。然后,将人载脂蛋白A1(ApoA1)和HMT13佐剂配伍不同的TLR1~TLR9样受体激动剂,分组免疫湖羊后采集血样,... 为了筛选能够提高羊免疫应答的Toll样受体激动剂,设计针对羊TLR1~TLR10基因序列的引物,采用PCR方法检测羊体内Toll样受体的表达情况。然后,将人载脂蛋白A1(ApoA1)和HMT13佐剂配伍不同的TLR1~TLR9样受体激动剂,分组免疫湖羊后采集血样,并通过琼脂扩散试验检测抗体效价。结果表明:在湖羊的血液中均可检测到TLR1~TLR10的特异性目的片段。经过3、5、7次免疫后,添加TLR3激动剂的组效价最高,说明TLR3激动剂Ploy(I∶C)免疫增强效果最佳,可作为提高羊疫苗免疫的候选激动剂。 展开更多

关键词 toll样受体 激动剂 湖羊 APOA1 免疫应答

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Toll样受体7激动剂治疗过敏性疾病的研究进展 被引量：2

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作者 王玲 蔡铠红 +2 位作者 詹文珠 殷国干 叶琳 《医药导报》 CAS 北大核心 2024年第5期769-773,共5页

Toll样受体(TLR)7是TLR家族中的一员,是Ⅰ型跨膜糖蛋白,由细胞质Toll/白细胞介素-1受体同源性(TIR)信号传导结构域和包含19~25个串联富含亮氨酸重复基序的外部抗原识别结构域组成。人体内TLR7主要分布在浆树突状细胞(pDC)和B细胞的胞体... Toll样受体(TLR)7是TLR家族中的一员,是Ⅰ型跨膜糖蛋白,由细胞质Toll/白细胞介素-1受体同源性(TIR)信号传导结构域和包含19~25个串联富含亮氨酸重复基序的外部抗原识别结构域组成。人体内TLR7主要分布在浆树突状细胞(pDC)和B细胞的胞体内体膜上,通过高尔基体的囊泡从内质网穿梭至内体。内体膜上的TLR7与病毒来源的单链RNA分子或咪唑啉类似物结合从而被激活,进一步诱导Ⅰ型干扰素的合成,从而启动辅助性T淋巴细胞(TH)1细胞的激活,快速招募炎症细胞到感染部分,发挥抗病毒、抗肿瘤以及抗过敏的功能。TLR7激活后由于具有调节TH1/TH2细胞比例的作用,其配体用于治疗过敏性疾病的研究日益受到关注。该文围绕TLR7激动剂对过敏性哮喘、过敏性鼻炎以及过敏性脑炎的临床前研究和临床试验研究进行综述,以期为过敏性疾病的治疗提供新思路。 展开更多

关键词 TLR7激动剂 toll样受体 过敏性哮喘 过敏性鼻炎 过敏性脑炎

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Toll样受体激动剂作为佐剂在恶性肿瘤治疗性疫苗中的应用研究进展 被引量：1

3

作者 牟漫 黄思剑 +5 位作者 李健伦 操媛 王丽娟 卓可星 李旭 钟茂华 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期246-255,261,共11页

恶性肿瘤严重威胁人类健康和生命,急需研发新型治疗药物。治疗性肿瘤疫苗通过刺激患者免疫系统产生针对特定肿瘤抗原的T细胞应答,达到肿瘤治疗的目的,成为未来肿瘤免疫治疗最有前景的技术之一。然而,肿瘤抗原免疫原性低下,难以诱导机体... 恶性肿瘤严重威胁人类健康和生命,急需研发新型治疗药物。治疗性肿瘤疫苗通过刺激患者免疫系统产生针对特定肿瘤抗原的T细胞应答,达到肿瘤治疗的目的,成为未来肿瘤免疫治疗最有前景的技术之一。然而,肿瘤抗原免疫原性低下,难以诱导机体产生有效的免疫应答。Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)是一类广泛表达在树突状细胞、巨噬细胞等多种天然免疫细胞的模式识别受体,其配体是一类保守的病原相关分子模式。TLRs激动剂与其受体结合后,可通过刺激天然免疫系统,提高疫苗免疫原性、增强肿瘤特异性T细胞应答,从而提高疫苗保护效率,是一种高效的疫苗佐剂。该文就TLRs激动剂佐剂的分类、分子结构、诱导的信号通路及其在治疗性肿瘤疫苗中的应用研究进展作一综述。 展开更多

关键词 恶性肿瘤 肿瘤治疗性疫苗 toll样受体激动剂 佐剂

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Toll样受体激动剂及其作为寄生虫疫苗佐剂研究进展

4

作者 王丹妮 郑贵杰 +3 位作者 张翼 韩艳辉 王松 朱惠丽 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1063-1072,共10页

Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)作为启动固有免疫应答的关键分子,是连接固有免疫和适应性免疫应答的桥梁。TLR属于跨膜受体,主要由天然免疫细胞表达,分为细胞表面TLR和细胞内TLR。TLR的配体称为TLR激动剂,研究发现TLR激动剂作为佐... Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)作为启动固有免疫应答的关键分子,是连接固有免疫和适应性免疫应答的桥梁。TLR属于跨膜受体,主要由天然免疫细胞表达,分为细胞表面TLR和细胞内TLR。TLR的配体称为TLR激动剂,研究发现TLR激动剂作为佐剂可提高疫苗的免疫保护效应。由于寄生虫生活史复杂,不同虫种或同一虫种不同发育阶段的抗原特性差异给寄生虫疫苗的研制与开发带来严重困难,因此研发有效、安全的新型佐剂对提高寄生虫疫苗免疫效果至关重要。本文对TLR激动剂的种类和作用以及作为寄生虫疫苗佐剂的应用进行综述,为新型寄生虫疫苗佐剂的研发提供新的思路。 展开更多

关键词 toll样受体 激动剂 疫苗 佐剂

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Toll样受体7在人胃癌细胞株中的表达及其激动剂诱导SGC-7901细胞发生凋亡的实验研究 被引量：4

5

作者 姜炅 董蕾 +4 位作者 秦斌 郭晓燕 李红 史海涛 刘亚萍 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1606-1610,共5页

目的探讨Toll样受体7（TLR7）在不同人胃癌细胞株中的表达及其激动剂咪喹莫特对SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响。方法 Western blot法检测3种胃癌细胞株（SGC-7901、HGC-27和MKN-28）中TLR7蛋白表达差异,选取高表达TLR7的胃癌细胞作为主... 目的探讨Toll样受体7（TLR7）在不同人胃癌细胞株中的表达及其激动剂咪喹莫特对SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响。方法 Western blot法检测3种胃癌细胞株（SGC-7901、HGC-27和MKN-28）中TLR7蛋白表达差异,选取高表达TLR7的胃癌细胞作为主要研究对象;MTT法考察不同浓度咪喹莫特处理TLR7高表达胃癌细胞12～72 h后细胞增殖活性的改变;流式细胞仪AnnexinV-FITC/PI双染色法观察100μg/ml咪喹莫特干预12及24 h后细胞早期凋亡比率的改变;透射电镜下观察细胞凋亡形态学改变;实时定量PCR法分析Bcl-2及Bax mRNA在咪喹莫特作用前后表达差异。结果 TLR7蛋白在SGC-7901中表达水平高于其他两种胃癌细胞,其激动剂咪喹莫特能够明显抑制SGC-7901细胞增殖并且呈现出浓度及时间依赖性;100μg/ml咪喹莫特干预24 h后SGC-7901细胞早期凋亡比率明显上升,透射电镜下可观察到典型的凋亡形态学改变;咪喹莫特处理后SGC-7901细胞Bcl-2 mRNA表达呈浓度依赖性下降,Bax mRNA呈浓度依赖性上升。结论 TLR7在3种不同分化程度的胃癌细胞中均有表达,其激动剂咪喹莫特能够明显抑制SGC-7901细胞增殖并诱导其凋亡。 展开更多

关键词 胃癌 toll样受体7 咪喹莫特 凋亡

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Toll样受体7激动剂T7-利尿酸偶合物联合ROR1具有更强的抗乳腺癌作用 被引量：2

6

作者 张娜 靳广毅 +5 位作者 晋贞超 刘兵 彭博雅 高宁宁 胡云龙 唐俐 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期876-880,885,共6页

目的探讨Toll样受体7激动剂T7-利尿酸偶合物(T7-EA)联合受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(ROR1)抗乳腺癌的作用。方法采用Syfpeithi表位预测软件预测ROR1的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位;ELISA检测4μmol/L T7-EA、4μmol/L ROR1和4μmol/L T7-E... 目的探讨Toll样受体7激动剂T7-利尿酸偶合物(T7-EA)联合受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(ROR1)抗乳腺癌的作用。方法采用Syfpeithi表位预测软件预测ROR1的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位;ELISA检测4μmol/L T7-EA、4μmol/L ROR1和4μmol/L T7-EA联合4μmol/L ROR1诱导小鼠脾淋巴细胞产生的γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素12(IL-12)和骨髓来源的树突状细胞(DC)产生的肿瘤坏死因子α(TNF-α);BALB/c小鼠皮下接种乳腺癌4T1细胞建立移植瘤模型,腹腔分别注射3 mg/kg T7-EA、15 mg/kg ROR1、3 mg/kg T7-EA联合15 mg/kg ROR1,每周1次,免疫治疗4次后处死小鼠检测肿瘤质量;ELISA检测血清中针对4T1细胞肿瘤蛋白的Ig G水平;乳酸脱氢酶(LDH)法测定特异性CTL活性。结果在预测的多条ROR1 CTL表位肽中选取序列PYCDETSSV作为疫苗多肽;体外实验显示T7-EA活化淋巴细胞呈现剂量依赖性,与ROR1相关多肽混合后不改变其活性;T7-EA与ROR1合用诱导小鼠脾淋巴细胞产生IFN-γ和IL-12,刺激DC产生TNF-α;体内实验显示T7-EA联合ROR1抑制肿瘤生长效果显著强于单用T7-EA组和ROR1组,T7-EA联合ROR1诱导的针对4T1细胞肿瘤蛋白的血清Ig G水平显著高于T7-EA和ROR1单独给药组,T7-EA联合ROR1诱发的T细胞杀伤作用显著强于T7-EA和ROR1单独处理组。结论 T7-EA和ROR1联合应用具有更强的抗乳腺癌效果。 展开更多

关键词 乳腺癌 toll样受体7 T7-利尿酸偶合物(T7-EA) 受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(ROR1) 肿瘤免疫治疗

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Toll样受体7/8激活剂雷西莫特(R848)在牛XY精子分离中的应用研究 被引量：1

7

作者 卫利选 贾志宏 +5 位作者 曹平 贺周争雁 李龙 张力妮 罗茜 牛隽 《畜牧兽医科技信息》 2024年第7期51-53,共3页

本研究应用TLR7/8受体蛋白的激活剂雷西莫特(R848)进行XY精子分离,经R848孵育后X精子的运动性能受到抑制,Y精子的运动性能未受影响,这种对X精子的运动性能的抑制是可恢复的。用上游法分离XY精子并洗脱R848后,稀释重悬混匀精液后冷冻保存... 本研究应用TLR7/8受体蛋白的激活剂雷西莫特(R848)进行XY精子分离,经R848孵育后X精子的运动性能受到抑制,Y精子的运动性能未受影响,这种对X精子的运动性能的抑制是可恢复的。用上游法分离XY精子并洗脱R848后,稀释重悬混匀精液后冷冻保存,并对冷冻保存精子的运动指标、活力、畸形率、顶体和质膜完整性等指标进行检测,结果显示与普通冷冻精液相比未发生显著性变化,说明用TLR7/8特异性蛋白激活剂雷西莫特(R848)能够有效分离牛XY精子,为研究牛XY精子分离新技术提供参考。 展开更多

关键词 牛 性控精液 雷西莫特(R848) toll样受体 7/8(TLR7/8)

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Toll样受体8激动剂在树突状细胞抗肿瘤免疫治疗中的研究进展

8

作者 张芸 许化溪 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1554-1557,共4页

树突状细胞(DC)作为功能最强大的专职抗原提呈细胞,在诱导机体产生抗原特异性细胞毒性T细胞(CTL)中发挥重要作用。因此,现在的研究聚焦于使用免疫刺激性配体以增强DC在肿瘤中的抗原提呈功能,促进Th1型细胞免疫。由于小分子Toll样受体8(T... 树突状细胞(DC)作为功能最强大的专职抗原提呈细胞,在诱导机体产生抗原特异性细胞毒性T细胞(CTL)中发挥重要作用。因此,现在的研究聚焦于使用免疫刺激性配体以增强DC在肿瘤中的抗原提呈功能,促进Th1型细胞免疫。由于小分子Toll样受体8(TLR8)激动剂直接激活DC、增强DC抗原提呈功能和细胞免疫应答,特别是Th1细胞应答。因此,TLR8激动剂已经成为抗肿瘤免疫调节药物或免疫佐剂的研究热点。本文在总结TLR8激动剂的结构和免疫调节作用的基础上,重点阐明TLR8激动剂增强DC免疫原性的机制,以及TLR8激动剂用于制备新一代DC疫苗的研究进展,探讨TLR8激动剂作为免疫刺激性配体在肿瘤免疫治疗中的临床应用前景。 展开更多

关键词 toll样受体8(TLR8) 激动剂 树突状细胞(DC) 肿瘤 免疫治疗 综述

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Toll样受体激动剂在变应性气道炎性疾病治疗中的研究进展 被引量：6

9

作者 刘佩强 许昱(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第24期3047-3051,共5页

Toll样受体(TLRs)是模式识别受体中的一个大家族,是形成有效和完善的适应性免疫的关键因素,与Th2向Th1的表型转化和调节性T细胞的成熟密切相关。TLRs激动剂作为免疫佐剂或者独立的免疫制剂,在变应性哮喘、变应性鼻炎(AR)等变应性气道炎... Toll样受体(TLRs)是模式识别受体中的一个大家族,是形成有效和完善的适应性免疫的关键因素,与Th2向Th1的表型转化和调节性T细胞的成熟密切相关。TLRs激动剂作为免疫佐剂或者独立的免疫制剂,在变应性哮喘、变应性鼻炎(AR)等变应性气道炎性疾病的治疗中展现出广泛的应用前景。本文总结了TLRs激动剂在变应性气道炎性疾病的临床前及临床免疫治疗中的最新研究成果。 展开更多

关键词 toll样受体 激动剂 变应性鼻炎 变应性哮喘

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三七对慢性肾衰竭大鼠Sortilin蛋白、Toll样受体及血管钙化的影响 被引量：3

10

作者 黄志敏 陆良喜 +3 位作者 江旖旎 刘晓羽 张知英 吴金玉 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第6期773-779,共7页

目的 以Sortilin为切入点,探究慢性肾衰竭(CRF)血管钙化的机制,并探讨三七干预的影响,以期为临床降低CRF心血管事件提供有效的方法。方法 将36只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、三七低、中、高剂量组、骨化三醇组,每组6只。采用腺... 目的 以Sortilin为切入点,探究慢性肾衰竭(CRF)血管钙化的机制,并探讨三七干预的影响,以期为临床降低CRF心血管事件提供有效的方法。方法 将36只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、三七低、中、高剂量组、骨化三醇组,每组6只。采用腺嘌呤联合高磷饲料喂养复制CRF血管钙化大鼠模型。检测主动脉钙盐沉积,大鼠血清Scr、BUN、TG、TC、P、Ca,主动脉TLRs、Sortilin蛋白及炎症因子水平。结果 模型组大鼠肾纤维化明显,肾间质许多腺嘌呤结晶;大量钙盐沉积。各治疗组肾纤维化、钙盐沉积均有不同程度的减轻。与正常组比较,模型组大鼠血清BUN、Cr、P、TG、TC、IFN-γ、IL-6、IL-10、IL-17A含量明显升高(P <0.01),Ca含量明显降低(P <0.01)。与模型组比较,三七中、高剂量组和骨化三醇组大鼠血清BUN、Cr、P、TG、TC、IFN-γ、IL-6、IL-10、IL-17A含量明显降低(P <0.01),Ca含量明显升高(P <0.05或P <0.01)。与正常组比较,模型组大鼠主动脉组织BMP2、RUNX2、Sortilin、TLR7、TLR9蛋白的表达显著升高(P <0.01),SM22α蛋白的表达显著下降(P <0.01)。与模型组相比,三七低、中、高剂量组和骨化三醇组BMP2、RUNX2、Sortilin、TLR7、TLR9蛋白表达下降显著(P <0.01),SM22α蛋白表达显著上调(P <0.05或P <0.01),三七高剂量组和骨化三醇组效果更显著。结论 三七可改善CRF血管钙化模型大鼠的肾纤维化、血管钙化,其机制可能与调控Sortilin、TLRs的生物学功能有关。 展开更多

关键词 三七 慢性肾衰竭 血管钙化 SORTILIN toll样受体7 toll样受体9

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不同Toll样受体激动剂对小鼠辅助性T细胞功能的影响

11

作者 李晓敏 张燕楠 +1 位作者 杨滨燕 吴长有 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1441-1446,共6页

目的探讨不同的Toll样受体(TLR)激动剂对小鼠脾细胞、树突状细胞(DC)和免疫后白细胞介素12p40(IL-12p40)和IL-6分泌的差异,进一步探讨其对辅助性T(Th)细胞功能的影响尤其是对Th1细胞分化的影响。方法不同剂量的TLR激动剂刺激小鼠脾细胞... 目的探讨不同的Toll样受体(TLR)激动剂对小鼠脾细胞、树突状细胞(DC)和免疫后白细胞介素12p40(IL-12p40)和IL-6分泌的差异,进一步探讨其对辅助性T(Th)细胞功能的影响尤其是对Th1细胞分化的影响。方法不同剂量的TLR激动剂刺激小鼠脾细胞和DC 24 h或免疫小鼠后收集不同时间点血清,用ELISA检测培养上清液或血清中IL-12p40和IL-6的水平。自CD4^+T细胞受体转基因(DO11.10 OVA-TCR)小鼠脾脏的CD4^+T细胞和与其具有相同背景基因BALB/c小鼠脾脏来源的抗原提呈细胞(APC),将两者按1∶3混合培养,用不同浓度的TLR激动剂联合卵清蛋白(OVA)抗原肽刺激培养,收集不同时间点的上清液,ELISA检测γ干扰素(IFN-γ)的水平。结果 Pam3CSK4、R848和Cp G寡核苷酸(ODN)均能明显促进脾细胞和DC产生IL-12p40和IL-6,以时间和剂量依赖的方式促进抗原特异性的CD4^+T细胞表达IFN-γ;来自明尼苏达沙门菌R595脂多糖的单磷酰脂A(MPLA-SM)诱导脾细胞产生细胞因子水平低、不能促进抗原特异性CD4^+T细胞产生IFN-γ,但可促进DC大量表达IL-12p40和IL-6。四种TLR激动剂免疫小鼠后均能明显促进IL-12p40和IL-6产生。结论不同TLR激动剂作用于脾细胞、DC和免疫小鼠后诱导免疫应答产生细胞因子的能力不同,进一步影响Th1细胞的分化。 展开更多

关键词 toll样受体 toll样受体激动剂 细胞因子

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Toll样受体激动剂在辐射防护方面的研究进展

12

作者 郭娇 杨海玉 龙伟 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期805-809,共5页

电离辐射使人体组织细胞大量凋亡,导致胃肠道和造血系统功能障碍。研究者们一直致力于开发高效低毒的辐射防护药物。近年来,基于肿瘤细胞抗凋亡机制研发的Toll样受体激动剂引起了广泛关注,其通过激活以核因子-κB为主的下游通路发挥辐... 电离辐射使人体组织细胞大量凋亡,导致胃肠道和造血系统功能障碍。研究者们一直致力于开发高效低毒的辐射防护药物。近年来,基于肿瘤细胞抗凋亡机制研发的Toll样受体激动剂引起了广泛关注,其通过激活以核因子-κB为主的下游通路发挥辐射防护作用。本文对参与辐射防护的几类Toll样受体激动剂进行梳理和讨论,希望为后续新型辐射防护药物的研究和开发提供新的切入点。 展开更多

关键词 辐射防护 toll样受体激动剂 核因子-ΚB

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Toll样受体4和Toll样受体7在儿童原发性肾病综合征患儿肾组织中的表达及意义 被引量：21

13

作者 张芳敏 韩子明 赵德安 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期512-516,共5页

目的探讨Toll样受体(TLR)4、TLR7在儿童原发性肾病综合征(PNS)不同肾脏病理类型中的表达及临床意义。方法纳入110例确诊且经肾活检的PNS患儿,采用免疫组化方法检测肾组织中的TLR4、TLR7,以21例肾母细胞瘤患儿的正常肾组织为对照,分析比... 目的探讨Toll样受体(TLR)4、TLR7在儿童原发性肾病综合征(PNS)不同肾脏病理类型中的表达及临床意义。方法纳入110例确诊且经肾活检的PNS患儿,采用免疫组化方法检测肾组织中的TLR4、TLR7,以21例肾母细胞瘤患儿的正常肾组织为对照,分析比较PNS患儿与对照儿童间以及不同病理分型PNS患儿间,肾组织TLR4、TLR7表达的差异。结果不同病理类型PNS患儿和对照组之间肾小管中TLR4、TLR7表达的差异均有统计学意义(P<0.01),其中肾小管TLR4表达水平以MCD型最高,其次MN型、MsPGN型、FSGS型,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);而肾小管TLR7表达水平以MsPGN型最高,其次为MN型、MCD型、FSGS型,两两比较差异也均有统计学意义(P<0.05)。结论 TLR4、TLR7在PNS患儿肾组织中表达增高,且其表达水平可能与病理类型相关。 展开更多

关键词 toll样受体4 toll样受体7 原发性肾病综合征 儿童

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Toll样受体在U937细胞的表达及其作用研究 被引量：11

14

作者 熊芳 王兴兵 +5 位作者 张佳华 刘伟 孙思 刘黎琼 王萍 黄士昂 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第3期449-453,共5页

本研究探讨急性髓系白血病的免疫治疗中以Toll样受体(TLRs)为靶点的可能性,研究人急性髓系白血病U937细胞TLR的表达及TLR8受体激动剂ssRNA40/LyoVec对其增殖、凋亡和细胞周期的影响。运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测U937细胞TLR1-9... 本研究探讨急性髓系白血病的免疫治疗中以Toll样受体(TLRs)为靶点的可能性,研究人急性髓系白血病U937细胞TLR的表达及TLR8受体激动剂ssRNA40/LyoVec对其增殖、凋亡和细胞周期的影响。运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测U937细胞TLR1-9mRNA的表达,用流式细胞术检测TLR8的表达。用不同浓度的TLR8激动剂ssRNA40/LyoVec作用于体外培养的U937细胞后,采用CCK-8法检测细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期。结果表明:U937细胞表达TLR1-9,TLR8激动剂ssRNA40/LyoVec作用于U937细胞明显地抑制了U937细胞生长,抑制率可达70%,且呈明显的量效关系;作用后处于G0/G1期细胞比例由(44.67±1.05)%增高到(54.08±1.19)%,但凋亡细胞的比例无明显变化。结论:TLR1-9可在U937细胞中表达,TLR8激动剂ssRNA40/LyoVec具有抗肿瘤细胞增殖的作用,使细胞阻滞在G0/G1期,但无明显的促凋亡作用。 展开更多

关键词 toll样受体 TLR8激动剂 U937细胞 ssRNA40/LyoVec

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猪Toll样受体7基因的克隆及序列分析 被引量：5

15

作者 段凤云 房永祥 +3 位作者 陈国华 王生富 何延华 景志忠 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期599-601,共3页

目的:研究猪TLR7基因的分子结构与功能。方法:用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增技术,从猪脾脏淋巴细胞中克隆猪Toll样受体7基因(pTLR7),利用生物信息学技术预测其结构与功能。结果:基因序列分析表明,克隆的pTLR7基因为3153bp,编码1... 目的:研究猪TLR7基因的分子结构与功能。方法:用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增技术,从猪脾脏淋巴细胞中克隆猪Toll样受体7基因(pTLR7),利用生物信息学技术预测其结构与功能。结果:基因序列分析表明,克隆的pTLR7基因为3153bp,编码1050个氨基酸,富含16.2%的亮氨酸;同源性分析显示,与GenBank上登载的猪TLR7参考序列(DQ333222)的同源性为98.8%,与牛和绵羊的同源性较高,与马、狗、人、家鼠、褐鼠的次之,其遗传演化关系与亲缘关系密切;推导氨基酸的分子结构预测表明,该分子属于I型跨膜受体,由胞外区(588个氨基酸)、跨膜区(23个氨基酸)和胞内区(174个氨基酸)组成,有信号肽序列、富含亮氨酸的重复序列(LRR)和Toll/IL-1R同源区结构域。结论:成功克隆了猪TLR7基因,预测分析证实具有典型的TLR家族结构特征,这为进一步研究其参与病原分子模式识别和信号传导奠定了基础。 展开更多

关键词 猪toll样受体7 分子克隆 序列分析 结构预测

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Toll样受体7的研究进展 被引量：6

16

作者 王晓月 赵鹏翔 +1 位作者 Adzavon Yao Mawulikplimi 马雪梅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1267-1271,共5页

Toll样受体7(TLR7)是一种广泛存在于机体免疫细胞内体膜上的模式识别受体。TLR7在识别结合病毒的单链RNA或人工合成的小分子嘌呤类化合物后,会招募特异接头蛋白,激活一系列信号级联反应,启动高水平的系统性适应性免疫应答,杀伤感染病毒... Toll样受体7(TLR7)是一种广泛存在于机体免疫细胞内体膜上的模式识别受体。TLR7在识别结合病毒的单链RNA或人工合成的小分子嘌呤类化合物后,会招募特异接头蛋白,激活一系列信号级联反应,启动高水平的系统性适应性免疫应答,杀伤感染病毒的细胞,从而彻底清除病毒。临床上已经开始利用TLR7激动剂治疗慢性病毒性感染疾病,TLR7激动剂作为免疫佐剂在机体识别和杀伤肿瘤过程中的作用也在逐渐得到重视。 展开更多

关键词 toll样受体7(TLR7) 免疫系统 抗病毒 抗肿瘤 综述

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绵羊Toll样受体7基因多态性分析 被引量：4

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作者 梁田 杨霞 +4 位作者 张勋 肖媛媛 陈新凯 宋佳玮 盛金良 《江苏农业科学》 北大核心 2017年第8期26-29,共4页

对新疆萨福克羊Toll样受体7基因单核苷酸进行多态性分析,探索绵羊TLR7基因多态性与抗病力的关系,为家畜抗病育种提供候选分子标记。采集新疆地区种羊场萨福克羊血液600份,提取DNA,设计扩增引物进行聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SS... 对新疆萨福克羊Toll样受体7基因单核苷酸进行多态性分析,探索绵羊TLR7基因多态性与抗病力的关系,为家畜抗病育种提供候选分子标记。采集新疆地区种羊场萨福克羊血液600份,提取DNA,设计扩增引物进行聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)检测,对突变位点进行测序分析。结果表明,12对扩增引物中,第2、5、6、7对引物扩增产物具有多态性。其中第2对和第7对引物扩增产物存在错义突变,第5对和第6对引物扩增产物存在同义突变。经SSCP分析,第2对引物扩增产物表现为3种带型,第7对引物有2种带型.经序列比对分析存在A343G、A350G、A1244G的错义突变,氨基酸改变分别是Lys突变为Gln,Asp突变为Ser,Glu突变为Arg,且突变都发生在胞外区亮氨酸重复区内。其中第2对引物的带型AB是位点A343G和A350G同时发生突变。位点A343G的突变频率最高为45.0%,A350G突变频率12.0%,而A1244G突变频率为5.8%。检测的突变可能改变TLR7基因的功能,进而影响其对病源的免疫应答。为进一步的疾病相关的研究奠定基础,以调查这些研究结果在家畜育种方面的用处。 展开更多

关键词 toll样受体7 多态性 萨福克羊 基因型

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猪Toll样受体7基因人工miRNA表达质粒的构建与筛选 被引量：3

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作者 宋红芹 姜翠翠 孙怀昌 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期18-21,26,共5页

目的构建猪Toll样受体7(TLR7)基因的人工miRNA(amiRNA)特异性表达载体,筛选有效amiRNA。方法 RT-PCR扩增猪TLR7基因的1984～2648 bp序列,构建融合表达载体pTLR7-EGFP。设计针对猪TLR7的5对amiRNA,构建重组干扰质粒pcDNA5-miRTLR7。将pcD... 目的构建猪Toll样受体7(TLR7)基因的人工miRNA(amiRNA)特异性表达载体,筛选有效amiRNA。方法 RT-PCR扩增猪TLR7基因的1984～2648 bp序列,构建融合表达载体pTLR7-EGFP。设计针对猪TLR7的5对amiRNA,构建重组干扰质粒pcDNA5-miRTLR7。将pcDNA5-miRTLR7和pTLR7-EGFP共转染NIH-3T3细胞,通过RT-PCR检测amiTLR7的表达,以荧光显微镜观察和流式细胞术分析干扰效率。结果 5个amiTLR7都成功表达,且均能沉默NIH-3T3细胞中TLR7基因的表达,抑制效率为36.99%到97.28%,其中amiTLR7-3效果最佳。结论成功构建了针对猪TLR7基因的amiRNA表达质粒,筛选出了沉默猪TLR7基因的最佳干扰序列。 展开更多

关键词 toll样受体7基因 人工miRNA RNA干扰 筛选

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1,25-二羟维生素D_3下调Toll样受体7在树突状细胞中的表达 被引量：3

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作者 刘飞 杨明珍 +2 位作者 李庆生 宋玲 夏雷鸣 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2012年第8期924-927,共4页

目的观察1,25-二羟维生素D3对树突状细胞(DC)的表型、功能以及对其Toll样受体7(TLR7)表达的影响,探讨TLR7在1,25-二羟维生素D3诱导耐受性DC可能的机制。方法体外扩增小鼠骨髓来源的DC,采用流式细胞术和混合淋巴细胞反应检测1,25-二羟维... 目的观察1,25-二羟维生素D3对树突状细胞(DC)的表型、功能以及对其Toll样受体7(TLR7)表达的影响,探讨TLR7在1,25-二羟维生素D3诱导耐受性DC可能的机制。方法体外扩增小鼠骨髓来源的DC,采用流式细胞术和混合淋巴细胞反应检测1,25-二羟维生素D3对DC表型和功能的影响;利用RT-PCR半定量方法测定1,25-二羟维生素D3对DC的TLR7表达的影响。结果 1,25-二羟维生素D3处理后,DC表达CD86和MHC II的荧光强度均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);对T细胞的刺激能力较对照组明显减弱(P<0.05);与对照组比较,1,25-二羟维生素D3可以明显下调TLR7的表达(P<0.01)。结论 1,25-二羟维生素D3可能通过下调TLR7的表达抑制DC细胞的成熟,从而使得DC具有耐受性特征。 展开更多

关键词 树突状细胞 1 25-二羟维生素D3 toll样受体7

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HBV对健康产妇脐带血浆细胞样树突状细胞Toll样受体9、干扰素调节因子7、干扰素α表达的影响 被引量：3

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作者 彭建平 孙克伟 +1 位作者 银思涵 伍玉南 《临床肝胆病杂志》 CAS 2016年第5期894-898,共5页

目的观察HBV对体外培养的健康产妇脐带血浆细胞样树突状细胞(pDC)Toll样受体(TLR)9、干扰素调节因子(IRF)7、干扰素(IFN)α表达的影响。方法体外培养Hep G 2.2.15细胞,收集各孔Hep G 2.2.15培养上清,超离心HBV病毒颗粒,PCR荧光探针法检... 目的观察HBV对体外培养的健康产妇脐带血浆细胞样树突状细胞(pDC)Toll样受体(TLR)9、干扰素调节因子(IRF)7、干扰素(IFN)α表达的影响。方法体外培养Hep G 2.2.15细胞,收集各孔Hep G 2.2.15培养上清,超离心HBV病毒颗粒,PCR荧光探针法检测HBV DNA浓度。将培养第7天的pDC与不同载量的HBV(1×105拷贝/ml、1×106拷贝/ml、1×107拷贝/ml和空白对照)共培养24 h。随后每组均加入终浓度为2μg/ml的Cp G ODN 2216继续培养24 h。Real Time-PCR检测pDC中TLR9、IRF7mRNA的表达,Western Blot检测TLR9、IRF7蛋白表达,ELISA法测IFNα水平。计量资料多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用SNK-q检验;对HBV DNA拷贝数取常用对数,相关指标与HBV DNA的常用对数值用Pearson直线相关分析法。结果HBV 1×106拷贝/ml组和1×107拷贝/ml组TLR9 mRNA、IRF7 mRNA、pDC TLR9和IRF7蛋白、IFNα的表达水平明显低于空白对照组及HBV 1×105拷贝/ml组,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。HBV对pDC TLR9 mRNA、IRF7 mRNA的表达和对pDC TLR9、IRF7蛋白的表达以及对pDC培养上清液IFNα的表达均呈浓度依赖性,HBV DNA载量越高,对TLR9 mRNA、IRF7 mRNA、TLR9和IRF7蛋白、IFNα表达的抑制效果越强(r值分别为-0.729、-0.761、-0.657、-0.703、-0.803,P值均<0.05)。结论 HBV体外干预后,正常pDC TLR9、IRF7 mRNA及蛋白表达下降,从而导致其下游IFNα的分泌减少。HBV能抑制正常pDC功能,导致HBV持续感染。 展开更多

关键词 肝炎病毒 乙型 树突细胞 toll样受体9 干扰素调节因子7 干扰素Α

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