Toll样受体(Toll like receptor,TLR)可以特异性地识别病原相关分子模式(pathogen-associated molecular patterns,PAMPs),是联系机体天然免疫和获得性免疫的重要分子。研究显示,TLR与多种皮肤病的发病机制及病理生理关系密切,而其配体...Toll样受体(Toll like receptor,TLR)可以特异性地识别病原相关分子模式(pathogen-associated molecular patterns,PAMPs),是联系机体天然免疫和获得性免疫的重要分子。研究显示,TLR与多种皮肤病的发病机制及病理生理关系密切,而其配体亦在多种疾病模型中显示出较好的治疗效果和疫苗属性,对这些机制的研究有助于为疾病的治疗策略提供新的视点。文中主要就TLR与皮肤病发病及相关治疗的研究进展进行综述。展开更多
目的:筛选能高效干扰大鼠Toll样受体4(Toll—like receptor4,TLR4)mRNA的最佳小分子干扰RNA(smallinter-feringRNA,siRNA)序列。方法:克隆大鼠TLR4基因全长,将TLR4基因与含增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluores-centprotein,EGFP...目的:筛选能高效干扰大鼠Toll样受体4(Toll—like receptor4,TLR4)mRNA的最佳小分子干扰RNA(smallinter-feringRNA,siRNA)序列。方法:克隆大鼠TLR4基因全长,将TLR4基因与含增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluores-centprotein,EGFP)的质粒pEGFP—C1重组,构建pEGFP—rTLR4,化学合成法合成3对干扰大鼠TLR4的siRNA后,将3对siRNA、阴性对照siRNA和干扰EGFP的siRNA分别与pEGFP—rTLR4经Lipofectamine2000共转染HEK-293细胞株,通过倒置相差显微镜和流式细胞仪观察EGFP的荧光强度。结果:与阴性对照组相比,3对针对TLR4的siRNA及针对EGFP的siRNA均明显抑制EGFP的荧光表达(P<0.05)。其中尤以siRNA2(核苷酸序列为5'-GTCTCAGATATCTAGATCT-3',位于TLR4基因序列的1352～1370位)的抑制效果最强,干扰效率>75%。结论:成功筛选出体外可高效干扰大鼠TLR4mRNA的siRNA片段。展开更多
文摘Toll样受体(Toll like receptor,TLR)可以特异性地识别病原相关分子模式(pathogen-associated molecular patterns,PAMPs),是联系机体天然免疫和获得性免疫的重要分子。研究显示,TLR与多种皮肤病的发病机制及病理生理关系密切,而其配体亦在多种疾病模型中显示出较好的治疗效果和疫苗属性,对这些机制的研究有助于为疾病的治疗策略提供新的视点。文中主要就TLR与皮肤病发病及相关治疗的研究进展进行综述。
文摘目的:筛选能高效干扰大鼠Toll样受体4(Toll—like receptor4,TLR4)mRNA的最佳小分子干扰RNA(smallinter-feringRNA,siRNA)序列。方法:克隆大鼠TLR4基因全长,将TLR4基因与含增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluores-centprotein,EGFP)的质粒pEGFP—C1重组,构建pEGFP—rTLR4,化学合成法合成3对干扰大鼠TLR4的siRNA后,将3对siRNA、阴性对照siRNA和干扰EGFP的siRNA分别与pEGFP—rTLR4经Lipofectamine2000共转染HEK-293细胞株,通过倒置相差显微镜和流式细胞仪观察EGFP的荧光强度。结果:与阴性对照组相比,3对针对TLR4的siRNA及针对EGFP的siRNA均明显抑制EGFP的荧光表达(P<0.05)。其中尤以siRNA2(核苷酸序列为5'-GTCTCAGATATCTAGATCT-3',位于TLR4基因序列的1352～1370位)的抑制效果最强,干扰效率>75%。结论:成功筛选出体外可高效干扰大鼠TLR4mRNA的siRNA片段。
