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紫苏精油中紫苏醛的抗TMV活性及作用方式 被引量:1
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作者 罗伟 姜悦 +6 位作者 王恺悦 骆静怡 刘颖辰 张悦阳 马志卿 闫合 王康 《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期744-756,共13页
紫苏精油(PEO)是从紫苏叶中提取的一种具有挥发性芳香气味的淡黄色油性物质,具有多种生物活性,但关于其抗烟草花叶病毒(TMV)活性尚未见报道。本研究测定了紫苏精油及其主要成分的抗TMV活性,明确了其主要活性成分,并在此基础上进行了作... 紫苏精油(PEO)是从紫苏叶中提取的一种具有挥发性芳香气味的淡黄色油性物质,具有多种生物活性,但关于其抗烟草花叶病毒(TMV)活性尚未见报道。本研究测定了紫苏精油及其主要成分的抗TMV活性,明确了其主要活性成分,并在此基础上进行了作用方式研究。结果表明:PEO在800μg/mL剂量下对TMV的活性高达65.58%,其主要活性成分紫苏醛在该剂量下的保护、治疗和钝化活性分别为80.41%、73.42%和34.93%,均显著高于对照药剂商品化药物壳寡糖,而其保护和治疗活性优于宁南霉素。作用方式研究结果表明:紫苏醛诱导了烟草的过敏反应(HR),透射电镜(TEM)观察显示紫苏醛对TMV粒子没有直接作用。紫苏醛在800μg/mL剂量下处理心叶烟,具有显著的诱导抗病活性,为58.46%。紫苏醛处理诱导了烟草病程相关基因非表达子1(NPR1)、病程相关蛋白1基因(PR1)和病程相关蛋白5基因(PR5)3个致病相关基因(PR基因)表达上调,也诱导了苯丙氨酸解氨酶基因(PAL)、呼吸爆发氧化酶B基因(RBOHB)和原叶绿素酸酯氧化还原酶基因1(POR1)过表达。此外,紫苏醛提高了烟草叶片中水杨酸(SA)和H2O2含量,增强了超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)4种防御酶的活性。紫苏醛在800μg/mL剂量下处理心叶烟24 h,结果表明:烟草叶片中的SA和H2O2含量最高,分别为1032.08 pmol/L和23.40μmol/g FW,防御酶活性也达到最大值,CAT、PAL、POD和SOD活性分别比对照提高了1.76、1.95、2.17和3.78倍。该研究结果表明,紫苏醛可能通过诱导系统性获得抗性(SAR)来增强植物对病原体感染的抵抗力,这可能是通过SA信号转导途径介导的。因此,紫苏醛作为一种新型抗病毒药物和免疫诱导剂在农业上具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 紫苏精油 紫苏醛 烟草花叶病毒(tmv) 诱导抗性 系统性获得抗性(SAR) 植物免疫
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基于CP基因的中国云南省烟草TMV群体遗传多样性分析
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作者 赵正婷 盖晓彤 +4 位作者 张俊蕾 夏振远 刘弟 姜宁 刘雅婷 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期48-60,共13页
为探明云南烟草上烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)的群体遗传多样性特征,本研究使用TMV外壳蛋白(coat protein,CP)基因的特异性引物对采自云南各烟区的疑似烟草花叶病样品进行检测,通过克隆测序获得138个TMV CP基因序列,对其进... 为探明云南烟草上烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)的群体遗传多样性特征,本研究使用TMV外壳蛋白(coat protein,CP)基因的特异性引物对采自云南各烟区的疑似烟草花叶病样品进行检测,通过克隆测序获得138个TMV CP基因序列,对其进行了一致性比对,及系统发育、错配分布、遗传变异、群体多样性等分析。变异分析显示,138条CP基因序列共有变异位点数122个,占总位点数的25.42%,变异类型只有核苷酸替换,核酸多样性为0.018,单倍型多样性为0.970;一致性比对结果显示,138条序列的核苷酸和氨基酸序列一致性均为96%~100%;重组分析未检测到重组信号;对来自云南烟草,NCBI上其他地区烟草及云南地区其他寄主的TMV分离物的CP基因进行系统发育分析,结果显示,所有TMV分离物在进化上可分为4个组,本试验获得的分离物分布在1、2、3组,其中只有来源昭通地区的分离物倾向于聚成簇,表明云南烟草TMV分离物的适应性进化受地理适应性所驱动,与寄主适应性基本无关;错配分布分析显示,云南烟草TMV群体呈多峰分布,表明该群体近期未经历群体扩张事件;群体间遗传分化分析结果表明,除昭通和曲靖烟草TMV群体与其他TMV群体之间很容易发生遗传漂变促使群体发生遗传分化外,其余大部分TMV群体之间的基因流都可以抵制遗传漂变。本研究首次报道了云南各烟区TMV分离物群体遗传变异情况,研究结果可为TMV的抗病育种和制定更为有效的防治策略提供重要参考。 展开更多
关键词 烟草 云南 烟草花叶病毒 CP基因 遗传多样性
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烟草花叶病毒(TMV)免疫诱抗剂的制备与验证
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作者 周向平 邓征宇 +5 位作者 许清孝 周立 郭军 盘先江 李才华 袁志辉 《湖南农业科学》 2024年第4期72-76,共5页
为了制备烟草花叶病毒(TMV)免疫诱抗剂,研究采用壳寡糖、高锰酸钾、内生真菌发酵液、紫外线、银杏叶提取物等试剂处理,筛选出TMV弱毒/无毒株系制备的最优方法,并在室内开展免疫激活效应。结果表明:紫外线、0.1%高锰酸钾溶液、内生真菌... 为了制备烟草花叶病毒(TMV)免疫诱抗剂,研究采用壳寡糖、高锰酸钾、内生真菌发酵液、紫外线、银杏叶提取物等试剂处理,筛选出TMV弱毒/无毒株系制备的最优方法,并在室内开展免疫激活效应。结果表明:紫外线、0.1%高锰酸钾溶液、内生真菌发酵液16倍浓缩液、100μg/mL壳寡糖溶液对TMV表现出良好的钝化效果,钝化液对TMV有较高的抑制率。钝化TMV能引起烟草多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化氢酶(CAT)5种防御酶活性显著升高,从而提高烟株对TMV感染的抗性。烟苗和大田烟叶TMV防控试验也证明钝化TMV在烟叶生产中可以作为TMV免疫诱抗剂使用,提高烟株的TMV免疫力和抵抗力。 展开更多
关键词 tmv 免疫诱抗剂 钝化 防御酶 防控效果
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云南大型真菌提取物及其多糖组分对TMV的抑制作用 被引量:8
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作者 李丹 赵文红 +2 位作者 孔宝华 叶敏 陈海如 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期175-180,共6页
对采自云南的17种大型食用真菌子实体的浸提液及其多糖组分,用半叶法在心叶烟上分别从预防(施用提取物24 h后接种病毒)、钝化(提取物与病毒混合后接种)、治疗(接种病毒24 h后施用提取物)3个方面进行抗TMV活性检测。结果表明,16种食用菌... 对采自云南的17种大型食用真菌子实体的浸提液及其多糖组分,用半叶法在心叶烟上分别从预防(施用提取物24 h后接种病毒)、钝化(提取物与病毒混合后接种)、治疗(接种病毒24 h后施用提取物)3个方面进行抗TMV活性检测。结果表明,16种食用菌子实体的浸提液对TMV有较好的预防和钝化作用,预防效果最好的真菌为火碳菌,预防效果达到99.95%。火碳菌、奶浆菌、扫把菌、白奶浆菌、美味牛肝菌、黄虎掌、黄牛肝、黑虎掌、冬瓜菌、红乳菇、北风菌的水浸液对TMV的钝化效果均在80%以上。火碳菌、青杆菌等9种食用菌的多糖组分与其子实体浸提液对TMV的抑制效果相似,表明其多糖组分具有抑制TMV的主要活性成分。实验真菌的治疗效果总体不如钝化效果明显,治疗效果在70%以上的有扫把菌、黄虎掌和冬瓜菌。其中,火碳菌和黄牛肝等对TMV抑制效果较好的食用菌及其多糖可作为环保型农药及生物保健产品的开发对象。 展开更多
关键词 烟草花叶病毒 大型真菌提取物 抑制作用
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抗TMV生防菌YNLP-2的筛选与鉴定 被引量:5
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作者 王盼 杨金广 +5 位作者 申莉莉 钱玉梅 翟熙伦 毕建华 王升平 王凤龙 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期67-72,共6页
采用局部枯斑法从云南罗平植烟区烟草根际土壤中筛选了一株对烟草普通花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)具有显著拮抗活性,且具有Amp筛选抗性的细菌菌株YNLP-2。通过菌体形态鉴定、16SrDNA序列比对和生理生化测定表明该菌株为蜡样芽... 采用局部枯斑法从云南罗平植烟区烟草根际土壤中筛选了一株对烟草普通花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)具有显著拮抗活性,且具有Amp筛选抗性的细菌菌株YNLP-2。通过菌体形态鉴定、16SrDNA序列比对和生理生化测定表明该菌株为蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)。菌株浓度在5.6×108 cfu/mL时,对TMV抑制效率高达99%以上。透射电镜观察显示B.cereus YNLP-2菌株对TMV病毒粒体的破坏作用表现为该菌株可将TMV典型的杆状病毒粒体破坏成小片段。SDS-PAGE电泳发现该菌株对TMV病毒外壳蛋白无破坏作用。田间抗病毒小区试验显示该菌株对病毒病综合防治效果达到45.65%,与宁南霉素效果相当。 展开更多
关键词 蜡样芽胞杆菌 烟草普通花叶病毒(tmv) 烟草
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一种细菌蛋白CZ控制烟草花叶病毒(TMV)的作用机理初探 被引量:9
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作者 吴惠惠 王凤龙 +2 位作者 申莉莉 陈德鑫 钱玉梅 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期74-77,共4页
以活性蛋白CZ处理NC89烟(Nicotianatabacumvar.NC89)12 h后,摩擦接种TMV,1、5、8、12、16 d分别取各处理叶片测过氧化物酶(POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性及丙二醛(MDA)和叶绿素的含量。结果表明,POD和PAL2种酶的活性均比对照明显提高... 以活性蛋白CZ处理NC89烟(Nicotianatabacumvar.NC89)12 h后,摩擦接种TMV,1、5、8、12、16 d分别取各处理叶片测过氧化物酶(POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性及丙二醛(MDA)和叶绿素的含量。结果表明,POD和PAL2种酶的活性均比对照明显提高;CZ处理使NC89烟叶片内MDA的含量降低,而叶绿素的含量增高。电镜下观察到活性蛋白能打破TMV粒体的规则排列,与TMV粒体不可逆的结合,从而降低侵染力。 展开更多
关键词 烟草 烟草花叶病毒 活性氧防御酶系统 活性蛋白
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蒙氏假单胞菌3A菌株对烟草漂浮育苗中TMV的钝化效果 被引量:5
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作者 袁莲莲 王耀锋 +8 位作者 刘相甫 靳志伟 张静 李伟 董石飞 赵存孝 黄明迪 王凤龙 杨金广 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期37-42,共6页
选用对烟草花叶病毒Tobacco mosaic virus(TMV)具有显著拮抗活性的蒙氏假单胞菌Pseudomonas monteilii3A菌株对烟草漂浮育苗过程中被TMV污染的育苗棚、育苗盘、基质及剪叶机械等进行生物钝化,并利用real-time RT-PCR对污染基质中TMV的... 选用对烟草花叶病毒Tobacco mosaic virus(TMV)具有显著拮抗活性的蒙氏假单胞菌Pseudomonas monteilii3A菌株对烟草漂浮育苗过程中被TMV污染的育苗棚、育苗盘、基质及剪叶机械等进行生物钝化,并利用real-time RT-PCR对污染基质中TMV的含量进行了定量检测。结果显示,200、400倍及600倍P.monteilii 3A菌悬液稀释液均可显著钝化病苗残留干叶及干根中的TMV;剪叶机械经不同稀释倍数的P.monteilii 3A菌悬液处理后,在一定程度上抑制了TMV的发生,相对防效达51.42%~100%;基质经不同稀释倍数的P.monteilii 3A菌悬液处理后,其中TMV的含量也下降了72.73%~88.46%,对TMV的相对防效达61.56%~87.46%。其中,200倍P.monteilii 3A稀释液处理育苗棚、育苗盘20min以上,浸泡剪叶机械1min以上对TMV钝化效果最好。 展开更多
关键词 烟草普通花叶病毒(tmv) 蒙氏假单胞菌3A菌株 漂浮育苗
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烟草漂浮育苗旧苗盘残留物TMV带毒检测 被引量:7
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作者 刘勇 陈学军 +1 位作者 李梅云 夏玉珍 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期502-504,共3页
为了建立烟草漂浮育苗旧苗盘残留物中烟草花叶病毒TMV的检测方法,以TMV病苗干根为材料,采用直接研磨法、液氮研磨法和浸泡研磨法制样,效果分别用三抗体夹心法(TAS-ELISA),TMV试纸条和枯斑寄主法检测灵敏度.结果表明,3种方法制备的样品... 为了建立烟草漂浮育苗旧苗盘残留物中烟草花叶病毒TMV的检测方法,以TMV病苗干根为材料,采用直接研磨法、液氮研磨法和浸泡研磨法制样,效果分别用三抗体夹心法(TAS-ELISA),TMV试纸条和枯斑寄主法检测灵敏度.结果表明,3种方法制备的样品都能用TAS-ELISA和试纸条检测出阳性,且3种制样方法间的差异小;3种制样方法制备的样品都具有侵染力,浸泡研磨法最强,直接研磨法次之,液氮研磨法最弱.TAS-ELISA,TMV试纸条和枯斑寄主接种的检测下限分别为干病根占健康根质量的0.01%,0.10%和0.10%. 展开更多
关键词 漂浮育苗 烟草 烟草花叶病毒 检测
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TMV侵染后的烟草细胞膜蛋白结构变化的研究 被引量:2
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作者 侯玉霞 李重九 +3 位作者 张文吉 蔡国友 丁晓岚 沈子威 《农药学学报》 CAS CSCD 1999年第3期71-73,共3页
为探明病毒侵染对烟草细胞膜的损伤作用 ,采用圆二色波谱仪 (CD)分析了被 TMV侵染的烟草细胞膜蛋白结构的变化 ,以及右旋紫草素对感病烟草细胞膜的作用。结果发现 ,被 TMV侵染的烟草细胞膜蛋白分子二级结构发生变化 ,表现为 α-螺旋的... 为探明病毒侵染对烟草细胞膜的损伤作用 ,采用圆二色波谱仪 (CD)分析了被 TMV侵染的烟草细胞膜蛋白结构的变化 ,以及右旋紫草素对感病烟草细胞膜的作用。结果发现 ,被 TMV侵染的烟草细胞膜蛋白分子二级结构发生变化 ,表现为 α-螺旋的减少和 β-转角的增加 ;用右旋紫草素处理的感病烟草细胞膜蛋白分子二级结构的变化 ,表现为药剂作用比感病样品的细胞膜蛋白的二级结构中 α-螺旋成分比例增加 ,而 β-转角比例相应减少。 展开更多
关键词 烟草花叶病毒 tmv 膜蛋白 蛋白二级结构 病毒侵染 烟草细胞膜 损伤作用
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联苯胺-H_2O_2-HRP伏安酶联免疫分析体系测定植物病毒TMV和TRSV 被引量:5
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作者 牛淑妍 焦奎 +3 位作者 张成良 张作芳 刘靖宇 魏澎 《分析科学学报》 CAS CSCD 1999年第3期195-198,共4页
提出了联苯胺-H2O2-辣根过氧化物酶(HRP)伏安酶联免疫分析体系测定植物病毒烟草花叶病毒(TMV)和烟草环斑病毒(TRSV)的新方法。HRP标记的羊抗兔酶标记抗体IgG-HRP可以催化H2O2氧化联苯胺的反应,其... 提出了联苯胺-H2O2-辣根过氧化物酶(HRP)伏安酶联免疫分析体系测定植物病毒烟草花叶病毒(TMV)和烟草环斑病毒(TRSV)的新方法。HRP标记的羊抗兔酶标记抗体IgG-HRP可以催化H2O2氧化联苯胺的反应,其氧化产物在Briton-Robinson(BR)缓冲溶液中在-0.62V(SCE)左右产生灵敏的线性扫描二阶导数伏安峰,可以测定IgG-HRP。根据IgG-HRP与植物病毒及其抗血清的免疫反应,可以间接测定植物病毒。本法测定TMV的检出限为0.25ng/mL,线性范围为0.25~5000ng/mL;测定TRSV的检出限为1.5ng/mL,线性范围为1.5~3000ng/mL;测定TMV烟草病叶澄清液的最高稀释比为1∶10000。检测灵敏度高于酶联免疫吸附显色光度法(ELISA) 展开更多
关键词 酶联免疫分析 烟草花叶病毒 烟草环斑病毒 测定
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双抗TMV和CMV转基因番茄后代的遗传分析 被引量:5
11
作者 单雷 毕玉平 +2 位作者 王兴军 徐平丽 李广存 《山东农业科学》 1998年第4期11-12,21,共3页
通过对转TMV和CMV双价外壳蛋白基因番茄T1代群体和T2代株系进行PCR及PCR-Southern鉴定,并分别进行温室及田间抗病毒试验,结果表明,T1代工程番茄植株中确有CMV—TMV双价外壳蛋白基因的遗传和分离,... 通过对转TMV和CMV双价外壳蛋白基因番茄T1代群体和T2代株系进行PCR及PCR-Southern鉴定,并分别进行温室及田间抗病毒试验,结果表明,T1代工程番茄植株中确有CMV—TMV双价外壳蛋白基因的遗传和分离,其遗传行为符合显性单基因的孟德尔遗传。T2代部分株系CMV—TMV双价CP基因已获得稳定遗传,共获得了3个遗传稳定的番茄株系。 展开更多
关键词 番茄 烟草花叶病毒 黄瓜花叶病毒 遗传分析
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番茄Manapal Tm-2^(nv)中的抗性基因对TMV的抗性遗传研究 被引量:1
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作者 杨悦俭 林瑞芬 +4 位作者 陈绍 马忠翼 金登迪 余舰斌 姚建明 《浙江农业学报》 CSCD 1990年第4期165-168,共4页
对Manapal Tm-2^(nv)及其子代的水平方向试材——转育材料和杂一代与垂直方向试材——自交和回交后代,在苗期接种TMV1株系的结果为:转育材料与Manapal Tm-2^(nv)抗性水平一致(HR);F_1均有不同程度感病,抗性水平下降(R);自交和回交后代... 对Manapal Tm-2^(nv)及其子代的水平方向试材——转育材料和杂一代与垂直方向试材——自交和回交后代,在苗期接种TMV1株系的结果为:转育材料与Manapal Tm-2^(nv)抗性水平一致(HR);F_1均有不同程度感病,抗性水平下降(R);自交和回交后代的发病牢和病情指数与幼苗群体中所含的R(抗性因子)值呈负相关。认为Tm-2^(nv)基因对TMV的抗性遗传是独立而稳定的,且在F_1中表现为不完全显性;F_1抗病程度关键在于作抗病亲本的选择。 展开更多
关键词 番茄 抗性 育种 遗传 Tm-2^nv基因
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不同供Fe水平下受TMV感染的烟草中几种防御酶活性变化 被引量:4
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作者 李晔 吴元华 赵秀香 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2006年第17期4237-4238,共2页
采用烟草栽培品种NC89,利用不同Fe离子浓度处理烟草感染TMV后,对防御酶系活性进行测定,研究不同供Fe水平与烟草感染TMV后防御酶系活性的互作关系。结果表明,烟草幼苗用不同浓度Fe离子处理后,其中1.68 g/LFe处理和感染TMV后的烟草体内,... 采用烟草栽培品种NC89,利用不同Fe离子浓度处理烟草感染TMV后,对防御酶系活性进行测定,研究不同供Fe水平与烟草感染TMV后防御酶系活性的互作关系。结果表明,烟草幼苗用不同浓度Fe离子处理后,其中1.68 g/LFe处理和感染TMV后的烟草体内,超氧化物歧化酶(SOD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性均迅速升高,酶活性高峰值出现也早,且明显高于其他Fe水平的。 展开更多
关键词 FE 普通烟草花叶病毒 防御酶活性
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烟草花叶病毒胶体金检测试纸条的制备与性能评价
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作者 王春琼 刘凯 +5 位作者 谢永辉 张轲 刘春明 张晓伟 孙浩巍 陈丹 《轻工学报》 北大核心 2025年第1期90-97,共8页
针对传统烟草花叶病毒(TMV)检测方法耗时较长、应用受限的问题,基于双抗夹心法研发快速定性检测TMV的胶体金检测试纸条,并对其制备条件进行优化,考查其检测限、准确性和特异性。结果表明:该试纸条的适宜制备条件为缓冲液添加量4μL、抗... 针对传统烟草花叶病毒(TMV)检测方法耗时较长、应用受限的问题,基于双抗夹心法研发快速定性检测TMV的胶体金检测试纸条,并对其制备条件进行优化,考查其检测限、准确性和特异性。结果表明:该试纸条的适宜制备条件为缓冲液添加量4μL、抗体质量浓度10μg/mL、NC膜选择CN140型、样本提取液0.02 mol/L PBS;该试纸条对TMV-CP蛋白的检测限为0.1μg/mL,与烟草丛顶病毒、番茄斑萎病毒、马铃薯Y病毒无交叉反应,特异性良好;将其进行实际样品检测,与PCR的总符合率为95.0%,阳性符合率为93.3%,准确性良好。此试纸条在10 min内即可显示检测结果,且操作简单,可用于烟田TMV的快速检测。 展开更多
关键词 烟草花叶病毒 单克隆抗体 胶体金免疫层析技术 试纸条
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TMV蚕豆株系CP基因及3′端非编码区序列分析与表达
15
作者 刘勇 周雪平 +1 位作者 李德葆 刘志敏 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1997年第1期1-8,共8页
根据烟草花叶病毒U1株系TMV-U1序列,人工合成引物,通过PCR扩增并克隆了烟草花叶病毒蚕豆株系(TMV-B)的外壳蛋白(CP)基因和3′端非编码区.DNA全序列测定结果表明,外壳蛋白基因全长459个碱基,编码15... 根据烟草花叶病毒U1株系TMV-U1序列,人工合成引物,通过PCR扩增并克隆了烟草花叶病毒蚕豆株系(TMV-B)的外壳蛋白(CP)基因和3′端非编码区.DNA全序列测定结果表明,外壳蛋白基因全长459个碱基,编码151个氨基酸,3′端非编码区全长224个碱基.与TMV-U1株系相比,TMV-B仅在CP基因上有一个碱基缺失,并导致CP基因提前终止,使其编码的氨基酸少7个.将CP基因及3′端非编码区插入pGEMEX-1的T7基因10中,转入E.coli后诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析呈现一特异的蛋白带.Western免疫检测证明,该特异带与TMV抗血清呈阳性反应.将CP基因正向插入植物表达载体PBⅠ121中,置于花椰菜花叶病毒35S启动子控制之下。 展开更多
关键词 遗传工程 烟草花叶病毒 外壳蛋白基因 蚕豆
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利用虾壳清洁化生产不同脱乙酰度壳寡糖及其抗TMV效果研究 被引量:3
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作者 朱琳 付晓丹 +2 位作者 李丽 韩振莲 牟海津 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2019年第2期148-154,共7页
壳寡糖的传统生产工艺是采用HCl和NaOH处理甲壳类制备壳聚糖,再酶解获得壳寡糖,生产过程中含高浓度Cl~–和Na^+的废水对环境造成严重污染。本研究采用H_3PO_4和KOH为反应溶液建立壳聚糖的绿色生产工艺,并制得不同脱乙酰度的壳寡糖,探究... 壳寡糖的传统生产工艺是采用HCl和NaOH处理甲壳类制备壳聚糖,再酶解获得壳寡糖,生产过程中含高浓度Cl~–和Na^+的废水对环境造成严重污染。本研究采用H_3PO_4和KOH为反应溶液建立壳聚糖的绿色生产工艺,并制得不同脱乙酰度的壳寡糖,探究了不同脱乙酰度壳寡糖抗烟草花叶病毒(TMV)的效果。结果显示,通过该生产工艺制得壳寡糖的脱乙酰度分别为63.79%、72.12%、79.34%和88.15%,分子量均为1500Da左右。脱乙酰度为79.34%和88.15%的壳寡糖诱导植株对TMV产生抗病性,表现出对TMV进行体外钝化、抑制TMV在寄主内的复制和提高植物体内过氧化氢酶、过氧化物酶和多酚氧化酶的活性。 展开更多
关键词 清洁化生产 壳寡糖 脱乙酰度 烟草花叶病毒
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PtWRKY14基因转化烟草及对TMV的抗性影响研究 被引量:1
17
作者 王兴 林善枝 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期130-133,141,F0002,共6页
PtWRKY14是从毛白杨中获得的WRKY基因,为研究PtWRKY14基因对植物抗病性的影响,构建了毛白杨PtWRKY14基因的植物表达载体pBI121-W14,通过农杆菌介导的叶盘转化法转化烟草,PCR与Southern杂交进行转基因烟草鉴定。对获得的转基因烟草植株... PtWRKY14是从毛白杨中获得的WRKY基因,为研究PtWRKY14基因对植物抗病性的影响,构建了毛白杨PtWRKY14基因的植物表达载体pBI121-W14,通过农杆菌介导的叶盘转化法转化烟草,PCR与Southern杂交进行转基因烟草鉴定。对获得的转基因烟草植株进行烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)的接种试验,结果表明PtWRKY14基因的转化使烟草对TMV的抗性增强。荧光定量PCR检测结果表明,TMV接种后,转基因烟草中PtWRKY14的表达量显著上调,同时转基因烟草中超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)、过氧化物酶(Peroxidase,POD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)的表达量均高于对照组。因此,PtWRKY14可能通过上调SOD、POD、CAT的表达从而增强植物抗病性。 展开更多
关键词 PtWRKY14 转基因烟草 烟草花叶病毒 抗病性
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抗TMV、CMV转基因烟草的初步选育 被引量:2
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作者 杨晓朱 林爵平 李华平 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期128-130,共3页
将烟草花叶病毒复制酶54 KD蛋白基因构建到质粒pSSZ32.54K,导入根癌农杆菌EHA105株系,用农杆菌介导的叶盘法转化含CMV CP基因的纯合系烟草,获得了含CMV CP基因和TMV RepE基因的转基因烟草,以及只含TMV RepE基因的转基因烟草。以繁殖于... 将烟草花叶病毒复制酶54 KD蛋白基因构建到质粒pSSZ32.54K,导入根癌农杆菌EHA105株系,用农杆菌介导的叶盘法转化含CMV CP基因的纯合系烟草,获得了含CMV CP基因和TMV RepE基因的转基因烟草,以及只含TMV RepE基因的转基因烟草。以繁殖于新鲜普通烟叶片上的TMV为毒源,机械摩擦接种含双基因的烟草和只含CMV CP基因的烟草。接种15 d后,观察植株发病情况,发现转双基因的烟草无花叶症状出现,而对照植株(只含CMV CP基因)出现花叶症状。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测病毒含量,发现转基因植株体内无病毒积累,而对照植株体内有病毒积累。因此,含RepE基因的烟草对TMV有一定抗性。 展开更多
关键词 烟草花叶病毒 复制酶基因 抗病毒 转基因烟草 农杆菌转化
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氨基寡糖素与镁锌混配对烟草TMV的防控效果及生理分析 被引量:4
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作者 周林媛 林云红 +2 位作者 熊茜 王丽媛 赵正雄 《湖南农业科学》 2018年第5期68-70,73,共4页
通过三生烟草(Sam Sun N.N)枯斑试验和接种TMV病毒的K326品种烟株体内生理指标分析,研究了氨基寡糖素与中微肥混配对烟草花叶病毒(TMV)的体外钝化、侵染抑制效果和综合防病效果,以及由其引起的烟叶叶绿素、防御酶活性及病程相关蛋白等... 通过三生烟草(Sam Sun N.N)枯斑试验和接种TMV病毒的K326品种烟株体内生理指标分析,研究了氨基寡糖素与中微肥混配对烟草花叶病毒(TMV)的体外钝化、侵染抑制效果和综合防病效果,以及由其引起的烟叶叶绿素、防御酶活性及病程相关蛋白等生理指标变化。结果表明:三生烟草枯斑试验中,氨镁锌混配剂对TMV病毒有明显的体外钝化和侵染治疗效果,病毒抑制率分别比单独施用氨基寡糖素提高20.6和10.1个百分点;K326品种烟株接种TMV病毒施用相应药剂,接种后7、11和30 d时的病情指数均以氨镁锌混配剂处理<氨基寡糖素单剂<CK;而上述烟株体内叶绿素的含量和SOD、POD和PAL酶活性则以氨镁锌混配剂处理总体最高;氨镁锌混配剂处理诱导病程相关蛋白PR3和PR5相对表达量显著性升高,达到对照的0.79倍和1.51倍。这说明,氨基寡糖素与镁锌混配对抑制TMV侵染和提高烟株抗性的效果比单独施用氨基寡糖素好。 展开更多
关键词 烟草花叶病 氨基寡糖素 混配
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烟草内源提取物抗TMV活性筛选 被引量:1
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作者 周文兵 计思贵 +2 位作者 李江舟 崔永和 张立猛 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2017年第6期1022-1027,共6页
【目的】探讨3种烟草提取物的抗TMV活性,为开发烟草内源性抗烟草花叶病物质提供依据。【方法】利用半叶枯斑法对心叶烟、云烟203和K326三种烟草的根、茎、叶、杈甲醇提取物进行抗烟草普通花叶病毒活性筛选,并用叶盘法对部分筛选结果进... 【目的】探讨3种烟草提取物的抗TMV活性,为开发烟草内源性抗烟草花叶病物质提供依据。【方法】利用半叶枯斑法对心叶烟、云烟203和K326三种烟草的根、茎、叶、杈甲醇提取物进行抗烟草普通花叶病毒活性筛选,并用叶盘法对部分筛选结果进行验证。【结果】3种烟草根和茎的提取物对TMV具有较明显的抑制活性,其中根对TMV体外钝化、初侵染和复制增殖作用的抑制率范围分别为65.00%~79.75%、64.0 8%~74.31%、26.9%~42.40%,活性最强;茎的活性次之,对TMV体外钝化、初侵染和复制增殖作用的抑制率范围分别为33.33%~44.25%、42.82%~66.06%、10.96%~47.76%。3种烟草叶和杈的提取物对TMV虽有一定的抑制活性,但较全株提取物对TMV体外钝化、初侵染和复制增殖作用的抑制活性均降低,抑制活性不明显。【结论】3种烟草的根部粗提物具有较好的抗TMV活性,值得进一步研究。 展开更多
关键词 烟草 提取物 普通烟草花叶病(tmv) 抑制活性
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