Tim-3/Galectin-9通路和MDSC在亲缘间Haplo-HDPSCT后aGVHD中的作用

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作者 张乐 庞楠楠 +2 位作者 于明凯 袁海龙 江明 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第6期1467-1472,共6页

目的:探究Tim-3/Galectin-9信号通路及MDSC与Haplo-HDPSCT术后发生急性移植物抗宿主病(a GVHD)的相关性。方法:选取42例行Haplo-HDPSCT治疗的患者及20例健康对照者为研究对象,采集所有研究对象的外周血,FCM检测Tim-3^(+)CD8^(+)T、颗粒... 目的:探究Tim-3/Galectin-9信号通路及MDSC与Haplo-HDPSCT术后发生急性移植物抗宿主病(a GVHD)的相关性。方法:选取42例行Haplo-HDPSCT治疗的患者及20例健康对照者为研究对象,采集所有研究对象的外周血,FCM检测Tim-3^(+)CD8^(+)T、颗粒酶B^(+)(Granzyme B^(+))CD8^(+)T、MDSC表达情况,ELISA检测Galectin-9水平。FCM检测a GVHD患者外周血中CD8^(+)T细胞凋亡情况。结果:参照西雅图国际诊断标准,16例患者发生a GVHD,26例患者未发生a GVHD。(1)a GVHD组Tim-3^(+)CD8^(+)T细胞和Granzyme B^(+)CD8^(+)T细胞百分比明显高于未发生a GVHD组和健康对照组,而a GVHD组MDSC细胞和Galectin-9水平低于未发生a GVHD组和健康对照组(P<0.05);(2)a GVHD组轻度(Ⅰ~Ⅱ度)和重度(Ⅲ~Ⅳ度)患者Tim-3^(+)CD8^(+)T、Granzyme B^(+)CD8^(+)T细胞数量和Galectin-9水平差异有统计学意义(P<0.05),而MDSC细胞数量差异无统计学意义(P=0.689);(3)Spearman相关分析表明,Galectin-9水平在未发生a GVHD组血清中与MDSC细胞数量呈正相关(r=0.684,P<0.05);(4)分选a GVHD患者外周血中的CD8^(+)T细胞,加入Galectin-9干预后,CD8^(+)T细胞凋亡率明显升高。结论:在行Haplo-HDPSCT术后,Galectin-9通过Tim-3/Galectin-9通路抑制CD8^(+)T细胞免疫应答,避免或减缓a GVHD的发生;Galectin-9与MDSC数量呈正相关,可能与a GVHD的发生有关。 展开更多

关键词 HLA单倍体相合非体外去T细胞高剂量外周血造血干细胞移植 急性移植物抗宿主病 髓源性抑制细胞 tim-3/galectin-9信号通路 CD8+T细胞

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基于Tim-3/aletin-9信号通路探究三仁汤对Hp相关性脾胃湿热证胃炎症状改善及巨噬细胞极化的影响 被引量：2

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作者 江望 田生望 +1 位作者 贺单 陶红 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2025年第2期484-491,共8页

目的本研究旨在探索三仁汤通过Tim-3/Galectin-9信号途径对幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,Hp)相关性胃炎(HAG)脾胃湿热证巨噬细胞极化的作用。方法72只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、四联疗法组(奥美拉唑2 mg/kg+阿莫西林100 m... 目的本研究旨在探索三仁汤通过Tim-3/Galectin-9信号途径对幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,Hp)相关性胃炎(HAG)脾胃湿热证巨噬细胞极化的作用。方法72只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、四联疗法组(奥美拉唑2 mg/kg+阿莫西林100 mg/kg+克拉霉素50 mg/kg+胶体果胶铋胶囊35 mg/kg)、三仁汤低剂量组(3 g/kg)、三仁汤中剂量组(7.5 g/kg)、三仁汤高剂量组(15 g/kg),每组12只。采用复合因素(劳倦+饮食+苦寒药+环境+生物因子(Hp菌液))构建HAG脾胃湿热证大鼠模型,并按组别持续给药21 d。实验中观察大鼠的基本状况;快速尿素酶实验检测Hp定植;利用HE染色观察胃黏膜炎症情况;透射电镜观察胃黏膜超微结构;ELISA法测定血清IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-10水平;免疫组化检测胃黏膜CD68的表达;流式细胞术检测巨噬细胞F4/80^(+)CD86^(+)和F4/80^(+)CD206^(+)亚型;RT-qPCR检测胃黏膜组织MCP-1、CD80、CD86、IL-4、CD206、CD163 mRNA表达;Western blot检测Tim-3、Galectin-9蛋白在胃黏膜组织中的表达。结果模型组胃黏膜组织病理较空白组明显损伤,且Hp定植率、血清IFN-γ和TNF-α、胃黏膜组织CD68、Tim-3、Galectin-9蛋白表达及MCP-1、CD80、CD86、CD163 mRNA表达较空白组显著升高(P<0.01);三仁汤高剂量干预显著改善了模型大鼠胃黏膜组织损伤,显著降低了Hp定植率,并抑制了血清IFN-γ和TNF-α、胃黏膜组织CD68、Tim-3、Galectin-9蛋白表达、胃黏膜组织MCP-1、CD80、CD86、CD163mRNA表达(P<0.05)。结论三仁汤对大鼠HAG脾胃湿热证症状有改善作用,同时可抑制炎症反应并调节胃黏膜巨噬细胞的极化,其作用机制可能与调节Tim-3/Galectin-9途径有关。 展开更多

关键词 幽门螺旋杆菌相关性胃炎 脾胃湿热证 三仁汤 tim-3/galectin-9通路 巨噬细胞

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白藜芦醇通过激活JAK2/STAT3信号通路抑制缺氧/复氧诱导的H9c2心肌细胞凋亡

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作者 李金玉 黄丹梅 +2 位作者 张艳美 高分飞 汪彬 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第3期451-456,共6页

目的探讨白藜芦醇(resveratrol,RSV)对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)诱导的H9c2心肌细胞凋亡的保护作用及机制。方法以H9c2心肌细胞为研究对象,建立H9c2心肌细胞H/R损伤模型,流式细胞术测定细胞凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋... 目的探讨白藜芦醇(resveratrol,RSV)对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)诱导的H9c2心肌细胞凋亡的保护作用及机制。方法以H9c2心肌细胞为研究对象,建立H9c2心肌细胞H/R损伤模型,流式细胞术测定细胞凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3及JAK2/STAT3信号通路蛋白的表达水平;采用JAK2抑制剂AG490研究抑制JAK2/STAT3信号通路对RSV减轻H/R诱导的H9c2心肌细胞凋亡的影响。结果RSV可有效抑制H/R诱导的H9c2心肌细胞凋亡,并促进p-JAK2和p-STAT3蛋白表达,而AG490干预后明显拮抗RSV抑制H/R诱导的H9c2心肌细胞凋亡作用。结论RSV通过激活JAK2/STAT3信号通路,抑制H/R诱导的H9c2心肌细胞凋亡。 展开更多

关键词 白藜芦醇 缺氧/复氧 H9C2心肌细胞 JAK2/STAT3信号通路 细胞凋亡 AG490

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Galectin-9/Tim-3信号通路在HBV感染中对机体固有免疫及适应性免疫调控的研究进展 被引量：8

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作者 刘亚男 余追 +2 位作者 姚兰 柳舟 侯果 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1590-1595,共6页

乙型肝炎病毒(HBV)感染过程中,机体固有免疫及适应性免疫功能损伤与HBV感染的慢性化密切相关,特别是T细胞功能的耗竭。T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(Tim-3)及其配体半乳糖苷结合蛋白9(Gal-9)在包括HBV在内的多种病毒感染所致的机体免疫功能... 乙型肝炎病毒(HBV)感染过程中,机体固有免疫及适应性免疫功能损伤与HBV感染的慢性化密切相关,特别是T细胞功能的耗竭。T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(Tim-3)及其配体半乳糖苷结合蛋白9(Gal-9)在包括HBV在内的多种病毒感染所致的机体免疫功能紊乱过程中发挥着重要作用,是参与机体固有免疫及适应性免疫应答调控的重要信号通路,也是诱导T细胞耗竭的重要负调控分子之一。本文扼要就Galectin-9/Tim-3信号通路在HBV感染过程中对机体免疫功能调控的相关研究进展作综述。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 galectin-9/tim-3信号通路 免疫调控 T细胞功能耗竭

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Tim-3/Gal-9信号通路参与妊娠的研究进展 被引量：5

5

作者 何泽现 赵富玺 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1391-1394,共4页

成功的妊娠依赖于母体对胎儿的免疫耐受。近年来研究证实：Tim-3/Gal-9信号通路通过抑制Th1细胞的活性、Th17细胞的分化和功能以及促进Th2细胞的功能,调节T细胞亚群平衡和诱导外周免疫耐受。Tim-3/Gal-9信号通路在母胎界面和妊娠中的功... 成功的妊娠依赖于母体对胎儿的免疫耐受。近年来研究证实：Tim-3/Gal-9信号通路通过抑制Th1细胞的活性、Th17细胞的分化和功能以及促进Th2细胞的功能,调节T细胞亚群平衡和诱导外周免疫耐受。Tim-3/Gal-9信号通路在母胎界面和妊娠中的功能已经在人和动物模型中有较多报道。本文将从Tim-3/Gal-9信号通路调节T细胞平衡这一生物学功能着手,阐明其在母胎免疫耐受的诱导和维持， 展开更多

关键词 信号通路 tim-3/Gal-9 母胎免疫耐受 母胎界面 细胞调亡 蜕膜 复发性流产 巨噬细胞 细胞亚群 免疫细胞

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Tim-3及其配体Galectin-9在多发性骨髓瘤患者Th1/Th2细胞失衡中的意义 被引量：3

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作者 张瑞 陈双 +1 位作者 骆婷婷 曲建华 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1764-1770,共7页

目的:探讨Tim-3及Galectin-9在多发性骨髓瘤患者Th1/Th2细胞失衡中的意义。方法:纳入初诊MM患者55例,健康对照20例,流式细胞术检测外周血CD4^(+)T细胞上Tim-3的表达水平、Th1和Th2细胞水平、Tim-3^(+)Th1和Tim-3^(+)Th2细胞水平,ELISA... 目的:探讨Tim-3及Galectin-9在多发性骨髓瘤患者Th1/Th2细胞失衡中的意义。方法:纳入初诊MM患者55例,健康对照20例,流式细胞术检测外周血CD4^(+)T细胞上Tim-3的表达水平、Th1和Th2细胞水平、Tim-3^(+)Th1和Tim-3^(+)Th2细胞水平,ELISA法检测血清中IFN-γ和IL-4的水平,PCR检测Galectin-9mRNA的水平,并分析Galectin-9mRNA表达与Th细胞亚群和细胞因子水平的相关性,以及Tim-3^(+)Th1/Tim-3^(+)Th2与相应临床特征的关系。结果:MM患者Tim-3^(+)CD4^(+)T细胞、Tim-3^(+)Th1、Tim-3^(+)Th2细胞水平及Tim-3^(+)Th1/Tim-3^(+)Th2细胞比值较健康对照组明显升高(P<0.05),Th1细胞水平及Th1/Th2细胞比值明显下降(P<0.05)。MM患者血清中IFN-γ及IFN-γ/IL-4比值明显下降(P<0.05),IL-4水平明显升高(P>0.05),Galectin-9mRNA的水平明显高于健康对照组(P<0.05)。Galectin-9mRNA与Tim-3^(+)CD4^(+)T细胞、Tim-3^(+)Th2细胞、IL-4均呈正相关(r=0.663,r=0.492,r=0.470),与IFN-γ呈负相关(r=-0.593)。进一步分析显示,患者Tim-3^(+)Th1/Tim-3^(+)Th2细胞比值与临床ISS分期、有溶骨性损害、染色体核型异常呈正相关(r=0.511,r=0.556,r=0.632)。结论:Tim-3及Galectin-9参与了MM患者Th1/Th2失衡,并且Tim-3^(+)Th1/Tim-3^(+)Th2细胞比值高与临床预后较差的指标有关。 展开更多

关键词 多发性骨髓瘤 tim-3 galectin-9 TH1 TH2

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Tim-3及其配体Galectin-9在宫颈癌患者中的表达及意义 被引量：13

7

作者 董頔 杜蓉 +4 位作者 薛茜文 赵雅文 张旭娟 杨艳 陈志芳 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期577-582,共6页

目的:通过检测宫颈癌、CIN与正常宫颈组织中Tim-3及其配体Galectin-9的表达水平,探讨Tim-3和Galectin-9与宫颈癌的关系。方法:用实时定量荧光PCR(qRT-PCR)和免疫组织化学法检测52例宫颈癌、30例宫颈上皮内瘤变患者和25例正常宫颈组织中T... 目的:通过检测宫颈癌、CIN与正常宫颈组织中Tim-3及其配体Galectin-9的表达水平,探讨Tim-3和Galectin-9与宫颈癌的关系。方法:用实时定量荧光PCR(qRT-PCR)和免疫组织化学法检测52例宫颈癌、30例宫颈上皮内瘤变患者和25例正常宫颈组织中Tim-3和Galectin-9的表达,并结合临床病理学资料对实验数据进行统计学分析。结果:①qPT-PCR检测Tim-3和Galectin-9的表达显示,其mRNA水平宫颈癌组高于CIN组和正常组(P<0.05),CIN组高于正常组(P<0.05)。②Tim-3和Galectin-9 mRNA水平与FIGO分期(P<0.05)、分化程度(P<0.05)和有无淋巴结转移(P<0.05)均明显相关。③免疫组化结果显示宫颈癌组织中Tim-3和Galectin-9在癌巢中呈阳性表达,其MOD值明显高于CIN组织及正常宫颈组织,差异有统计学意义(P<0.01)。④宫颈癌组织中Tim-3和Galectin-9的MOD值与FIGO分期(P<0.05)、病理分型(P<0.05)、分化程度(P<0.05)和有无淋巴结转移(P<0.05)均明显相关。结论:Tim-3和Galectin-9的mRNA水平和MOD值在宫颈癌中升高,并与宫颈癌的FIGO分期、分化程度和有无淋巴结转移密切相关。 展开更多

关键词 宫颈癌 tim-3 galectin-9 QRT-PCR 免疫组化

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TIM-3/galectin-9参与慢性淋巴细胞白血病患者T细胞的负性调控 被引量：12

8

作者 谢仁古丽·阿力木 曾雪娇 +4 位作者 庞楠楠 张瑞 马佳佳 赵宇 曲建华 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1021-1025,共5页

目的探讨慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域分子3/半乳糖凝集素9(TIM-3/galectin-9)信号通路对调节性T细胞(Treg)及Th17细胞的调控作用及临床意义。方法采用流式细胞术检测36例健康体检者和40例初诊CLL患者外周... 目的探讨慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域分子3/半乳糖凝集素9(TIM-3/galectin-9)信号通路对调节性T细胞(Treg)及Th17细胞的调控作用及临床意义。方法采用流式细胞术检测36例健康体检者和40例初诊CLL患者外周血Treg、Th17细胞及其上TIM-3的表达,用ELISA检测血清中白细胞介素10(IL-10)、IL-17及galectin-9的水平。结果与健康对照组相比,CLL组TIM-3^+Treg、Treg/Th17细胞比值、TIM-3^+Treg/TIM-3^+Th17比值、IL-10、galectin-9水平及IL-10/IL-17比值增加;CLL患者T细胞上TIM-3、galectin-9的表达,IL-10/IL-17比值随Binet分期增加而增加。结论TIM-3/galectin-9信号通路参与CLL T细胞的负性调控。 展开更多

关键词 T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域分子3(tim-3)/甲型肝炎细胞受体2(HAVCR2) 半乳糖凝集素9(galectin-9)慢性淋巴细胞白血病 调节性T细胞(Treg) Th17细胞

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Apelin-13通过PI3K/Akt信号通路抑制尼古丁诱导的H9c2细胞凋亡 被引量：3

9

作者 张海增 全慧 +4 位作者 单晓琼 田秋云 张福坤 范小芳 龚永生 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1352-1358,共7页

目的:研究小分子活性肽apelin-13对尼古丁诱导的心肌细胞凋亡的作用,探讨其可能的调节机制。方法:建立尼古丁诱导的大鼠H9c2细胞凋亡模型,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测凋亡相关蛋白的表达。结果:(1)与正常对照组相比,... 目的:研究小分子活性肽apelin-13对尼古丁诱导的心肌细胞凋亡的作用,探讨其可能的调节机制。方法:建立尼古丁诱导的大鼠H9c2细胞凋亡模型,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测凋亡相关蛋白的表达。结果:(1)与正常对照组相比,尼古丁组细胞凋亡率明显增加(P<0.01),凋亡相关蛋白Bax和cleaved caspase-3的表达显著上调, Bcl-2、p-Akt、p-PI3K和APJ蛋白的表达显著下调(P<0.01);(2)与尼古丁组相比,apelin-13+尼古丁组细胞的凋亡率明显降低(P<0.01),Bax和cleaved caspase-3的表达显著降低(P<0.01), Bcl-2、p-Akt、p-PI3K和APJ蛋白的表达显著升高(P<0.01);(3)与apelin-13+尼古丁组相比,apelin-13+尼古丁+PI3K/Akt抑制剂LY294002组细胞凋亡率明显增加(P<0.01),Bax和cleaved caspase-3的表达显著增加(P<0.01), Bcl-2、p-Akt和p-PI3K蛋白的表达显著下调(P<0.01)。结论:Apelin-13通过PI3K/Akt信号通路抑制尼古丁诱导的H9c2细胞凋亡。 展开更多

关键词 APELIN-13 尼古丁 细胞凋亡 H9C2细胞 PI3K/AKT信号通路

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miR-214调控FGF9的表达参与结核分枝杆菌感染肺泡Ⅱ型细胞中PI3K/AKT信号通路的免疫调控作用研究 被引量：7

10

作者 苏维娜 李晓晶 +1 位作者 张丽丽 包志伟 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第11期48-54,61,共8页

目的探究miR-214对结核分枝杆菌感染肺泡Ⅱ型细胞中免疫调控的作用机制。方法培养肺泡Ⅱ型细胞系A549,分别使用结核分枝杆菌疫苗株BCG和结核分枝杆菌标准株H37Rv感染A549细胞。对A549细胞进行分组,并进行H37Rv感染。qRT-PCR检测各组细胞... 目的探究miR-214对结核分枝杆菌感染肺泡Ⅱ型细胞中免疫调控的作用机制。方法培养肺泡Ⅱ型细胞系A549,分别使用结核分枝杆菌疫苗株BCG和结核分枝杆菌标准株H37Rv感染A549细胞。对A549细胞进行分组,并进行H37Rv感染。qRT-PCR检测各组细胞中miR-214和FGF9的表达情况,Western blot检测各组细胞中FGF9蛋白的表达。ELISA检测细胞中免疫相关因子SP-A、SP-D、TLR2和TLR4,炎症因子IL-10、TNF-α、TNF-γ、IL-1β和IL-8的含量。Western blot检测PI3K/AKT信号通路成员PI3K、AKT、p-AKT的表达。结果和BCG相比,H37Rv感染后的A549细胞中miR-214表达升高,FGF9表达降低。和NC mimic+oe-NC组相比,miR-214 mimic+oe-NC组细胞SP-A、SP-D、IL-10含量显著降低,TLR2、TLR4、TNF-α、TNF-γ、IL-1β、IL-8含量显著升高,PI3K、AKT/p-AKT表达显著升高。NC mimic+oe-FGF9组SP-A、SP-D、IL-10含量显著升高,TLR2、TLR4、TNF-α、TNF-γ、IL-1β、IL-8含量显著降低,PI3K、AKT/p-AKT表达显著升高降低。和miR-214 mimic+oe-NC组相比,miR-214 mimic+oe-FGF9组SP-A、SP-D、IL-10含量显著升高,TLR2、TLR4、TNF-α、TNF-γ、IL-1β、IL-8含量显著降低,PI3K、AKT/p-AKT表达显著降低。结论 miR-214通过抑制FGF9的表达,进而激活PI3K/AKT信号通路,导致结核分枝杆菌感染肺泡Ⅱ型细胞过度免疫反应,从而导致炎症发展。 展开更多

关键词 miR-214 FGF9 PI3K/AKT信号通路 结核分枝杆菌 肺泡Ⅱ型细胞 免疫调控

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胡黄连苷Ⅱ通过抑制cyto C/caspase-9/caspase-3通路发挥神经保护作用 被引量：14

11

作者 张红艳 翟丽 +3 位作者 王婷婷 李珊 张艳辉 郭云良 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期668-674,共7页

目的研究胡黄连苷Ⅱ对大鼠脑缺血/再灌注过程中cyto C/caspase-9/caspase-3信号通路的影响及其神经保护作用机制。方法环孢素(Cs A)和苍术苷(Atr)分别作为cyto C阳性对照和阴性对照,改良Longa法制备缺血2 h再灌注24 h大鼠脑缺血/再灌注(... 目的研究胡黄连苷Ⅱ对大鼠脑缺血/再灌注过程中cyto C/caspase-9/caspase-3信号通路的影响及其神经保护作用机制。方法环孢素(Cs A)和苍术苷(Atr)分别作为cyto C阳性对照和阴性对照,改良Longa法制备缺血2 h再灌注24 h大鼠脑缺血/再灌注(I/R)模型。再灌注24 h后,TTC染色观察脑梗死体积;免疫组织化学和Western blot检测cyto C、caspase-9、caspase-3表达水平。结果模型组大鼠脑缺血/再灌注后TTC显示染色脑梗死体积明显增加;免疫组织化学和Western blot显示cyto C、caspase-9、caspase-3表达水平较假手术组明显增多(P<0.05)。治疗组大鼠TTC显示脑梗死体积缩小;免疫组化和Western blot显示cyto C、caspase-9、caspase-3表达水平与模型组相比明显降低(P<0.05)。与Atr组相比,Atr+胡黄连苷Ⅱ组大鼠脑梗死体积缩小,免疫组化和Western blot显示cyto C、caspase-9、caspase-3表达水平减弱(P<0.05)。结论胡黄连苷II抑制缺血/再灌注损伤大脑神经凋亡的机制可能与下调cyto C/caspase-9/caspase-3信号通路蛋白有关。 展开更多

关键词 胡黄连苷Ⅱ 脑 缺血/再灌注损伤 cyto C/caspase-9/caspase-3信号通路 神经保护 大鼠

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肠愈宁对溃疡性结肠炎大鼠PI3K/AKT信号通路作用机制的研究 被引量：7

12

作者 王海强 张萌 +3 位作者 熊丽 马晨曦 王瑶 郑丽红 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2023年第11期3736-3743,共8页

目的探讨肠愈宁方对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠组织磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路中PTEN、TLR2、Caspase-3、Caspase-9蛋白的作用机制。方法将70只SPF级大鼠适应性喂养7天后分为空白组1... 目的探讨肠愈宁方对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠组织磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路中PTEN、TLR2、Caspase-3、Caspase-9蛋白的作用机制。方法将70只SPF级大鼠适应性喂养7天后分为空白组10只和造模组60只,造模组大鼠采用TNBS/乙醇溶液灌肠诱导UC模型。将成功建立模型的大鼠随机分为模型组,美沙拉嗪组,肠愈宁高、中、低剂量组、肠愈宁高、中、低剂量组分别灌服相当于生药量为4 g·mL^(-1)、2 g·mL^(-1)、1 g·mL^(-1)的肠愈宁方溶液10 mL·kg^(-1),美沙拉嗪组灌服相当于生药量为0.2 g·kg^(-1)美沙拉嗪悬浊液10 mL·kg^(-1),空白对照组、模型组给予等量10 mL·kg^(-1)生理盐水灌胃。各组大鼠灌胃均每天1次,连续14天。末次给药后处死大鼠取材。评估疾病活动指数,HE染色观察结肠变化,进行结肠组织损伤指数评分,蛋白免疫印迹法检测结肠组织PI3K、AKT、PTEN、TLR2、Caspase-3、Caspase-9蛋白的表达。结果与空白组比较,模型组PI3K、AKT、Caspase-3、Caspase-9及TLR2蛋白表达水平增高(P<0.05),PTEN蛋白表达水平降低(P<0.05)。与模型组比较,肠愈宁高剂量组PI3K、AKT、Caspase-3、Caspase-9、TLR2蛋白表达水平均明显下降(P<0.05),PTEN蛋白表达水平显著升高(P<0.05);美沙拉嗪组、肠愈宁中剂量PI3K、AKT、Caspase-3水平均降低(P<0.05),PTEN蛋白表达水平升高(P<0.05),在Caspase-9中表达无统计学意义;肠愈宁低剂量组在各蛋白表达情况与模型组无统计学意义。结论肠愈宁方治疗UC作用显著,其机制可能与调控PI3K/AKT信号通路及其相关蛋白PTEN、TLR2、Caspase-3、Caspase-9有关,能够有效缓解UC大鼠症状,减轻结肠病理损伤。 展开更多

关键词 溃结性结肠炎 肠愈宁方 PI3K/AKT信号通路 PTEN TLR2 CASPASE-3 CASPASE-9

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过表达脑红蛋白通过激活PI3K/Akt信号通路防治AD的体外研究

13

作者 杨军 戴颂阳 +1 位作者 向月 张雄 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期2166-2171,共6页

目的:探索过表达脑红蛋白(neuroglobin,NGB)对转染了p APPswe的SH-SY5Y细胞的神经保护作用及机制。方法:成功构建过表达NGB的质粒p EGFP-NGB并转染入已预先转染了p APPswe的SH-SY5Y细胞,MTT法检测过表达NGB对该细胞存活率的影响;JC-1法... 目的:探索过表达脑红蛋白(neuroglobin,NGB)对转染了p APPswe的SH-SY5Y细胞的神经保护作用及机制。方法:成功构建过表达NGB的质粒p EGFP-NGB并转染入已预先转染了p APPswe的SH-SY5Y细胞,MTT法检测过表达NGB对该细胞存活率的影响;JC-1法检测其对细胞线粒体膜电位的影响;流式细胞术检测过表达NGB对细胞凋亡的影响;Western blotting法检测其对细胞中p-Akt、Akt和caspase-3/9表达的影响;ELISA法检测其对细胞内Aβ42生成的影响。结果:MTT结果显示,与对照组和空质粒组比较,转染NGB后,p APPswe-SH-SY5Y细胞的存活率明显提高,差异有统计学意义(P<0.05)。JC-1染色结果显示过表达NGB能够明显抑制转染p APPswe对SH-SY5Y细胞线粒体膜电位的降低作用(P<0.05)。流式细胞术结果显示过表达NGB能够抑制早、晚期细胞的凋亡。而Western blotting显示过表达NGB不仅能抑制细胞内caspase-3和caspase-9蛋白水平的表达,而且还能够促进细胞内p-Akt蛋白的表达,而这种促进作用能够被PI3K/Akt的抑制剂LY294002所抑制。ELISA结果显示过表达NGB能够明显抑制细胞内Aβ42的生成。结论:过表达NGB能够显著抑制p APPswe诱导的细胞损伤,而且还抑制与细胞凋亡密切相关的caspase-3和caspase-9等蛋白表达。NGB的神经保护作用可能是通过激活PI3K/Akt信号通路来实现的。 展开更多

关键词 脑红蛋白 SH-SY5Y细胞 细胞凋亡 Caspase-3/9 PI3K/AKT信号通路

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制冰片介导Bax/Bcl-2/Caspase-3信号通路改善心肌细胞H/R损伤 被引量：6

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作者 支文冰 余金花 +4 位作者 王春柳 刘琪琪 李晔 张红 刘洋 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2022年第5期68-73,267,共7页

目的研究天竺黄制冰片对缺氧/复氧(Hypoxia/Reoxygenation,H/R)诱导H9C2心肌细胞损伤的保护作用及潜在作用机制。方法通过给予H9C2心肌细胞不同的缺氧时间体外模拟缺血再灌注损伤,测定损伤后H9C2心肌细胞中超氧化物歧化酶(superioxide d... 目的研究天竺黄制冰片对缺氧/复氧(Hypoxia/Reoxygenation,H/R)诱导H9C2心肌细胞损伤的保护作用及潜在作用机制。方法通过给予H9C2心肌细胞不同的缺氧时间体外模拟缺血再灌注损伤,测定损伤后H9C2心肌细胞中超氧化物歧化酶(superioxide diamutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogense,LDH)水平,评估模型是否成功建立。MTT方法测定天竺黄、冰片及制冰片对H9C2细胞的安全浓度范围,并检测天竺黄、冰片及制冰片对H/R诱导后心肌细胞中MDA、SOD和LDH生成的影响。采用Real-time PCR和Western blot方法检测天竺黄制冰片对H/R诱导H9C2细胞中Bcl-2、Bax和Caspase-3基因和蛋白的表达。结果缺氧6 h,复氧4 h,心肌细胞存活率小于50%,细胞中MDA和LDH水平显著增加,SOD活性显著降低,成功模拟缺血再灌注模型。天竺黄、冰片及制冰片在12.5~100μg/mL浓度范围内,对心肌细胞活力均没有影响。天竺黄(6.25~100μg/mL)对H/R诱导的H9C2细胞活力没有显著影响;冰片(25~100μg/mL)显著增加H/R诱导的H9C2细胞活力(P<0.05),制冰片(25~100μg/mL)极显著增加了H/R诱导的H9C2细胞活力(P<0.01)。同时,与模型组相比,冰片和制冰片分别给药均降低了H/R诱导的心肌细胞中MDA和LDH的水平,提高了SOD的活性,且同浓度制冰片调节作用优于冰片。同时,天竺黄制冰片通过上调了Bcl-2基因和蛋白表达,下调Bax、Caspase-3基因和蛋白表达,发挥抑制细胞凋亡的作用。结论天竺黄制冰片可通过调控Bax/Bcl-2/Caspase-3信号通路阻碍心肌细胞凋亡,进而达到保护心肌的作用。 展开更多

关键词 冰片 缺血性心肌病 H/R损伤 H9C2细胞 Bax/Bcl-2/Caspase-3信号通路

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SOX9基因下调JAK2/STAT3信号诱导肺癌细胞凋亡及降低免疫逃逸相关因子表达的研究 被引量：15

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作者 刘贵廷 杨柳 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期59-63,共5页

目的:探讨SOX9基因对肺癌细胞凋亡、免疫逃逸相关因子HIF-1α和VEGF表达及JAK2/STAT3信号通路的影响。方法:以脂质体Lip-2000为载体,将针对SOX9特异性靶点的siRNA转染肺腺癌A549细胞,Western blot检测SOX9的蛋白表达; CCK8法检测细胞活... 目的:探讨SOX9基因对肺癌细胞凋亡、免疫逃逸相关因子HIF-1α和VEGF表达及JAK2/STAT3信号通路的影响。方法:以脂质体Lip-2000为载体,将针对SOX9特异性靶点的siRNA转染肺腺癌A549细胞,Western blot检测SOX9的蛋白表达; CCK8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡率; DCFH-DA检测ROS水平; Western blot检测免疫逃逸相关因子HIF-1α、VEGF及JAK2/STAT3信号通路p-JAK2、p-STAT3和下游相关基因survivin的蛋白表达。结果:转染SOX9的siRNA的肺癌细胞SOX9的表达明显降低;与阴性对照组比较,si-SOX9组细胞活力显著降低,细胞凋亡率显著升高,ROS水平显著升高,HIF-1α、VEGF、p-JAK2、p-STAT3和survivin的蛋白表达均显著降低。结论:siRNA抑制SOX9基因可降低肺癌细胞活力,诱导细胞凋亡,降低免疫逃逸相关因子HIF-1α和VEGF表达,机制可能与提高细胞ROS水平和下调JAK2/STAT3信号通路有关。 展开更多

关键词 肺癌 SOX9基因 凋亡 JAK2/STAT3信号通路 免疫逃逸

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膀胱癌中Galectin-3的表达及其对膀胱癌细胞增殖、凋亡的影响 被引量：4

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作者 张广云 张海芳 乔明洲 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2019年第1期101-105,共5页

目的:探讨Galectin-3在膀胱癌的表达及其对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用Western blot法检测膀胱癌、癌旁正常组织(54例)及SV-HUC-1、T24、5637、BIU-87细胞中Galectin-3蛋白的表达;转染NC-siRNA、Galectin-3-siRNA1和Galectin... 目的:探讨Galectin-3在膀胱癌的表达及其对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用Western blot法检测膀胱癌、癌旁正常组织(54例)及SV-HUC-1、T24、5637、BIU-87细胞中Galectin-3蛋白的表达;转染NC-siRNA、Galectin-3-siRNA1和Galectin-3-siRNA2入膀胱癌T24细胞,未转染任何siRNA作为对照组,转染48 h后采用Western blot法检测各组细胞中Galectin-3蛋白的表达。CCK8及流式细胞术分别检测对照组、NC-siRNA组、Galectin-3-siRNA组细胞存活率和凋亡率;Western blot法检测Notch1、Hes1、Cleaved Caspase-3、PCNA和Ki-67蛋白的表达。结果:膀胱癌组织中Galectin-3的表达高于癌旁正常组织(P<0.001),T24细胞中Galectin-3的表达最高(P<0.05);Galectin-3-siRNA1、Galectin-3-siRNA2组Galectin-3 mRNA及蛋白表达均低于对照组(P<0.05),Galectin-3-siRNA1组的抑制效果更明显。Galectin-3-siRNA组与对照组比较,细胞存活率降低,Notch1、Hes1、PCNA和Ki-67表达降低,细胞凋亡率升高,Cleaved Caspase-3表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:抑制膀胱癌Galectin-3表达可降低细胞活力,诱导细胞凋亡,其机制可能与Notch信号通路的下调有关。 展开更多

关键词 膀胱癌 galectin-3基因 增殖 凋亡 NOTCH信号通路

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定心方经PI3K/Akt通路抑制人脐静脉内皮细胞迁移的研究 被引量：2

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作者 苏志杰 赵丹丹 +6 位作者 周凤华 程赛博 徐煜凌 刘晓瑜 张蕾 张宇 贾钰华 《辽宁中医杂志》 CAS 2018年第12期2667-2670,2704,共5页

目的:探讨定心方(DXR)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)迁移的分子机制。方法:将HUVEC分为空白组、模型组、DXR低、中、高剂量组和LY294002阻制剂组。除正常对照组外,其他组采用ox-LDL(终浓度为100mg/L)造成HUVE... 目的:探讨定心方(DXR)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)迁移的分子机制。方法:将HUVEC分为空白组、模型组、DXR低、中、高剂量组和LY294002阻制剂组。除正常对照组外,其他组采用ox-LDL(终浓度为100mg/L)造成HUVEC损伤模型,用不同浓度定心方含药血清(终浓度为0%,5%,10%,20%)和PI3K特异性抑制剂LY294002(浓度为4μmol/L)干预培养24h。采用MTT法检测细胞增殖;细胞划痕实验和迁移实验检测各组细胞迁移情况;Western blotting法检测各组细胞中MMP9、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达情况。结果:与空白组比较,模型组可显著促进HUVEC增殖和细胞迁移,上调HUVEC内p-PI3K、p-Akt、MMP9蛋白的表达(P<0.05);与模型组比较,DXR高、中剂量组和LY294002阻制剂组可显著抑制HUVEC增殖,降低细胞迁移数目,抑制HUVEC内p-PI3K、p-Akt、MMP9蛋白的表达(P<0.05)。结论:体外实验表明,DXR可抑制ox-LDL诱导的HUVEC迁移,其机制可能与下调PI3K/Akt通路抑制MMP9表达有关。 展开更多

关键词 定心方 PI3K/AKT信号通路 MMP9 细胞迁移

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下调miR-153-3p可促进Nrf2表达从而减轻H2O2诱导的H9C2细胞损伤 被引量：2

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作者 黄兆琦 许卫 +1 位作者 黄炯华 卢雄 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1249-1254,共6页

目的:研究敲减微小RNA-153-3p(miR-153-3p)的表达在H2O2引起的H9C2细胞氧化损伤中的作用以及具体机制。方法:建立H2O2诱导的H9C2细胞氧化应激损伤模型,分别通过MTT实验和RT-qPCR检测细胞活力和miR-153-3p表达的变化。通过RNA干扰技术敲... 目的:研究敲减微小RNA-153-3p(miR-153-3p)的表达在H2O2引起的H9C2细胞氧化损伤中的作用以及具体机制。方法:建立H2O2诱导的H9C2细胞氧化应激损伤模型,分别通过MTT实验和RT-qPCR检测细胞活力和miR-153-3p表达的变化。通过RNA干扰技术敲减miR-153-3p的表达,观察其对氧化应激状态下H9C2细胞氧化损伤的影响,并通过Western blot和双萤光素酶报告基因实验确定miR-153-3p的作用靶点。结果:H9C2细胞活力随H2O2浓度升高而逐渐降低(P<0.05),miR-153-3p的表达则逐渐增加(P<0.05)。敲减miR-153-3p的表达可提高H9C2细胞在氧化应激状态下的细胞活力,减少细胞凋亡,减少丙二醛(MDA)含量并升高超氧化物岐化酶(SOD)活性(P<0.01)。Western blot实验可见核因子E2相关因子2(Nrf2)的表达和抗氧化反应元件(ARE)活性随H2O2浓度升高而升高(P<0.05);TargetScan分析和双萤光素酶报告基因实验结果显示Nrf2是miR-153-3p的潜在靶基因之一。Western blot实验进一步显示miR-153-3p过表达可抑制Nrf2的表达(P<0.01),抑制miR-153-3p则可促进Nrf2表达(P<0.01)。同时敲减H9C2细胞的Nrf2和miR-153-3p表达可显著降低H9C2细胞在H2O2环境下的细胞活力,促进细胞凋亡,增加MDA含量并降低SOD活性(P<0.01)。结论:抑制miR-153-3p表达可上调Nrf2/ARE通路从而减轻H2O2引起的H9C2细胞损伤。 展开更多

关键词 微小RNA-153-3p H9C2细胞 氧化应激 Nrf2/ARE信号通路

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TIM-3基因在上皮性卵巢癌中高表达并促进癌细胞的增殖和迁移 被引量：9

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作者 霍叶琳 王月 +1 位作者 安娜 杜雪 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期190-200,共11页

目的通过挖掘GEPIA数据库中的基因信息,分析T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(TIM-3)基因在上皮性卵巢癌(EOC)中的表达及作用机制。方法采用GEPIA数据库在线分析TIM-3基因在EOC组织和正常卵巢组织中的表达水平。收集2018年6月~2019年12月在... 目的通过挖掘GEPIA数据库中的基因信息,分析T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(TIM-3)基因在上皮性卵巢癌(EOC)中的表达及作用机制。方法采用GEPIA数据库在线分析TIM-3基因在EOC组织和正常卵巢组织中的表达水平。收集2018年6月~2019年12月在我院实施卵巢手术治疗的82例EOC癌变组织标本和18例正常卵巢组织标本,免疫组织化学法检测标本组织中TIM-3的表达水平,分析TIM-3表达与EOC临床病理参数的相关性;采用Kaplan-MeierPlotter分析TIM-3表达水平与EOC患者生存之间的关系。qRT-PCR法检测卵巢癌组织和正常组织标本TIM-3和Wnt1 mRNA表达水平及相关性。采用pMAGic 4.0质粒转染构建TIM-3沉默卵巢癌SKOV3细胞系,将细胞分为SKOV3组(未转染的SKOV3细胞系)、沉默阴性对照组(SKOV3+NCsiRNA组:转染pMAGic 4.0 NC siRNA质粒的SKOV3细胞系)和沉默TIM-3组(SKOV3+TIM-3 siRNA组:转染pMAGic 4.0 TIM-3 siRNA质粒的SKOV3细胞系);采用pcDNA3.1质粒转染构建TIM-3过表达卵巢癌SKOV3细胞系,将细胞分为SKOV3组、过表达阴性对照组(pcDNA NC组:转染pcDNA3.1质粒的SKOV3细胞系)和过表达TIM-3组(pcDNA TIM-3组:转染pcDNA3.1 TIM-3质粒的SKOV3细胞系)。MTT法检测细胞增殖能力,Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡能力,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,TOPflash/FOPflash双荧光素酶报告基因实验检测Wnt/β-catenin通路活性,qPCR检测Wnt/β-catenin信号通路中转录因子TCF-7、TCFL-2及靶基因CD44的mRNA水平,Westernblot检测SKOV3细胞中MMP-9,CD44、Wnt1、β-catenin及E-cad蛋白表达。结果TIM-3在正常卵巢组织中呈阴性表达,在EOC组织中呈阳性表达,EOC组织中TIM-3阳性表达率(84.14%)显著高于正常卵巢组织(16.67%,P<0.05)。TIM-3表达与FIGO分期、组织分化程度及淋巴结是否转移有关(P<0.05),与年龄、病理类型无关(P>0.05)。且TIM-3与Wnt1水平呈正相关(P<0.05)。沉默TIM-3基因后,Wnt/β-catenin通路活性受到抑制,SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力显著降低(P<0.05),凋亡能力显著升高(P<0.05),转录因子TCF-7、TCFL-2及靶基因CD44的mRNA水平显著下调,细胞MMP-9,CD44、Wnt1、β-catenin蛋白水平均显著下调,EMT相关蛋白E-cad水平显著上调(P<0.05)。过表达TIM-3基因后,Wnt/β-catenin通路活性被激活,SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力显著升高(P<0.05),凋亡能力显著降低(P<0.05),转录因子TCF-7、TCFL-2及靶基因CD44的mRNA水平显著上调,细胞MMP-9,CD44、Wnt1、β-catenin蛋白水平均显著上调,EMT相关蛋白E-cad水平显著下调(P<0.05)。结论TIM-3在EOC组织中高表达,可促进卵巢癌细胞的恶性生物学行为,其机制可能与Wnt/β-catenin信号通路的激活有关。 展开更多

关键词 GEPIA数据库 上皮性卵巢癌 tim-3基因 生物学行为 WNT/Β-CATENIN信号通路

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抑制Notch1信号通路对CD8^+ T细胞免疫检查点、功能及增殖的影响 被引量：3

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作者 程少燕 李峰 +3 位作者 平玉 赵启泰 吴欣爱 张毅 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2019年第3期323-326,共4页

目的:探讨抑制Notch1信号通路对CD8^+ T细胞免疫检查点、功能及增殖的影响。方法:收集健康人外周血标本,分选CD8^+ T细胞。对照组利用CD3/CD28活化磁珠激活CD8^+ T细胞,实验组在激活的同时加入Notch1信号通路抑制剂LY3039478。应用流式... 目的:探讨抑制Notch1信号通路对CD8^+ T细胞免疫检查点、功能及增殖的影响。方法:收集健康人外周血标本,分选CD8^+ T细胞。对照组利用CD3/CD28活化磁珠激活CD8^+ T细胞,实验组在激活的同时加入Notch1信号通路抑制剂LY3039478。应用流式细胞术检测2组细胞免疫检查点(PD-1、TIM-3)、功能性细胞因子[(IFN-γ、IL-2和颗粒酶B(GZMB)]及增殖(Ki-67)的变化。结果:与对照组相比,实验组CD8^+ T细胞PD-1、TIM-3、IFN-γ、IL-2、GZMB和Ki-67的表达明显受抑(P <0. 05)。结论:Notch1信号通路在CD8^+ T细胞免疫检查点、功能、增殖的表达中起到了重要作用。 展开更多

关键词 CD8^+T细胞 Notch1信号通路抑制剂 PD-1 tim-3

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