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Adeno-X Tet-On系统调控LacZ基因在雪旺细胞中表达的研究 被引量:1
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作者 郝伟 朱锦宇 +2 位作者 朱庆生 李志全 杨安钢 《山西医科大学学报》 CAS 2004年第2期118-121,共4页
目的 应用Adeno XTet On系统感染雪旺细胞 ,通过四环素衍生物强力霉素 (doxcycline ,Dox)调控LacZ基因产物 (βgal)的表达。方法 ①取生后 5~ 6dSD仔鼠坐骨神经进行雪旺细胞培养 ,并进行形态学及S 10 0蛋白相关抗原免疫组织化学染色... 目的 应用Adeno XTet On系统感染雪旺细胞 ,通过四环素衍生物强力霉素 (doxcycline ,Dox)调控LacZ基因产物 (βgal)的表达。方法 ①取生后 5~ 6dSD仔鼠坐骨神经进行雪旺细胞培养 ,并进行形态学及S 10 0蛋白相关抗原免疫组织化学染色鉴定。②将Adeno XTet OnVirusStock与Adeno XTRE βgalVirusStock分别感染HEK2 93细胞 ,收获病毒并作滴度测定。③将扩增后的病毒感染雪旺细胞并绘制Dox调控下βgal诱导表达曲线。结果 ①由体外培养获得的雪旺细胞纯度可达 90 %以上并且状态良好 ,免疫组织化学染色阳性结果明显。②扩增后的病毒滴度较高 ,分别达 1.2 6× 10 9、1.99× 10 9pfu/ml。 结论 将病毒感染雪旺细胞后 ,经检测发现DOX对 展开更多
关键词 Adeno-X tet-on系统 LACZ基因 雪旺细胞 免疫组织化学 周围神经损伤 重组腺病毒载体
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Tet-on系统对胰岛细胞瘤中TRB3基因的表达调控作用 被引量:2
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作者 钱波 张文健 +4 位作者 徐亚萍 刘虹麟 张娜 徐世清 娄晋宁 《肝胆外科杂志》 2008年第5期371-374,共4页
目的构建Tet-on系统可控表达TRB3基因的胰岛细胞瘤细胞株。方法通过Tet-on系统将TRB3质粒转染INS-rβ(r9)细胞中,经潮霉素筛选,克隆扩增得到可诱导表达TRB3基因的细胞系。采用实时定量RT-PCR、细胞免疫化学和Western Blot检测该基因表... 目的构建Tet-on系统可控表达TRB3基因的胰岛细胞瘤细胞株。方法通过Tet-on系统将TRB3质粒转染INS-rβ(r9)细胞中,经潮霉素筛选,克隆扩增得到可诱导表达TRB3基因的细胞系。采用实时定量RT-PCR、细胞免疫化学和Western Blot检测该基因表达的可诱导性。结果三种检测方法都显示,500ng/mlDOX诱导48h可使转染的r9细胞中TRB3基因表达达到峰值,mRNA表达可上调60倍。结论通过本研究结果得到可控的TRB3高表达细胞株,为进一步研究该基因在胰腺肿瘤细胞中的功能提供了良好的细胞模型。 展开更多
关键词 TRB3 胰岛细胞瘤 tet-on系统
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